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文档简介

病原性球菌菌名染色形态与结构培养特性生化反应抗原结构致病性其他葡萄球菌G+c无鞭毛无芽孢普通琼脂平板:圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落。可产生不同的脂溶性色素;血琼脂平板:几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素;液体培养基:生长迅速,呈均匀混浊状。糖类发酵:多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖,产酸不产气;H2O2(+);多数致病性葡萄球菌能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。①蛋白抗原:SPA蛋白(存在于葡萄球菌表面,结合在细胞壁的黏肽部分,具有抗吞噬作用),有种属特异性。②多糖抗原:有型特异性。侵袭性疾病:①皮肤及软组织感染(毛囊炎、疖、痈);②全身性感染(败血症、心内膜炎);③呼吸道感染;④医院内感染毒素性疾病:①食物中毒;②烫伤样皮肤综合征;③中毒性休克综合征;④葡萄球菌性肠炎。新生霉素实验:S:表皮葡萄球菌(医院感染的重要病原菌;导致血培养污染的常见细菌)。R:腐生葡萄球菌(导致尿路感染的常见病原菌)。链球菌属G+c无鞭毛无芽孢在含有腹水的培养基上生长良好;血平板:灰白色、圆形凸起的细小菌落,菌落周围出现不同溶血环;液体培养基:溶血性菌株呈絮状或颗粒状沉淀生长,不溶血菌株呈均匀混浊生长。糖类发酵:分解葡萄糖产酸不产气;H2O2(-);A群链球菌:杆菌肽(+);B群链球菌:CAMP实验(+),水解马尿酸钠;D群链球菌:七叶苷实验(+);α-溶血性链球菌:对奥普托欣耐药,不分解菊糖。A群链球菌:急性化脓性感染;猩红热;风湿热和肾小球肾炎。B群链球菌:新生儿肺炎、脑膜炎、败血症的病原体。D群链球菌:呼吸道和泌尿道感染α-溶血性链球菌:亚急性心内膜炎。A群链球菌对青霉素G高度敏感。猪链球菌在羊血平板上为α-溶血,在兔血平板上呈β-溶血。肺炎链球菌G+c无鞭毛无芽孢有荚膜在含3%~5%兔血清肉浸液中生长良好;血平板:灰色扁平,中心凹陷的的菌落,周围有草绿色溶血环;液体培养基:均匀混浊生长,加入血清、腹水、葡萄糖,可促使其生长。糖类发酵:多数菌株分解菊糖;胆汁溶解实验(+);奥普托欣敏感试验(+);荚膜肿胀实验(+);动物试验:小白鼠对肺炎链球菌极为敏感;快速乳胶凝集试验(+)。所致疾病:大叶性肺炎,支气管炎。可继发胸膜炎、脓胸,也可引起中耳炎、副鼻窦炎、脑膜炎及败血症。肠球菌属G+c无芽孢无荚膜部分肠球菌有稀疏鞭毛在高盐(6.5%NaCl)、高碱(pH9.6)、40%胆汁培养基上和10~45℃环境下生长;在胆汁七叶苷和含6.5%NaCl培养基中可以生长(与链球菌鉴别);血平板:主要表现为α溶血和γ溶血H2O2(-);水解吡咯烷酮-β萘基酰胺(PYR)。致病基因:细胞溶解素激活基因、明胶酶基因、表面蛋白基因、胶原蛋白黏附素基因、聚集物质基因、粪肠球菌心内膜炎基因。常引起尿路感染(最常见)。肠球菌是G+菌中仅次于葡萄球菌属的重要医院感染病原菌。菌名革兰染色形态与结构培养特性生化反应抗原结构致病性其他脑膜炎奈瑟菌G-双球菌无鞭毛无芽孢有菌毛必须在含有血清或含有多种氨基酸,无机盐等物质的培养基上生长良好。糖类发酵:分解葡萄糖、麦芽糖(淋病奈瑟菌不分解麦芽糖),产酸不产气;不分解乳糖、甘露醇、半乳糖和果糖;H2O2(+);OX(+);NIT(-);H2S(-);吲哚(-);尿素(-)。①荚膜多糖群特异性抗原、②外膜蛋白型特异性抗原、③脂多糖抗原、④核蛋白抗原。治疗原则:青霉素G为首选,三代头孢也具有很强的抗菌活性。青霉素过敏者可考虑选用三代头孢或氯霉素。淋病奈瑟菌G-双球菌有菌毛有荚膜无鞭毛无芽孢必须在含有血清或含有多种氨基酸,无机盐等物质的培养基上生长良好。需置5%~10%CO2条件下才能生长发育。培养基表面可见光滑、凸起、半透明、高亮度的圆形菌落。糖类发酵:发酵葡萄糖、产酸,但不酵解麦芽糖、蔗糖和乳糖;H2O2(+);OX(+)。①菌毛蛋白抗原、②脂多糖抗原、③外膜蛋白抗原。淋病的病原菌。浓汁标本中,常位于中性粒细胞内,而在慢性淋病时常位于细胞外。细菌培养仍是目前世界卫生组织推荐的筛选淋病患者的唯一方法。治疗原则:一线药物一般为三代头孢菌素,氟喹诺酮类、大观霉素可作为替代药物。卡他莫拉菌G-双球菌无鞭毛无芽孢在普通培养基上18~20℃即可生长(可与脑膜炎奈瑟菌鉴别)H2O2(+);OX(+);DNA酶(+);NIT(+)(可与脑膜炎奈瑟菌鉴别)。是社区呼吸道感染的主要病原体之一。肠杆菌科菌名革兰染色形态与结构培养特性生化反应抗原结构致病性其他埃希菌属G-b有周鞭毛有菌毛有荚膜普通琼脂:圆形、凸起边缘整齐、灰白色的光滑性菌落;血平板:少数菌株产生溶血环;伊红美兰平板:蓝紫色菌落并有金属光泽;麦康凯和SS琼脂:粉红色菌落;液体培养基:混浊生长。糖类发酵:发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇,产酸产气;MViC:++--KIA:AA+-MIU:++-苯丙(-);NIT(+)。菌体抗原(O)、表面抗原(K)、鞭毛抗原(H)。致病因素:侵袭力、内毒素、肠毒素(引起各种炎症)。内毒素还可引起发热、休克、DIC。1.肠道感染:①肠产毒性大肠埃希菌(ETEC):霍乱样肠毒素腹泻(水泻)。②肠致病性大肠埃希菌(EPEC):引起婴儿腹泻。③肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC):侵入结肠粘膜上皮,引起志贺样腹泻(黏液脓血便)。④肠出血性大肠埃希菌(EHEC)又称产志贺样毒素大肠埃希菌;O157:H7。⑤肠黏附性大肠埃希菌(EAggEC)肠道外感染:常见于泌尿系感染。CDC将大肠埃希菌O157:H7列为常规检测项目。6、7、8三个月O157:H7感染的发生率最高。O157是4岁以下儿童急性肾衰竭的主要病原菌。对产ESBLs产酶株所致感染需要采用碳青酶烯类β-内酰胺类抗生素/酶抑制剂或头孢菌素类进行治疗。志贺菌属G-b无鞭毛无芽孢无荚膜有菌毛普通琼脂平板和SS琼脂中等大小、半透明的光滑型菌落(宋内志贺菌可形成扁平粗糙的菌落);液体培养基:浑浊生长。糖类发酵:分解葡萄糖产酸不产气,不分解乳糖(宋内志贺菌可迟缓分解乳糖);OX(-);IMViC:-+--KIA:KA--MIU:---H2S(-);苯丙(-);赖氨酸(-);柠檬酸盐(-)NIT(+)。只有菌体抗原(O)(分群特异性和型特异性)。K抗原存在时能阻断O抗原与相应抗血清的凝集作用,加热100℃,60min可消除K抗原对O抗原的阻断作用。致病因素:侵袭力、内毒素、外毒素与大肠埃希菌鉴别:①无动力,不发酵乳糖,靛基质(-),赖氨酸(-)。②发酵糖,产酸不产气③分解黏液酸,在醋酸盐和枸橼酸盐琼脂上产碱。与类志贺邻单胞菌和伤寒沙门菌鉴别:动力和氧化酶:志贺菌(-);类志贺邻单胞菌(+)。伤寒沙门菌:动力(+)H2S(+)菌名革兰染色形态与结构培养特性生化反应抗原结构致病性其他沙门菌属G-b有周身鞭毛(除鸡沙门菌)有菌毛无芽孢无荚膜SS琼脂和麦康凯琼脂:透明或半透明菌落,对胆盐耐受。产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心;液体培养基:均匀混浊生长。糖类发酵:均不发酵乳糖(亚利桑那菌除外)发酵葡萄糖产酸产气(伤寒沙门菌产酸不产气);IMViC:-+-+KIA:KA+/-+/-MIU:+-+苯丙(-);NIT(+)O抗原H抗原:是定型的依据。