方法计划验证具体内容

优选文档优选文档PAGEPAGE17优选文档PAGE.考证内容：正确度、精巧度（包括重复性、中间精巧度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。一、正确度：是指用该方法测定的结果与真切值或参照值凑近的程度，一般以百分回收率表示。最少用9次测定结果进行谈论。二、精巧度：是指在规定的条件下，同一个均匀样品，经过多次取样测定所得结果之间的凑近程度。用误差、标准误差或相对标准误差表示。1、重复性：相同条件下，一个分析人员测定所得结果的精巧度称为重复性。最少9次。

2、中间精巧度：一个实验室，不相同时间不相同分析人员用不相同设施测定结果的精巧度。

3、重现性：不相同实验室，不相同分析人员测定结果的精巧度。分析方法被法定标准采用

应进行重现性试验。

三、专属性：指在其他成分可能存在的情况下，采用的方法能正确测定出被测物的特点，

用于复杂样品分析时相互搅乱的程度。鉴识反响、杂质检查、含量测定方法，圴应察看专属

性。

四、检测限：指试样中被测物能被检测出的最低量，不用然量。用百分数、ppm或ppb

表示。

五、定量限：指样品中被测物能被定量测定的最低量，测定结果应具必然的精巧度和准

确度。

六、线性：系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。

七、范围：能达到必然的精巧度、正确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度

或量的区间。

八、耐用性：指在必然的测定条件稍有变动时，测定结果不受影响的承受程度。

专业资料.

方法考证内容以下。

一、正确度

正确度系指用该方法测定的结果与真切值或参照值凑近的程度，一般用回收率（%）表示。

正确度应在规定的范围内测试。

1．含量测定方法的正确度

原料药可用已知纯度的比较品或样品进行测定，或用本法所得结果与已知正确度的另一

个方法测定的结果进行比较。

制剂可用含已知量被测物的各组分混淆物进行测定。如不能够获得制剂的全部组分，可向制剂

中加入已知量的被测物进行测定，或用本法所得结果与已知正确度的另一个方法测定结果进

专业资料.

行比较。

如该分析方法已经测试并求出了精巧度、线性和专属性，在正确度也可计算出来的情况

下，这一项可不用再做。

2．杂质定量测定的正确度

可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如不能够获得杂质或降解产物，可用本法

测定结果与另一成熟的方法进行比较，如药典标准方法或经过考证的方法。在不能够测得杂质

或降解产物的响应因子或对原料药的相对响应因子情况下，可用原料药的响应因子。应明确

表示单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（%）或面积比（%）。

3．数据要求

在规定范围内，最少用9个测定结果进行谈论，比方，设计3个不相同浓度，每个浓度

各分别制备3份供试品溶液，进行测定。应报告已知加入量的回收率（%），或测定结果平

均值与真切值之差及其相对标准误差或可信限。

（建议3：可否对所设定的浓度范围作出要求，如：该方法用于药品的含量测定，回收

率试验的样品浓度应设定于含量100％的±20％之间；用于溶出（释放）曲线察看时，回收

率试验的样品浓度应设定于全曲线范围的上、中、下部位。）

二、精巧度

精巧度系指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接

近程度。精巧度一般用误差、标准误差或相对标准误差表示。

在相同条件下，由一个分析人员测定所得结果的精巧度称为重复性；在同一个实验室，

不相同时间由不相同分析人员用不相同设施测定结果之间的精巧度，称为中间精巧度；在不相同实验

室由不相同分析人员测定结果之间的精巧度，称为重现性。

含量测定和杂质的定量测定应试虑方法的精巧度。

专业资料.

