2019-2020年生物选修一第1章 微生物技术北师大版习题五十

2019-2020年生物选修一第1章微生物技术北师大版习题精选五十

第1题【单选题】

培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（）

①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法

A、⑤③②①④⑥

B、①②③④⑤⑥

C、⑥②③④①⑤

D、③④②①⑥⑤

【答案】：

A

【解析】：

【解答】解：①实际操作者的双手用化学药剂进行消毒,用酒精擦麻手；②®种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；

③培养皿能耐高温，需用干热灭菌；

皈气可用紫外崩毒；

⑤培养基用高压蒸汽灭菌；

⑥巴氏消毒法用于牛奶及其制品的消毒,不会破坏其营养成分.

嵋：A.

【分析】无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工

具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌.

第2题【单选题】

植物的组织培养与微生物培养的相同之处是（）

A、都需要配制培养基并灭菌

B、前者培养基中需多种矿质营养，后者不需要

C、培养基中都需要加入有机物

D、都需要在相同的温度条件下培养

【答案】：

A

【解析】：

【薛答】解：A、植物的组织培养与微生物培养，都需要配制培养基并灭前,A正确；

B、植物的组织培养与微生物培养，都需要种矿质营养，B错误；

&植物的组织培养需要加入有机物,而微生物培养的培养基根据培养微生物的不同，有些需要加入有机物，有些不需要，C错

误；

D、微生物培养的不同阶段所需的温度条件不同，D错误.

婕：A.

【分析】组织培养常用的MS培养基含大量元素、微量元蓑有机物,有机勃包括甘氨酸、维生素Bi、维生素B戒烟酸肌

醇、蔗糖、琼脂等，还需要添加植物生长素、细胞分裂素等植物生长调节物质，微生物培养基不含有植物激素.MS培养基含氨

基酸,如甘氨酸,含碳源,如蔗糖,含维生素Bi和维生素B6；微生物培养基中并不是所有氨基酸都含有，有些微生物在生长发

育过程中可自行合成所需氨基酸，可以加；有些微生物合成能力有限，氨基酸可多加.

>第3题【单选题】

细菌培养基的配制中，培养基在计量、溶化后，首先要做的步骤是（）

A、调整pH

B、分装

C、灭菌

D、搁置斜面

【答案】：

A

【解析】：

【解答】细菌培养基的配制中，培养基在计量、溶化后，首先要做的步骤是调整pH,然后依次是分装、灭菌、搁置斜面，所以

选A.【分析】本题考查培养基配制的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力.

>第4题【单选题】

黑茶是以肉食为主的中国边疆游牧民族的主要饮品。在一系列微生物的作用下，黑茶会产生一种对人

体非常有益的金黄色颗粒“金花”。研究人员对"金花”中的微生物进行了分离和鉴定，过程如图。下列说法

不正确的是（）

A、向"金花”样品中加入蒸储水制成样品悬液

B、可根据菌落特征对菌种进行初步鉴定

C、涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化

D、可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定

【答案】：

A

【解析】：

【解答】向"金花”样品中加入无菌水制成样品悬液，A符合题意；可根据菌落特征对苗种进行初步鉴定，B不符合题意；涂布

平板上长出的菌落可通过划线进f纯化,C不符合题意;可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定,D不符合题意.

故答案为：A

【分析】两种纯化微生物方法的比较

优点缺点澧用范工

WT或姿若落号工，亟用于

平唳电致法不能上数

好象营

吸玄量较少，装嶷

可以沪戮，可以成察土三二二七

帘样冷有平根注薄，二烷K二燃效

理落将在美三三弱宅

奏不：二.太昌夏襄

第5题【单选题】

下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是（）

A、应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基pH

B、实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触

C、待培养基冷却至室温后，在酒精灯火焰附近倒平板

D、使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃

【答案】：

C

【解析】：

【解答】解：A、应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基pH,A正确；B、实验操作时应避免已灭菌处理的材

料用具与周围物品接触,以防止杂菌污染，B正确；

C、待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，冷却到室温时培养基吸凝固，C错误;

D、邮过的培养行高百的菌ftbSS再丢弃,以防T菌污,D正确.

Sd®:C.

【分析】1、培养基的概念、种类及营养构成（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的昔

「液体培养基：配制成的液体状态的基质

入凝固剂，如琼脂）

固体「概念：配制成的固体状态的基质

养基质.（3）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无

（2）种类1培养I用途：实蛉室中最常用的培养基

基I之一。微生物在上面生长

,I可形成肉眼可见的菌落。

机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求.2、无菌技术的主要内容①对实验操作的空间、操作者

的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的

污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触.

