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文档简介
2009.利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆,具有广阔的应用前景。但现在野生菌株对淀粉的转化效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株。(1)实验步骤:①配置(固体、半固体、液体)培养基,该培养基的碳源应为
。②将
接入已灭菌的培养基平板上。③立即用适当剂量的紫外线照射,其目的是
。④菌落形成后,加入碘液,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现
现象的菌落即为初选菌落。经分离、纯化后即可达到实验目的。若已得到二株变异菌株Ⅰ和Ⅱ,其淀粉转化率较高。经测定菌株Ⅰ淀粉酶基因的编码区或非编码区,可推测出菌株Ⅰ的突变发生在
区,菌株Ⅱ的突变发生在
区。2010.(12分)某种细菌体内某氨基酸(x)的生物合成途径如图:
这种细菌的野生型能在基本培养基(满足野生型细菌生长的简单培养基)上生长,而由该种细菌野生型得到的两种突变型(甲、乙)都不能在基本培养基上生长;在基本培养基上若添加中间产物2,则甲、乙都能生长;若添加中间产物l,则乙能生长而甲不能生长。在基本培养基上添加少量X,甲能积累中间产物l,而乙不能积累。请回答:(1)根据上述资料可推论:甲中酶____的功能丧失;乙中酶______的功能都正常。由野生型产生甲、乙这两种突变型的原因是野生型的_____(同一、不同)菌体中的不同______发生了突变,从而导致不同酶的功能丧失,如果想在基本培养基上添加少量的X来生产中间产物l,则应选用_____(野生型、甲、乙)。(2)将甲、乙混合接种于基上能长出少量菌落,再将这些菌落单个挑出分别接种在基本培养基上都不能生长。上述混合培养时乙首先行成菌落,其原因是_____.(3)在发酵过程中,菌体中X含量过高时,其后成速率下降。若要保持其合成速率,可采取的措施是改变菌体细胞膜的_______.使X排出菌体外。2011.(10分)同学从温度为55~65度的泉水中筛选出能合成脂肪酶的细菌,并从该细菌中提取了脂肪酶。回答问题:(1)测定脂肪酶活性时,应选择________________作为该酶作用的物质,反应液中应加入____________溶液以维持其酸碱度稳定。(2)要鉴定该酶的化学本质,可将该酶液与双缩脲试剂混合,若反应液呈紫色,则该酶的化学本质为________________。(3)根据该细菌的生活环境,简要写出测定该酶催化作用最适温度的实验思路。2013.[生物——选修1](15分)临床试用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:(1)为了从样本中获取致病菌菌落,可用_____法或_____法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释,用______法接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A,B,C,D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A_______;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B_____;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明___;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________。(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素_______。2014.[生物——选修1:生物技术实践](15分)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是
;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为
。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过
灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是
。(3)示意图A和B中,
表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
(2)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的____的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高
的利用率。2015.【生物—选修1】回答与胡萝卜有关的问题:(1)胡罗卜含有的胡罗卜素中,最主要的是____(填“α—胡罗卜素”或“β—胡罗卜素”或“γ—胡罗卜素”),该胡罗卜素在人体内可以转变成两分子
,后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症,该疾病称为
,胡罗卜素是
(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。(2)工业生产上,用养殖的岩藻作为原料提取胡罗卜素时,
(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂,应选用其中的
作为胡罗卜素的萃取剂,不选用另外一种的理由是
