动物生物制品的制备

第二章

动物生物制品的制备第一节一般生物制品的制备方法目前一页\总数一百二十一页\编于四点一、原料的选择、预处理和保存方法1.原料的选则

生物原料可来源于人体、动物、植物、微生物及海洋生物的生物组织或分泌物，也可以来源于人工构建的工程细菌、工程细胞及人工免疫的动植物目前二页\总数一百二十一页\编于四点1.原料的选则（1）.注意事项：注意最佳生长时期（2）.选择原料时应遵循的原则：原料来源丰富，产地接近，成本低；原料新鲜杂质含量少，起始原料质量稳定目前三页\总数一百二十一页\编于四点2、原料的预处理生物材料动物材料植物材料微生物材料目前四页\总数一百二十一页\编于四点3.原料的保存方法1）冷冻2）有机溶剂脱水3）防腐剂保鲜目前五页\总数一百二十一页\编于四点二、目的产物的提取1.组织细胞破碎高压匀浆高速珠磨超声破碎压力法反复冻融化学渗透酶溶破碎2.固液分离离心双水分配膜过滤微滤超滤反渗透

目前六页\总数一百二十一页\编于四点三、.目的产物的分离纯化在去除各种杂质的同时将目的产品成分进行富集与浓缩纯度、提纯倍数、收获率分级沉淀、超滤、电泳、层析……目前七页\总数一百二十一页\编于四点第二节各类生物制品的分离纯化方法目前八页\总数一百二十一页\编于四点一、蛋白质类制品的分离纯化方法1.根据蛋白质的分子大小、形状和密度差异进行的分离纯化（1）.过滤和超过率技术（2）.离心和超离心技术（3）.凝胶过滤层析技术（4）.透析目前九页\总数一百二十一页\编于四点2.利用蛋白质电性进行分离纯化（1）.等电点沉淀（2）.离子交换层析技术（3）.电泳和等点聚焦电泳目前十页\总数一百二十一页\编于四点3、利用蛋白质的亲水性和疏水性进行分离（1）.盐析技术（2）.乙醇和聚乙二醇沉淀法（3）.疏水层析法目前十一页\总数一百二十一页\编于四点4.利用蛋白质的化学性质分离纯化（1）.辛酸沉淀法（2）.利凡诺沉淀法（3）.固相化染料柱层析（4）.螯合柱层析目前十二页\总数一百二十一页\编于四点二、核酸类制品的分离纯化方法1.提取环烷酸2.对提取的核酸制品进行纯化1）.盐析法及沉淀法2）.离心法3）.膜分离法目前十三页\总数一百二十一页\编于四点三、多糖的分离纯化方法目前十四页\总数一百二十一页\编于四点四.脂类的分离纯化方法目前十五页\总数一百二十一页\编于四点第三节强毒菌(毒)种的选育病原分离纯粹试验致病性免疫原性

筛选出适用毒株，分装，冻干保存目前十六页\总数一百二十一页\编于四点三、弱毒菌(毒)种选育目前十七页\总数一百二十一页\编于四点传统方法培育弱毒活疫苗种和病毒种

利用病原自然弱毒株LaSota、牛痘、鸽痘经典方法诱变弱毒株选育化学途径：亚硝酸基胍物理途径：热、干燥、射线等生物途径：适应非易感动物适应细胞杂交减毒目前十八页\总数一百二十一页\编于四点第四节细菌增殖技术目前十九页\总数一百二十一页\编于四点一、细菌繁殖规律与生长条件细菌的营养：水、碳、氮、盐类、生长因子等细菌生长的条件：气体、温度、PH值、渗透压细菌繁殖规律：二分裂法迟缓期、对数增殖期、稳定期、衰退期目前二十页\总数一百二十一页\编于四点二、细菌的分离与培养需氧菌的分离培养1．平板分离培养法：平板划线分离培养法、倾注培养法2．需氧芽胞菌的分离培养法3．利用化学药品抑茵的分离培养4．通过实验动物分离法目前二十一页\总数一百二十一页\编于四点厌氧菌的分离培养1．生物学方法：在培养基中加入动植物组织2．化学方法保险粉法：利用连二亚硫酸钠（Sodiumhydrosulphite）和碳酸钠以吸收空气中的氧焦性没食子酸法：焦性没食子酸在碱性溶液中能吸收大量氧气硫乙醇酸钠法：硫乙醇酸钠（HSCH2COONa）是一种还原剂，能除去氧或还原氧化型物质3．物理学方法：加热、密封、抽气等目前二十二页\总数一百二十一页\编于四点

