血糖Glu的测定干扰预试验及实验

关于血糖Glu的测定干扰预试验及实验第1页，讲稿共10页，2023年5月2日，星期三一、干扰原理干扰试验用于测定某物质加到样品中产生的系统误差。干扰物浓度一定时，产生的误差是恒定系统误差，误差的实际大小随干扰物的浓度而变化。干扰试验即用于检验某方法的特异性，也用于检测干扰物质对方法的干扰作用，以评价分析方法的准确性。第2页，讲稿共10页，2023年5月2日，星期三β-D-葡萄糖+O2+H2OGODD-葡萄糖酸+H2O2

（GOD：葡萄糖氧化酶）H2O2+4-AAP+酚POD2H2+红色醌类化合物

（4-AAP：4氨基氨替比林）（POD：过氧化物酶）第3页，讲稿共10页，2023年5月2日，星期三当干扰物的浓度达到一定量时，将对相应的实验产生干扰，由于vitC、尿酸等物质对血糖测定GOD-POD法具有干扰作用，本实验选用vitC做GOD-POD法测血糖的干扰试验，vitC与GOD反应生成的H2O2发生反应，使部分H2O2不能参与第二步POD的偶联反应，从而降低显色强度，产生负的测定误差。第4页，讲稿共10页，2023年5月2日，星期三二、样品制备

干扰样品血清30mmol/LVitC标准液生理盐水基础血清（ml）0.09-0.01样品Ⅰ(ml)0.090.01-样品Ⅱ(ml)0.090.0070.003样品Ⅲ（ml）0.090.0050.005第5页，讲稿共10页，2023年5月2日，星期三三、测定方法

1、加样

2、分光光度计测定方法：波长505nm，以空白管调零，测定标准管和各样品管吸光度值，按公式计算测定结果。

试剂校准（S）空白（B）基础样品干扰管123

校准液（ml）

0.02—————样品（ml）

——————蒸馏水（ml）

—0.02————基础样品（ml）

——0.02———干扰样品1（ml）

———0.02——干扰样品2（ml）

————0.02—干扰样品3（ml）

—————0.02工作试剂（ml）

2.02.02.02.02.02.0

各管充分混匀置37水浴10分钟后室温冷却。第6页，讲稿共10页，2023年5月2日，星期三四、计算与数据处理⑴计算公式：Glu含量（mmol/L）=×Cs

其中：Cs=5.55mmol/L干扰物加入量=

干扰物浓度：30mmol/L

干扰值（mmol/L）=干扰样品测定值-基础样品测定值干扰率（%）=干扰值/基础值×100⑵干扰试验的数据处理:

样品GLU测得值（mmol/L）加入US值（mmol/L）干扰值（mmol/L）干扰率（%）基础样品（ml）———干扰样品1（ml）干扰样品2（ml）干扰样品3（ml）

第7页，讲稿共10页，2023年5月2日，星期三五、参考区间干扰值即偏差，当偏差<允许误差，则表明干扰物引起的偏差不会影响测定结果的临床应用价值。对于血糖测定而言，当干扰物引起的偏差小于1/4TEa[CLIA88（临床实验室修正法规1988）能力对比试验的质量要求规定，血糖的TEa为0.33mmol/L或10%]，则不会影响测定结果的临床应用价值，可以近似地认为当干扰物浓度低于该浓度时不会对血糖测定产生影响。第8页，讲稿共10页，2023年5月2日，星期三六、评价与思考当干扰物引起的偏差小于1/4TEa时，则不会影响测定结果的临床应用价值，可近似地认为当干扰物浓度低