。2016.[生物—选修1]苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的,回答下列为题:
(1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段,在酵母菌细胞的______中进行,其产物乙醇与______试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验;过程③在酵母菌细胞的____中进行,与无氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌的增值速度_____。(2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程,根据醋酸杆菌的呼吸作用类型,该过程需要在____________条件下才能完成。(3)在生产过程中,第一阶段和第二阶段的发酵温度不同,第一阶段的温度______(填“低于”或“高于”)第二阶段。(4)醋酸杆菌属于_______核生物,其细胞结构中________(填“含有”或“不含有”)线粒体。2017.[生物——选修1]豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素,某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀,再将两者置于适宜条件下进行发酵,并在32h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题:(1)该实验的自变量是_______、_________。(2)如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好,说明该发酵菌是___________。(3)如果在实验后,发现32h内的发酵效果越来越好,且随发酵时间呈直线上升关系,则无法确定发酵的最佳时间;若要确定最佳发酵时间,还需要做的事情是_____________________。(4)从大豆到豆豉,大豆中的成分会发生一定的变化,其中,蛋白质转变为________,脂肪转变为_________。难度逐年提升,泡菜的亚硝酸盐的检测与鉴定没有考察过,有可能出现在今年的高考中!!微生物的培养分离鉴定选择果酒果醋泡菜豆腐乳的制作植物有效成分的提取专题1传统发酵技术的应用课题1果酒和果醋的制作课题2腐乳的制作课题3泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定11一、果酒和果醋的制作1.基础知识制作果酒:①原理:
进行
发酵产生酒精。反应式为:
________________________________________。②条件:
、pH为
、温度为
℃。制作果醋:①原理:醋酸杆菌进行有氧发酵产生醋酸。反应式为:
__________________________________________。②条件:
、pH为
、温度为
℃。酵母菌无氧C6H12O6酶2C2H5OH+2CO2+能量无氧酸性18~25酶CH3COOH+H2O+能量C2H5OH+O2有氧酸性30~35
12一、果酒和果醋的制作2.制作方法选材冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵果酒果醋①原料糖化处理:酒曲?②酒精发酵的接种?③酒精发酵:先通气,后密封?④酒精发酵液的检测?13二、腐乳的制作1.基础知识毛霉分泌
将蛋白质水解为多肽和氨基酸,
将脂肪水解为甘油和脂肪酸,并在多种微生物的协同作用下形成独特风味。脂肪酶
豆腐生长毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制蛋白酶
2.制作方法:14三、泡菜的制作和亚硝酸盐含量的检测1.基础知识
进行
呼吸产生
。反应式为:
_______________________________。C6H12O6酶2C3H6O3+能量
亚硝胺适宜温度、pH和一定微生物作用乳酸杆菌无氧乳酸*亚硝酸盐的产生:
土壤→NO3-→NO2-→NH3→氨基酸→蛋白质152.亚硝酸盐含量的检测在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色后的样品与已知浓度的标准显色液进行比色,从而估算泡菜中亚硝酸盐含量。16选择材料修整加工晾晒成型称取食盐配制盐水煮沸冷却加入调味料,装坛密封发酵泡菜成品亚硝酸盐含量的检测3.制作方法17一、无菌技术1.灭菌:培养器皿、接种用具、培养基等。方法:灼烧灭菌法,使用酒精灯;
接种环、试管口等
干热灭菌法,使用干热灭菌箱;
移液管、微量移液器枪头等
高压蒸汽灭菌法,使用高压蒸汽灭菌锅。
培养基、培养皿、无菌水、无菌纸等
紫外线灭菌法,使用紫外灯。
接种箱等18二、培养基的成分、类型及其配制方法1.培养基的成分
水、无机盐、
碳源:CO2、糖类、脂肪酸等含碳有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。
氮源:N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
生长因子:某些微生物正常生长代谢中必须从培养基中吸收的微量有机小分子,如某些氨基酸、碱基、维生素等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。
19二、培养基的成分、类型及其配制方法3.培养基的配制配制平板培养基计算称量溶化调pH灭菌倒平板配制原则①目的要明确②营养要协调③pH要适宜
配制斜面培养基计算称量溶化调pH分装灭菌搁置斜面
20三、微生物的接种技术1.平板划线法:
