血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳_第1页
血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳_第2页
血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳_第3页
血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳_第4页
血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳_第5页
已阅读5页，还剩6页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳第1页/共11页实验目的1、掌握血红蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的操作。2、了解醋酸纤维素薄膜电泳的原理和应用，

血红蛋白的组成和分类。

第2页/共11页实验原理》Hb的组成：》Hb的种类：

HbA（α2β2）：95-98%

HbA2

（α2δ2

）：2-3%

HbF

（α2γ2

）：1%；（胎儿、新生儿：70-80%）4条多肽链构成的珠蛋白（

αβγδ）血红素辅基第3页/共11页》电泳分离Hb1、支持物：醋酸纤维薄膜（CAM）2、缓冲液：pH8.6硼酸-氢氧化钠，TEB液各种Hb的结构差异迁移速率不同分离电荷，分子量不同第4页/共11页实验步骤2、制备Hb溶液反复洗涤三次皂素1滴Hb溶液（样品）1、取血:本人指血10～15μl2000r/min5min丢弃上清液血（10μl）﹢0.9%NaCl（3ml）

第5页/共11页3、电泳1）醋酸纤维薄膜准备：(已完成）2）点样：点样线上点样（毛面）3）电泳：平衡5～10min；电泳条件：10V/cm（长），30-40min

电泳结束：Hb区带分离后结束电泳。点样线＋－8cm2cm第6页/共11页4）染色：丽春红染色8-10min5）洗脱：背景发白，能辨清条带6）观察分析结果碳酸酐酶HbAHbA2点样线＋－－＋第7页/共11页α地中海贫血异常Hb样本HbH第8页/共11页β地中海贫血第9页/共11页7）定量：空白管HbAHbA2膜条空白背景HbA蛋白区带HbA2蛋白区带NaOH3ml6ml3ml10min后醋酸0.3ml0.6ml0.3ml混匀后，520nm测定吸光度值（空白管调零）HbA%=AHbA*2/(AHbA*2+AHbA2)*100HbA2%=AHbA2/(AHbA*2

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论