影响微生物生长的三个实验

第第页影响微生物生长的三个实验

专业：生物科学类

班级：20**级

姓名：

学号：1007040085

20**年6月16日

试验九环境因素对微生物生长的影响

一、试验目的

1、了解渗透压及生物因素〔抗生素〕对微生物生长的影响。

2、了解抗生素对微生物生长的影响，学习抗菌谱试验的基本方法。

3、进一步掌控培育基的制备及划线操作。

二、试验原理

微生物的生长繁殖受外界环境因素的影响，环境条件相宜时微生物生长良好，环境条件不相宜时微生物生长受到抑制，甚至导致微生物死亡。物理、化学、生物及营养等不同环境因素影响微生物生长繁殖的机制不尽相同，而不同类型微生物对同一环境因素的适应技能也有差别。

1、渗透压

微生物在等渗溶液中可正常生长繁殖；在高渗溶液中细胞失水，生长受到抑制；在低渗溶液中细胞失水膨胀，由于大多数微生物具有坚硬的细胞壁，细胞一般不会裂解，可以正常生长，但低渗溶液中溶质含量低，在某些状况下也会影响微生物的生长。另一方面，不同类型微生物对渗透压改变的适应技能不尽相同，大多数微生物在0.5%~3%NaCl浓度条件下生长受到抑制，但某些极端嗜盐菌可在30%以上NaCl浓度条件下正常生长。

2、生物因素〔抗生素〕

在自然界中普遍存在微生物间的拮抗现象，很多微生物可以产生抗生素，能选择性地抑制或杀死其他微生物。不同抗生素的抗菌谱是不同的。了解某种抗生素的抗菌谱在临床治疗上有重要的意义，利用滤纸条法可初步测定抗生素的抗菌谱。当滤纸条上的抗生素溶液在琼脂平板上想四周扩散后可形成抗生素浓度由高到低的梯度，将不同试验菌与滤纸条垂直划线接种、培育后，依据抑菌带的长短可判断改抗生素对不同试验菌生长的影响的程度，初步确定其抗菌谱。

三、试验器材及实试剂

1、菌种

大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌。

2、试剂

培育基牛肉膏蛋白胨液体培育基，装有牛肉膏蛋白胨的5支试管中中分别含有0.5%、2%、5%、7.5%及10%的NaCl。无菌蒸馏水、氨苄青霉素溶液〔80万单位/ml〕。仪器和其他用品

酒精灯、接种环、镊子、培育皿、无菌吸管、试管、三角瓶、无菌滤纸条。

四、试验方法及步骤

1.培育基和培育液的配置

⑴全班分组共同配制以下五组溶液：

①牛肉膏蛋白胨琼脂培育基＋0.5%NaCl3000mL

②牛肉膏蛋白胨液体培育基＋3.0%NaCl100mL

③牛肉膏蛋白胨液体培育基＋5.0%NaCl100mL

④牛肉膏蛋白胨液体培育基＋7.5%NaCl100mL

⑤牛肉膏蛋白胨液体培育基＋10%NaCl100mL

⑵用移液管把液体培育基匀称各取5mL放入试管中，把加热溶化后的固体培育基分装到12个三角瓶中。

⑶把平板、试管、移液管等用品包装好并放入灭菌锅灭菌30min。

2.抗生素对微生物的影响

⑴倒平板：无菌操作，将牛肉膏琼脂蛋白胨培育基溶化后倒平板，留意平板的厚度匀称。

⑵贴滤纸条：无菌操作，将镊子去滤纸入氨苄青霉素溶液中潮湿，在容器内壁沥去多余溶液，再将滤纸条贴在平板上。

⑶接种:无菌操作，用接种环分别取埃希氏大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌，从滤纸边缘分别垂直向外划线接种，并用首字母做好标记。

⑷培育观测：放入37℃的温箱中培育，观测生长状况并记录。

3.渗透压对微生物生长的影响

⑴取培育液：从各小组取到各浓度培育液做好标记，按浓度梯度顺次排列好摆放在试管架上。

⑵接种：每一个试管中分别取一环枯草杆菌接入溶液中，轻轻摇一下放好就不再动。⑶培育、观测：培育一段时间后观测生长状况并记录。

五、试验结果及分析

结果观测(1):渗透压对试验的影响

2.0%NaCl试管液面有菌膜，中部有沉淀物

5.0%NaCl试管中部有少量沉淀

7.5%NaCl试管底部有少量沉淀，液体少许浑浊

10%NaCl试管液体比较清亮

结果分析：在2.0%NaCl的'培育基中培育，菌体长势良好，说明2.0%NaCl适合枯草杆菌的生长。但随着NaCl的浓度的上升，枯草杆菌的生长也渐渐受到抑制，当浓度上升到10%时，菌体几乎完全不能生长。由于环境渗透压过高，这样就径直作用细胞壁、细胞膜，导致细胞内的渗透压的转变，当渗透压很大时，细胞会严峻的脱水，因失水其代谢功能会下降，甚至丢失而不能存活。

结果观测(2):生物因素〔抗生素〕对微生物生长的影响

结果分析：

埃希氏大肠杆菌〔Escherichiacoli〕、枯草杆菌〔Bacillussubtilis〕金黄色葡萄球菌〔Staphylococcusareus〕分别是革兰氏G-杆菌、革兰氏G+杆菌、革兰氏G+球菌的代表，由观测图可知，革兰氏G+菌的生长受到抑制，由于革兰氏G+的细胞壁含有大量的磷壁酸。所以金黄色葡萄球菌〔Staphylococcusareus〕埃希氏大肠杆菌

〔Escherichiacoli〕产生的菌株普带比枯草杆菌〔Bacillussubtilis〕的短，其中金黄色葡萄球菌〔Staphylococcusareus〕产生的谱带最短。同时这也是区分革兰氏阴性菌和阳性菌的重要指标，革兰氏G+菌对抗生素过敏，当其生长环境中有抗生素存在时，抗生素会破坏其细胞壁，使其细胞壁透性转变，不能正常维持其细胞内正常代谢功能，因此就会影响其生长繁殖。因此，革兰氏阳性菌不能存活或存活微弱。在图中生长良好的是埃希氏大肠杆菌〔Escherichiacoli〕，它是革兰氏G-菌，其细胞壁中不含磷壁酸，因而其生长不受抗生素抑制，所以能在培育基看到起菌落。

影响微生物生长篇二：环境对微生物生长的影响

环境对(转载于:RNA等。例如在氮、碳源缺乏时，机体内蛋白质降解速率比正常条件下的细胞增加了7倍，同时减削t