Vi抗原:加热60℃,30min或经碳酸处理被破坏,Vi抗原存在时可阻止O抗原与相应抗体发生凝集。致病因素:侵袭力、内毒素、肠毒素。可引起胃肠炎、肠热症、菌血症或败血症等。变异性:①S~R变异:菌落光滑型经人工培养传代后逐渐变成粗糙型。②H~O变异:有鞭毛的沙门菌失去鞭毛的变异。③相位变异:具有双相H抗原的沙门菌变成只有其中某一项H抗原的单项菌。④V~W变异:失去全部Vi抗原的变异。变形杆菌属G-b有周身鞭毛(摩根菌属的部分菌株在30℃以上不形成鞭毛)无芽孢无荚膜营养琼脂和血琼脂平板:迁徙扩散生长(普通变形和奇异变形),可被0.1%苯酚、4%硼酸、5%~6%琼脂及同型血清或胆盐所抑制。普罗威登斯菌和摩根菌属无迁徙生长现象。含有胆盐的培养基:扁平、圆形、半透明菌落。含有铁离子或铅离子的培养基:产H2S菌株的菌落中心呈黑色。液体培养基:生长迅速,早期培养物呈混浊,可有部分沉淀。迁徙生长;H2S(+);明胶液化(+);酯酶(玉米油)(+)共同特点:OX(-);苯丙(+)普通变形和奇异变形引起尿道、创伤、烧伤的感染,奇异变形还可引起婴幼儿肠炎;外斐反应:OX19、OX2、OXk。普罗威登斯菌属H2S(-);明胶液化(-);酯酶(玉米油)(-)鸟氨酸(-)枸橼酸盐(+)摩根菌属H2S(-);明胶液化(-);酯酶(玉米油)(-)鸟氨酸(+)枸橼酸盐(-)为医源性感染的重要病原菌之一。菌名革兰染色形态与结构培养特性生化反应抗原结构致病性其他鼠疫耶尔森菌G-b无鞭毛无芽孢有荚膜培养初期的菌落特征:显微镜观察可见一层形状不一,浅灰色小菌落。液体培养基:形成絮状沉淀(“钟乳石”状)和菌膜。每毫升中加入0.25ml亚硫酸钠或0.1%~1.0%脱纤维血液的培养基对鼠疫耶尔森菌生长有刺激作用(可能与降低培养基氧化还原点位有关)。KIA:;利用葡萄糖,不利用乳糖;H2S(-);MIU:---;丙氨酸脱氨酶(-)烈性传染病鼠疫的病原菌小肠结肠炎耶尔森菌G-cb25℃周鞭毛37℃无动力无芽孢无荚膜25℃培养时形成周鞭毛,呈翻滚旋转状运动。血平板:圆形光滑,凸起的菌落。麦康凯平板:形成不发酵乳糖的无色、透明或半透明、扁平、较小的菌落。液体培养基:浑浊生长,表面形成白色菌膜或有沉淀生成。糖类发酵:分解葡萄糖和蔗糖,产酸不产气,不发酵乳糖;脲酶(+);鸟氨酸(+);H2S(-);VP试验:25℃(+),37℃(-)本菌为人畜共患菌。假结核耶尔森菌G-b25℃周鞭毛37℃无动力普通琼脂:圆形,中心凸起,呈颗粒状,灰黄色,半透明菌落。液体培养基:光滑型菌株:均匀浑浊生长;粗糙型菌株:沉淀生长。哈夫尼亚菌属G-b无荚膜无芽孢有周鞭毛糖类发酵:发酵葡萄糖产酸产气;可利用枸橼酸盐、乙酸盐和丙二酸盐作为唯一碳源;H2S(-);山梨醇(-);DNA酶(-);赖氨酸(+);关键生化反应:葡萄糖酸盐(+)。爱德华菌属G-bIMViC:++--H2S(+);甘露醇(-)。菌名形态与染色培养特性生化反应抗原结构致病性其他枸橼酸杆菌属G-直杆状无荚膜无芽孢有周鞭毛血平板:灰色或白色,隆起,边缘整齐,不溶血。肠道选择培养基:发酵乳糖;液体培养基:浑浊生长。弗劳地枸橼酸杆菌:靛基质(-)H2S(+);异型枸橼酸杆菌:丙二酸盐(+)β-半乳糖苷酶、赖氨酸、枸橼酸盐:+-+克雷伯菌属G-b无鞭毛无芽孢有荚膜血平板:圆形,凸起,灰白色,不溶血的菌落。有时菌落呈黏液性,用接种环挑取时呈长丝状。肠道选择培养基:乳糖产酸菌落。液体培养基:浑浊生长,可形成菌膜与黏性沉淀物。糖类发酵:发酵乳糖;H2O2(+);脲酶(+);OX(-);鸟氨酸(-);动力(-)。本菌对氨苄西林天然耐药。对产ESBLs菌株的治疗可用碳青酶烯类、β-内酰胺类抗生素/酶抑制剂或头孢菌素类进行治疗。易产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),应利用CLSI/NCCLS推荐的标准确证实验对超广谱β-内酰胺酶进行检测。肠杆菌属G-短而粗的杆菌部分有荚膜有周鞭毛无芽孢普通琼脂:大而湿润的黏液状菌落。肠道选择培养基:乳糖发酵菌落(聚糖肠杆菌除外)。液体培养基:均匀浑浊生长,表面有薄膜,管底有黏稠性沉淀物。糖类发酵:发酵乳糖;OX(-);DNA酶(-);IMViC:--++鸟氨酸(+)(聚糖肠杆菌除外);枸橼酸盐(+);脲酶、鸟氨酸、赖氨酸、山梨醇发酵试验:阴沟肠杆菌:-+-+;坂崎肠杆菌:-+--;聚糖肠杆菌:---+/-;产气昌杆菌:-+++;日勾维肠杆菌:+++-沙雷菌属G-b有周鞭毛部分有荚膜无芽孢普城沙雷菌和深红沙雷菌可耐5%~10%NaCl。普通培养基:白色、红色或粉红色菌落。各种沙雷菌可产生两种色素:灵菌红素(非水溶性)和吡羧酸(水溶性)。糖类发酵:能发酵多种糖;能利用枸橼酸盐、丙氨酸等作为唯一碳源;胞外酶可水解DNA、脂酸、明胶和邻位硝基苯-β-半乳糖苷。关键反应:DNA酶(+);葡萄糖酸盐(+)。菌名形态与染色培养特性生化反应抗原结构致病性其他霍乱弧菌G-弧菌无芽孢有极端鞭毛有菌毛(普通菌毛和性菌毛)取患者米泔水样悬滴镜检可见该菌呈穿梭状样或流星状运动。液体培养物滴片染色镜检,可见排列如“鱼群”状G-弧菌。常选用pH8.5的碱性蛋白胨水增菌培养,以抑制其他细菌生长,有利于本菌的繁殖。碱性琼脂平板:较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。硫代硫酸盐-枸橼酸盐-蔗糖琼脂平板(TCBS)上,形成较大黄色菌落。亚碲酸钾琼脂平板:菌落中心呈灰褐色或庆大霉素琼脂平板上呈灰褐色(还原亚碲酸钾呈金属碲)。糖类发酵:分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖,产酸不产气。迟缓发酵乳糖,不分解阿拉伯糖。OX:(+);明胶酶(+);ONPG(+);靛基质(+);动力(+);霍乱红反应(亚硝基靛基质试验)(+)极端鞭毛、甘露醇、脂酶、生长需要NaCL、对O129敏感五项为+++++。特异性O抗原(耐热):分群和分型的基础。非特异性H抗原(不耐热)。O1群霍乱弧菌的菌体抗原由A、B、C3个抗原组成,根据其不同组合又分为AB的小川型、AC的稻叶型、ABC的彦岛型。O1群霍乱弧菌有古典生物型和E1Tor生物型两种。副溶血性弧菌G-弧菌两极浓染无芽孢无荚膜单鞭毛普通培养基中加入适量NaCL(35g/L)即可生长。无盐培养基或100g/LNaCL培养基不生长。30g/LNaCL琼脂平板:蔓延生长,菌落边缘不整齐,凸起、光滑湿润,不透明。副溶血性弧菌专用培养基:稍隆起、浑浊、无黏性、绿色菌落。SS平板:不生长或长出1~3mm圆形、隆起、湿润、灰白色菌落,某些菌株可形成α溶血或β溶血。TCBS琼脂:不发酵蔗糖,绿色菌落。糖类发酵:分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、淀粉,产酸不产气,不分解乳糖、蔗糖,但分解阿拉伯糖。神奈川试验(+)。靛基质(+);甲基红(+);VP试验(-);H2S(-);尿素酶(-);KIA:。O抗原:定群H抗原:K抗原O抗原、K抗原组合定型。致病因子:黏附因子、毒素。副溶血性弧菌是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。气单胞菌属G-b无芽孢窄荚膜单鞭毛普通培养基:微白色半透明菌落。血平板:灰白、光滑、湿润、凸起的菌落,多数有β溶血环,3~5天后菌落呈暗绿色。肠道选择培养基:形成乳糖不发酵菌落。液体培养基:均匀浑浊生长。糖类发酵:发酵葡萄糖产酸。KIA:;MIU:++-;OX(+);H2O2(+);极端鞭毛、甘露醇、脂酶、生长需要NaCL、对O129敏感五项为-++--。