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文档简介

基因工程的原理和技术选修3现代生物科技专题第一章基因工程问题1：限制性核酸内切酶的作用特点？问题2：载体－质粒需要具备什么条件？问题3：如何构建重组DNA分子？

前回课顾目的基因载体重组DNA分子重组DNA分子的构建如何让大肠杆菌生产人的生长激素？步骤03010204获取目的基因将重组DNA分子导入受体细胞筛选含有目的基因的受体细胞目的基因的表达05形成重组DNA分子

第一部分获取目的基因PART0101获得目的基因的方法：已知序列未知序列化学方法合成利用PCR技术扩增从基因文库获得人工合成基因的方法反转录法根据已知的氨基酸序列合成DNA蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列目的基因

基因DNA文库的构建

将总DNA经过酶解，分离不同长短的DNA片段。包含的基因片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，转入细菌或体外包装到噬菌体颗粒上便构成了该生物的基因文库。循环变性退火延伸目的基因的扩增呈指数形式扩增（2n）PCR技术利用PCR技术扩增目的基因

聚合酶链式反应，在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。可以获得大量的目的基因。

第二部分形成重组DNA分子PART0202重组DNA分子的形成：质粒DNA分子同种限制酶一个切口两个粘性末端两个切口获得目的基因DNA连接酶重组DNA分子（重组质粒）思考：目的基因、运载体质粒经DNA连接酶处理，两两结合可能有几种产物？1、目的基因与目的基因结合；2、质粒与质粒结合；3、目的基因与质粒结合。思考：如何避免自身连接（自身环化）？

第三部分将重组DNA分子导入受体细胞PART0303思考：常用的受体细胞？导入方法？导入过程？将目的基因导入受体细胞将受体细胞进行扩增受体细胞：细菌CaCl2细胞壁的通透性增大重组质粒进入受体细胞目的基因随受体细胞的繁殖而复制将目的基因导入植物细胞农杆菌转化法基因枪法将目的基因导入动物细胞显微注射技术提纯基因表达载体体外显微注射入受精卵受精卵移植

第四部分筛选含有目的基因的受体细胞

PART0404抗四环素基因重组DNA四环素生长被抑制正常生活四环素

作业本试题：如下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图筛选菌落的方法—影印法

第四部分目的基因的表达

PART05051、特定性状的产生2、产生特定的产物遗传信息的传递过程（信息流）——DNA（基因）mRNA转录翻译遗传信息性状蛋白质中氨基酸排列顺序蛋白质DNA中脱氧核糖核苷酸的排列顺序RNA中核糖核苷酸的排列顺序逆转录中心法则遗传密码课堂小结123基因工程目的基因的获取形成重组DNA分子将目的基因导入受体细胞基本操作程序45筛选含有目的基因的受体细胞目的基因表达期待下一节课！思考：干扰素是一种抗病毒药物，其化学本质是蛋白质，假如现在要用大肠杆菌来生产抗病毒干扰素，如何操作？(画图讲解)目的基因？载体？受体细胞？

从人的淋巴细胞中提取干扰

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