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文档简介
细胞生物学自主实验人体外周血淋巴细胞培养与染色体组型分析
本文档共28页;当前第1页;编辑于星期二\5点24分一、实验目的1、了解动物细胞培养的方法。2、掌握人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备。3、熟悉人类染色体的镜下检查和核型分析方法。本文档共28页;当前第2页;编辑于星期二\5点24分二、实验原理外周血培养:是将外周血接种在适当的培养物中加入适量的秋水仙素,使纺锤体微管解聚,这样细胞停留在中期,可以获得大量的分裂细胞。用低渗盐溶液(一般是0.075mol/L的KCl)处理,使其中的红细胞及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去,最后以气干法制片,可获得较好的染色体装片。
本文档共28页;当前第3页;编辑于星期二\5点24分三、实验仪器试剂及材料:1、材料人的静脉外周血.(两小组内选取男女各一名,取血样)2、试剂RPMIl640培养液,小牛血清,肝素,PHA(植物血球凝集素),75%乙醇,秋水仙素,生理盐水,甲醇,Giemsa粉末,KCl溶液,NaHCO3,低渗液,NaCl,PHA,甲醇,甘油,肝素溶液,Carnoy固定液,磷酸缓冲液PH6.8,纯酒精,冰乙酸等本文档共28页;当前第4页;编辑于星期二\5点24分3、器材:
光学显微镜1台,离心机1台,恒温水浴箱1台,恒温箱1台,离心管8支,量筒2个,烧杯2只,培养瓶4个,载玻片8张,玻片架2台,枪头2支,移液枪3支,胶塞4个,标签纸1圈,碘酒和酒精棉球,酒精灯1台,分析天平1台,普通冰箱1台,染缸1个,染色架1个,镊子1个。正常人类染色体G带核型图,核型报告纸本文档共28页;当前第5页;编辑于星期二\5点24分1、实验所用药品及器皿的无菌处理。2、采血及接种培养。四、实验方法采取血样血细胞培养本文档共28页;当前第6页;编辑于星期二\5点24分3、制片预固定固定重复固定添加固定滴片收集细胞低渗处理染色镜检本文档共28页;当前第7页;编辑于星期二\5点24分五,实验结果本文档共28页;当前第8页;编辑于星期二\5点24分男生染色体本文档共28页;当前第9页;编辑于星期二\5点24分男生染色体本文档共28页;当前第10页;编辑于星期二\5点24分男生染色体本文档共28页;当前第11页;编辑于星期二\5点24分男生染色体本文档共28页;当前第12页;编辑于星期二\5点24分女生染色体本文档共28页;当前第13页;编辑于星期二\5点24分女生染色体本文档共28页;当前第14页;编辑于星期二\5点24分女生染色体本文档共28页;当前第15页;编辑于星期二\5点24分女生染色体本文档共28页;当前第16页;编辑于星期二\5点24分【参考文献】王金发,何炎明细胞生物学实验教程[M]北京科学出版社200904孔庆友,孙媛等人体外周血淋巴细胞培养和染色体标本制备实验的改进[J]大连医科大学学报2001,23(3)贾印峰单良鹏高素平等人体外周血淋巴细胞的培养与染色体标本制作方法的探讨[J]济宁医学院学报2000,23(3)蔡绍京.细胞生物学与医学遗传学实验指南.[M]上海:第二军医大出版社,200247_48本文档共28页;当前第17页;编辑于星期二\5点24分Thankyou!本文档共28页;当前第18页;编辑于星期二\5点24分返回本文档共28页;当前第19页;编辑于星期二\5点24分返回本文档共28页;当前第20页;编辑于星期二\5点24分返回本文档共28页;当前第21页;编辑于星期二\5点24分返回本文档共28页;当前第22页;编辑于星期二\5点24分返回本文档共28页;当前第23页;编辑于星期二\5点24分返回本文档共28页;当前第24页;编辑于星期二\5点24分返回本文档共28页;当前第25页;编辑于星期二\5点24分返回
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