弧菌科弯曲菌属和幽门螺旋杆菌菌名形态与染色培养特性生化反应抗原结构致病性其他弯曲菌属G-弯曲杆菌逗点状,S形或螺旋状一端单鞭毛(胎儿亚种),两端单鞭毛(空肠弯曲菌)空肠弯曲菌、大肠弯曲菌在43℃生长,25℃不生长;胎儿弯曲菌在25℃生长,43℃不生长;简明弯曲菌在25℃和43℃均不生长。初次分离时需在5%O2、10%CO2和85%N2气体环境中生长,传代培养时能在10%CO2环境中生长。需加入血液、血清才能生长,培养基大多含有抗生素(主要为头孢哌酮)。不分解糖类。OX(+);H2O2(+);硝酸盐(+);明胶液化试验(-);尿素(-);VP试验(-);甲基红(-);空肠弯曲菌马尿酸水解试验(+)。O抗原:可将空肠弯曲菌分为42个血清型。H抗原热不稳定抗原空肠弯曲菌是人类腹泻最常见的弯曲菌之一;空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一。胎儿弯曲菌胎儿亚种在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎。常用的选择培养基:Skirrow、Butzler和Campy-BAP培养基。治疗原则:空肠弯曲菌对红霉素、克林霉素和四环素敏感,多数空肠弯曲菌对氨基糖苷类、氯霉素及氟喹诺酮类敏感。对β-内酰胺类耐药。幽门螺旋杆菌G-一端或两端可有多根带鞘鞭毛在潮湿(相对湿度98%以上)5%O2、10%CO2和85%N2的环境中生长良好。初次分离需要3~4天,少数需7天;再次分离需2~3天。对酸比较敏感,pH降至3.5以下活力明显减弱。OX(+);H2O2(+);DNA酶(+);快速脲酶试验(+++)。毒力因子:细胞毒素相关基因(cagA)、空泡毒素基因(VacA)、脲酶基因。VacA基因与胃癌发生密切相关。Hp存在于胃粘膜上皮表面和黏液底层,胃窦为Hp定植的最佳部位,胃体和胃底较少。菌名形态与染色培养特性生化反应抗原结构致病性其他破伤风杆菌G+有芽孢细长杆菌有周鞭毛无荚膜早期培养物为G+,培养48小时后,易转变为G-。血平板:扁平、灰白色、半透明、边缘不齐的菌落。糖类发酵:一般不发酵糖类。明胶液化试验(+);吲哚(+);H2S(+);硝酸盐还原(-);对蛋白质有微弱的消化作用。菌体(O)抗原鞭毛(H)抗原:有型特异性,可分为10个血清型。致病因素:外毒素。本菌产生的毒素对中枢神经系统有特殊的亲和力。芽孢体有非常强的抵抗力。产气荚膜梭菌G+有芽孢粗大杆菌有荚膜(机体内可形成)血平板:双层溶血环。疱肉培养基:分解肉渣中的糖类而产生大量气体。牛乳培养基:分解乳糖产酸,使酪蛋白凝固,同时产生大量气体,出现“汹涌发酵”现象。糖类发酵:可分解多种糖类,产酸产气。明胶液化试验(+);根据产生的毒素,可将产气荚膜梭菌分成5个型(A、B、C、D、E),对人类致病的主要为A型。致病因素:外毒素(α毒素)、侵袭酶。致病表现:局部组织剧烈胀痛,局部严重水肿,水气夹杂,触摸有捻发感,并产生恶臭。体内不形成芽孢,在体外也很少形成,只有在无糖培养基上方可形成芽孢。直接涂片镜检:极有价值的快速诊断方法。肉毒梭菌G+有芽孢短粗杆菌菌体呈汤匙状或网球拍状根据所产生毒素的抗原性不同,可将肉毒梭菌分成8个型,引起人类疾病的以A、B型最为常见肉毒梭菌对人类的致死量为0.1~1.0μg。肉毒梭菌对酸的抵抗力比较强,可在胃液24h不被破坏。但不耐热,煮沸1分钟即可被破坏。艰难梭菌G+有芽孢粗长杆菌有鞭毛CCFA平板:黄色、粗糙型菌落酯酶(-);卵磷脂酶(-)。本菌可产生A、B两种毒素。毒素A为肠毒素,毒素B为细胞毒素。本菌感染与大量使用抗生素有关,以克林霉素尤为常见。无芽孢厌氧菌分离培养是鉴定无芽孢厌氧菌感染的关键步骤。最常用的培养基是以牛心脑浸液为基础的血平板。无芽孢厌氧菌引起的感染均为内源性感染所致疾病:1.败血症:主要由脆弱类杆菌引起4.呼吸道感染:主要由普雷沃菌属、坏死梭菌属、核梭菌属、消化链球菌和脆弱类杆菌引起2.中枢神经系统感染:主要由G-厌氧杆菌引起5.腹部和会阴部感染:主要由脆弱类杆菌引起3.口腔与牙齿感染:主要由消化链球菌、产黑素类杆菌等引起6.女性生殖道感染:主要由消化链球菌属、普雷沃菌属和卟啉单胞菌常见厌氧菌常见需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌菌名形态与染色培养特性生化反应抗原结构致病性其他白喉棒状杆菌G+b无荚膜无芽孢无鞭毛无菌毛有异染颗粒吕氏(Loeffler)血清斜面培养基:灰白色、湿润、S型菌落,异染颗粒明显。亚碲酸钾血琼脂:黑色菌落糖类发酵:分解葡萄糖、麦芽糖、果糖、半乳糖、产酸不产气。不分解乳糖,极少分解蔗糖。硝酸盐还原(+);明胶液化试验(-);吲哚(-);尿素(-)。致病因素:白喉外毒素、K抗原、索状因子。白喉早期死亡的主要原因:气管、支气管假膜形成。白喉晚期死亡的主要原因:心肌炎、软腭麻痹。Neisser(奈瑟)染色:菌体呈黄褐色,颗粒呈紫黑色;Albert(阿培特)染色:菌体呈蓝绿色,颗粒呈蓝黑色。毒力试验:可作为鉴定致病菌株的重要依据。炭疽芽孢杆菌G+b无鞭毛有荚膜有芽孢普通琼脂平板:灰白色、不透明、无光泽、边缘不整齐、大而扁平的粗糙型菌落,镜下呈卷发状。血平板:轻微溶血。液体培养基:管底有絮状卷成团的沉淀物生长,表面稍浑浊但不形成菌膜,中层清亮。碳酸氢钠琼脂平板:有毒株置于5%CO2环境中培养可产生荚膜,形成黏稠、有光泽的M型菌落。糖类发酵:分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气。能水解淀粉,不分解乳糖。H2O2(+);迟缓液化明胶,形如倒松树状;靛基质(-);H2S(-)。①菌体多糖抗原②荚膜多肽抗原③芽孢抗原④炭疽毒素抗原致病菌中最大的革兰阳性杆菌。鉴定试验:①串珠试验:鉴别意义较大。②噬菌体裂解试验③重碳酸盐毒力试验④青霉素抑制试验⑤植物凝集素试验产单核李斯特菌幼龄菌呈G+,陈旧培养物多转为G-。有鞭毛无芽孢无荚膜血平板:形成小而透明的S型菌落,周围有狭窄的β溶血环。半固体培养基:倒伞型生长。20℃有动力,25℃动力最强,37℃动力缓慢。糖类发酵:可发酵葡萄糖、果糖、麦芽糖等,产酸不产气。不发酵木糖和甘露醇。H2O2(+);CAMP试验(+);七叶苷水解试验(+);水解精氨酸产氨;吲哚(-);尿素(-)。菌体(O)抗原鞭毛(H)抗原致病物质:溶血素、菌体表面成分通过胎盘或产道感染新生儿是本病的重要特点。丹毒丝菌属G+b无荚膜无芽孢无鞭毛血平板:光滑型菌落细小、圆形、突起有光泽;粗糙型菌落大,表面呈颗粒状。糖类发酵:发酵葡萄糖、乳糖,产酸不产气。H2O2(-)。分枝杆菌属菌名形态与染色培养特性生化反应抗原结构致病性其他结核分枝杆菌G+b无芽孢无鞭毛有荚膜专性需氧,在无氧条件下迅速死亡。在5%~10%CO2环境中可刺激其生长(烛缸不适合本菌,需用CO2培养箱)。最快的分裂速度为18h一代。必须在血清、卵黄、马铃薯、甘油、以及某些无机盐类的特殊培养基上才能生长。固体培养基:2~6W才能长出,干燥颗粒状,不透明,乳白色或米黄色,表面呈皱纹状,形似菜花。液体培养基:多为表面生长,形成菌膜,且干燥易碎而沉于管底。(若在液体培养基中加入乳化剂聚山梨酯-80,则呈均匀分散生长),有毒力菌株在液体培养基中可呈索状生长。糖类发酵:不发酵糖类。H2O2(+);脲酶(+);中性红试验(+);耐热H2O2试验(-);聚山梨酯-80水解试验(-);耐热磷酸酶试验(-);烟酸试验(+);烟酰胺酶试验(+);硝酸盐还原试验(+)。致病物质:荚膜、脂质、蛋白质金胺O染色,在荧光显微镜下菌体可发生荧光。结核菌素试验:利用IV型变态反应的原理,检测机体是否感染过结核杆菌。