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文档简介

实验二土壤中微生物的

分离与纯化

实验从土壤中稀释分离微生物一、实验目的：学习微生物稀释平板计数及划线分离技术二、实验原理采用适宜（选择）培养基和培养条件，或加入某种抑制剂有利于目标微生物的生长，从而分离获得目标微生物的纯培养：常用稀释平板分离法和划线分离法在固体培养基上形成单个菌落。分离细菌用牛肉膏培养基，分离放线菌用高氏培养基，分离真菌用马丁-孟加拉红培养基。依据一个单细胞在固体培养基上培养后可以长成一菌落从而推算样品中含有多少细菌或真菌的活菌数目土壤是微生物的大本营

从土壤中稀释分离微生物的方法如下：（一）土壤悬液制备准备1瓶土壤悬液：称10克土壤放入带玻璃珠的90ml瓶装无菌水中，手摇振荡(10-20min)，使土样分散。三、实验步骤：（二）倒固体琼脂培养基平板：分离细菌的同学取一瓶牛肉膏培养基（350ml／瓶）熔化后，凉至45-50度倒平板。（三）悬液稀释：方法见下图：（四）悬液涂布(演示):无菌操作(从稀至浓将菌液涂布均匀)采用10－3，10－4，10－5稀释液0.1ml涂布牛肉膏蛋白胨平板（演示）平板涂布简单易行，但易造成机械损伤Liquidspecimenisspreadonthesurfaceofsolidagarwithasterilebentglassrod.五、划线分离每人用剩下的1个平板做划线分离，从三角瓶中取土壤悬液作划线分离平皿互划线网分离友法（五诸）吹尼干将已塑涂布搜好的击平皿孔皿盖凭半揭衫开，之置于阵无菌愉台上及吹干沃。（六正）培眼养：待吹绑干后殖，将软平板红用报充纸包晓好（家每个个平板锻方向卸一致什），潮写上款班级虽和姓牢名，钥皿底件朝上尺，置追于培石养箱元培养(温度?)。（七头）检序查结沿果结果梅分析:1.计数收：牛厨肉膏贝平板秀取单带菌落同数目地在30～30替0个左量右的经稀释亭度来敞计数仆，马列丁氏亩平板欺取单抽菌落鉴数目五在10～10赤0个左屡右的胀稀释裹度来远计数2.我所蹲计数瓜的平句板稀义释度区是：单菌条落数腊目：、。3.计算贡：活患菌数似目/每克确土壤探＝（计浸算过核程）湖＝个/每克激土壤4.对你止和同从伴的由细菌虑及真输菌计脏数结墨果进秩行分犹析实验蹲要求做1个土裳样梯狮度分携离倒12个平己皿(其中6个用法于稀甲释涂朽布，6个用馅于划帮线)每组(5树-6人)试管岩斜面沈接种1.两支狠试管撕呈“V”字形2.拔下视试管躲塞3.火焰裁上微厦烧一虑周4.接种充环灼护烧、霞冷却5.接种、划俱线6.塞上猴塞子境，灼掘烧接失种环实验毫报告从土路壤中敲稀释就分离菠微生唱物的原理狼、方奥法、漆步骤汉。2．思拒考题(1密)为什糖么融遇化后章的培政养基所要冷群却至45她℃左右扯才能培倒平迅板?(2助)要使赏平板或菌落相计数浙准确减，需电要掌联握哪严几个萍关键?为什漂么?(3摄)当你满的平悄板上都长出敌的菌醉落不绸是均迁匀分栽散的浩而是座集中队在一忧起时甘，你蚂认为挣问题片出在范哪里?本次泡实验专课结评束请确

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