1．重复性

在规定范围内，最少用9个测定结果进行谈论，比方，设计3个不相同浓度，每个浓度

各分别制备3份供试溶液，进行测定。或100%的浓度水平，用最少测定6次的结果进行

谈论。

2．中间精巧度

为察看随机变动因素对精巧度的影响，应设计方案进行中间精巧度试验。变动因素为不

同日期、不相同分析人员、不相同设施。

3．重现性

当分析方法将被法定标准采用，应进行重现性试验，比方，成立药典分析方法时经过协

同查验得出重现性结果。共同查验的目的、过程和重现性结果均应记录在起草说明中。应注

意重现性试验用的样品自己的质量均匀性和储藏运输中的环境影响因素，免得影响重现性结

果。

4．数据要求

均应报告标准误差、相对标准误差和可信限。

三、专属性

专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的方法能正确

测定出被测物的特点。鉴识反响、杂质检查、含量测定方法均应察看其专属性。如方法不够

专属，应采用多个方法予以补充。

1．鉴识反响

应能与可能共存的物质或构造相像化合物划分。不含被测成分的样品，以及构造相像或

组分中的有关化合物，应均呈负反响（不呈正反响？）。

．含量测定和杂质测定

专业资料.

色谱法和其他分别方法，应附代表性图谱，以说明方法的专属性，并应注明诸成分在图

中的地址。色谱法中的分别度应符合要求。

在杂质可获得的情况下，关于含量测定，试样中可加入杂质或辅料，察看测定结果可否

受搅乱，并可与未加杂质或辅料的试样比较测定结果。关于杂质测定也可向试样中加入必然

量的杂质，察看杂质可否获得分别。

在杂质或降解产物不能够获得的情况下，可将含有杂质或降解产物的试样进行测定，与另

一个经考证了的或药典方法比较结果。用强光照射，高温，高湿，酸、碱水解或氧化的方法

进行加速损坏，以研究可能的降解产物和降解路子。含量测定方法应比对二法的结果，杂质

检查应比对检出的杂质个数，必要时可采用二极管阵列检测和质谱检测，进行峰纯度检查。

四、检测限

检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。药品的鉴识试验和杂质检查方法，均应

经过测试确定方法的检测限。常用的方法以下。

1．非仪器分析目视法

用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。

2．信噪比法

用于能显示基线噪声的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信

号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比为3∶1或2∶1时相

应浓度或注入仪器的量确定检测限。

3．数据要求

应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。

五、定量限

定量限系指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具必然正确度和精巧

专业资料.

度。杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定方法的定量限。

常用信噪比法确定定量限。一般以信噪比为10∶1时相应浓度或注入仪器的量确定定

量限。

六、线性

线性系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。

应在规定的范围内测定线性关系。可用一贮备液经精巧稀释，或分别精巧称样，制备一

系列供试样品的方法进行测定，最少制备5份供试样品。以测得的响应信号作为被测物浓

度的函数作图，察看可否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可经数

学变换，再进行线性回归计算。

数据要求：应列出回归方程、有关系数和线性图。

（建议4：“线性”、“范围”中，如测定方法用于溶出（释放）曲线察看时，可否规定样

品浓度的范围应涵盖整条曲线。）

七、范围

范围系指能达到必然精巧度、正确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。

范围应依照分析方法的详细应用和线性、正确度、精巧度结果和要求确定。原料药和制

剂含量测定，范围应为测试浓度的80%～120%；制剂含量均匀度检查，范围应为测试浓度

的70%～130%，依照剂型特点，如气雾剂、喷雾剂，范围可适合放宽；溶出度或释放度中

的溶出量测定，范围应为限度的±20%，如规定了限度范围，则应为下-20%限的至上限的

＋20%；杂质测定，研究时，范围应依照初步实测，制定为规定限度的±20%。若是含量测

定与杂质检查同时进行，用百分归一化法，则线性范围应为杂质规定限度的-20%至含量限

度（或上限）的＋20%。

八、耐用性

专业资料.

耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为把方法用于常

规查验供应依照。开始研究分析方法时就应试虑其耐用性。若是测试条件要求苛刻，则应在

方法中写明。典型的变动因素有：被测溶液的牢固性，样品的提取次数、时间等。液相色谱

法中典型的变动因素有：流动相的组成和pH值，不相同厂牌或不相同批号的同种类色谱柱，柱

温，流速等。气相色谱法变动因素有：不相同厂牌或批号的色谱柱、固定相，不相同种类的担体，

柱温，进样口和检测器温度等。

经试验，应说明小的变动可否经过设计的系统适用性试验，以保证方法有效。

附表查验项目和考证内容项目鉴识杂质测定含量测定及溶出量测定内容定量限度正确度－＋－＋精巧度－－－＋重复性－＋－＋中间精巧度－＋①－＋①专属性②＋＋＋＋检测限－－③＋－定量限－＋－－线性－＋－＋范围－＋－＋耐用性＋＋＋＋

专业资料.

①已有重现性考证，不需考证中间精巧度。

②如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。

③视详细情况予以考证。

床前明月光，疑是地上霜。

二、方法考证的详细内容

（一）正确度

正确度系指用该方法测定的结果与真切值或参照值凑近的程度，一般用回收率（%）

表示。正确度应在规定的范围内测试。用于定量测定的分析方法均需做正确度考证。

1.测定方法的正确度

可用已知纯度的比较品做加样回收测定，即于已知被测成分含量的供试品中再精巧加

入必然量的已知纯度的被测成分比较品，依法测定。用实测值与供试品中含被测成重量之差，

除以加入比较品量计算回收率。

回收率%=

式中：A为供试品所含被测成重量；

专业资料.

为加入比较品量；

为实测值。

在加样回收试验中，应注意比较品的加入量与供试品中被测成分含有量之和必定在标

准曲线线性范围之内；应注意加入比较品的时间（供试品预办理前）；比较品的加入量要适

当，过小则惹起较大的相对误差，过大则搅乱成分相对减少，真切性差。

2.数据要求

在规定范围内，取同一浓度的供试品，用6个测定结果进行谈论；或设计3个不相同浓

度，每个浓度分别制备3份供试品溶液进行测定，用9个测定结果进行谈论，一般中间浓

度加入量与所取供试品含量之比控制在1:1左右。应报告供试品取样量、供试品中含有量、

比较品加入量、测定结果和回收率(％)计算值，以及回收率(％)的相对标准误差（RSD％）

或可信限。

（二）精巧度

精巧度系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间

的凑近程度。精巧度一般用误差、标准误差或相对标准误差表示。

用于定量测定的分析方法均应察看方法的精巧度。精巧度包括重复性、中间精巧度和

重现性。

1.重复性

在相同操作条件下，由一个分析人员在较短的间隔时间内测定所得结果的精巧度称为

重复性。

在规定范围内，取同一浓度的供试品，用6个测定结果进行谈论；或设计3个不相同浓

度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液进行测定，用9个测定结果进行谈论。

2.中间精巧度

专业资料.

在同一个实验室，不相同时间由不相同分析人员用不相同设施测定结果之间的精巧度，称为

中间精巧度。

为察看随机变动因素对精巧度的影响，应进行中间精巧度试验。变动因素为不相同日期、

不相同分析人员、不相同设施等。

3.重现性

在不相同实验室由不相同分析人员测定结果之间的精巧度，称为重现性。

当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。比方，成立兽药典分析方法时

应经过不相同实验室的复核查验得出重现性结果，复核查验的目的、过程、重现性结果均应记

载在起草说明中。应注意重现性试验用的样品自己的质量均匀性和储藏运输中的环境影响因

素，免得影响重现性结果。

4.数据要求

均应报告标准误差、相对标准误差或可信限。

（三）专属性

1.意义与要求

专属性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能正确测定出药材、饮片、药材提取

物或制剂中被测成分的特点。鉴识、限量检查、含量测定等方法均应察看其专属性。如方法

不够专属，应采用其他方法予以补充。

2.鉴识试验

鉴识应能与可能共存的物质或构造相像化合物划分。不含被测成分的供试品，以及结

构相像或组分中的有关化合物，均不得搅乱测定。显微鉴识、色谱及光谱鉴识等应附相应的

代表性图像或图谱。

3.含量测定和限量检查

专业资料.

