临床微生物标本的采集

临床微生物标本的采集临床微生物标本的采集第1页临床微生物检测目标帮助临床医生明确疾病诊疗并治疗感染性疾病规范临床抗生素应用帮助院感加强多重耐药菌和特殊病原菌监测临床微生物标本的采集第2页从微生物标本接收后，试验室工作就是：生物安全柜恒温培养箱临床微生物标本的采集第3页临床微生物标本的采集第4页标本采集、运输及处理过程中生物安全一、采集标本过程中需戴手套、穿工作服、戴防护口罩，必要时戴防护眼镜、穿隔离服。二、采集到原始标本应采取防漏可密封无菌管或杯型容器搜集。外加防漏可密封塑料袋，袋上应注明标本信息以及印有生物安全标志。临床微生物标本的采集第5页标本采集、运输及处理过程中生物安全三、用带针头注射器采集标本应移至无菌管内或用防护性装置套住针头，再置于密封、防漏塑料袋内送检。四、不要将泄漏标本送到试验室或随意处理。若需重送，旧标本需高压灭菌后弃去。临床微生物标本的采集第6页标本采集基础标准标本正确选择、采集和运输是试验室工作准确和有效前提，是确保试验室质量主要步骤，。

(早、无、药、适、时机)临床微生物标本的采集第7页标本采集基础标准一、尽早采集一旦怀疑细菌感染，应及时采集标本进行细菌学检验，尽早取得病原学诊疗和抗生素敏感资料，对细菌感染治疗含有极其主要意义。采集时间最好是病程早期、急性期，确保病原菌检出。临床微生物标本的采集第8页标本采集基础标准二、恪守无菌操作在采取血液、穿刺液或脑脊液等正常状态下无菌部位标本，应严格注意无菌操作，不得被其它部位细菌污染。在有正常菌群借居部位，如口咽部、鼻咽部和泌尿生殖道等部位应采取办法防止正常菌群和其它菌群污染。

盛放标本容器应无菌。临床微生物标本的采集第9页临床常见各种送检标本无菌标本血液骨髓脑脊液胸腹水关节液胆汁非无菌标本痰尿大便生殖道标本耳泌物临床微生物标本的采集第10页微生物标本送检天然棉花及木棒√×bact临床微生物标本的采集第11页微生物标本送检√×bact临床微生物标本的采集第12页微生物标本送检√×临床微生物标本的采集第13页标本采集基础标准三、在抗生素应用前采集

感染会发生生命危险，临床医生会在细菌学检验出结果之前使用抗生素治疗，而抗生素使用将影响病原菌检出。临床微生物标本的采集第14页标本采集基础标准四、选择不一样采集时机和标本种类

依据临床症状和流行病学资料，可大致对感染性疾病病原体作大致预计，依据病程和感染部位不一样，选择适当时机采集不一样标本。如伤寒患者，发病第一周应采集血液、第二周应采集粪便和尿液，不然影响细菌检出率。临床微生物标本的采集第15页标本采集基础标准五、适量标本标本量太少，可能造成假阴性结果；标本尽可能不用以天然棉花及木棍制成拭子采集标本（不饱和脂肪酸、干燥）；

临床微生物标本的采集第16页标本运输1.把握好时间标本采集后马上送检，送检时间不得超出2h，不然会影响病原菌检出。

少许液体（<1ml）或组织（<1cm3）应在15~30min内送至试验室，以免蒸发、干燥及暴露于周围环境。临床微生物标本的采集第17页标本运输2.控制好环境

普通性细菌培养标本延迟送检时，应放置4℃冰箱保留，且不超出24h。

若疑似标本中有对周围环境敏感微生物，如淋病奈氏菌、脑膜炎奈氏菌和流感嗜血杆菌（低温易死亡），应马上运输和处理。通常血液、脑脊液、生殖道、眼或内耳标本不要冷藏保留。临床微生物标本的采集第18页标本运输3、做好包装和防护临床标本及感染性物质，不论运输距离有多远，应严格注意标本包装，而且应采取安全防护办法。临床微生物标本的采集第19页标本送检样本临床微生物标本的采集第20页标本接收、处理标准当标本送至试验室时，应有病人基础信息、标本起源、采集时间等。试验室碰到以下情况标本时拒绝接收