含二氧化碳条件下细菌分离培养有些细菌特别是初次分离培养，要在含有5%～10％CO2。蜡烛缸法二氧化碳培养箱目前二十三页\总数一百二十一页\编于四点三、工业化大生产中细菌培养方法1、固体培养基表面培养法：用于制备抗原、灭活苗苗或冻干苗苗2、液体静置培养法：适于一般菌苗的生产目前二十四页\总数一百二十一页\编于四点3、液体深层通气培养法：适于大量的培养，菌苗生产中的主要培养方法。反应缸4、透析培养法：培养物与培养基之间隔一层半透膜的培养方法。发酵器透析培养系统目前二十五页\总数一百二十一页\编于四点三、细菌计数技术总菌数计数法1．显微镜直接计数：利用血细胞计数器2．直接涂片计数法：数出红细胞与菌数之比3．过滤计数法：测定空气或水中的细菌数4．比浊计数法：麦氏比浊管目前二十六页\总数一百二十一页\编于四点活菌计数法：通常用菌落形成单位（CFU）表示1．倾注平板培养2．平板表面散布法3．微量点板计数法4、其他方法：玻璃片琼脂薄层法、还原试验法、大肠菌群最近似数测定法、过滤计数法等5、新技术方法：如生物发光法、放射测量法，鲎试验法，电阻抗测量法等目前二十七页\总数一百二十一页\编于四点

第五节病毒增殖技术目前二十八页\总数一百二十一页\编于四点

一、病毒的增值病毒的增殖过程包括吸附、穿入、脱壳、病毒成分的合成、装配与释放等步骤。目前二十九页\总数一百二十一页\编于四点吸附目前三十页\总数一百二十一页\编于四点吸附与温度有一定关系，37℃时吸附最好要求病毒附加蛋白质细胞感受器目前三十一页\总数一百二十一页\编于四点穿入-----质膜溶解疱疹病毒,副粘病毒,艾滋病病毒HIV目前三十二页\总数一百二十一页\编于四点穿入----通过形成内涵体目前三十三页\总数一百二十一页\编于四点穿入----通过形成内涵体目前三十四页\总数一百二十一页\编于四点H+目前三十五页\总数一百二十一页\编于四点穿入-----有囊膜病毒fromSchaechteretal,MechanismsofMicrobialDisease,3rded,1998目前三十六页\总数一百二十一页\编于四点穿入-----无囊膜病毒

直接通过质膜目前三十七页\总数一百二十一页\编于四点H+穿入-----形成内涵体目前三十八页\总数一百二十一页\编于四点病毒成分的合成此过程称为“隐蔽期”，主要为mRNA的转录、病毒多肽的转译和基因组的复制等根据病毒核酸及其转录和复制的方式不同，将动物病毒分为以下六个基本类型1．双股DNA病毒2．单股DNA病毒3．双股RNA病毒4．单股RNA（正股）病毒5．单股RNA（负股）病毒6．单股RNA（正股反转录）病毒目前三十九页\总数一百二十一页\编于四点病毒的装配与释放新合成的病毒蛋白质亚单位组成前衣壳，病毒核酸进入前衣壳而形成完整的病毒粒子。无囊膜的病毒由于细胞溶解而逸出胞外。有囊膜的病毒，在核膜、胞浆空泡膜和细胞膜上出芽时，获得囊膜囊膜病毒出芽时，病毒糖蛋白进入细胞膜，使细胞获得病毒抗原的特异性目前四十页\总数一百二十一页\编于四点天花病毒的装配与成熟目前四十一页\总数一百二十一页\编于四点SemlikiForestVirus释放目前四十二页\总数一百二十一页\编于四点HIV释放与成熟目前四十三页\总数一百二十一页\编于四点Hockleyetal.JGenVirol69:2455-2469没感染的HIV感染的(athighermagnification)HIV感染的目前四十四页\总数一百二十一页\编于四点

二、病毒的营养需求必须利用活的细胞为其提供生物合成所需的能量和材料。常以动物、鸡胚、细胞培养方法增殖病毒培养细胞的营养液主要成分包括：无机盐离子、碳水化合物、氨基酸、维生素、蛋白质及抗生素等。目前四十五页\总数一百二十一页\编于四点三、禽胚增殖病毒技术禽胚的选择接种途径与收获

