拳参正丁醇提取物对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚的保护作用

拳参正丁醇提取物对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚的保护作用【摘要】目的观察拳参正丁醇提取物对异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚的保护作用及探索其相关作用机制。方法采用ISO1mg·kg-1·d-1，背部皮下注射，连续10d，建立大鼠心肌肥厚模型。造模第2天开始给大鼠灌胃不同浓度的拳参正丁醇提取物或NS，连续14d，末次给药后禁食12h，称重，麻醉后断头取血，取心脏称重后计算全心重量指数及左心重量参数；采用试剂盒测定心肌组织NOS活性及MDA含量。结果ISO模型组大鼠心脏重量参数及左心室重量指数明显提高，左心室NOS含量降低，MDA含量升高；与模型组相比，拳参正丁醇提取物治疗组左心室重量指数下降，心脏重量指数有下降趋势，心肌组织NOS活性显着升高及MDA含量降低。结论拳参正丁醇提取物对异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚具有保护作用，其作用机制与清除OFR和提高NO水平有关。

【关键词】拳参正丁醇提取物；异丙肾上腺素；心肌肥厚

Abstract：ObjectiveToobservetheprotectiveeffectofPolygonumbistorlaL.n-ButylAlcoholExtract(PBNA)onmyocardialhypertrophycausedbyisopropylarterenol(Iso)inratsandexploreitspossiblemechanism.MethodsThemyocardialhypertrophymodelwasestablishedthroughhypodermicinjectionfor10consecutivedaysatbackskinwithIso,1mg/.Oncethemodelwasformed,theratswereadministratedwithvariousconcentrationsofPBNAorNSinintragastricwayfromtheseconddayfor14days.12hafterthelastadministration,bloodandheartweretakenunderanesthesia,theindexesofwholeheartandleftventriclewerecalculatedandNOSactivityandMDAlevelofmyocardialtissueweredeterminedwithkits.ResultsTherewasobviousdifferencebetweenIsogroupandNsgroup.IndexesofwholeheartandleftventricalinIsogroupweremuchhigherthanthoseincontrolone,NOSactivitywasdecreasedwhileMDAconcentrationwasincreasedinleftventricle.However,bothindexesofwholeheartandleftventricleweredecreasedinBAEBgroup,furthermore,NOSactivitywasstrikinglyenhancedandMDAconcentrationwasreducedinPBNAgroup.ConclusionBAEBhasaprotectiveeffectonmyocardialhypertrophycausedbyIso,anditsmechanismmayberelatedwithclearanceofOFRandNOconcentrationpromotion.

Keywords：PolygonumbistorlaL.n-Butylalcoholextact;Isopropylarterenol;Myocardialhypertrophy

中药拳参具有清热、镇惊、利湿等功效，主要成分为没食子酸、丁二酸、槲皮素、槲皮素-5-O-β-D-葡萄糖苷、原儿茶酸等［1，2］。有实验表明，其正丁醇提取物(PolygonumbistorlaL.n-ButylAlcoholExtract)具有镇痛［3］、中枢抑制［4］、心肌缺血保护等［5］作用。心肌肥厚是以心肌细胞体积增大和蛋白含量增多为主要特征的代偿反应，是对各种心血管刺激因子的适应反应，但持续的心肌肥厚会导致死亡。资料表明，连续用ISO刺激可诱导大鼠心肌肥厚［6］，本实验利用ISO背部皮下注射构造大鼠心肌肥厚模型，研究拳参正丁醇提取物对ISO所致大鼠心肌肥厚的保护作用及其可能机制。

1器材和方法1药品和试剂

拳参正丁醇提取物；盐酸异丙肾上腺素注射针剂，一氧化氮合酶、丙二醛测定试剂盒。2仪器

722N可见光分光光度计；赛多利斯BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)，7600-020+ISE全自动生化分析仪(日本日立)。3动物

SD大鼠，雄性，体重200～250g，购自江西中医学院〔动物合格证号：SCXK2005-0001〕。4方法分组及给药

雄性SD大鼠24只，随机分成4组：①正常对照组；②心肌肥厚模型组；③心肌肥厚模型+1mg/kgPBNA组；④心肌肥厚模型+mg/kgPBNA组。②③④组大鼠背部皮下注射ISO1mg·kg-1·d-1，连续10d，制作心肌肥厚模型，正常对照组给予等体积生理盐水。于造模后第2天开始③④组分别灌胃给以PBNA1，mg/kg，连续14d，NS对照组和ISO模型组大鼠每日灌胃给予相同体积的生理盐水。心脏重量指数和左心室重量参数的测定