一线药物:利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素耐药性:对利福平耐药是由于rpoB的基因突变;链霉素耐药是和编码核糖体S12蛋白的rpsl基因发生突变以及编码16SrRNA的rrs基因发生突变;异烟肼耐药:与过氧化氢酶和过氧化物酶的失活有关。麻风分枝杆菌G+b无芽孢无鞭毛有荚膜人畜共患病典型的胞内寄生菌不发酵菌菌名形态与染色培养特性生化反应抗原结构致病性其他铜绿假单胞菌G-b无芽孢无荚膜1~3根鞭毛普通琼脂平板:圆形大小不一,边缘不整齐、扁平、隆起、光滑、湿润的菌落。血平板:扁平、湿润、有特殊气味的灰绿色或蓝绿色菌落,菌落周围有透明溶血环。麦康凯培养基:微小无光泽半透明菌落,48h菌落中心呈棕绿色。液体培养基:液面可形成菌膜,细菌在深层发育不良,呈微浑浊或透明状,菌落上层为蓝绿色。糖类发酵:分解葡萄糖、木糖,产酸不产气。OX(+);CIT(+);尿素(+);明胶液化试验(+);硝酸盐还原试验(+);吲哚(-);H2S(-)。毒力因子:黏附素、多糖荚膜、外毒素、绿脓素、弹性蛋白酶、磷脂酶C。引起局部感染常见于烧伤或创伤后,亦可引起中耳炎、角膜炎、尿道炎和下呼吸道感染,甚至引起心内膜炎、肺炎,严重者可引起败血症。菌株对亚胺培南耐药主要原因之一是产生金属酶。治疗原则:最大剂量应用青霉素,头孢他啶和氨基糖苷类抗生素联合治疗。产生的主要色素:①绿脓素(75.5%);②荧光素(89.9%)。军团菌属G-b无芽孢无荚膜有端生或侧生鞭毛在含有2.5%~5%CO2环境中生长良好。初次分离需L-半胱氨酸,培养基中含有铁盐可促进生长。BCYE(活性炭-酵母浸出液琼脂)培养基:圆形凸起,灰白色有光泽的菌落。糖类发酵:不分解糖类,多数菌株产β-内酰胺酶。H2O2(+);OX(+);菌体(O)抗原:具有特异性鞭毛(H)抗原菌名形态与染色培养特性生化反应抗原结构致病性其他嗜麦芽窄食单胞菌G-b无芽孢无荚膜1~8根鞭毛糖类发酵:分解麦芽糖,缓慢氧化葡萄糖。七叶苷水解试验(+);DNA酶(+);明胶液化试验(+);OX(-)。治疗原则:首选磺胺类(TMP/SMZ);喹诺酮类(环丙沙星或替卡西林/格拉维酸)。产碱杆菌属G-b无芽孢无荚膜液体培养基:浑浊生长,表面可形成菌膜,管底形成黏液沉淀,在含有蛋白胨的肉汤中产氨。糖类发酵:不分解糖类。O/F试验:碱性反应;H2O2(+);OX(+);尿素(-);吲哚(-);H2S(-);明胶液化试验(-)。黄杆菌属G-b无芽孢无鞭毛有荚膜血平板:淡黄色,黄色或棕黄色菌落。H2O2(+);OX(+);磷酸酶(+)。不动杆菌属G-b无芽孢无鞭毛“三阴”:OX(-);硝酸盐还原试验(-);动力(-)。其他革兰阴性杆菌菌名形态与染色培养特性生化反应抗原结构致病性其他流感嗜血杆菌G-b无芽孢无鞭毛在普通培养基中需加入X和V因子才能生长。血液中的V因子通常处于抑制状态,经80~90℃加热10分钟破坏红细胞膜上的不耐热抑制物,可使V因子释放。加热血平板:圆形、光滑、湿润、边缘整齐,呈露滴状的小菌落。液体培养基:有荚膜的菌株均匀浑浊生长,无荚膜的R型菌株呈颗粒状沉淀生长。糖类发酵:分解葡萄糖,产酸,不分解乳糖或甘露醇。硝酸盐还原试验(+);吲哚(+)(有荚膜菌株);自溶酶(+);胆汁溶解试验(+)。致病物质:内毒素、荚膜、菌毛和酶类。主要通过呼吸道感染。原发性感染多由b型荚膜强菌株引起,为急性化脓性感染。继发感染多由无荚膜菌株引起,主要在流感、麻疹、百日咳、肺结核等感染后发生。毒力菌株在营养丰富的培养基上6~8小时有明显荚膜,在陈旧培养物中荚膜消失。金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子,可促进流感嗜血杆菌的生长。卫星现象:在葡萄球菌周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大,离葡萄球菌越远的菌落越小。副流感嗜血杆菌生长过程中只需V因子呼吸道系统的感染、心内膜炎等。杜克嗜血杆菌生长需要X因子为性病软性下疳的病原菌。嗜沫嗜血杆菌生长需要X因子心内膜炎、脑水肿、肺炎、脑膜炎,继发性菌血症等。溶血嗜血杆菌生长需要V因子和X因子引起呼吸道感染。鲍特菌属G-b常用鲍-金培养基进行培养,血平板及巧克力平板不生长。糖类发酵:不发酵糖类吲哚(-);H2S(-);液化明胶试验(-);硝酸盐还原(-);CIT(-)。菌体(O)抗原荚膜(K)抗原毒素:百日咳毒素、丝状血细胞凝集素、腺嘌呤环化酶毒素、气管坏死毒素、皮肤坏死毒素。布鲁菌属G-b无鞭毛无芽孢无荚膜血平板:微小、灰色、不溶血的菌落糖类发酵:发酵葡萄糖等糖类。尿素酶(+);硝酸盐还原(+)。A抗原M抗原人畜共患感染性疾病的病原菌。可通过皮肤、呼吸道、消化道感染人体,引起布鲁菌病。主要表现为菌血症。进入人体后首先侵犯局部淋巴结,之后入血,再进入肝、脾、骨髓等器官。患者热型呈波浪热。衣原体概念生物学特性抗原成分抵抗力形态染色繁殖周期培养特性衣原体是一群体积较小,能通过细菌滤器细胞内专性寄生,并有独特发育周期的原核细胞型微生物。原体:为成熟的衣原体。吉姆萨染色呈紫色,Macchiavello染色呈红色。无繁殖能力。具有高度的感染性。(2)网状体(始体):吉姆萨染色和Macchiavello染色均呈蓝色。为衣原体发育周期的繁殖型,在胞外不能存活。无感染性。原体与易感细胞表面特异受体吸附,进入细胞形成吞噬小泡,后增大为网状体,8h后,网状体构成各种形状的包涵体,18~24h后,网状体浓缩形成原体,后随宿主细胞破裂而出,再感染新易感细胞,开始新的发育周期。每个发育周期需40~72h。专性细胞内寄生。各种衣原体均可在鸡胚卵黄囊和组织细胞内生长繁殖,鹦鹉热衣原体常用小鼠分离。沙眼衣原体多用McCoy细胞;鹦鹉热衣原体多用Hela229细胞希进行培养;肺炎衣原体适合用Hep-2和HL细胞系培养。(1)属特异性抗原:无典型内毒素生物学特性。(2)种特异性抗原:主要位于外膜蛋白(MOMP)上。(3)型特异性抗原抵抗力弱。耐寒不耐热,加热50℃经30min或56~60℃5~10min可杀死。首选药物:四环素类及大环内脂类。对四环素、青霉素、红霉素、螺旋霉素、利福平较敏感。磺胺类对肺炎衣原体无效。临床意义:1.沙眼衣原体(1)沙眼:主要通过眼-眼或眼-手-眼的途径进行直接或间接接触传播。(2)包涵体结膜炎:(3)泌尿生殖道感染:主要由沙眼生物亚种D-K血清型引起,是经性接触传播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染的主要病原菌,是男性尿道炎最常见的病因之一。衣原体常与淋病奈瑟菌混合感染,淋病奈瑟菌对衣原体的繁殖起激活和促进作用。(4)性病淋巴肉芽肿:由沙眼衣原体LGV生物亚种L血清型引起,主要通过性接触传播,引起以化脓性腹股沟淋巴结炎为特征的性病,又称第四性病。2.鹦鹉热衣原体主要引起动物感染,感染动物的粪便污染环境,以气溶胶形式传给人,是人类发生上呼吸道感染、肺炎和毒血症,典型表现为非典型肺炎。3.肺炎衣原体传播方式主要人-人经呼吸道传播,症状以肺炎为主。立克次体概念生物学特性抗原成分其他共同特征形态染色培养特性立克次体是一类寄生于细胞内的、以节肢动物为传播媒介的原核微生物。①大多数为人畜共患病原体;②以节肢动物为传播媒介或宿主;③多形性;④专性活细胞内寄生;⑤对多种抗生素敏感(磺胺类除外);⑥菌体内同时含有DNA和RNA;⑦以二分裂方式进行繁殖。具有程度不同的多形性。无鞭毛,无荚膜。Giemsa染色呈紫红色,Macchiavello染色呈红色,Giménez染色呈红色,背景为绿色。