以不含被测成分的供试品(除掉含待测成分药材或不含待测成分的模拟复方)试验说明

方法的专属性。色谱法和其他分析方法，应附代表性图谱，并注明主成分在图中的地址，以

空白比较（除掉含待测成分药材或不含待测成分的模拟复方）试验说明方法的专属性。色谱

法中的分别度应符合要求，必要时可采用二极管阵列检测和质谱检测，对色谱峰进行定性检

查。

（四）检测限

检测限系指供试品中被测物能被检测出的最低量。确定检测限常用的方法以下。

1.直观法

用一系列已知浓度的供试品进行分析，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。

可用于非仪器分析方法，也可用于仪器分析方法。

2.信噪比法

仅适用于能显示基线噪音的分析方法，即把已知低浓度供试品测出的信号与空白样品

测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比为3∶1或2∶1

时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。

3.数据要求

应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。

（五）定量限

定量限系指供试品中被测成分能被定量测定的最低量，其测定结果应具必然正确度和

精巧度。用于限量检查的定量测定的分析方法均应确定定量限。

常用信噪比法确定定量限。一般以信噪比为10∶1时相应的浓度或注入仪器的量进行

确定。

（六）线性

专业资料.

线性系指在设计的范围内，测试结果与供试品中被测物浓度直接呈正比关系的程度。

应在规定的范围内测定线性关系。可用一贮备液经精巧稀释，或分别精巧称样，制备

一系列供试品的方法进行测定，最少制备5个浓度的供试品。以测得的响应信号作为被测

物浓度的函数作图，察看可否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可

经数学变换，再进行线性回归计算。

数据要求：应列出回归方程、有关系数和线性图。

（七）范围

范围系指能达到必然精巧度、正确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。

范围应依照分析方法的详细应用和线性、正确度、精巧度结果及要求确定。关于有毒

的、具特别功能或药理作用的成分，其范围应大于被限制含量的区间。溶出度或释放度中的

溶出量测定，范围应为限度的±20％。

（八）耐用性

耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为使方法用于

老例查验供应依照。开始研究分析方法时，就应试虑其耐用性。若是测试条件要求苛刻，则

应在方法中写明。典型的变动因素有：被测溶液的牢固性，样品提取次数、时间等。液相色

谱法中典型的变动因素有：流动相的组成比率或pH值，不相同厂牌或不相同批号的同种类色谱

柱，柱温，流速及检测波长等。气相色谱法变动因素有：不相同厂牌或批号的色谱柱、固定相，

不相同种类的担体，柱温，进样口和检测器温度等。薄层色谱的变动因素有：不相同厂牌的薄层

板，点样方式及薄层张开时温度及相对湿度的变化等。

经试验，应说明小的变动可否经过设计的系统适用性试验，以保证方法有效。

（九）系统适用性试验

专业资料.

对一些仪器分析方法，在进行方法考证时，有必要将分析设施、电子仪器与实验操作、

测试样品等一同看作完满的系统进行评估。系统适用性即是对整个系统进行评估的指标。系

统适用性试验参数的设置需依照被考证方法种类而定。

色谱方法对分析设施、电子仪器的依靠程度较高，因此全部色谱方法均应进行该指标

考证，并将系统适用性作为分析方法的组成部分。详细考证参数和方法参照《中国兽药典》

有关规定。

三、方法再考证

在某些情况下，如原药提取工艺改变、制剂处方或工艺改变、分析方法改变等，均有

必要对分析方法再次进行全面或部分指标的考证，以保证分析方法可靠，这一过程称为方法

再考证。再考证原则：依照改变的程度进行相应的再考证。

当原药提取工艺或制剂工艺发生改变时，含量测定方法的专属性就需要再进行考证，

以证明含量测定方法中发生的成分变化对主成份的测定无搅乱。

当制剂的处方组成改变、辅料改