第6题【单选题】

下列关于微生物接种操作中正确的是（）

A、将涂布器放在火焰上灼烧，直到烧红

B、将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，画三至五条平行线即可

C、在分解尿素的细菌的分离与计数的实验中，涂布平板的所有操作都应在酒精灯火焰附近进行

D、打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞

【答案】：

D

【解析】：

【解答】解：A、将涂布器先放入酒精中;肖毒,将沾有酒精的涂布器放在酒精灯火焰上引燃并放凉,即可涂布接种,A错误;

B、左钠持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处糊蝌环迅速伸入平板内，划三至五条平行线,盖上皿盖,接种环不

应划破培养基表面，B正确；

C、在分解尿素的细菌的分离与计数的实验中，涂布平板的所有操作都应在酒精灯火焰附近进行，C正确；

D、在崛灯火焰旁打开含有菌种的试管棉塞，并将试管口过火焰,将以冷却的接种环伸入菌液，沾取f菌液，将试管口过

火焰并塞上棉塞，D错误.

婕：D.

【分析】微生物接种的关键是无菌操作，金属接种工具通常用灼烧灭菌，培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌.接种时在酒精灯火焰

旁打开含有菌种的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰并塞上棉塞.

左手斜持琼脂平板，皿盖打舟盖缝,右手于火焰近处耨接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线,盖上皿盖,接种环不应

划破培养基表面.所有的接种操作都需要在酒精灯火焰附近进行.

第7题【单选题】

图甲表示酵母菌的细胞结构，图乙表示血细胞计数板一个中方格的实验结果。下列说法中，正确的是

小格

中恪（双线边）

解母细胭

A、图甲中酵母菌可产生C02的场所是②、③，产生酒精的场所是③

B、酵母菌无氧呼吸的终产物需要经过自由扩散和协助扩散才能转运到细胞外

C、图乙中利用标志重捕法调查该中格中有酵母菌23个

D、计数操作时，应先往计数室滴1mL培养液，盖上盖坡片后再镜检

【答案】：

A

【解析】：

【分析】从题目中可知是酵母菌的结构图,酵母蕾是真核细胞，具有缝体，是有氧呼吸的主要场所，但酵母菌也能进行无氧

呼吸，其发生的场所是细胞质基质,所以能产生C02的场所有细胞质基质和稣体基质,②指的是绕体，③指的是细胞质基

质，产物有酒精说明是无氧呼吸，其产生场所是③；酵母菌无氧呼吸的终产物是酒精和82均通过自由扩散跨膜运输的；图乙

使用血球板计数来计算细胞数目，计数操作时，应先盖上盖坡片后滴培养液再镜检.

第8题【单选题】

下列有关高压蒸汽灭菌叙述，错误的是（）

A、果酒与果醋的原料不需要进行高压蒸汽灭菌

B、用于微生物培养的培养皿必须高压蒸汽灭菌

C、用于植物组织培养的培养基必须高压蒸汽灭菌

D、用于分离微生物的土壤样品必须高压蒸汽灭菌

【答案】：

D

【解析】：

【解答】解：A、果酒和果醋的制作使用的是传统发酵技术，原料不需要进行高压蒸汽灭菌法灭菌，A正确；

B、用于微生物培养的培养皿需要进行高压蒸汽灭菌法灭菌，B正确；

&植物组织培养的培养基必须高压蒸汽灭菌以防杂菌污染，C正确；

D、分离微生物的土壤样品是实验材料,不能进行高压蒸汽灭菌，D错误.

叫：D.

【分析】灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽抱和抱子，达到完全无菌的过程,灭菌的方法主要有

灼烧灭菌、干然灭菌和高压蒸汽灭菌.灼烧灭菌适合于接种工具的灭菌，一般来说是在操作过程中金属类的接种工具.干热灭

菌适合于玻璃器皿、金属工具的灭菌.高压蒸汽灭苗适合于玻璃器皿、接种工具以及培养基.特别注意培养基的灭菌只能用高

压蒸汽灭菌，

第9题【单选题】

A①

、

B②

、

c③

、①

D

、

【答案】：

A

【解析】：

【解答】解：想要分离出联苯降解菌，就要使用以多聚联率为唯一碳源的培养基，在此培养基上，不能降解多聚联率的细菌无

法存活.①培养基中只有多聚联聿一种碳源，②培养基中不含多聚联率,③培养基中的碳源包括多聚联率和淀粉，因此，①培

养基能有效分离多聚联苯降解菌.故选：A.