1.不正确运输温度

2.不正确运输工具

3.延长送检时间

4.标本容器上未贴病人信息或贴错

5.标本有泄漏

6.盛标本容器有破损

7.标本有显著污染

8.标本量不足或已干涸

9.24h内重复送检标本（不包含血培养）

10.对某种试验不适合标本临床微生物标本的采集第21页临床常见标本采集、运输与接种临床微生物标本的采集第22页临床常见标本：

血液

痰及鼻咽分泌物尿液

粪便

穿刺液（脑脊液、胆汁、胸腹水等）

脓液及创伤感染分泌物

生殖道临床微生物标本的采集第23页血液

正常人血液是无菌。当细菌侵入时可引发菌血症或败血症。临床微生物标本的采集第24页血液培养意义：菌血症感染性心内膜炎临床不明原因感染假体植入后感染（人工关节、人工瓣膜）静脉导管相关性感染肺炎临床微生物标本的采集第25页血培养采集指征：高热（>38℃）或低温（<36℃）寒战白细胞增多（计数>10*109/L）皮肤黏膜出血休克多器官衰竭血压降低C反应蛋白升高及呼吸加紧血液病患者出现粒细胞降低、血小板降低临床微生物标本的采集第26页血培养中出现问题血培养阳性检出率偏低

血培养污染问题

血培养瓶保留与运输不妥

没有及时送检送检率偏低采血时机不适当药品对细菌培养影响采血量不足影响细菌生长套数影响临床微生物标本的采集第27页血培养送检率

我国多数三甲综合医院10～20瓶/天

复旦大学中山医院20～50瓶/天

香港玛丽医院200瓶/天

台湾大学医院300瓶/天临床微生物标本的采集第28页血培养中出现问题血培养阳性检出率偏低

血培养污染问题

血培养瓶保留与运输不妥

没有及时送检送检率偏低采血时机不适当药品对细菌培养影响采血量不足影响细菌生长套数影响临床微生物标本的采集第29页血液标本采集时机使用抗菌药品之前或停药24小时后寒战和发烧高峰30~60min内（研究表明细菌通常在寒战或发烧前1小时左右进入血流）临床微生物标本的采集第30页血液标本采集时机

怀疑感染性心内膜炎或其它静脉内感染（如导管相关性感染）时，可分开时段分部位采集：临床微生物标本的采集第31页导管相关血流感染导管相关血流感染（CatheterRelatedBloodStreamInfection,简称CRBSI）

指带有血管内导管或者拔除血管内导管48小时内患者出现菌血症或真菌血症，并伴有发烧（38℃）、寒颤或低血压等感染表现，除血管导管外没有其它明确感染源。

临床微生物标本的采集第32页导管送检指征

在ICU病房内携带中心静脉导管超出48小时，出现原因不明发烧或低血压患者，儿童患者出现低体温者。临床微生物标本的采集第33页送检方法

1、保留情况：采取最少2套血培养，其中最少一套来自外周静脉，另外一套则从导管中心无菌采获，两个起源采血时间必须靠近（<5分钟），各自做好标识。2、不保留情况：从独立外周静脉无菌采集2套血培养。无菌状态下取出导管并剪下5cm导管尖端或近心端送往试验室进行Maki半定量平板滚动培养。临床微生物标本的采集第34页血培养中出现问题血培养阳性检出率偏低

血培养污染问题

血培养瓶保留与运输不妥

没有及时送检送检率偏低采血时机不适当药品对细菌培养影响采血量不足影响细菌生长套数影响临床微生物标本的采集第35页血培养瓶需氧瓶厌氧瓶一套血培养=1瓶需氧+1瓶厌氧临床微生物标本的采集第36页血液标本采集方法采集量：成人每瓶采血量为8~10ml，儿童每瓶采血量为1~3ml

采取“双侧双瓶”标准。即2套血培养（1套为1瓶需氧和1瓶厌氧）。成人每套不少于10ml，婴幼儿仅用需氧瓶，采取两只需氧瓶为2套血培养，不少于4ml。

儿童患者因血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人临床微生物标本的采集第37页采血总量是影响检出病原菌主要原因之一。

采血量一套血培养（抽20ml血液）二套血培养三套血培养

阳性检出率

65%80%96%临床微生物标本的采集第38页血液标本采集时机+采血量

急性感染患者，应在5min内从不一样部位分别采2~3套血培养发烧原因不明患者，在24h内应从不一样部位采2~3套，间隔不少于60min。可疑心内膜炎患者，起始采集3套血培养（每次间隔不少于30min），假如24h内培养阴性，则应继续采集2套血培养亚急性感染性心内膜炎，需在30min至1h内连续抽取数套血培养（以证实细菌感染连续性）然后才开始抗菌药经验治疗。临床微生物标本的采集第39页血培养中出现问题血培养阳性检出率偏低

