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文档简介

免疫细胞及其功能检验技术第二十三章免疫细胞及其功能检验技术办民卫生出版往本章要点1.单个核细胞和淋巴细胞及其亚群的分离纯化原理。2.T细胞及其亚群的表面标志和功能检测。3.B细胞功能检测的方法和原理。4.NK细胞的表面标志及其功能检测方法。5.中性粒细胞和巨噬细胞的功能检测。办民卫生出版往免疫细胞是指参与免疫应答或与免疫应答相关的细胞,主要包括淋巴细胞、单核巨噬细胞和树突状细胞等通过分离、纯化免疫细胞及其亚群,并对其数量和功能测定,可以判断机体免疫功能状态,对指导临床实践和科学研究具有重要意义。办民卫生出版往第一节免疫细胞的分离与纯化免疫细胞的分离方法很多,主要根据细胞表面标志、理化性状和细胞功能等特征应根据实验目的、所分离的目的细胞群种类、数量和纯度等要求选择分离方法。所用的方法应力求操作简便、尽量保持细胞活性兼顾细胞纯度和获得率。办民卫生出版往白细胞的分离(一)自然沉降法加抗凝血于试管中血浆室温或37℃中静置(30-60min)白细胞血小板分层红细胞结果示意图办民卫生出版往二)高分子聚合物沉降法抗凝血与等量3%明胶或6%右旋糖酐溶液混匀室温或37℃中静置(30~60min)优点:速度快、得率高不足:白细胞黏性增加分层结果与自然沉降法类似办民卫生出版往外周血单个核细胞的分离外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)主要是指淋巴细胞和单核细胞。PBMC是免疫学实验中最常用的细胞群PBMC也是T、B细胞分离纯化的细胞来源办民卫生出版往(一)Fico分离法操作流程:1,加入单个核细2加入稀释后的胞分离液新鲜抗凝血400×g离心15-3min血浆层淋巴细胞层分离液层注意:温度以20℃最适宜,红细胞层超过25℃影响细胞得率办民卫生出版社66、节制使快乐增加并使享受加强。——德谟克利特

67、今天应做的事没有做，明天再早也是耽误了。——裴斯泰洛齐

68、决定一个人的一生，以及整个命运的，只是一瞬之间。——歌德

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