【分析】培养段功能分：

制备方法特征用途

嵯培养基中加根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗加入青毒素分离得到酵母菌和

培养入某种化学性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提毒菌

基成分高该菌的筛选率

朝加入某种试依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药鉴别和区分菌落相似的微生

培养制或化学药品反应,产生明显的特征变化而设计物，如伊红和美蓝培养基可以

基品鉴^大肠杆菌

>第10题【单选题】

A、此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的菌种

B、此培养基因原料来源广泛，可用于工业生产

C、此培养基可以用来筛选自生固氮菌

D、此培养基中含有微生物所必需的五类营养要素

【答案】：

A

【解析】：

【解答】解:A、由于此培养基只含有纤维素为唯一的碳源，故此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的箴*,A正确；B、此培

养基为固体培养基,不适用于&k生产，B错误；

C、筛选自生固露菌不能添加N源，C错误；

D、此培养基中含有C源、N源、水、无机盐4类营养要素,D错误.

幽：A.

【分析】从土壤中分离微生物的一般步骤是:土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株.从土壤中筛选纤维素分

解菌应该表为*弼的养基，用刚果进行台.触素分解菌培养液中的如素酶产量需要进行发

酵产2推春酶分解的^2向定.睛发酵邮的吐物的母菌.

>第11题【填空题】

美国科学家发现了一种能将溶解在水中的铀还原成难以溶解的铀的地杆菌，可缩小铀污染的范围，而

其他的细菌则不能在含铀的环境中生存.科学家为了研究这种地杆菌的生理特性，需对其进行分离和培

养.请回答：

(1)培养基中一般含细菌生长所需的水、无机盐、等.制备培养基时常用的灭菌方法是

灭菌.接种时使用的接种环灭菌方法是灭菌.

(2)为分离出能够还原铀的地杆菌，可在培养基中加入,从用途上看，这种培养基称为

培养基.

(3)对地杆菌计数时，常采用的方法是法.在稀释倍数为10八6倍下涂布了三个平板(每次取

0.1mL),统计菌落数分别为240、250、260,则稀释前1mL菌液中所含细菌为个.

（4）获取地杆菌后如要临时保存，可将其接种在培养基上，等长成菌落后放在4＜的冰箱中

保存.

【答案】：

【第1空】碳源和限源

【第2空】高压蒸汽

【第3空】标

【第4空】含铀化管物

【第5空】邮

【第健】稀释涂布平板法

【第7空】2,5x109

【第8空】斜面固体

【解析】：

【解答】（1）微生物培养基的成分有水、无机盐、碳源、氮源等.实险室常用灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌等，培养基

灭菌用高压蒸汽灭菌，接种环等金属用具用灼烧灭菌.

（2）在微生物学中，将允许特定级的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基.由题意可

知，有些微生物不能在含铀的环境中生存，可以在培养基中加入含铀化合物进行筛选.

（3）细菌计数可以用稀释涂布平板法接种后统计前骨,再计算细菌数.三个平板平均每个有24升2：叶26°=250个菌落,

贝懈释前1ml菌液中所含细菌为250x10x106=2.5*1（）9（个）.

（4）菌种I临时保存可以用斜面固体培养基，放入温度为4℃冰箱中.

【分析】微生物的营养物质主要包括碳源、题源、水和无机盐等.常用灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌等.筛选与分离微

生物需要使用选择培养基.稀释涂布平板法可以用来进行微生物的接种与计数.菌种的百方法主要有固体斜面保藏法和甘油

管藏法.

＞第12题【解答题】

如图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上成活）和小鼠骨髓瘤细胞（具分裂能力、

不能在HAT培养基上存活）进行人类基因定位的操作示意图,请回答:

©

促融剂

骨髓他茂导融合

乌本甘杂交细照A

人婕獭机丢失您

・方就立面而某交细胞B

成纤维

阳胞

杂交细烟C

图示技术名称为，该技术的基础是技术.

A\u52a8\u7269\u7ec6\u80de\u878d\u5408

B\u52a8\u7269\u7ec6\u80de\u57f9\u517b

【第1空】动物细胞融合

【第2空】动物细胞培养

操作所用的成纤维细胞应在代以内；该过程中区别于原生质体融合的方法是用处理.

A、10

B\u706d\u6d3b\u75c5\116bd2

【第1空】10

【第2空】灭活病毒

HAT培养基属于选择培养基，其中需要加入等天然物质.为防止培养过程中的污染还要在培养

液中添加一定量的,图示操作中加入乌本昔的目的.