恙虫病立克次体Macchiavello染色呈蓝色,Giménez染色呈暗红色,背景为绿色。立克次体只能在活的真核细胞细胞内生长(巴通体除外)。立克次体的分离繁殖常用方法有鸡胚卵黄囊培养、细胞培养。立克次体的初代分离常接种豚鼠等动物。汉塞巴通体接种新鲜巧克力平板,在35℃、5%CO2环境中培养2周左右才长出菌落。群特异性抗原:立克次体悬液经乙醚处理后获得的可溶性抗原。种特异性抗原:为颗粒性抗原。各种立克次体在细胞内存在部位:普氏立克次体分散于胞质中;恙虫病立克次体多在胞质近核处堆积;Q热立克次体在胞质的空泡中定位;斑点热立克次体位于胞质外,也可位于核内;埃克立克次体呈单个或包涵体形式存在于宿主细胞膜包被的空泡内。致病性:立克次体病以发热、头痛、皮疹及中枢神经系统症状为其特征。发热多为稽留热,伴剧烈头痛、肌肉痛;可伴恶心、呕吐;皮疹可为充血性皮疹或出血性皮疹;严重时可累及中枢神经系统,出现神志不清、昏迷等症状。立克次体斑疹伤寒群主要包括普氏立克次体和莫氏立克次体。普氏立克次体常以人的体虱为传播媒介。莫氏立克次体的贮存宿主是鼠类,主要传播媒介是鼠蚤或鼠虱。恙虫病立克次体通过恙螨幼虫叮咬传给人类,引起恙虫病。贝纳柯克斯体(Q热立克次体)以蜱为传播媒介,也可不借助于媒介节肢动物而通过接触、呼吸道、消化道等途径传给人类,引起Q热,以出现肺炎和肝炎为其临床特征。汉塞巴通体为杆菌性血管瘤-杆菌性紫癜和猫抓病的病原体外斐反应疾病变形抗原抗原OX19OX2OXK流行性斑疹伤寒+++++-地方性斑疹伤寒+++++-斑点热++++或++或+++-恙虫病--++++腺热--++菌名生物学特性致病性形态与结构培养特性抗原构造基因组抵抗力斑疹伤寒立克次体多形性。在感染细胞内大多聚集成团分布在胞浆内。Giménez染色立克次体呈红色,背景为绿色。与G-菌的肽聚糖成分相似。采用鸡胚城纤维细胞、L929细胞和Vero细胞进行分离培养,繁殖一代需要6~8h,培养时需要CO2。群特异性抗原:与黏液层的脂多糖有关;种特异性抗原:与细胞壁外膜的表面蛋白成分有关。MadridE株染色体为1111523bp组成的环状DNA,G+C含量为29.1mol%;Wilmington株基因组全长为1111496bp,为单链环状DNA,G+C含量为28.9mol%。对热敏感,耐低温和干燥。对四环素和氯霉素类抗菌药物敏感。磺胺类可刺激其增殖。致病物质:脂多糖、酯酶A及微荚膜样黏液层。以高热、头痛、全身皮疹为主要特征。斑疹伤寒立克次体是地方性斑疹伤寒的病原体。啮齿类动物是其主要储存宿主,主要传播媒介是鼠蚤或鼠虱。其他:核酸检测对斑疹伤寒立克次体早期诊断、鉴别诊断以及自然生态宿主调查研究具有较大价值。恙虫病立克次体G-;Giemsa染色呈紫色;Macchiavello染色呈蓝色;Giménez染色呈暗红色,背景为绿色。细胞内寄生的恙虫病立克次体分布在细胞质内,密集于细胞核旁。专性活细胞内寄生;常采用动物接种或细胞培养方式进行培养。耐热性多糖抗原特异性抗原与变形杆菌OXK株具有共同抗原成分。Boryong株为线性DNA,全基因组长2127051bp,G+C含量为30.5mol%;Ikeda株为环状DNA,全基因组长2008987bp,G+C含量为30mol%。致000病因素:为死后所释放的毒素样物质。临床表现为高热(通常在38~41℃之间)、寒战、头痛、肌肉痛。皮疹一般在发病后3~8天出现。其他:ELISA间接法是检测标本的特异性抗原或抗体的最常用方法。贝纳柯克斯体G-;Giménez染色呈红色,背景为绿色;Giemsa染色呈紫红色。在细胞空泡中繁殖。鸡胚是培养大量立克次体的极好宿主。一个鸡胚卵黄囊膜中的繁殖量可达2×109个立克次体。颗粒性抗原。抵抗力强。对乙醇、乙醚、三氯甲烷等脂溶剂敏感。对氯霉素和四环素类抗菌药物敏感。致病物质:脂多糖。以出现肺炎和肝炎为其主要的临床特征。对人的感染力特别强,是立克次体中唯一可不借助于媒介节肢动物,而感染动物的排泄物污染环境后,通过接触,气溶胶经呼吸道、消化道等途径感染人及动物。埃立克体Romanowsky染色呈蓝色和紫色。电镜下受侵细胞胞质内可见包涵体。其他:PCR技术是最有效的埃立克次体病的病原学诊断方法,可用于埃立克次体病的早期诊断。汉赛巴通体Giemsa染色呈紫蓝色;镀银染色呈黄色。于35~37℃5%CO2环境下培养。用新鲜绵羊、马、兔、或人血的琼脂或巧克力、活性炭-酵母浸液琼脂以及心脑浸液或心浸液琼脂等。可引起人类杆菌性血管瘤-杆菌性紫癜和猫抓病。支原体概念生物学特性形态染色培养特性生化反应抗原成分抵抗力支原体是一类无细胞壁、呈高度多形态性,能通过细菌滤器,在人工培养基上能生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。无细胞壁仅有细胞膜是与细菌区别的主要特点。支原体的细胞膜由外、中、内三层所组成,内外两层主要为蛋白质,中间层系脂质,其中胆固醇类含量高。通常在含95%N2、5%CO2环境中生长良好。可在含牛心浸液、马血清与酵母浸液的培养基上生长。菌落与细菌L型相似,37℃培养3~10天,低倍镜下可见“荷包蛋”样。发酵葡萄糖、水解精氨酸和尿素等生物学特性不同,作为初步鉴别支原体的依据。肺炎支原体、生殖道支原体等可分解葡萄糖产酸不产气,人型支原体等不能分解葡萄糖,但可利用精氨酸产氨。解脲脲原体不能利用葡萄糖和精氨酸,但可利用尿素作为能源,分解尿素产碱。支原体的抗原性主要来自细胞膜,其外层蛋白质是主要的型特异性抗原,具有免疫原性。耐冷,不耐干燥。对一些化学物质比细菌敏感,容易被重金属盐类、苯酚、来苏儿等化学消毒剂灭活。支原体无细胞壁,对渗透压敏感,对作用于细胞壁的抗生素(如青霉素、头孢菌素等)不敏感,对抑制或影响蛋白合成的抗生素(如四环素、红霉素)敏感。支原体与细菌L型的不同点细菌L型在无抗生素等诱导因素作用下,易返祖为原菌,而支原体为独立的一类微生物,不出现返祖现象。菌名生物学特性微生物检验致病性分离与鉴定生化反应血清学试验肺炎支原体典型的形态类似酒瓶状。Giemsa染色呈淡紫色。P1蛋白是肺炎支原体的主要特异性免疫原,是目前血清学诊断的主要抗原。分离与鉴定是确诊支原体感染的可靠方法之一。常用牛心消化液为基础另加20%小牛血清及新鲜酵母浸液制成液体培养基或固体培养基。初次分离通常先接种与液体培养基增菌,1周后转种固体平板。在5%CO2环境中培养,初次分离肺炎支原体需1~2周才能长出菌落。发酵葡萄糖产酸,不能利用精氨酸、尿素。氯化三苯基四氮唑(TTC)还原试验:使无色TTC还原为粉红色。生长抑制试验(GIT)和代谢抑制试验(MIT)。红细胞吸附试验:肺炎支原体的菌落能发生红细胞吸附。特异性血清学试验①ELISA技术:敏感性和特异性高,可检测IgM和IgG抗体。利用ELISA捕获法,以抗P1蛋白单抗检测标本中的肺炎支原体P1蛋白。②补体结合试验:诊断肺炎支原体常用的血清学方法。主要通过飞沫传播,是人类原发性非典型性肺炎的主要病原体之一。解脲脲原体Giemsa染色呈紫蓝色。抗原成分:脂多糖抗原、蛋白抗原、脲酶抗原(种特异性抗原)。最好在95%N2、5%CO2环境中培养不分解葡萄糖、精氨酸。分解尿素。解脲脲原体是人类生殖道最常见的寄生菌之一。是非淋菌性尿道炎的主要病原体之一。病原性放线菌菌名生物学特性致病性其他形态与染色培养特性生化反应放线菌属G+;无芽孢、无鞭毛、无荚膜、无抗酸性。在患者病灶和脓汁中可找到肉眼可见的黄色小颗粒,称为“硫磺颗粒”,是放线菌在病灶组织中形成的菌落。将其压制成片,镜检可见颗粒呈菊花状。有氧环境中一般不生长,初次分离加5%CO2可促进生长。葡萄糖肉汤:在培养基底部形成灰白色球形小颗粒沉淀。硫乙醇酸钠肉汤:培养基下层白色或灰白色雪花样生长。衣氏放线菌在牛心脑浸液琼脂上,形成蜘蛛网状菌落。