OLYMPUSI51倒置显微镜操作规程-厦门大学生物医学仪器共享平台

倒置荧光显微镜操作规程Olympus IX5厦门大学医学院中心试验室黄静茹202310月说明：①透射光主开关；②汞灯高压电源开关；③透射光光强把握钮；④滤色片架；XY/微调焦旋钮；⑨双目观看筒；⑩屈光度调整环；⑪聚光镜高度调整钮；⑫聚光镜对中旋钮；⑭⑮⑯〔SHUTTER；⑰荧光激发块转盘；⑱荧光减光阀一、开机1〔白光〕主开关①；21〔白光〕主开关①；2〔汞灯高压电源〕②；3、翻开电脑，进入cellSensStandard二、明场观看〔BrightFieldBF〕1、正确放置标本，BFHE2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；4、将光路选择杆⑤推动去〔选择目镜观看光路；4、将光路选择杆⑤推动去〔选择目镜观看光路；粗/细调焦旋钮⑧聚焦观看,依据需要调整瞳间距⑨和屈光度⑩；三、相衬观看〔PhasecontrastPH)1、正确放置标本，PH2、转动荧光激发块转盘⑰到“6”的位置；3、转动物镜转盘⑦，选用适宜的物镜；5、将光路选择杆⑤推动去〔选择目镜观看光路；4、转动聚光镜转盘⑮，使相衬光学元件与所用物镜相匹配〔5、将光路选择杆⑤推动去〔选择目镜观看光路；/细调焦旋钮⑧进展聚焦观看,依据需要调整瞳间距⑨和屈光度⑩。物镜4X10X、20X物镜4X10X、20X40X相差元件PHLPH1〔PHC〕PH2四、荧光观看1、假设需要，可先用明场观看对标本定位，再转入荧光观看；2BF至最低，将孔径光阑向右拨至最小；3、转动荧光激发块转盘⑰，依据所用的荧光染料选择匹配的荧光激发块；2：荧光激发块序号激发块名称放射光λ〔nm〕滤掉光λ〔nm〕1WU330-385420＜4002WB450-480515＜5003WG510-550590＜5704WBV400-440475＜4555WIY545-580610＜6006BF明场、相差5、将光路选择杆⑤推动去〔选择目镜观看光路；4⑯5、将光路选择杆⑤推动去〔选择目镜观看光路；/细调焦旋钮⑧聚焦观看，依据荧进入光路的荧光强度进入光路。五、CCD成像、cellSensStandard图像更清楚；4、背景校准：进展明场和相差成像时执行白平衡，荧光成像时执行黑平衡，在样品空白背景处画一个小区域，软件自动以该处为背景对整幅图像进展调整，使所选区域显示为白色或黑色；5、各成像参数设定完毕后，点击拍照，仪器自动成像；6、右键文档工具栏窗口或在文件处进展保存〔TIFJPG衡，在样品空白背景处画一个小区域，软件自动以该处为背景对整幅图像进展调整，使所选区域显示为白色或黑色；5、各成像参数设定完毕后，点击拍照，仪器自动成像；六、关机1、试验完毕，先退出工作站；2、将透射光光强调整钮③逆时针旋至最低，关闭透射光主开关〔TH4〕①；30.5h，方能关闭汞灯高压电源②；4、用无水乙醇擦拭镜头，并将物镜转盘转至空位，清理载物台及桌面；录数据：放入全光盘，将数据发送至光盘，电脑右下角消灭刻录提示，点击该提示进入，确认待刻录数据，点击“刻录到光盘” 刻录6、关电脑及显示器。七、图像处理1、标尺：在工具栏上选择正确的物镜倍数，点击“视图标尺，软件自动将标尺加在图像上，再点击“图像” 印入信息，保存即可。2、测量：点击“测量” 测量工具，软件左侧显示出测量工具栏，点击选择量结果可导出量结果可导出Excel：点击测量工具栏图标。3、图像叠加：翻开拟叠加的图“图像----组合彩色图像 “可用图像”中选择拟叠加的图----√合并层 确认。4、图像拼接：按确定挨次拍摄图像，相邻两张图像的边缘要局部重叠，4、图像拼接：按确定挨次拍摄图像，相邻两张图像的边缘要局部