血培养污染问题

血培养瓶保留与运输不妥

没有及时送检送检率偏低采血时机不适当药品对细菌培养影响采血量不足影响细菌生长套数影响临床微生物标本的采集第40页血液标本采集方法

静脉采血，应严格消毒血培养瓶盖和皮肤，用无菌采血装置采血，不换针头，直接将血液标本注入血培养瓶中，注入血液后应颠倒混匀以防凝固。采取真空采血装置可降低污染。采血部位：成人采取肘静脉，儿童和婴幼儿多为颈部和腹股沟。成人不提议采集动脉血，不宜从静脉导管或静脉留置口取血，因其常伴有高污染率。严格消毒原因为：采血部位皮肤皱褶多，易造成皮肤寄生菌污染临床微生物标本的采集第41页血培养瓶接种次序有学问用注射器采血时：首先接种厌氧瓶防止空气进入，所以接种次序为先接种厌氧瓶，后需氧瓶。用蝶形针采血时：血液首先装入需氧瓶，以免装置里空气传送到厌氧瓶中。所以它次序为先接种需氧瓶，后接种厌氧瓶。特殊情况：假如抽取血液量极少时，血液应首先接种到需氧瓶中，因为多数菌血症是由需氧菌和兼性厌氧菌感染造成，剩下血再接种厌氧瓶。临床微生物标本的采集第42页血培养中出现问题血培养阳性检出率偏低

血培养污染问题

血培养瓶保留与运输不妥

没有及时送检送检率偏低采血时机不适当药品对细菌培养影响采血量不足影响细菌生长套数影响临床微生物标本的采集第43页血液标本运输采集后血培养应在1h内送达，不能及时送达时，需置室温下保留，不可冷藏或冷冻。(因为若感染菌为肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、淋病奈瑟氏菌遇冷易死亡)临床微生物标本的采集第44页泌尿生殖道标本一、尿液标本

适应症：尿路感染肾结核泌尿系结石膀胱排空功效受损前列腺增生患者临床微生物标本的采集第45页送检指针：出现尿频、尿急、尿痛等膀胱刺激症，肉眼脓尿或血尿，尿常规检验有白细胞或亚硝酸盐阳性，不明原因发烧或留置尿管患者出现发烧、尿道口有脓性分泌物等症状，泌尿系统疾病手术前等情况临床微生物标本的采集第46页采集时间：抗菌药品使用前或停药5天后采集尿液标本，通常采集晨尿，确保尿液在膀胱内停留4h以上。·临床微生物标本的采集第47页采集方法

1、清洁中段尿采集法：嘱患者晨起用温和肥皂水清洁会阴后，弃去前段尿，留取中段尿10ml~15ml于灭菌容器内，马上加盖送检。2、膀胱穿刺采集法：严格无菌操作消毒耻骨联合上皮肤，用无菌注射器穿刺入膀胱抽取5~10ml尿液于灭菌容器送检。该方法带给病人有一定痛苦3、导尿法：直接导尿采集法、留置导尿采集法临床微生物标本的采集第48页采集方法直接导尿按常规方法消毒会阴后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，先弃去前段15ml，再留取10~15ml膀胱尿液于无菌容器送检。留置导尿用碘酒消毒尿道口处导尿管壁，用联空针筒细针斜穿管壁抽吸尿液10~15ml，置于无菌容器中送检临床微生物标本的采集第49页采集方法四、集尿法怀疑结核分枝杆菌感染时，可用一清洁容器留24h尿，取其沉渣10~15ml送检。临床微生物标本的采集第50页尿液标本运输标本采集后及时送检和接种，室温下存放时间不得超出2h（夏季保留时间应适当缩短或冷藏保留），4~8℃保留时间不得超出24h，当应注意冷藏保留不用于疑为淋病奈瑟菌感染病人临床微生物标本的采集第51页常见临床标本采集及处理泌尿生殖道标本二、生殖道和尿道标本送检指针：女性患者外阴阴道炎细菌性阴道炎阴道溃疡尿道炎宫颈炎子宫颈炎子宫内膜炎输卵管炎卵巢脓肿男性患者尿道炎附睾炎前列腺炎生殖器临床微生物标本的采集第52页标本采集（依据不一样感染种类和病变特征采集不一样标本）