继续培养7~14天,形成臼齿形或面包屑样菌落,白色或灰白色,不溶血,无气中菌丝。糖类发酵:能分解多种糖类,产酸。H2O2(-)(黏性放线菌除外);吲哚(-);尿素(-);明胶液化试验();硝酸盐还原试验()。最常见为面颈部感染。诺卡菌属G+;抗酸染色呈弱抗酸性;普通培养基或沙氏培养基:表面干燥、有褶皱或呈颗粒状。星卡诺卡菌可形成黄色或深橙色菌落,表面无白色菌丝。巴西诺卡菌的菌落,表面有白色菌丝。主要为外源性感染。两种诺卡菌的鉴别特征分解侧金盏花醇赤藓糖鼠李糖半乳糖枸橼酸盐葵二酸58℃8h耐受试验蛋白质氨基酸黄嘌呤次黄嘌呤星形诺卡菌-------dD++巴西诺卡菌++-+---++--螺旋体菌名生物学特性微生物检验致病性形态与染色培养特性抗原成分抵抗力疏螺旋体属伯氏疏螺旋体Giemsa染色呈紫红色,瑞氏染色呈棕红色。5%~10%CO2促进其生长。培养基需含有长链饱和与不饱和脂肪酸、葡萄糖、氨基酸和牛血清蛋白等。鞭毛蛋白外膜蛋白分离培养:标本接种改良的Kelly(BSK)培养基。抗体检测:①间接免疫荧光法;②ELISA;③免疫印迹技术;核酸检测:PCR技术伯氏疏螺旋体是引起莱姆病的病原体。主要传播媒介是硬蜱。回归热螺旋体回归热螺旋体:以虱为传播媒介,引起流行性回归热;赫姆疏螺旋体赫姆疏螺旋体:以蜱为传播媒介,引起地方性回归热。奋森螺旋体引起多种口腔感染钩端螺旋体属钩端螺旋体暗视野显微镜下,似细小珍珠排列成的细链,一端或两端弯曲成钩状。Fontana镀银染色染成深褐色。在含有兔血清(如柯式培养基)和含白蛋白、脂肪酸的培养基中生长良好。pH低于6.5,高于8.4生长不良。在液体培养基表面1cm内的部位生长最佳,呈半透明云雾状混浊。人工培养基:透明、不规则的扁平菌落。对化学消毒剂极敏感,75%乙醇、0.1%盐酸、硫酸10~15min内、0.5%来苏儿、1%苯酚、1:2000升汞10~30min内,其迅速死亡。对青霉素、金霉素及庆大霉素极敏感。对磺胺类药物耐药。发病一周内血液的阳性率高。一周后尿和脑脊液的阳性率高。(1)分离培养:标本接种Korthof培养基;(2)抗体检测:①间接免疫荧光法;②ELISA;(3)核酸检测:PCR技术。人畜共患疾病。鼠类和猪是最常见的储存宿主。人类主要感染途径是接触了疫水。菌名生物学特性微生物检验致病性形态与染色培养特性抗原成分抵抗力密螺旋体属梅毒螺旋体Fontana镀银染色染成棕褐色。梅毒螺旋体不能在人工培养基上生长繁殖。(1)特异性抗原:具属特异性,无种特异性。(2)类属抗原:可刺激机体产生沉淀素抗体或补体结和抗体。对化学消毒剂敏感,1%~2%苯酚数分钟就死亡。对青霉素、四环素、红霉素、庆大霉素均敏感。直接镜检:一期梅毒取硬下疳渗出液,二期梅毒取梅毒疹渗出液。血清学试验:①非密螺旋体抗原试验(非特异性):A.VDRL;B.RPR;C.USR。②密螺旋体抗原试验(特异性):A.FTA-ABS;B.MHA-TP;C.ELISA;D.免疫印迹法。梅毒的临床病程分为三期:第一期:硬性下疳,极易传播感染。第二期:梅毒疹期,全身皮肤黏膜出现皮疹,伴有淋巴结肿大。第三期:晚期梅毒,病损部位螺旋体少但破坏性大。其他:WHO推荐用VDRL、RPR法进行过筛试验,出现阳性者用FTA-ABS、MHA-TP、ELISA和免疫印迹试验等作确认试验。苍白螺旋体地方亚种:地方性梅毒;苍白螺旋体极细亚种:雅司病;品他螺旋体:品他病。病毒病毒名称生物学特性微生物学检验临床意义形态与结构分型与变异抵抗力呼吸道病毒流感病毒正黏病毒科。病毒颗粒具有多形性。核心:核酸为分节段的单负股RNA,节段间易发生基因重组,从而引起变异;核蛋白为型特异性抗原。基质蛋白(M蛋白):具有保护核心与维持病毒外形的作用。具有型特异性。包膜:含有宿主细胞膜成分,其中镶嵌有突出于病毒表面的两种结构蛋白:①血凝素(HA);②神经氨酸酶(NA)。其抗原性是划分流感病毒亚型的依据。分型:根据核蛋白抗原和M蛋白的不同,将流感病毒分为甲(A)、乙(B)、丙(C)型。变异:流感病毒易发生变异,变异的物质基础是HA和NA。两者变异可同时出现,也可单独出现。抗原变异幅度小称抗原漂移,若变异幅度大称为抗原转变。不耐热,对干燥、日光紫外线以及甲醛、乙醇等均敏感。(1)分离培养与鉴定:常用鸡胚接种培养,初次分离接种羊膜腔为最佳,传代适应后可移种尿囊腔。细胞培养一般用原代猴肾细胞(PMK)或犬肾传代细胞(MDCK)。利用红细胞凝集试验确定病毒的存在。血清学诊断:需同时检测急性期(5天以内)和恢复期(2~4周)血清。如恢复期抗体效价比急性期高4倍或4倍以上即有诊断意义。流感病毒在呼吸道柱状上皮细胞内复制,病毒随飞沫传播,依靠血凝素与相应受体结合,感染细胞。主要在呼吸道增殖,但代谢毒素样物质可进入血流引起发热、头痛和全身酸痛。副流感病毒副黏病毒科、副黏病毒亚科、副黏病毒属。核酸为单负股RNA,不分节段。包膜上嵌有两种糖蛋白刺突,一种为HN,具有血凝和神经氨酸酶活性,具有流感HA的吸附作用。另一种为F,具有使病毒进入宿主细胞和使病毒在宿主细胞之间传播的作用抵抗力弱,不耐酸,对热敏感。分离培养:最敏感的细胞是原代人胚肾和原代猴肾细胞。病毒鉴定:最常用的方法是红细胞吸附抑制试验,亦可用血凝抑制试验,中和试验,补体抑制试验对病毒进行鉴定。(3)直接检测病毒抗原:常用间接免疫荧光法,也可用ELISA、放射免疫和电镜技术。副流感病毒经感染人呼吸道分泌物通过人与人密切接触或气溶胶传播。可分为4个型,其中1型、2型是主要的致病因子,3型常引起下呼吸道感染,4型只引起轻型上呼吸道感染。病毒名称生物学特性微生物学检验临床意义呼吸道病毒呼吸道合胞病毒副黏病毒科、肺病毒亚科、肺病毒属。核酸为单负股RNA,不分节段。包膜上的G蛋白作用类似流感病毒的血凝素蛋白HA,F蛋白为融合蛋白,介导病毒穿入和细胞融合。G、F蛋白均有较强的免疫原性,能刺激机体产生中和抗体。分离培养与鉴定:呼吸道合胞病毒不能在鸡胚中增殖,可在人类上皮细胞传代细胞系内增殖。细胞病变特点为合胞体形成即细胞融合成多核巨细胞,胞质内形成嗜酸性胞涵体。直接检测病毒抗原:利用免疫荧光技术和ELISA。血清学诊断:检测患者IgM、IgA可进行早期诊断。是引起婴幼儿下呼吸道疾病的最常见的病毒。病毒随飞沫传播感染。腺病毒无包膜病毒。核心为单一线形双股DNA。不能在鸡胚中增殖,只能在人源组织细胞中增殖。细胞病变为肿胀、变形、聚集成葡萄串状,细胞核中形成嗜碱性包涵体。腺病毒对酸和乙醚不敏感,对低温耐受但56℃30min可被灭活。分离与鉴定:适合于腺病毒分离的细胞有:传代人细胞系HeLa、KB、A549以及原代人胚肾细胞。一般用补体结合实验和EIA试验对腺病毒进行分属,以中和试验或血细胞凝集抑制试验进行血清型鉴定。直接检测病毒抗原:电镜或免疫电镜检查、免疫荧光技术、ELISA技术、PCR技术进行鉴定。引起呼吸道疾病。机体在病毒感染后可获得对同型病毒的持久免疫力。麻疹病毒副黏病毒科、麻疹病毒属。核心为单负链RNA。3种衣壳蛋白(L、P、N),外被包膜,包膜内为M蛋白,表面有血凝素(H蛋白)和融合蛋白(F)。H蛋白与病毒受体CD46结合,感染宿主。病毒抵抗力不强,对阳光和一般消毒剂敏感。(1)分离与鉴定:进行细胞接种,接种传代细胞系HeLa、Vero以及原代人胚肾细胞。(2)直接检测病毒:HE或瑞氏染色可见感染细胞形成细胞融合和多核巨细胞,胞质和胞核内有嗜酸性包涵体。(3)血清学诊断:双份血清做补体结合实验、酶免疫测定及血凝抑制试验。ELISA法检测血清特异性IgM可协助诊断。麻疹病毒是儿童时期最常见的急性呼吸道传染病,病毒通过飞沫传播。病毒侵入上呼吸道和眼结膜上皮细胞内增殖,通过局部淋巴组织入血,出现第1次病毒血症,随后侵入全身淋巴组织和单核吞噬细胞系统增殖,形成第2次病毒血症,还可引起较为少见的亚急性硬化性全脑炎(SSPE)。