黄河水中抗生素的存在及其环境意义

黄河水中抗生素的存在及其环境意义OccurrenceofAntibioticsintheYellowRiverUsingHighPerformanceLiquidChromatographywithMassSpectrum邹世春凌镇浩单位：中山大学化学院分析化学研究所【摘要】论文总结了抗生素在环境中的存在，归宿及对环境的影响。应用固相萃取、液相色谱/串联质谱法（HPLC-MS-MS）同时分析了黄河水体中几种重要抗生素的含量。总的结果表明，喹诺酮类抗生素的含量最高，其次是磺胺甲恶唑类和大环内酯类药物。这可能与这些抗生素的使用量有关，在邻近人口较集中的城镇的黄河中下游一带都有较高含量分布。与其它国家的研究相比，喹诺酮类与大环内酯类类药物甚至达到该国家污水厂的含量水平，也高于珠江广州河段抗生素含量水平。关键词：固相萃取，液相色谱/串联质谱，抗生素人们日常生活中大量接触的药物与个人护理品(PharmaceuticalsandPersonalCareProducts，简称PPCPs)的使用及其对环境生态的影响，多年来一直被忽视，直到1990年代后期才开始得到关注。PPCPs对环境中生物的影响较之其它类别有机污染物更为显著，更易产生生物累积。但在我国，相关研究并没得到足够的重视，我国是滥用药物，尤其是滥用抗生素类药物最为严重的国家之一。因此，加强对PPCPs环境污染研究，应属当务之急。本文总结了抗生素在黄河流域水体中的存在及其环境意义。1．实验部分1.1仪器与设备Agilent1100高效液相色谱仪和ABI/SCIEXAPI4000MS/MS液质联用仪；OasisHLB柱(Waters,6mL/500mg)；快速混匀器(QL2901江苏麒麟医用仪器厂)，真空泵,沙芯漏斗及过滤膜(0145μm)等。1.2试剂与标准溶液甲醇为色谱纯(Sigma公司)，其它试剂未做说明均为优级纯；红霉素、罗红霉素标样(99%，Sigma公司)；7种抗生素标样(氧氟沙星、诺氟沙星、罗红霉素、红霉素、磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑，含量>99％,sigma公司)；13C3-咖啡因溶液(1mg/mL，CambridgeIsotopeLabs，USA)1.3实验方法1.3.1采样沿着黄河东流，途经三门峡，洛阳，开封，荷泽等城市，一直到达东平湖。采样时间为2006年5月。采样图如图Ⅰ。分离富集步骤水样经静置后,将上层清液通过0.45µm的滤膜真空抽滤,除去悬浮物。取1L水样并往其加入100µL，1µg/mL13C3-咖啡因后倾入预先分别经3mL甲醇和超纯水淋洗过的HLB固相萃取柱,开启真空泵,控制流速约为15mL/min。完成过柱后,以6mL甲醇淋洗,洗脱液收集于10mL具塞离心管中。在室温下用N2吹扫至近干,甲醇-水(60∶40)定容至1mL,待测。1.3.3测量条件色谱条件:色谱柱：ODS-P(4.6mm´250mm，DIKMA)；进样量：20µL；流动相:乙腈(A)和0.2%甲酸溶液(B)；流速：0.4mL·min-1；梯度淋洗程序：40%A(0-8)min，然后在2min内将A相线性增加至60%并保持15min，随后在5min内降低A相至40%并保持5min。悦质谱牲条件眉:玻离子砌源为掠ES类I惧；败离子傍源龄Ⅰ(化GS于1宗)筐和怖Ⅱ语(G澡S2缺)爹的气两体流钞速分梨别为巾20洗和丝40过m斜L自/m再in亚，聋碰撞恐气和块气帘蔑气流洁速分弱别为害6肯和眠15证mL抄/阔mi瘦n腹,赖气体观均为肆N犯2歪；肚辅助卖加热尖气温勺度鸣,逝45天0声℃句；答电离弟电压惩,膛5设50寇0绳V障。慈去簇境电压伐(搁de牢cl顶us用te检ri幕ng揪p元ot紧en瞧ti唯al榴,营DP封)圣、碰沫撞能塔(行co那ll务is痛io护n药en句er浴gy拴,收C怜E搭)纱及阔3染种抗志生素俭的其悠它相伸关质发谱条刮件见糠表被Ⅰ磨。刺检测投方式辞为多苹反应只选择得监测侄(诊MR划M坝)挺离子终模式灰。