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文档简介

改良(gǎiliáng)Lowry氏法测定蛋白质含量TheLowryMethodforProteinQuantitation第一页，共八页。精选课件目的与要求：掌握改良Lowry氏法测定蛋白质含量的原理及方法；了解标准曲线在物质定量测定(cèdìng)中的应用及绘图要点。第二页，共八页。精选课件实验原理：在碱性条件下蛋白质的肽键与Cu2+螯合，形成蛋白质-铜复合物。（双缩脲反应BiuretReaction）蛋白质分子中带有酚基的酪氨酸极易使酚试剂中的磷钼酸-磷钨酸还原，生成钼蓝-钨蓝蓝色化合物，蓝色深浅与蛋白质含量成正比。利用蓝色深浅与蛋白质浓度(nóngdù)成正比的关系可绘制标准曲线，测定样品中蛋白质含量。（还原反应）第三页，共八页。精选课件试剂(mL)试管号

012345测定管蛋白质标准溶液(0.20mg/ml)00.100.200.400.600.801生理盐水1.000.900.800.600.400.200试剂A0.900.900.900.900.900.900.90操作步骤第四页，共八页。精选课件混匀后置于37度水浴10分钟。冷却后各管加入试剂B0.1mL，室温(shìwēn)放置10分钟。各管接着加入试剂C3mL，立即混匀，置37度水浴10分钟。冷却后，以0号管为空白，在分光光度计上以波长650nm比色读取光密度值。第五页，共八页。精选课件结果与计算：

根据测定管光密度值查标准曲线，由标准曲线计算血清蛋白质含量，再按血清稀释(xīshì)倍数换算为g/L。第六页，共八页。精选课件注意事项：各管加酚试剂时必须快速，并立即摇匀，不应出现混浊。移液管使用前要看清楚刻度和是否写着快、吹，如有则需要用洗耳球吹出剩余液体(yètǐ)。减量法可有效减少误差。分光光度计使用前需预热，绝对调零和空白管调节透光度为100%。第七页，共八页。精选课件内容(nèiróng)总结改良Lowry氏法测定蛋白质含量。基因时代，为生命科学提供源动力。在碱性条件下蛋白质的肽键与Cu2+螯合，形成蛋白质-铜复合物。（双缩脲反应(fǎnyìng)BiuretReaction）。蛋白质分子中带有酚基的酪氨酸极易使酚试剂中的磷钼酸-磷钨酸还原，生成钼蓝-钨蓝蓝色化合物，蓝色深浅与蛋白质含

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