风疹病毒核心为单正链RNA。外被包膜,包膜表面有血凝素,病毒能在绿猴肾、兔肾和人胚肾细胞内增殖。抵抗力不强,不耐热,对脂溶剂敏感,紫外线能灭活病毒。分离与鉴定:进行细胞接种,接种非洲绿猴肾Vero以及原代人胚肾细胞。直接检测病毒:利用PCR技术或核酸探针技术进行鉴定。血清学诊断:用ELISA法检测血清特异性IgM可协助诊断。患儿出生时血清中有抗风疹病毒IgM抗体或从母体获得IgG抗体,或宫内羊水中有IgM抗体可判定为先天性风疹综合征。风疹是全身有麻疹样出疹,伴耳后及枕下淋巴结肿大为特征的急性呼吸道传染病。冠状病毒核酸为单股正链ENA。核衣壳外被包膜,包膜有E蛋白和M蛋白病毒主要通过飞沫传播或是直接、间接接触传播。是成人及较大儿童上呼吸道感染的重要病因。病毒名称生物学特性微生物学检验临床意义肠道病毒肠道病毒由简单的衣壳和单股RNA组成。能在猴肾、人胚肾、人羊膜细胞、HEPL2、HeLa细胞中增殖。抵抗力较强。对酸及乙醚稳定,对紫外线、干燥及热敏感,56℃30min可被灭活。主要包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒。病毒分离:猴细胞系对脊髓灰质炎病毒、B组柯萨奇病毒和ECHO病毒具有良好的敏感性。人类二倍体成纤维细胞(如WI-38和HELF)适合于A组柯萨奇病毒的分离。直接检测病毒:电镜检查、酶免法。病毒鉴定:中和试验为鉴定的标准方法。血清学诊断:中和试验(较为特异)、补体结合试验、血凝抑制试验。肠道病毒经粪-口途径传播。最开始试感染胃肠道,但很少引起胃肠道疾病。病毒的靶器官以神经系统、肌肉和其他系统为主。脊髓灰质炎病毒可损害脊髓前脚运动神经细胞,导致脊髓灰质炎。在粪便中有肠道病毒排出时,多数病人往往无任何症状。而病毒在中枢神经系统、血液、眼结膜分泌物和泌尿生殖道等部位检出时,就意味着真正的病毒侵入。急性胃肠炎病毒轮状病毒核心含双链RNA,外被双层衣壳,内层核衣壳的壳粒呈放射状排列,犹如车轮状外形。常用的细胞为原代猴肾细胞和传代猴肾细胞。病毒抵抗力强,耐酸碱,耐乙醚,56℃30min可灭活,可被消毒剂灭活。标本直接检查:①电镜和免疫电镜检查;②抗原检测:ELISA法、胶乳凝集试验;③病毒分型:病毒RNA聚丙烯酰胺凝胶电泳分析;④核酸检测。轮状病毒是引起婴幼儿急性腹泻的主要病因。A组感染引起婴幼儿急性肠胃炎,B组感染引起成人腹泻。黄病毒乙脑病毒病毒基因为单正链RNA。其结构蛋白有三种:内膜蛋白(M)、衣壳蛋白(C)和囊膜糖蛋白(E)。M位于包膜内面,C在衣壳中,E是镶嵌在包膜上的糖蛋白,组成血凝素。乙脑病毒可在地鼠肾,幼猪肾等原代培养细胞内增殖最易感染的动物为出生2~3天的乳鼠,经脑内接种后3~5天即可发病。病毒抗原性稳定,很少变异。分离培养与鉴定:动物接种或细胞培养阳性者以中和试验、血凝抑制试验等进行鉴定。血清学试验:血凝抑制试验、补体结合试验等进行诊断。通过三带喙库蚊叮咬传播,猪为最重要的宿主和传染源。人感染后,绝大多数表现为隐性或轻型感染,只有少数发生脑炎。病毒侵入脑组织内增殖,造成脑实质病变。森林脑炎病毒形态结构与乙脑病毒类似。最易感动物为小鼠。可在原代鸡胚细胞和传代地鼠细胞培养中生长并引起病变。鸡胚接种能在卵黄囊、绒毛尿囊膜增殖,抗原性稳定。病毒经蜱传播,森林硬蜱为主要传播媒介和宿主,也可经胃肠道传播。人类感染后大部分表现为隐性感染,发病者潜伏期为10~14天,然后出现高热、头痛、脑膜刺激征、昏迷。登革病毒形态结构与乙脑病毒类似。由抗原性不同分为4个血清型。可用蚊体胸内接种培养,也可用白蚊伊蚊的传代细胞(C6/36株)或地鼠肾细胞进行培养,可用出生小鼠进行动物接种。取患者1~3天的血清接种白蚊伊蚊C6/36株细胞以分离病毒。患者感染一周后血清中可出现血凝抑制抗体,通过测定早期与恢复期血清标本来观察抗体滴度是否呈4倍以上增高。也可利用ELISA及斑点免疫测定法检测IgM抗体,有助于登革热的早期诊断。病毒储存于人和猴,通过埃及伊蚊和白蚊伊蚊传播。病毒感染人体,可在毛细血管内皮细胞和单核细胞中增殖,可引起发热、肌肉和关节酸痛、淋巴结肿胀、皮肤出血和休克。病毒名称生物学特性微生物学检验临床意义疱疹病毒单纯疱疹病毒有包膜的DNA病毒,基因组由两个互相连接的长片段(L)和短片段(S)组成,为双股线状DNA。病毒能在多种细胞内增殖,如原代兔肾、人胚肺、人胚肾细胞或地鼠肾细胞等。细胞被感染后很快发生病变,如细胞肿胀、变圆、出现嗜酸性核内包涵体。该病毒有两种血清型:HSV-1和HSV-2。两型病毒的DNA有5%同源性。直接检查病毒:利用免疫电镜检查病毒颗粒或病变细胞,也可用吉姆萨染色,在光学显微镜下检查多核巨细胞和胞核内嗜酸性包涵体。将标本制成涂片,采用直接免疫荧光法或酶免疫法进行病毒抗原检测。(2)分离及鉴定:病毒分离培养是HSV感染实验室诊断的最敏感的方法。可以利用单克隆抗体确定HSV分离株的型别。HSV感染通过直接密切接触和性接触传播,也可经飞沫及垂直传播。HSV-1感染常局限在口咽部,通过唾液或呼吸道分泌物传播。HSV-1原发感染多见于半岁以后的婴幼儿,大多数呈隐性感染。HSV-2的原发感染多见于青春期以后的患者,主要通过生殖道途径传播。主要表现为生殖器疱疹。水痘带状疱疹病毒为线状双股DNA病毒。VZV能在人胚二倍体肾细胞(HFDK)或人胚二倍体肺细胞(HFDL)培养中增殖。受感染的细胞出现嗜酸性核内包涵体和多核巨细胞直接检测病毒或抗原:用直接或间接免疫荧光法检测病变细胞内的VZV抗原,有助于快速诊断。利用疱疹液进行免疫电镜检查,可对VZV感染进行特异性诊断1。鉴定:利用标记的抗VZV的单克隆抗体进行直接荧光抗体染色,进行特异性鉴定。血清学诊断:EIA已成为VZV血清学诊断的主要方法。儿童初次感染VZV大约有2周的潜伏期。巨细胞病毒种属特异性高。体外培养HCMV只能在人成纤维细胞中才能增殖。病毒在细胞培养中增殖缓慢,细胞病变特点为肿胀、核变大形成巨大细胞,核内有致密的嗜碱性包涵体,形似猫头鹰眼特征。加热56℃30min,低pH、乙醚、紫外线、反复冻融均能使CMV灭活。直接检查病毒:用HE染色观察巨大细胞和细胞核内的包涵体,也可利用免疫荧光技术检查标本中的HCMV抗原。分离与鉴定:人成纤维细胞适合于HCMV增殖。利用单克隆或多克隆相应抗体对分离培养出的病毒进行间接免疫荧光法鉴定。血清学诊断:常利用ELISA或IFA来检测HCMVIgG抗体或IgM抗体。病毒可通过多种途径传播。有先天性或获得性细胞免疫缺陷的患者,CMV感染很常见。HCMV感染所致的间质性肺炎是骨髓移植受者的首位死因。AIDS患者HCMV感染,以肺、中枢神经系统和胃肠道感染最为常见。EB病毒EBV缺乏良好的体外培养系统,不能用常规的疱疹病毒培养方法进行培养。一般用人脐血淋巴细胞或从外周血分离的B淋巴细胞培养。EBV抗原分为3类:(1)潜伏期表达的抗原:EBV核抗原(EBNA)和潜伏期膜蛋白;(2)EBV增殖早期抗原(EA);(3)病毒增殖早期抗原:EBV衣壳抗原(VCA)和EBV胞膜抗原(MA)。直接检查病毒:抗补体免疫荧光法检查淋巴细胞或上皮细胞EB病毒核抗原。血清学诊断:嗜异性抗体检测可用于辅助诊断传染性单核细胞增多症。主要通过唾液传播,也可因输血传染。EBV主要侵犯B细胞,与EB病毒感染有关的疾病主要有:传染性单核细胞增多症、非洲儿童恶性淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金病。病毒名称生物学特性微生物学检验临床意义肝炎病毒甲型肝炎病毒小RNA病毒,无包膜,核心为单正股RNA。HAV的抵抗力较其他小RNA病毒强,60℃加热10~12小时后仍具有感染性,85℃加热立即灭活,对乙醚、氯仿及pH为3的酸性环境有抵抗力。