嚼图始Ⅰ求参黄河床及其壮流域锯水样侄采集辟位置称略图冷表早Ⅰ患抗哭生素脾的相盼关质置谱条急件衔抗生郑素鸡去簇奶电压杠/碰衫撞能讨分子酱离子渐/碎贝片离剥子原抗生顽素之去簇菜电压笛/碰扁撞能慨分子敢离子扮/碎武片离辽子响氧氟色沙星象13点0/阿24醋36熔2/筒31牧8头磺胺索嘧啶专70环/4讨0鱼25乔0.灵9/盗92笑.2油诺氟矮沙星陡12警0/逐25这32受0/革30毙2赖磺胺躬二甲侦嘧啶络75难/2衣5际27恭9.旁1/僚18精6.祝1锈罗红抗霉素砖12庭0/寨54筑83床7.卡1/萄15苏8.贱2组磺胺鄙甲痛噁优唑寄68钩/2桂6取25绞3.活9/戴15床6.愚1寄红霉艰素(赚脱水得)锐12捧0/贵25涉71晓6.宰1/生55挽8.润3萝13均C永3禾咖啡映因鹅80印/2级5挖19僻8.臣1/赌14虏0.野1遍2．猾结果忍与讨销论革2.伙1抗揉生素结在黄渗河流构域的旁存在添与分唯布属黄河诱水样彻分析栏结果输（剃ng惰/L连），脏具体异采样援位见左图贼Ⅰ贤所示香。各吃采样秤点抗适生素睛含量胀如表腾Ⅱ勉。晌结果怠显示昨不同钞位置宝的河你流的村抗生屯素的蓬含量孩和种诉类有池所不调同。扒表跳Ⅱ槽各抗惨生素杏沿着讯黄河判东流到而下街在黄兔河流女域的摧含量验分布清(狂ng色/L萄)拣样品尾编号喜及采多样点园磺胺接类恢氟喹喇诺酮造类抄大环虹内酯计类休磺胺览甲恶庙唑粘氧氟框沙星曾诺氟扶沙星绸红霉朗素（门脱水鲜）良罗红队霉素捏1已风陵疯渡大轻桥取途--臭--怨--杏4饿--镜2博三门系峡水筹库味--仆--验--既13为--涉3般小浪锐底水昨库粒圾--秤82逐74止10灵2驻95扎4旱孟津口大桥独畅--葬37仪46朝--颜16滋5仿洛阳虚石化搬总厂驾犹--努56杨12燕8畏56躲53拣6累杨沟边村杯集3窗26亲4触16碰4镇--止--渐7中首阳蜂山电老厂(遗孟津蚂东良抵村)俱--壶56蕉--桂--煤--舰--殖8瓶高崖搂寨签彼--资11堡1释15固2早--外18弄9蜻龙门诊公路府大桥渡--精79块--催--巾--甜10帜伊护洛河浇汇合庙口饲53免--芽--秘66满--央11洒首毒阳山滴电厂终--跨11爪4钟32勾7轧77担66辆12杯河信南化陪工厂领--奶12晋0椒23浓6凉--彩--轧13冶伊陡洛河贤神北严村捡勺霞--祖--怪--渠36赚64概14宵黄纪河1找--拜48靠10仰6矮23章66假15职黄筐河2屯23窄12鼠2税12螺7伐24基89找16私黄道河3妹--搬12影0香15旦0殊39篮24誉17炮汜皇水膀68过12挽9什--献--物62随18脾汜凭水黄射河糟56舅12收3顶17食2朗--倡--肿19各东失平滩彩--摘--被--蹦76极91泳20明沁缝河谈--图--障--束56闲38弹21南沁紫河黄棉河倦17场--拴--洲10玩31扭22俭花巾园口劳--斩12世8善14弹7餐--微--子23亦开劣封大坡桥碧--锅11列5凡16醉8扰--眼--移24闪濮蔽阳东密明公瑞路大查桥碎--籍20障9猫24箱2编--泼--亿25慨金下堤河堤(贾会海桥辟)消11窜--备--也28缝42袄26期金钱堤河迈黄河候--危11筒6抱30终0铅--退--临平均烘值青38皱11颜.7赠16嗽9.遥3桌43管.6搭53良.9永中值帽11物5.剪5士15召2打5概7.绒5湿36听从比诊较黄幅河与涂珠江鼠广州钥河段郊(洪叹季)钢中抗衔生素惑的平篇均含星量可豆知(腐如图惭Ⅱ眠)，技不同奸地区诸含有方抗生究素的己总类借与数筹量差屈别较镰大，闹这与朗地区落的经把济种获类和青人口踏密度己有关仰。盖图除Ⅱ捞黄计河与覆珠江茎广州欢河段叙(洪殊季)酿河水状中几归典型选抗生槽素的出浓度烂水平夏比较府黄河程水中短含有栽氟喹期诺酮撑类药梁物的抽量远强高于则珠江壤广州仗河段载该类痒抗生垫素的妙量，咏而在播大环亏内酯惹类药酿物，阳磺胺合甲恶毯唑方夸面，绳两者传的平认均含间量相走差不很多。趴表明扇黄河娱水中谢氟喹班诺酮迁类药矩物与瓶大环售内酯犯类药敬物的讯污染吧较严丧重，已应该铜给予期重视绘。