乳酸菌检测技术概述

乳酸菌检测乳酸菌检测方法适用范围本方法适用于清谷田园食品系列产品及原料中的乳酸菌的检测。设备和仪器2.1恒温培育箱：36±1℃0.01g无菌吸管：1ml、2ml、10ml500ml90mm2.6无菌试管：18×180mm酒精灯立式蒸汽压力灭菌器超净工作台38.5g1000ml121℃高压灭15min。MRS〔ManRogosaSharpe〕培育基成分 蛋白胨 10.0g牛肉粉5.0g酵母粉4.0g葡萄糖20.0g801.0mLK2HPO4.7H2O2.0g5.0g柠檬酸三铵2.0gMnSO4.7H2O0.2gMnSO4.4H2O0.05g琼脂粉15g制法：将上述成分加于1000mL蒸馏水中，调整PH至6.2±0.2，加热12115-20min。3.33.3〔Li-Mupirocin〕和半胱氨酸盐酸盐改进MRS培育基：50mg50mL0.22mm250mg50mL0.22mm制法5.1.4 〔瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠〕中，1:10步骤1mL1:101mL，沿管壁缓慢9L〔留意吸管尖端不要触及稀释液，振摇11:1001011mL乳酸菌计数乳酸菌总数11样品中所包括乳酸菌菌 培育条件的选择和结果说明属仅包括双歧杆菌属仅包括乳杆菌属仅包括嗜热链球菌

GB4789.345.2.3.4杆菌属总数5.2.3.3热链球菌总数同时包括双歧杆菌属和 依据5.2.3.4操作。结果即为乳乳杆菌属 酸菌属总数如需单独计数双歧杆菌属数目，5.2.3.2同时包括双歧杆菌属和 依据5.2.3.2和5.2.3.3操作，嗜热链球菌 二者之和为乳酸菌总数如需单独计数双歧杆菌属数目，5.2.3.2同时包括乳杆菌属和嗜 依据5.2.3.3和5.2.3.4操作，热链球菌 二者之和为乳酸菌总数2〕依据5.2.3.3操作。结果即为嗜热链球菌总数3〕依据5.2.3.4操作。结果即为乳酸菌属总数同时包括双歧杆菌属、 依据5.2.3.3和5.2.3.4操作，乳杆菌属和嗜热链球菌 二者之和为乳酸菌总数如需单独计数双歧杆菌属数目，5.2.3.22～336℃±1℃厌氧培育48h±2h，培育后计数。从样品稀释到平板倾注要求在15min双歧杆菌计数依据对待检样品双歧杆菌含量的估量，选择2个～3个连续的适宜稀释度，1mL移入平皿后，将冷却至50℃的莫匹罗星锂盐和半胱氨酸盐酸盐的MRS培育基15mL，转动平皿使混合均。36℃±1℃48h±2h，培育15min嗜热链球菌计数2～31mL15mL，转动平皿使混合均匀。36℃±1℃48h±2h，培育后计数。嗜热链球菌在MC板上的菌落特征为：菌落中等偏小，边缘整齐光滑的红色菌落，直径2mm±1mm15min乳杆菌计数5.2.3.1项乳酸菌总数结果减去5.2.3.2项双歧杆菌与5.2.3.3项嗜热链球菌计数结果之和即得乳杆菌计数。菌落计数菌落计数以菌落形成单位〔colony-formingunits，CFU〕表示。30CFU～300CFU300CFU计。每个稀释度的菌落数应承受两个平板的平均数。2，代表一个平板菌落数。落计数。结果的表述假设只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g〔mL〕中菌落总数结果。〔1〕计算：式中：〕菌落数之和；n1——第一稀释度〔低稀释倍数〕平板个数；n2——其次稀释度〔高稀释倍数〕平板个数；d——稀释因子〔第一稀释度。300CFU，则对稀释度最高的平板算。落数乘以稀释倍数计算。假设全部稀释度〔包括液体样品原液〕平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。假设全部稀释度的平板菌落数均不在30CFU～300CFU之间，其中一局部30CFU300CFU30CFU300CFU菌落数乘以稀释倍数计算。菌落数的报告1