A\u8840\u6d46\uff08\u8840\u6e05\uff09

B\u6297\u751f\u7d20

C\u9664\u53bb\u6210\u7ea4\u7ef4\u7ec6\u80de

【第1空】血浆（血清）

【第2空】抗生素

【第3空】除去幅维细胞

【答案】：

【解析】：

【解答】解：（1）图示表示骨髓瘤细胞与成纤维细胞的融合过程，需要采用动物细胞融合技术，该技术的基础是动物细胞培养

技术.（2）操作所用的成纤维细胞应在1吮以内，10ft以内的细胞能保持正常的二倍体核型；可以采用物理（离心、振

动）、化学（PEG）、生物诱导（灭活的病毒）融合方法，其中区别于原生质体融合的方法是生物法，即用灭活的病毒处理.

（3）9细联养时,会在培养基中加（血清）等质；为防止培养女中筋亏共一养液中添加一^*»抗

生素.培养基中会出现3中融合细胞，成纤维细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合和杂交瘤细胞，为了除去成纤维细胞，则需要

在培养基中加入乌本昔.故答案为：（1）动物细胞融合动物细胞培养（2）10灭活病毒（3）血浆（血清）抗生素除

去成纤维细胞

【分析】分析题图:图示表示骨髓瘤细胞与成纤维细胞的融合过程，该技术的基础是动物细胞培养技术.原生质体融合指通过

人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程.据此解答.

＞第13题【解答题】

利用紫外线诱变选育高产B-胡萝卜素的三袍布拉霉负菌（单细胞真菌），未突变菌不能在含有浓度

为10八-八5M的P-紫罗酮的培养基上生长.菌体随P-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色.图甲为

选育及提取获得P-胡萝卜素流程.

图甲同乙

三刑布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是

A\u6838\u7cd6\u4f53

【第1空】磔轴

培养基中的葡萄糖为菌体生长提供:为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加.

A\u78b3\u6e90\uff08\u78b3\u6e90\u548c\u80fd\u6e90\uff09

B10A\ufe63<Vsup>A5<Vsup>M\u7684\u03b2\u2501\u7d2b\u7f57\u916e

【第1空】碳源（碳源和能源）

【第2空】10-5M的B■喋罗酮

进行③过程时，应选取______色的菌落接种至液体培养基.为筛选纯化B-胡萝卜素产量高的菌种，

采取重复（填图甲中数字）过程.

A\u6a59\u7ea2

B\u2462\u2463

【第1空】

【第2空】@@

固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示.该同学的接种方法是:只有少数

菌能生长形成菌落的根本原因是.

A\u7a00\u91ca\u6d82\u5e03\u5e73\u677f\u6cd5

B\u57fa\u56e0\u7a81\u53d8\u9891\u7387\u4f4e\u548c\u4e0d\u5b9a\u5411\u6027

【第1空】稀释涂布平橱去

【第2空】基因突变顷率低和不定向性

过程⑥是,用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能

是萃取时，萃取剂使用量______,提取的色素少.

A\u6d53\u7f29

B\u8fc7\u5cll

【第1空】秘

【第2空】砂

【答案】：

【解析】：

【解答】解：（1）三抱布拉毒负菌为真核细胞，细菌为原核细胞，它们共同具有的细胞器是核糖体.（2）培养基中的葡萄糖

为菌体生长提供碳源（碳源和能源）；由于未突变菌不能在含有浓度为10-5M的0-紫罗酮的培养基上生长，所以为选出高产突

变前种，还应在培养基中添加10-5乂的伊嘴罗酮.（3）菌体随0-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，所以进行③过程

时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基.为筛选纯化BF萝卜素产量高的菌种,采取重复③④过程.（4）固体平板培养

基经过程②蝴培养后的菌落分布如图乙所示，所以该同学的接种方法是稀释涂布平板法；只有少数菌能生长形成菌落的根本

原因是基因突变频率低*0不定向性.（5）过程⑥是浓缩，用纸层析法i鉴定提取的胡萝卜素粗品,结果发现颜色较浅，导致该现

象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量过少，提取的色素少.故答衰为：（1）核糖体（2）碳源（碳源和能源）10-5M的

罗酮（3）橙红③@（4）稀释涂布平板法基因突变频率彳咖不定向性（5）浓缩过少

【分析】阅读题干可知，本题是利用紫外线诱变选育高产伊湖萝卜素的三抱布拉毒负菌菌种的分离和培养过程，根据选项涉及

的具体内容回腕粉析判健项.