绒毛尿囊膜接种法

尿囊腔接种法

羊膜腔接种法

卵黄囊接种法其它接种方法：脑内接种、胚体接种、静脉接种目前四十六页\总数一百二十一页\编于四点10-11天龄鸡胚目前四十七页\总数一百二十一页\编于四点影响禽胚增殖病毒的因素种蛋质量

SPF胚、母源抗体、抗生素残留孵化技术

温度、湿度、通风、翻蛋等接种技术：

无菌操作、伤及胚体目前四十八页\总数一百二十一页\编于四点鸡胚接种后的检查与收获病毒弃去接种24小时内死亡的胚蛋，24小时后死亡的胚蛋随时取出，放4～8℃冷冻4～24小时，以备收获材料。收获含病毒的尿囊液、羊水、绒毛尿囊膜、卵黄囊、胚体目前四十九页\总数一百二十一页\编于四点目前五十页\总数一百二十一页\编于四点

四、培养病毒的细胞类型及其培养方法细胞类型1、原代细胞(2-3代)2、二倍体细胞株(有限性，10-50代)3、传代细胞(恶性转化细胞系、转化细胞系)目前五十一页\总数一百二十一页\编于四点细胞培养方法1、静置培养2、转动培养3、悬浮培养4、微载体培养5、中空纤维细胞培养6、微囊化细胞培养目前五十二页\总数一百二十一页\编于四点组织培养细胞上皮细胞上皮样细胞纤维原细胞目前五十三页\总数一百二十一页\编于四点上皮细胞------腺病毒正常感染初期感染后期目前五十四页\总数一百二十一页\编于四点上皮细胞(epithelialcells)–呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytialvirus)感染前感染后目前五十五页\总数一百二十一页\编于四点纤维原细胞-------单纯疱疹病毒正常感染初期感染后期目前五十六页\总数一百二十一页\编于四点纤维原细胞-----脊髓灰质炎病毒正常感染初期感染后期目前五十七页\总数一百二十一页\编于四点

三、实验室细胞培养技术培养细胞用器材及其处理一次性的使用方便酸碱处理、清洁、干燥、消毒目前五十八页\总数一百二十一页\编于四点细胞培养液和贮存液1、平衡盐溶液(BSS)和磷酸缓冲盐溶液(PBS)2、胰蛋白酶-EDTA溶液3．碳酸氢钠溶液4．胰蛋白酶溶液5．水解乳蛋白溶液6．胰蛋白胨磷酸盐肉汤（TPB）7．Eagle’s营养液8．199营养液9.RPMI－1640营养液10.犊牛血清、抗生素目前五十九页\总数一百二十一页\编于四点

细胞培养的细胞制备1、鸡胚成纤维细胞(CEF)10天龄鸡胚→去头、脚、翅、内脏→剪碎→洗3次→加胰酶水浴消化→洗3次→加入生长液过滤→离心→加犊牛血清、营养液分装培养瓶→24~48小时后成间层细胞目前六十页\总数一百二十一页\编于四点

2．传代细胞的培养：次代细胞和传代细胞系的培养方法基本相同。良好单层的细胞→用无钙镁的磷酸平衡盐水洗两次→胰酶消化→加生长液分装(1：3~4)目前六十一页\总数一百二十一页\编于四点细胞的保存单层的细胞培养→更换新的营养液→胰酶消化→收集细胞→细胞冷冻保护液→分装干lml安瓿→0.05％美蓝溶液中，4℃30min→一50～一70℃→液氮罐内贮存数年细胞的复苏：将安瓿自液氮罐取出后立即放入37～40℃温水中，在lmin之内使细胞融化→吸出细胞悬液→加入新的生长液，稀释分装培养瓶→贴壁后换液一次→至形成细胞单层。细胞的运输：留少量生长液能覆盖单层，防细胞干燥，防液体振荡冲脱细胞。目前六十二页\总数一百二十一页\编于四点病毒的接种与检查单层细胞培养→弃生长液→洗一次细胞面→接种待检病料或病毒液→吸附30～60min→弃接种液加入维持液→细胞病变→鉴定目前六十三页\总数一百二十一页\编于四点病毒的蚀（空）斑技术病毒接种于细胞上→覆盖一层琼脂→形成局限性病灶→蚀斑多用于病毒克隆化及病毒含量的滴定目前六十四页\总数一百二十一页\编于四点细胞培养污染问题细菌污染真菌污染支原体污染病毒污染来源血清的原虫污染目前六十五页\总数一百二十一页\编于四点五、以动物体增值病毒的技术