末次给药后禁食12h，称重后麻醉断头取血后，取出心脏，去除结缔组织，用生理盐水洗净，吸干后称全心重量，剪除心房和右心室，称左心室重量，计算心脏重量指数和左心室重量参数：心脏重量指数=全心重(mg)/体重(g),左心室重量参数(LHWW/BW)=左心室重(mg)/体重(g)。测定左心室NOS活性及MDA含量

取约500～600mg左心室心肌组织冰浴下配制10%匀浆，3500r/min，离心10min，取上清液按试剂盒说明测定NOS活性及MDA含量。统计学分析实验数据采用Graphpadprism软件进行单因素方差分析，结果以柱状图表示，P＜,认为有统计学意义。

2结果

PBNA对心肌肥厚大鼠心脏重量指数和左心室重量参数的影响

ISO模型组大鼠心脏重量指数及左心室重量参数值较正常对照组明显增加()。1mg/kgPBNA剂量组与心肌肥厚模型组比较心脏重量指数有下降趋势，但无统计学差异。1mg/kgPBNA剂量组与心肌肥厚模型组比较左心室重量参数有下降趋势，且有统计学差异()。提示拳参正丁醇提取物有保护大鼠心肌的作用。

PBNA对心肌肥厚大鼠左心肌组织NOS活性的影响

与正常对照组比较，ISO模型组NOS有一定下降趋势，但无统计学差异；与ISO模型组相比，PBNA低浓度及高浓度组NOS均有显着提高(及)，且呈剂量依赖性。

PBNA对心肌肥厚大鼠心肌组织MDA含量的影响

与正常对照组比较，ISO模型组MDA有明显升高()。与ISO模型组相比，PBNA低浓度及高浓度组MDA下降，且呈剂量依赖性。

3讨论

本实验研究了PBNA对ISO所致大鼠心肌肥厚的保护作用，结果表明PBNA能有效减轻ISO所致大鼠心肌肥厚。异丙肾上腺素为β肾上腺素受体激动药，对β受体有很强的激动作用，可加快心率、加速传导，心肌耗氧量明显增加，环磷酸腺苷(cAMP)生成和糖原合成增加，从而促进心肌细胞总蛋白和非收缩蛋白合成，心肌细胞肥大。另外，循环和心脏局部儿茶酚胺含量增加，可引起脂质代谢异常及引起体内氧自由基生成增加［7］。OFR可进攻生物膜的类脂分子，引起类脂分子中多不饱和脂肪酸(PUFA)的脂质过氧化，从而损伤生物膜，产生大量的脂质自由基。OFR可致线粒体结构破坏和功能障碍，抑制ATP合成体系中的酶，使ATP合成减少，心肌能量缺乏，导致心肌肥厚的发生发展［7,8］。

过多的OFR可使细胞的基本结构-脂质过氧化，MDA为过氧化脂质的降解产物，实验中观察到，在注射ISO的同时给予PBNA，可呈剂量依赖性地降低MDA含量，表明PBNA具有清除OFR的作用，并能夺取过氧化过程中产生的脂质过氧化自由基，生成活性较低的多酚自由基，打断自由基氧化链反应，有效清除体内有害自由基［8，9］，从而对心肌起保护作用。

NO作为体内重要的生理因子，大量研究证实，NO可以通过舒张血管，减少心脏的前后负荷，降低心肌氧耗，直接灭活氧自由基等途径，抑制心肌和血管增殖，抑制心肌肥厚，产生心肌保护作用。NO是NOS催化L-Arg和分子氧反应产生的。本实验证明拳参正丁醇提取物可提高心肌肥厚大鼠心肌组织NOS的活性，并呈剂量依赖性。这可能是PBNA抑制心肌肥厚的机制之一［10，11］。

本实验结果表明，PBNA能抑制ISO连续注射引起的心肌肥厚,具有保护心肌的结构和功能的作用，其作用与清除OFR和提高NO水平有关。

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