感染早期一般可用RIA或ELISA检测患者血清中的抗HAVIgM出现早,消失快,是HAV新近感染的重要指标。对于了解既往感染史或进行流行病学调查,需检测抗-HAVIgG。HAV主要通过粪-口传播,潜伏期15~50天,平均28天。典型的甲型肝炎常可分为黄疸前期、黄疸期及恢复期。乙型肝炎病毒病毒在电镜下可见3种特有颗粒:①大球形颗粒(Dane颗粒):为具有感染性的HBV完整颗粒,呈球形。HBsAg镶嵌于包膜的脂质双层中。内衣壳是HBV的HBcAg;②小球形颗粒:成分为HBsAg,不含病毒核酸DNA及DNA多聚酶,无传染性;③管型颗粒:成分亦是HBsAg,是由多个小球形颗粒“串联而成”,不含病毒核酸。HBV的基因组是独特的带有部分单链区的双链DNA环状模式。长链为负链,短链为正链。抗原成分:①HBsAg是HBV感染的主要标志,由病毒的S区编码。②HBcAg免疫性强,抗-HBcIgG在血清中持续时间长,抗HBcIgM提示HBV处于复制状态。③HBeAg为可溶性蛋白质。作为HBV复制及具有强感染性的一个指标。病毒对理化因素有较强抵抗力。60℃加热10h,98℃加热1min,以及乙醚、pH为2.4的酸性环境处理6h均不能有效灭活病毒。HBV的传播途径为:血液、血制品传播、性传播、母婴传播。病毒是通过破损的皮肤和黏膜侵入机体,传染源是HBV携带者和患者的血液、唾液、精液和阴道分泌物等。丙型肝炎病毒HCV是小的有包膜的单正股RNA病毒。不能用体外细胞培养进行分离。抗原成分主要包括:核衣壳蛋白、包膜蛋白、非结构蛋白。HCV对各种理化因素的抵抗力较弱,对酸、热均不稳定,沸水煮5min或60℃加热30min均可使感染性丧失。对氯仿、乙醚等有机溶剂敏感。HCV抗体检测主要是ELISA法作为筛选试验,采用条带免疫法作确认试验。HCV主要经输血或其他非肠道途径进行传播。HCV的亚临床感染,临床上无自觉症状,而ALT不正常,是丙型肝炎的主要传染源。HCV感染的一个主要特点就是慢性化的几率很高,感染过程很长,存在不同程度的肝组织病变,并呈慢性进行性。丁型肝炎病毒外被HBSAg包绕,核心含HDV抗原和HDV-RNA基因组,基因组为一单负链环状RNA。HDA不能独立复制,需要HBV辅助才能增殖。抗-HDV抗体检测:HDV感染后2周左右产生抗-HDVIgM,一个月达高峰,随后迅速下降。抗-HDVIgG出现较迟,在恢复期出现。HDV抗体不能清除病毒,如持续高效价,可作为慢性丁肝的指标。通过检测抗-HBsIgM或IgG以及HBeAg和抗-HBe,作出同步感染和重叠感染的诊断。HDV传播方式主要经血传播,也可通过密切接触与母婴间垂直传播。HDV感染只有在感染了HBV的人群或是与HBV同时侵入才能发生。病毒名称生物学特性微生物学检验临床意义肝炎病毒戊型肝炎病毒无包膜,基因组为单股RNA。HEV对高盐、氯化铯、氯仿和反复冻融敏感。临床常用的诊断方法是检测血清中的抗HEVIgM或IgG。HEV主要经粪-口途径传播。戊型肝炎的潜伏期约为10~60天,潜伏期末和急性期初的患者粪便中病毒量较大,传染性最强,是戊型肝炎的主要传染源。病毒名称生物学特性微生物学检验临床意义反转录病毒人类免疫缺陷病毒1.形态结构:病毒为RNA病毒,核心含有RNA、反转录酶和核衣壳蛋白,外被脂蛋白包膜,其中镶嵌有gp120和gp41两种特异的糖蛋白。Gp120与CD4受体蛋白结合。gp41为跨膜蛋白。2.基因组结构:由两条拷贝的单正股RNA在5′端通过请见结合而形成的二聚体。3.病毒的复制:病毒包膜糖蛋白gp120与细胞上的CD4受体结合,病毒包膜与细胞膜发生融合。4.病毒受体与细胞亲嗜性:HIV的主要靶细胞是以CD4T淋巴细胞和单核-巨噬细胞亚群。皮肤Langerhans细胞、淋巴结滤泡的树突状细胞、脑小胶质细胞等也是感染的对象。CD4分子是HIV的主要受体,两种辅助受体:CXCR4和CCR5。5培养特性:常用新鲜分离的正常人T细胞或患者自身分离的T细胞培养病毒。6.抵抗力:病毒抵抗力较弱,56℃30min可灭活。可被消毒剂灭活。1.病毒标志:指病毒培养或用分子生物学方法直接从感染者体内分离HIV或其基因物质。2免疫标志:指HIV抗原及抗体等免疫复合物。(1)抗原检测:常用间接ELISA法检测p24抗原。(2)抗体检测:初期感染的最稳定的指标:抗核心蛋白p24及其前体p55的抗体在血清中出现最早,随后出现抗包膜糖蛋白gp120/160的抗体。抗糖蛋白p41的抗体常在p24抗体出现后数周才出现。①初筛试验:酶免法(EIA)、免疫荧光法(IFA)、凝集试验。②确证实验:免疫印迹试验(WB)、放射免疫沉淀试验。3.相关标志:CD4、新喋呤、白细胞介素。HIV-1是引起全球艾滋病流行的病原体,HIV-2主要局限于非洲西部。AIDS是以侵犯CD4细胞为主,造成细胞免疫功能缺陷,并继发体液免疫功能缺损为基本特征的传染病。从HIV感染到发展为典型AIDS分为4个时期:急性感染期、无症状感染期、艾滋病相关综合征、艾滋病(艾滋病完全型)。HIV的致病机制:HIV直接损伤或间接损伤CD4T细胞;HIV抑制抗原递呈细胞功能;HIV诱发自身免疫性疾病及诱导细胞凋亡;HIV导致CD8T细胞丧失抗病毒活性。狂犬病病毒病毒体内含单负股RNA,外面是脂蛋白包膜,其表面有许多糖蛋白刺突,与病毒的感染性和毒力有关。是一种嗜神经性病毒。在易感动物或人类的中枢神经细胞中增殖时,在胞质内形成嗜酸性包涵体,称内基小体,在诊断上很有价值。细胞培养:将感染的动物或人类的相应组织悬液接种敏感细胞,培养40~48小时候后,用DFA进行病毒抗原检测,如果阴性进行第二代培养。血清学诊断:中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验、ELISA试验。分子生物学:利用RT-PCR技术检测标本中狂犬病毒RNA,此方法敏感、快速、特意。发病典型表现:神经兴奋性增高,吞咽或饮水时喉头肌痉挛,甚至闻水声或其他轻微刺激包括光线均可引起全身痉挛发作,又称恐水症。人乳头瘤病毒由病毒衣壳和双链环状DNA组成。具有宿主和组织特异性,只能感染人的皮肤,黏膜的上皮细胞,在易感细胞内增殖形成核内嗜酸性包涵体。临床常根据病史及典型的临床表现即可作出诊断。症状不典型的可作病理学检查或用免疫组化技术等方法检查病变组织中的HPV抗原。HPV可通过性接触感染,引起尖锐湿疣(主要由HPV-6引起)。病毒感染仅局限于局部皮肤和黏膜中。阮粒朊病毒就是蛋白质病毒,是只有蛋白质而没有核酸的病毒。他比已知的最小的常规病毒还小得多。朊病毒对人类最大的威胁是可以导致人类和家畜患中枢神经系统退化性病变,最终不治而亡。概念及分类生物学性状致病性基本形态与结构培养与繁殖抵抗力真核细胞型微生物,具有典型的细胞核,不含叶绿素,不分根、茎、叶,以寄生或腐生方式生存,由单细胞或多细胞组成,细胞壁含几丁质和(或)纤维素,能进行有性生殖和(或)无性生殖。单细胞真菌常见的有酵母菌和类酵母菌,以出芽方式繁殖。多细胞真菌由菌丝和孢子组成。另外,因寄生环境或培养条件不同而出现2种形态的真菌称为二相性真菌。在体内或体外含动物蛋白的培养基上37℃培养为酵母型真菌,而在体外普通培养基上25℃培养为真菌型真菌。基本结构为菌丝和孢子。菌丝:通常把伸入到培养基内的菌丝为营养菌丝;露出培养基表面的为气中菌丝。一部分气中菌丝可产生有性或无性孢子的称生殖菌丝。可分为①单纯菌丝;②球拍状菌丝;③破梳状菌丝;④鹿角状菌丝;⑤结节状菌丝;⑥螺旋状菌丝;⑦关节状菌丝;⑧假菌丝(与真菌的主要区别为它的壁两边有时交叉,而真菌丝侧壁两边永远是平行的)

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