用途病毒的致病力、致病机理免疫应答方面制造疫苗抗血清等接种技术脑内接种法皮内接种法皮下接种法静脉接种法腹腔接种法目前六十六页\总数一百二十一页\编于四点六、工业化大规模生产病毒的方法

1．多表面细胞培养系统(多层玻璃板)2．微载体细胞培养系统3．气升悬浮细胞培养系统4．过滤培养5．大规模生产过程中的计算机自动控制系统目前六十七页\总数一百二十一页\编于四点第二章第六节

灭活剂、保护剂与免疫佐剂目前六十八页\总数一百二十一页\编于四点一、灭活剂灭活灭活—指破坏微生物的生物活性、繁殖能力和致病性，但不影响其免疫原性。微生物灭活、血清灭活、毒素灭活…目前六十九页\总数一百二十一页\编于四点灭活的主要方法物理灭活：加热超声波裂解、

60Co照射等目前七十页\总数一百二十一页\编于四点化学灭活：用于灭活微生物的化学试剂或药物称为灭活剂。

甲醛、戊二醛烷化剂(乙酰基乙烯亚胺、二乙烯亚胺、缩水甘油醛)、苯酚、结晶紫、

β-丙酰内酯目前七十一页\总数一百二十一页\编于四点影响灭活作用的因素灭活剂的特异性微生物种类与特性灭活剂浓度灭活温度灭活时间酸碱度有机物的存在目前七十二页\总数一百二十一页\编于四点新型灭活剂的作用新型病毒灭活剂----辛酸钠，用于血清制品的病毒灭活壳聚糖----可作为流感病毒灭活疫苗的新型佐剂目前七十三页\总数一百二十一页\编于四点二、保护剂指一类能防止生物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。作用机制：防止失去结合水阻止结合水形成结晶降低膜内外渗透压差提供复苏和修复所需的营养目前七十四页\总数一百二十一页\编于四点保护剂(稳定剂)的种类1.渗透剂(二甲基亚砜、甘油和蔗糖等)，能渗入生物活性物质内部，降低因冷冻而增加的渗透压，防细胞内脱水。

2.非渗透剂(聚乙烯吡咯烷酮“PVP”和蛋白质等)，能防止活性物质由外向内渗漏溶质。目前七十五页\总数一百二十一页\编于四点三.冻干保护剂的组成营养液：脱脂乳、蛋白胨、氨基酸、和糖类等赋形剂：蔗糖、山梨醇、乳糖、PVP、葡聚糖等抗氧化剂：Vit.C、Vit.E和硫代硫酸钠等目前七十六页\总数一百二十一页\编于四点四、影响保护剂效能的因素保护剂的种类保护剂组分浓度保护剂配制方法保护剂酸碱度目前七十七页\总数一百二十一页\编于四点五、常用的冻干保护剂脱脂牛奶(TACC配方)脱脂奶-谷氨酸钠(日本配方)7.5%葡萄糖-血清(NCYC配方)环乙醇-血清喷雾干燥稳定剂(NCTC和NCIB的配方)……目前七十八页\总数一百二十一页\编于四点三、免疫佐剂佐剂（Adjuvant）或“免疫佐剂”凡能非特异地通过物理或化学的方式与抗原结合而增强其特异免疫性的物质。用于疾病预防、治疗、免疫制备中1925年法国免疫学家Ranmon发现在疫苗中加入某些与之无关的物质可以特异性地增强机体的免疫反应目前七十九页\总数一百二十一页\编于四点佐剂的作用机理对抗原的作用增加抗原的表面积和改变活性基团构型增强T细胞和B细胞的协同作用使抗原缓慢降解和缓释对机体的作用引起细胞浸润，增强细胞免疫反应加速淋巴细胞的转化为效应细胞使膜和胞浆活性增加分泌辅助因子细胞功能改变，免疫细胞数量增加目前八十页\总数一百二十一页\编于四点完美佐剂的标准无致癌性;无毒性;纯度高;有一定的吸附力;在动物体内能被降解、吸收;不含与动物有交叉反应的抗原物质;不诱发自身过敏反应;稳定,储存1年以上不分解、不变质目前八十一页\总数一百二十一页\编于四点佐剂的类型1、颗粒性佐剂盐类佐剂油水乳剂佐剂蜂胶佐剂脂质体佐剂免疫剌激复合物(ISCOM)佐剂其它：MF59佐剂、微囊化佐剂、硬脂酰酪氨酸佐剂、γ-菊粉等目前八十二页\总数一百二十一页\编于四点佐剂的类型2、可溶性佐剂肽类：MDP表面活性分子类：TDM核酸及其衍生物类：CpGDNA,CpG-ODN含硫复合物类：左旋咪唑碳水化合物高分子类：多糖和DEAE-葡聚糖等细胞因子类：IL-γ-IFN脂质分体类：脂多糖，Vit.A\E其他：蛋白毒素如CT、PT、TT目前八十三页\总数一百二十一页\编于四点常用佐剂1、铝盐类佐剂

