《微生物的实验室培养》课件-(新人教版选修1)

《微生物的实验室培养》课件-(新人教版选修1)第一页，共46页。第二页，共46页。

是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。一、微生物第三页，共46页。微生物病毒细菌放线菌真菌原生动物

是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。一、微生物特点：小简低第四页，共46页。病毒的结构第五页，共46页。病毒

第六页，共46页。SARS冠状病毒、禽流感病毒第七页，共46页。朊病毒（蛋白质病毒）第八页，共46页。病毒的增殖第九页，共46页。细菌的外形与大小

A.球菌B.杆菌C.弧菌常见的细菌三种典型形态ABC第十页，共46页。细菌的结构第十一页，共46页。芽孢：细菌形成的椭圆形的休眠体第十二页，共46页。

芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。第十三页，共46页。异养菌：腐生菌寄生菌大部分病原菌细菌的营养类型

根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。

自养菌：光能自养型：光合细菌化能自养型：硝化细菌，铁细菌，硫细菌第十四页，共46页。菌落

单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的

重要依据。第十五页，共46页。4.放线菌⑴结构：

单细胞原核生物分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）第十六页，共46页。（2）繁殖孢子丝

|孢子第十七页，共46页。链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素

微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是由放线菌产生的⑶应用:第十八页，共46页。第十九页，共46页。酵母菌酵母菌和霉菌青霉第二十页，共46页。生殖腐生生活孢子生殖第二十一页，共46页。微生物的实验室培养条件：（1）合适的营养和环境条件（2）确保其他微生物无法混入一.培养基

1.概念：按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。第二十二页，共46页。固体培养基：菌落第二十三页，共46页。液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长第二十四页，共46页。半固体培养基：第二十五页，共46页。2.种类：（按物理形态分）液体培养基增菌、工业生产固体培养基半固体培养基应用微生物纯化（分离）、鉴定、计数和菌种保存等方面按照培养基用途分选择性培养基鉴别培养基按照培养基的成分来分合成培养基、天然培养基、半合成培养基第二十六页，共46页。3.成分：思考：各种培养基的具体配方不同，但一般都包括哪些成分？水、无机盐、碳源、氮源、（生长因子）+满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的要求C第二十七页，共46页。碳源：如CO2和糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，自养微生物需无机碳，异氧微生物需有机碳还能提供能量。氮源：如N2、氨盐、硝酸盐和牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等，无机氮源可为硝化细菌提供能量。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。第二十八页，共46页。C第二十九页，共46页。二.无菌技术思考：1.什么是无菌技术？包括哪些方面？2.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？（P15旁栏思考）3.消毒和灭菌有何不同？4.常用的消毒和灭菌方法有哪些？无菌技术：泛指培养微生物操作中，所有防止杂菌污染的方法。无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。第三十页，共46页。

芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。第三十一页，共46页。3.常用的消毒方法：煮沸消毒法，巴氏消毒法，紫外线或化学药剂消毒法常用的灭菌方法：灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌：100kPa121℃15-30min判断下列各项是否需要消毒或灭菌。如需要，选择合适方法。（1）豆浆（2）游泳池（3）超净工作台（4）玻棒、试管、吸管、锥形瓶（5）培养细菌用的培养皿（6）无菌水（7）牛肉膏蛋白胨培养基（8）接种环、接种针（9）实验操作者的双手牛奶接种室、接种箱或超净工作台接种工具，接种环、接种针或其他金属用具玻璃器皿（吸管、培养皿）第三十二页，共46页。三.实验操作---大肠杆菌的纯化培养（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算－称量－溶化－灭菌－倒平板（二）纯化大肠杆菌

最常用的接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法（冷却至50℃）第三十三页，共46页。问题讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？

应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。第三十四页，共46页。菌种的保存1、临时保藏法：对象：温度：缺点：2、甘油管藏法：对象：温度：结果分析与评价课题延伸（P20）频繁使用的菌种4℃（冰箱）容易被污染或产生变异长期保存的菌种-20℃（冷冻箱）第三十五页，共46页。第三十六页，共46页。接种环接种针第三十七页，共46页。倒平板讨论1，2讨论3，4第三十八页，共46页。平板划线法讨论2，3第三十九页，共46页。1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？操作的第一步灼烧接种环：

每次划线前灼烧接种环：划线结束后灼烧接种环：

避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。第四十页，共46页。2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？以免接种环温度太高，杀死菌种。划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落第四十一页，共46页。涂布器第四十二页，共46页。1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基第四十三页，共46页。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。不要空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生第四十四页，共46页。选择培养基不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