植物病原细菌病害识别技术

植物病原细菌病害识别技术第一页，共93页。原核生物细菌（Bacterium)放线菌植原体(Phytoplasma)螺原体（Spiroplasma）古菌原核微生物真细菌第二页，共93页。一、原核生物形态结构第三页，共93页。

细菌的基本形态有球状、杆状和螺旋状第四页，共93页。球菌(coccus)第五页，共93页。杆菌第六页，共93页。叶孔周围的细菌第七页，共93页。

螺旋菌第八页，共93页。Spirilli(螺旋菌)第九页，共93页。芽孢第十页，共93页。spores第十一页，共93页。电镜下的细菌（示鞭毛）第十二页，共93页。荧光假单胞杆菌鞭毛第十三页，共93页。植原体（无细胞壁）第十四页，共93页。电镜下的植原体第十五页，共93页。菌落形态嗜酸硫杆菌嗜冷细菌荧光假单胞菌第十六页，共93页。细菌的菌落形态第十七页，共93页。细菌的细胞壁肽聚糖肽聚糖第十八页，共93页。

原理：两类细菌的细胞壁有很大的差异。

19世纪80年代ChristianGram创立结晶紫初染—碘液媒染—酒精脱色—番红复染G+紫色（显示结晶紫的颜色）G-红色（显示番红的颜色）G+壁厚，产外毒素，对青霉素、链霉素敏感G-壁薄，产内毒素，对青霉素不敏感，对四环素、链霉素敏感革兰氏染色原理第十九页，共93页。细菌的革兰氏染色第二十页，共93页。

大肠杆菌蜡质芽胞杆菌GramnegtiveGrampositive第二十一页，共93页。二、植物病原细菌

第二十二页，共93页。

没有受过任何正规教育荷兰人列文·虎克自制显微镜第一个发现细菌。1680年，以无名之辈被选为英国皇家学会会员和法国科学院院士。可以说，他单枪匹马地创立了微生物这门学科。

1676年12月26日，列文·虎克从一滴胡椒水中发现了比荷兰人口（270万）还要多的微小的生物，这一天被称为细菌学诞生的日子。第二十三页，共93页。1850年德国人米泽尔里奇美国人伯利尔(ThomasBartill）美国史密斯（E.F.Smith1884-1927）

《细菌与植物病害的关系》《植物细菌病害》三大卷

《植物细菌病害导论》100多篇论文。第一个确认了植物病原细菌对植物的致病性，被誉为植物细菌病害的奠基人和美国植物病原细菌学之父。第二十四页，共93页。第二十五页，共93页。第二十六页，共93页。第二十七页，共93页。

细菌有球菌、杆菌和螺旋菌。植物病原细菌多为杆菌，细胞壁外有粘质层，很少有荚膜。有鞭毛（周鞭、极鞭，在属的分类上有重要意义）。通常无芽孢，革兰氏染色多为阴性。可培养形成菌落，多好气。好中性偏碱环境，适温26－30℃。1、植物病原细菌定义第二十八页，共93页。植物病原细菌的特点1、都是杆菌2、绝大多数有鞭毛3、不产生芽孢4、兼性腐生5、除棒状杆菌属呈革兰氏阳性反应外，其他都是阴性反应。第二十九页，共93页。细菌的繁殖：裂殖

第三十页，共93页。细菌的营养方式：营养：异养，属于死体营养。植物病原细菌寄生性较弱，侵染处主要是衰老器官，多从伤口或自然孔口侵入，一般不侵染绿色部分；寄生性低级的主要侵染地下部多汁器官;寄生性较高级的则以侵染叶片等绿色器官为主；还有一类属于中间类型，侵染根部及维管束系统。第三十一页，共93页。1.有细胞壁

2.细胞壁薄，格兰氏染色反应阴性…薄壁菌门

假单胞菌属，黄单胞菌属，土壤杆菌属，

欧文氏菌属，木质部小菌属

2.细胞壁厚，格兰氏染色反应阳性…厚壁菌门棒形杆菌属和链丝核菌属1.无细胞壁，只有原生质膜……………软壁菌门螺原体属和植原体属三、植物病原原核生物的主要类群第三十二页，共93页。薄壁菌门壁薄，革兰氏阴性厚壁菌门壁厚，革兰氏阳性软壁菌门无细胞壁第三十三页，共93页。薄壁菌门厚壁菌门软壁菌门土壤杆菌属棒形杆菌属植原体属欧文氏菌属链霉菌属螺原体属假单胞菌属拉尔氏属（Rlastonia)黄单胞菌属木质菌属韧皮部杆菌属