氢氧化铝胶明矾磷酸三钙目前八十四页\总数一百二十一页\编于四点氢氧化铝成本低廉,使用方便、无毒,是胞外繁殖的细菌及寄生虫抗原的良好免疫佐剂。主要的不足之处是铝盐佐剂仅能诱导、激发体液免疫。目前八十五页\总数一百二十一页\编于四点油乳剂佐剂弗氏佐剂、265佐剂、白油Span佐剂、MF259……目前八十六页\总数一百二十一页\编于四点

常用矿物油佐剂的缺点①矿物油在组织中因不能代谢而长期存在，造成局部组织损伤；②有污染致癌性多环芳香烃化物的危险，限制了矿物油佐剂只应用于实验动物及一些兽用疫苗。目前八十七页\总数一百二十一页\编于四点

蜂胶（Propolis）佐剂蜂胶是蜜蜂采自柳树、杨树、栗树和其它植物幼芽分泌的树脂，并混入蜜蜂上颚腺分泌物，以及蜂蜡、花粉及其它一些有机与无机物的一种天然物质。目前八十八页\总数一百二十一页\编于四点蜂胶免疫性剂具有良好的免疫增强作用，它能增强巨噬细胞的吞噬能力，促进抗体的产生，提高机体的特异性和非特异性免疫力。质量不稳定蜂胶需95%乙醇溶解蜂胶佐剂注射部位形成肿块目前八十九页\总数一百二十一页\编于四点新型免疫佐剂细胞因子类佐剂CpGDNA(胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸DNA)基因工程减毒素免疫刺激复合物（ISCOM）佐剂脂质体(liposomes)佐剂MF59佐剂……目前九十页\总数一百二十一页\编于四点新型佐剂----细胞因子类佐剂作为免疫佐剂，其佐剂活性不如常规佐剂作为免疫治疗剂，预防治疗某些病原感染通过基因重组，构建新型基因工程疫苗这类细胞因子主要为IL-2、IL-1、IL-12、γ-干扰素。目前九十一页\总数一百二十一页\编于四点CpGDNA(胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸)激活NK细胞和巨噬细胞刺激B细胞及产生Ig诱导分泌多种细胞因子诱导抗抗体诱生的细胞凋亡安全、无副作用、可人工合成(CpG-ODN—寡聚脱氧核苷酸)目前九十二页\总数一百二十一页\编于四点基因工程减毒素细菌细胞壁成分或毒素通过现代基因工程技术脱毒霍乱毒素(CT)大肠杆菌不耐热毒素(LT)破伤风类毒素(TT)目前九十三页\总数一百二十一页\编于四点其他新型佐剂1、免疫刺激复合物（ISCOM）佐剂ISCOM是由抗原+QuilA+胆固醇=1：1：1混合后自发共价结合而成的一种较高免疫活性的脂质小泡。ISCOM现已广泛应用于兽医多种细菌、病毒和寄生虫病的疫苗。目前九十四页\总数一百二十一页\编于四点ISCOM快速、有效地将抗原递呈给免疫系统免疫后迅速激活机体的细胞免疫应答和体液免疫应答经口服或鼻腔接种获得免疫,且能达到在局部和全身黏膜表面诱导有效而特异的黏膜应答;重复低剂量口服ISCOM疫苗不会引起免疫耐受只有含疏水基团很多的抗原或免疫原才能与ISCOM形成复合物目前九十五页\总数一百二十一页\编于四点2、脂质体(liposomes)佐剂人工合成的具有单层或单位膜样结构的脂质小囊，由一个或多个类似细胞单位的类脂双分子包囊水相介质所组成，具有佐剂兼载体效应。一类以提高抗原输送和递呈为主要作用的佐剂与弗氏佐剂或铝胶合用，效果更佳目前九十六页\总数一百二十一页\编于四点脂质体膜对细胞膜具有很好的亲和性,容易将包被在脂质体上或内部的抗原成分输入到细胞内近似于病毒与宿主细胞的作用过程，定向传输主要存在问题是稳定性目前九十七页\总数一百二十一页\编于四点由N’,Ｎ’-二甲基乙二胺基氨甲酰基胆固醇(DCchol)制备成的正电荷脂质体作为基因转移的载体而被批准用于基因治疗的临床研究脂质体佐剂多在粘膜疫苗和基因工程疫苗上应用目前九十八页\总数一百二十一页\编于四点3、纳米(Nanometer,NM)佐剂是将抗原物质或能编码免疫原多肽的DNA或RNA包裹于纳米粒子内部或是吸附在纳米粒子表面,或与纳米粒子结合纳米乳剂是对黏膜无毒性的佐剂避免传统疫苗的载体效应发生,提高生物利用度,提高制剂的均匀性、分散性和吸收性目前九十九页\总数一百二十一页\编于四点4、MF59佐剂4.3%角鲨烷+0.5%吐温-80+0.5%司班-80制成水包油型疫苗可刺激体液免疫，可激发细胞免疫取代氟氏佐剂。采用了可代谢和无毒的鲨烯作为油剂,以减轻炎症反应实验效果并不稳定目前一百页\总数一百二十一页\编于四点5、QuilA佐剂QuilA系从南美皂树树皮中筛选到的具有佐剂活性的成分。使外源性抗原刺激机体Th1免疫应答,又能诱导CTL应答亚单位疫苗、细胞内病原体疫苗及癌症疫苗的理想佐剂引起溶血、局部组织坏死,甚至全身不良反应或中毒目前一百零一页\总数一百二十一页\编于四点6、胞壁酰二肽(MDP)及其衍生物佐剂从分枝杆菌细胞壁中分离到的具有活的最小结构片段诱导机体产生细胞因子存在致热原性,在动物体内会引起赖特尔过敏综合征目前一百零二页\总数一百二十一页\编于四点注射局部反应轻微,极少化脓无抗原性和过敏原性,可反复注射无致癌作用分子量小,对生物学降解作用有抵抗力,可以口服。目前一百零三页\总数一百二十一页\编于四点（七）佐剂的应用关键控制抗原-佐剂复合物的体积利用佐剂的靶向性优化佐剂的选择注重佐剂的联合应用目前一百零四页\总数一百二十一页\编于四点（八）在DNA疫苗上使用较有潜力的免疫佐剂CpG-ODN脂质体霍乱毒素(CT)大肠杆菌热不稳定性肠毒素(LT)细胞因子…….目前一百零五页\总数一百二十一页\编于四点（九）新佐剂的研发药效、药理、毒理学研究佐剂类型、联用配方有效性、安全性、选择性、可控性有机结合目前一百零六页\总数一百二十一页\编于四点（十）中药免疫佐剂具有多效性、双向调节性、不良反应少、毒副作用小和无依赖性等特点。存在成分复杂、作用机制不清、稳定性差多糖、黄酮、皂苷等是主要的活性成分目前一百零七页\总数一百二十一页\编于四点能有效提高机体免疫力的中药