尿道分泌物患者排尿1h后采集，男性用生理盐水局部清洗，采取从尿道口溢出脓性分泌物，或尿道内2~4cm旋转拭子停留20s后取出分泌物；女性清洗尿道口后，从尿道内压迫尿道，使分泌物溢出后采集标本，无肉眼可见脓液，可用灭菌拭子轻轻深入前尿道内2~4cm旋转拭子停留20s取样送检生殖器标本用无菌盐水和手术刀去除溃疡面，暴露出溃疡基底，渗出物积聚较显著时，用拭子或吸管采集临床微生物标本的采集第53页送检指针：腹泻病人出现以下任一情况时提议采集粪便标本进行培养：

腹泻、大便每日≥3次，粪便性状异常，可为稀便、水样便、粘液便、脓血便及血便，可伴有恶心、呕吐、食欲不振、发烧、腹痛及全身不适等；病情严重者，因大量丢失水分引发脱水、电解质紊乱甚至休克；粪便涂片镜检白细胞≥5个/hp；抗菌药品治疗后腹泻；来自疫区患者常见临床标本采集及处理

粪便标本临床微生物标本的采集第54页采集方法自然排便采集法自然排便后，挑取有脓血或粘液个别粪便，液状粪便取絮状物盛于无菌容器内或置于保留液中送检，若不能及时送检，应按1:10百分比与ph7.0磷酸盐甘油缓冲液混合保留，以防病原菌死亡而影响检出率临床微生物标本的采集第55页直肠拭子采集法适于排便困难患者或婴幼儿。临床微生物标本的采集第56页采集量普通用拭子采集大于2g标本送检，若标本为水样，采集大于2ml标本置于无菌容器中送检临床微生物标本的采集第57页采集时间及频率采集时间尽可能在发病早期（急性期）和应用抗菌药品治疗之前，采集新鲜粪便送检，以提升检出率。怀疑沙门菌感染时，应在发病2周以后采集标本送检采集频率重复采集标本频率每日最多1次临床微生物标本的采集第58页痰标本适应症：咳嗽咳出脓性痰或铁锈样痰咯血鲜血和痰中带血等呼吸困难呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛、X线检验提醒肺部有炎性浸润或胸腔积液

发烧伴有白细胞以及中性粒细胞升高或CRP显著升高临床微生物标本的采集第59页标本采集普通以晨痰为好；支气管扩张症患者清晨起床后进行体位引流，可采集痰标本。自然咳痰采集法：在留取痰之前，用温清水重复漱口，以降低常居菌污染，应从气管深部咳出痰，吐入无菌容器中。气管穿刺法：在环甲膜下穿刺抽取痰液，搜集标本。临床微生物标本的采集第60页不合格标本处理对以下不合格标本应拒收

申请单姓名、科别、床号与标本标签不符痰标本呈水样或唾液样痰涂片白细胞<10/LP,上皮细胞>25/LP

标本容器溢漏，无盖子痰标本留取放置时间太长，超出2h

未用指定无菌容器留痰做细菌培养临床微生物标本的采集第61页标本运输标本采集后需尽快（小于2h）送至试验室，不及时运输可造成肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等病原菌因为不适应外界环境和自溶想象而死亡。延迟送检或待处理标本应置于4℃冰箱保留（疑为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌感染标本不能冷藏），以免杂菌生长，但保留标本应在24h小时内处理。对可疑烈性呼吸道传染病（SARS、肺炭疽、肺鼠疫等）患者检验标本，在采集、运输或保留过程中必须注意生物安全防护。临床微生物标本的采集第62页脓液及创伤感染分泌物标本采集送检指针：局部感染：红、肿、热、痛和功效障碍全身症状：轻重不一、常有发烧、头痛、全身不适、乏力食欲减退等。（白细胞计数增加、crp升高）疑为软组织急性化脓性炎症、化脓性疾病、脓肿、创伤感染临床微生物标本的采集第63页采集方法：开放性脓肿：包含眼、耳、扁桃体、术后切口感染等脓性分泌物首先用无菌生理盐水清洗病灶表面污染杂菌，用无菌棉拭子先蘸少许无菌生理盐水，然后采取靠近组织个别脓液及病灶深部分泌物马上送检。闭锁性脓肿：指完整脓壁与体腔，及与外界不相通脓肿采集前需对患者病灶局部皮肤或粘膜表面用2.5%-3%碘酊消毒、75%乙醇脱碘，用无菌注射器将脓肿内容物吸出。临床微生物标本的采集第64页

明明送检是脓液，可培养结果却是“无菌生长”？临床微生物标本的采集第65页标本采集前已经使用了抗