第三十四页，共93页。1、细菌的分类：国际系统细菌学委员会（ICSB）《伯杰细菌鉴定手册(Bergey,sManualofDeterminativeBacteriology9thed)》共8版，1994年第九版《伯杰系统细菌学手册(Bergey,sManualofSystematicBateriology,1984)》第一版第三十五页，共93页。常见的细菌属：Agrobacterium土壤杆菌属，1942年，种数4；Clavibacter棒形菌属，1984年，种数3；Erwinia欧氏杆菌属，1920年，种数15；Pseudomonas假单胞杆菌属，1902年，种数20；Xanthomonas黄单胞杆菌属，1939年，种树20；第三十六页，共93页。重要的植物病原细菌属检索如下：1.革兰氏染色反应阳性……………棒杆菌属1.革兰氏染色反应阴性…………………...22.鞭毛两端生……………...32.鞭毛周生……………..….43.鞭毛数条，菌落白色，产生荧光….…….假单胞杆菌属3.鞭毛一条，菌落黄色……….…………….黄单胞杆菌属4.引起植物组织增生和畸形症..……………….土壤杆菌属4.引起植物组织崩解和腐烂………..…………欧氏杆菌属

第三十七页，共93页。假单胞杆菌属(Pseudomonas)：约占细菌病害的50%以上。常见的青枯病、以及其它各种细菌性条纹、条斑、叶斑、疫病等等。黄单胞杆菌属(Xanthomonas)：黑腐病、柑橘溃疡病、细菌性疫病、细菌性穿孔病、细菌性疮痂病。土壤杆菌属(Agrobacterium)：放射性土壤杆菌、根癌土壤杆菌、发根土壤杆菌、悬钩子土壤杆菌。欧文氏菌属(Erwinia)：软腐病、火疫病棒状杆菌(clavibacter)：鸭茅草蜜穗病、狗牙根草矮化、甘蔗矮化。节杆菌属(Arthrobacter)：仅美国冬青节杆菌引起美国冬青细菌疫病。短小杆菌属(Curtobacterium)：萎蔫短小杆菌引起甜菜银叶、一品红细菌疫病、郁金香球茎黄色疮斑和叶斑。红球菌属(Rhodococcus)：只有带化红球菌引起甜豌豆带化和多种植物叶瘤。第三十八页，共93页。2.园艺林植物细菌病害的特点：（1）园艺植物细菌病害的症状：过度生长：（土壤杆菌属）瘿瘤、增生、带化组织坏死：（黄单胞和假单胞菌）溃疡：（黄单胞和假单胞菌）萎蔫：多为多个细菌属为害的结果。软腐：欧文氏菌和假单胞杆菌属灼伤：从叶片、叶缘变黄、干枯、卷曲。（野火病、火疫病等）第三十九页，共93页。（土壤杆菌属）瘿瘤、增生、带化第四十页，共93页。Cucumber

:AngularleafspotPseudomonassyringaepv.lachrymans丁香假单胞菌流泪致病变种坏死：假单胞菌）第四十一页，共93页。大白菜软腐病欧文氏菌菌属第四十二页，共93页。火疫病造成的损失PhotographcourtesyAlanL.Jones梨火疫使美国东部梨树全面毁灭；如果传入中国每年造成损失超过500亿人民币灼伤第四十三页，共93页。柑橘溃疡病第四十四页，共93页。坏死柑橘溃疡病溃疡：（黄单胞和假单胞菌）

第四十五页，共93页。Blackrotofcabbage(Xanthomonascampestrispv.campestris)第四十六页，共93页。其它症状第四十七页，共93页。坏死症状菌脓、菌胶菌脓、菌胶第四十八页，共93页。溢菌现象番茄青枯病第四十九页，共93页。