滋补类药物中的人参、枸杞、五味子、何首乌、黄芪、仙茅、肉桂等;清热解毒药物中的金银花、仙人掌、黄连、黄芩、柴胡、穿心莲、大黄、板蓝根等;活血化瘀药物中的红花、三七、川芎及一些地衣类植物等方剂有:玉屏风散、补中益气汤、小柴胡汤、养真方、银翘散、白虎汤等目前一百零八页\总数一百二十一页\编于四点中药佐剂的作用机制免疫调节(细胞因子网络的修饰)、抗原递呈(抗原构象的维持)、细胞毒性T细胞(CTL)诱导、抗原靶向和储存等目前一百零九页\总数一百二十一页\编于四点中药佐剂的研究方向传统中药制剂为研究对象以中药有效部位(群)为研究对象以中药有效单体为研究对象目前一百一十页\总数一百二十一页\编于四点第六节

生物制品的冷冻真空干燥技术目前一百一十一页\总数一百二十一页\编于四点一、冷冻真空干燥(冻干)原理与特点原理：

将生物活性物质先行降温冻结成固体，再在真空和适度加温(不超过40℃)条件下使固体水分子直接升华成水汽抽出，最后使生物活性物质形成疏松、多孔样固状体。目前一百一十二页\总数一百二十一页\编于四点一、冷冻真空干燥(冻干)原理与特点特点：

(1)保护热敏物质的活泩

(2)保护活性物质的性状

(3)保持活性物质体