字但从贵图伶Ⅲ祥可看营出，趴黄河步中的迫抗生德素的队含量详与珠课江河强段枯冬季的题含量炒相当杯，一它方面忘由于脉气候口和水复系的愧不同进，特调别珠削江处店于亚毒热带袄水系搅较黄迅河发问达，鲁而且滨在洪爸季众(叠5稀月分揪后)踩，珠贤江流捉域降涛水较其多，塌从而胁使河捕流中名抗生神素的遇含量加有所坛降低韵。此鸭外，厘冬、捉春季料节是兆感冒思等疾面病的驼多发烈季节蕉，抗透生素服的使岛用量心相对怪较大条，从皇而造如成春某季珠规江河庆水中记抗生览素类扔药物峡含量迫偏高吃。但旗从两善方面巨的比竿较可胁知在桐全国相不同锣河流规的含浸量其恳实都礼很高伯，从失下表页黄河砖水与币欧洲悠易北筛河的杆含量浑比较律可知寸，我恐国河究流抗鬼生素暑污染虏已相哗当严落重，严应当拢重视言。倒表律Ⅲ辟黄你河与逮易北军河抗历生素喂含量强河流竿氧氟握沙星者诺氟演沙星并红霉汽素诊罗红殖霉素疯磺胺明甲幅噁姜唑层黄河佩37睬-2职64宜46酷-3维24疏4-纸10仙2赌16袜-9富5及3-吼68练易北孔河款--渐--息30筒-7咬0营30尝-4宣0栽--贤图虽Ⅲ捡黄河汉与珠司江广寺州河编段过(枯副季)偶河水拐中几蓄典型摧抗生田素的烂浓度错水平横比较喝2.明2于氟喹顽诺酮霞类抗运生素纯的分躺布特刮征汪该类萌抗生墨素是持近十业多年芬来研妹究最柿多、辣用量甘较大残的一远类合俱成抗发菌药察，如盲氧氟冬沙星军和诺鹅氟沙情星纠等。炸图奉Ⅳ僻黄泡河水导中氟嫩诺酮酱类抗炒生素崖的含茫量分桶布厦氧氟造沙星察在其北中削18羡个采忧样地驼点都蹲有检猾出，悠含量鹅在饮37拥～较26孔4钢ng州/L忆之间限，诺玩氟沙封星在柳其中丝15救个采叨样点坏都有快检出狡，含胜量在泊46起～3拣24搬ng符/L脾之间矿，在熄所检意出的润抗生悬素中渔，该柄类抗纪生素确的含鸟量最社高，该其总弯体含袍量水化平明朽显高静于瑞激士河锣流中待同类经抗生判素，门甚至钓与该罚国污爆水处交理厂带的含巨量水食平相静当捎[添2司]欲。竟图发Ⅳ叠为各宽采样姐点诺恶氟沙案星和浆氧氟纯沙星往的含赌量分脸布。记可以均看出穴，这明两种饰氟糊喹诺香酮类象的最膜低含券量出碎现在剪位于棍小浪贺底水妨库下贯游的框孟津腹大桥考附近稍（船4捆#）晃，分萄别为核46盈ng侮/L渐和株37愧ng减/L秧。碧这可猴能是带因为梳小浪说底水眉库水缠体对尖抗生察素浓县度的幕稀释构作用锅引起科的。赤同样管，在拌首阳男山电哄厂(仆7蹦#)银、伊院洛河绕汇合蔑口(浩10缠#)改、伊司洛河绍神北薄村(确13盖#)陷、黄豆河亏1咬(狼14掉#)订、金膏堤河边-黄差河交冻汇报有处(哀26态#)复等几蓝个采氧样位刘置，架也由拿于河盼水的泛稀释吓作用蛮和黄辣河水择中泥苏沙的钳吸附窗作用私使氟耐喹诺疤酮类镰药物鼓的含网量有赢所降东低。洲在东很平滩赌(包19急#)应、沁鹊河(径20科#)呆两矮个采奖样点光，未知检测源出氟秒喹诺葵酮类顾药物装的存把在，占表明乡沁河列和新贴蟒河乔对黄挤河水变中氟爸喹诺涨酮类爱药物绪的含芦量影及响很工小。赞然而帅，在月濮阳泊东明正公路皮大桥和(塞24瞒#)耍、杨符沟村绵(沟6涛#)隙采样庄位置俯，因笔该地斧区人三口密旧度相急对较桂大，摄氧氟胜沙星莲的含变量很芳高(判20某9患ng鸭/L库,组26飞4深ng谈/L卷)，违表明戒在该把流域竹有大测量抗偷生素杰注入请黄河支。贯反观亩诺氟巩沙星差，其释最高味含量首出现球在首段阳山煎电厂苦点(锈11欲#)衡，表逢明氧高氟沙接星药走物在善该流镰域有股大量侨的使撑用。帖另外进在河竞南化读工厂寇(湿12扫#)朴、濮鸽阳东煮明公播路大框桥(添24巾#)壤、金砌堤河命黄河根(严26伪#洪)吧处诺摇氟沙碧星的若含量淡都较杀高，仆表明新在对鱼应流奴域氟懂喹诺女酮类王药物臣的使疤用较沙多。科通过妈上述缓分析蚁发现榆，知在黄称河中拢下游捉，该水类抗津生素营的含描量都娱较高握(怕有大臂量的帜生活蓝废水底和工紫业废异水)夕，如影杨沟碌村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