细菌性青枯（Erwiniatracheiphila.）在切开的茎干木质部维管束内有细菌的黏液线。PhotographcourtesyM.P.Hoffmann第五十页，共93页。2细菌病害特点：（1）初侵染源：初侵染的菌源主要来自带菌的种子、种苗等繁殖材料、病残体、田边杂草、带菌土壤和昆虫等。（2）侵入途径：伤口或自然孔口侵入（3）营养方式：细菌为死体营养，侵入寄主后，通常先将细胞或组织致死，然后从死亡的组织或细胞中吸取养分（4）症状表现：侵入后扩展部位不同，症状不同：薄壁细胞---叶斑、腐烂；维管束导管---萎蔫；细胞分裂增生---畸形肿瘤（5）病害传播：传播靠水、雨、介体昆虫、线虫、人为。第五十一页，共93页。3、细菌病害的防治：30%DT（琥胶肥酸铜）34%绿乳铜14%络氨铜70%DTM（琥-乙磷铝）27%铜高尚；20%龙克菌47%加瑞农；53.8%可杀得200068%或72%农用链霉素4000倍新植霉素第五十二页，共93页。四、植原体和其它原核生物病原第五十三页，共93页。（一）植原体菌原体（支原体/霉形体）(mycoplasma)类菌原体（Mycoplasma-likeOrganism，简称MLO）植原体（Phytoplasma）1967年，日本的土居养二在植物的韧皮部筛管细胞内发现植原体，证实了植原体对植物的致病性。第五十四页，共93页。（1）在西非和加勒比海地区，椰子致死性黄化病曾造成椰子园的毁灭性破坏。仅牙买加和坦桑尼亚就有1000万株椰子树绝产。（2）国内50-70年代，江苏、浙江一带桑树萎缩病曾严重危害养蚕业（古时称“桑癃”），明末《沈氏农书》记载：“凡桑一癃，再无医法，断不可留者”。（3）北京密云70年代初，二三年间枣疯病的危害就毁灭了40万株盛产的密云金丝小枣树；（4）河南、山东泡桐丛枝病的危害曾使人工种植泡桐难以发展。第五十五页，共93页。1植原体的基本特征：（1）菌体不具细胞壁，因此植原体对一些可以抑制细胞壁合成的青霉素等抗菌素不敏感，而对四环素类抗菌素高度敏感；植原体的外缘只有一层原生质膜。（2）形态多变：同一种植原体可以是杆状、球状或不规则形等。（3）植原体的繁殖：二分裂法或缢缩断裂法繁殖或芽殖。第五十六页，共93页。2植原体的分类：原核生物界软壁菌门软球菌纲(柔膜菌纲MOLLICUTES)

菌原体目菌原体科植原体属（Phytoplasma）第五十七页，共93页。3植原体病害：菌原体引起的病害近300种，我国已报道的菌原体病害约60种。第五十八页，共93页。黄化型症状：槟榔黄叶病、板栗黄化病、桃黄化病、椰子致死性黄化病、葡萄黄化病、报春花黄化病、茶树黄化病、棕榈致死性黄化病、柳树黄化丛枝病、第五十九页，共93页。丛枝型或疯病型症状：