连续划线、平行划线等2.稀释涂布平板法:
梯度稀释法3.稀释混合平板法:
梯度稀释→0.1mL与40~50℃培养基混合→搁置平板→培养4.穿刺接种法:5.斜面接种法:21四、微生物的计数方法1.显微镜计数法显微镜直接计数法(血球计数板)显微镜相对计数法2.菌落计数法/稀释涂布平板法细菌30~300个;真菌10~100个3.重量法
10mL菌液→反复离心洗涤→鲜重或干重22五、微生物的培养1.纯化培养
平板划线法或稀释涂布平板法接种
微生物纯净培养物挑取单菌落232.选择性培养(选择培养基)
无氮培养基、纤维素培养基、尿素培养基、抗生素培养基、高渗培养基等选择性培养条件高温培养等243.鉴别性培养
尹红美蓝大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电被染成红色,再与美蓝结合形成紫黑色菌落,并带有绿色金属光泽酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。刚果红刚果红染色法特指纤维素的染色法,刚果红能把纤维素染成红色复合物,对纤维二糖和葡萄糖无作用,可用此来鉴别纤维素或纤维素分解菌的分解作用25五、从生物材料中提取某些特定成分方法与原理:蒸馏法:
的化合物。如:玫瑰精油(蒸馏装置)压榨法:
的化合物。如:橘皮精油、豆油(榨油机)萃取法:易溶于与某种有机溶剂且沸点与溶剂沸点差别较大的化合物。如:胡萝卜素(冷凝回流装置、蒸馏装置)沸点较低、挥发性强沸点较高、挥发性弱26植物芳香油的提取基础梳理1.植物芳香油的来源天然香料的主要来源是__________和__________。动物香料主要来源于麝、灵猫、海狸和抹香鲸等,植物香料的来源更为广泛。植物芳香油可以从大约50多个科的植物中提取。例如,工业生产中,玫瑰花用于提取__________,樟树树干用于提取__________。提取出的植物芳香油具有很强的__________,其组成也比较复杂,主要包括__________及其衍生物。萜类化合物动物植物玫瑰油樟油挥发性2.植物芳香油的提取方法植物芳香油的提取方法有_______、__________和__________等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。_______________是植物芳香油提取的常用方法,它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来,形成油水混合物,冷却后,混合物又会重新分出油层和水层。根据蒸馏过程中原料放置的位置,可以将水蒸气蒸馏法划分为__________、__________和__________。其中,水中蒸馏的方法对于有些原料不适用,如柑橘和柠檬。这是因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题。因此,柑橘、柠檬芳香油的制备通常使用压榨法。蒸馏压榨萃取水蒸气蒸馏法水中蒸馏水上蒸馏水气蒸馏植物芳香油不仅__________强,而且易溶于__________,如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不适于用水蒸气蒸馏的原料,可以考虑使用__________法。萃取法是将粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡,使芳香油溶解在有机溶剂中的方法。芳香油溶解于有机溶剂后,只需蒸发出有机溶剂,就可以获得纯净的植物芳香油了。但是,用于萃取的有机溶剂必须事先精制,除去杂质,否则会影响芳香油的质量。萃取挥发性有机溶剂3.玫瑰精油的提取玫瑰精油是制作__________的主要成分,能使人产生愉悦感。由于玫瑰精油的化学性质__________,难溶于__________,易溶于__________,能随__________一同蒸馏,故通常采用__________法中的水中蒸馏法来提取玫瑰精油,其实验流程为__________、__________、__________、__________、__________、__________。过滤高级香水稳定水有机溶剂水蒸气水蒸气蒸馏鲜玫瑰花与水混合水蒸气蒸馏加入NaCl分离油层加入无水Na2SO44.橘皮精油的提取从橘皮中提取的__________,其主要成分为__________,具有很高的经济价值。橘皮精油主要贮藏在__________部分,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解,使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题,所以一般采用__________法。具体的操作流程是__________、__________、__________、__________、__________、__________。
再次过滤橘皮油柠檬烯橘皮压榨法石灰水浸泡漂洗压榨过滤静置胡萝卜素的提取基础梳理1.胡萝卜素是__________结晶,化学性质比较__________,不溶于水,微溶于__________,易溶于__________等有机溶剂。胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键,根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类。__________是其中最主要的组成成分。与β胡萝卜素化学结构类似的胡萝卜素大约有100多种,它们大多存在于蔬菜中。__________等蔬菜是提取天然β胡萝卜素的
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