山核桃丛簇病、柳树丛枝病、枣疯病、泡桐丛枝病、桃丛枝病、梣树丛枝病、刺槐丛枝病、山茱萸丛枝病、檀香木簇顶病、胡桃丛簇病、丁香丛枝病、越橘丛枝病、仙人掌丛枝病、牵牛丛枝病、杨树丛枝病、万寿菊丛枝病、竹子丛枝病、杜鹃簇生病、牡丹丛枝病、刚竹鸟巢病、苦楝丛枝病、金鱼草丛枝病、淡竹丛枝病、柿疯病、樱桃丛枝病、山查丛枝病、栾树丛枝病、小叶朴丛枝病、锦菊丛枝病、夹竹桃丛枝病、四季海棠丛枝病、榕树丛枝病、檀香木簇生病、马尾松丛枝病、荷苞牡丹丛枝病、天竺葵丛枝病。第六十页，共93页。花变叶型及花变绿型（花器返祖型）症状：月季绿瓣病、长春花变叶病、福录考变叶病、草莓绿萼病、八仙花绿瓣病、万寿菊变叶病、三叶草变叶病、枣丛花病、绣球花绿变病、香罗兰（桂竹香）绿变病、大丽花绿瓣病叶变色、变质和变形：杏褪绿叶卷病、百幕大草白叶病、亮白花叶芋、倒挂金钟小叶病、桉树小叶病、杨梅小叶病第六十一页，共93页。其它类型的症状：苹果小果病榆树韧皮部坏死病、桑树萎缩病、杉苗萎缩病、美国梧桐叶灼伤病、薰衣草黄萎病、悬钩子矮化病、香椿带化病、油桐带化病、国槐带化病、紫穗槐带化病、第六十二页，共93页。植原体病害的特点：（1）传播：嫁接、菟丝子、昆虫介体传病。介体终生带毒，但不经卵传播。（2）细胞内寄生全株性侵染。（3）病害防治：四环素家族：土霉素、金霉素、氯霉素、脱甲基氯四环素、盐酸四环素等4000倍液；使用方法：叶面喷洒（四环素族抗生素不溶于水，需要盐酸作溶媒）、根部或枝条浸渍法、树干灌注法。第六十三页，共93页。植原体病害的花器畸形(花变绿/花变叶)第六十四页，共93页。长春花花变叶第六十五页，共93页。月季绿瓣病第六十六页，共93页。第六十七页，共93页。植原体病害的丛枝症状(witche'sbroom)第六十八页，共93页。Witche`sbroom(扫帚病/丛枝病)第六十九页，共93页。扁柏黄化第七十页，共93页。（二）植物螺原体病害：1螺原体（Spiroplasma）一般特性：（1）螺原体原核、无壁（三层单位膜）（2）对青霉素不敏感，对四环素敏感。（3）多数能在固体培养基内和表面生长，并形成“煎鸡蛋形”菌落。菌落圆形，中间稠密为黑色，周围透明。在液体培养基中形成丝状体。第七十一页，共93页。spiroplasma第七十二页，共93页。Spiroplasmasinthephloemofaninfectedcornplant.PhotographcourtesyR.E.Davis,USDA-ARS,Beltsville,MD第七十三页，共93页。2、螺原体在原核生物界的分类位置：

原核生物界软壁菌门软球菌纲菌原体目菌原体科螺原体属(Spiroplasma)第七十四页，共93页。3、螺原体病害：柑橘僵化病、马里兰花螺原体病害、椰子螺原体病害、长春花螺原体病害。第七十五页，共93页。柑桔僵化病第七十六页，共93页。（三）类立克次氏体（RLO）

是一类严格活细胞内寄生的原核细胞型微生物。（又称难养细菌或类细菌）

1909年,美国医生H.T.Ricketts(1871-1910年)首次发现落基山斑疹伤寒的独特病原体并被它夺取生命,故名.立克次氏体（Rickettsia）是一类专性寄生于真核细胞内的G-原核生物。

植物上的类似生物称为Richettsia-likeorganism简称RLO。第七十七页，共93页。1、植物类立克次氏体的特点：（1）菌体呈多形，而以棒形居多，具光滑或波纹状细胞壁。（2）类似细菌但难于培养。（3）传播：主要为昆虫介体和嫁接传播（4)分为韧皮部寄生和木质部寄生两大类。第七十八页，共93页。第七十九页，共93页。EM-xylella第八十页，共93页。

韧皮部寄生的类立克次体细胞，短杆状，无鞭毛，革兰氏染色反应为阴性，对青霉素和四环素敏感，不能人工培养；所致病害有柑橘青果病和柑橘黄龙病。主要症状为黄化和小叶；Liberobacter韧皮部杆菌属，1995年，种数2；柑橘黄龙病，韧皮部难养菌（fastidiousphloem-limitedbacteria）或“限于韧皮部类细菌（PLB）；第八十一页，共93页。患柑橘黄龙病的柑橘幼树第八十二页，共93页。柑橘黄龙病

Linberobacterasiaticum,

危害状及其传毒介体PhotographcourtesyTimR.GottwaldandSteveM.Garnsey

第八十三页，共93页。

木质部寄生的类立克次体细胞壁，短杆状，无鞭毛，有革兰氏阴性和阳性两种菌体；木质部类立克次体所致病害症状主要为叶灼、梢枯、枯萎和萎缩等；桃假果病、杏、洋李、榆树叶烧病、葡萄皮尔斯病、三叶草棒叶病、漆树黄化病、长春花萎蔫病、柑橘幼树衰退、橡树叶烧病、丁香萎蔫病、法国梧桐叶烧病、约翰逊