>第14题【实验探究题】

根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？（能/不能），原因是

A\u4e0d\u80fd

B\u57f9\u517b\u57fa\u542b\u86cb\u767d\u80e8\uff0c\u5c3f\u7d20\u4e0d\u662f\u552f\u4e00\u6c2e\u6

e90\uff0c\u4e0d\u80fd\u9009\u62e9\u51fa\u53ea\u4ee5\u5c3f\u7d20\u4e3a\u6c2e\u6e90\u7684\u5fae\u75

1AU7269

【第1空】不能

【第2空】培养基含蛋白豚f尿素不是唯一氮源，不能百出只以尿素为氮源的微生物

要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体

积，统计平板上的就能大约推测出样品中活菌数.

A\u7a00\u91ca\u6d82\u5e03\u5e73\u677f

B\u83cc\u843d\u6570\u76eeV\u5e73\u5747\u83cc\u843d\u6570

㈤空】雌涂布平板

【第2空】菌落数目/平均菌落数

实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后，才能倒掉.

A\u706d\u83cc

【第1空】灭菌

【答案】：

【解析】：

【薛答】解：（1）据表分析，表中的蛋白陈可以为微生物的生存提供氨源，所以不能分高尿素分解前,筛选纤维表分解菌需要

以纤维素为唯一的碳源的选择培养基.（2）固体培养基上的接种方法有触涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法i善用于

微生物的统计计数，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的菌落数目片均菌落数能够推测样品中的活菌

数.（3）为防止微生物污染环境和操作者，实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌后倒掉.故答案为：（1）不能培养

基含蛋白豚,尿素不是唯一氮源，不能邮出只以尿素为负I源的微生物（2）稀释涂布平板菌落数目/平均菌落数

（3）灭菌

【分析】筛选纤维表分解菌需要以纤维表为唯一的碳源的选择培养基.分离纤维表分解菌计数时需要用稀释涂布平板法接种.

＞第15题【综合题】

无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和

动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：

消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀

死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处

理。

①皮肤②饮用水③牛奶④注射器⑤培养皿

⑥接种环⑦培养基⑧果汁⑨酱油⑩手术刀

A、①②③⑧⑨

B、④⑤⑥⑦⑩

C、①②③④⑤⑥⑧

D、以上全部

配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整______，接种前要进行，在整个微生物的

分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。

ApH（l\u5206\uff09

B\u9ad8\u538b\u84b8\116c7d\u706d\u83cc

【第1空】pH（l分）

【第2空】高压蒸汽灭菌

在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用法进行

大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：

每次划线前要:

冷却后从上一区划线末端开始划；

首尾区o

A\u5e73\u677f\u5212\u7ebf

B\u707c\u70e7\u63a5\u79cd\u73af

C\u4e0d\u8fde\u63a5\uff08\u4e0d\u91cd\u53e0\uff09

【第1空】平板划线

【第2空】磁蝴环

【第3空】不连接（不重叁）

培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被

污染。对固体培养基应采用的检测方法是,观察培养基上是否有菌落产生。

A\u5c06\u672a\u63a5\u79cd\uff08\u63a5\u79cd\u7b49\u91cf\u65e0\u83cc\u6c34\uff09\u7684\u57f9\u5

17b\u57fa\u5728\u9002\u5b9c\u7684\u6e29\u5ea6\u4e0b\u653e\u7f6e\u9002\u5f53\u65f6\u95f4

【第1空】将未接种（接种等量无菌水）的培养基在适宜的温度下放置适当时间

有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是

A\u9752\u9709\u7d20\u6740\u6b7b\u4e86\u4e73\u9178\u83cc

【第1空】青毒素杀死了乳酸菌

【答案】：

【解析】：

【解答］（1）①©③®⑨应采用消毒,④@©⑦⑩应采用灭前,故选A.（2）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进

行调整pH,培养基接种前要进行高压蒸汽灭菌，在进行倒平板.（3）微生物实验室培养的关键在于防止杂前污染，本题是采

用平板划发法接种,需要注意的是连续划线时，每次划设前要灼烧接种环，同时划线结束首尾不肯邹连.（4）检测培养基是否

被污染.对固体培养基应采用的检测方法是将未接种（接种等量无菌水）的培养基在适宜的温度下放置适当时间，观察培养基

上是否有菌落产生.（5）制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青毒素结果发酵失败，原因可能是青毒素杀死了乳

酸菌.【分析】本题主要考查微生物的实验室分离的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解,把握知识间的内在联系的能

力.

＞第16题【综合题】

土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废

弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等.从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下：土壤取样今选

择培养基T梯度稀释T鉴别培养基

纤维素酶是复合酶，由C1酶、Cx酶和组成.

A\u8461\u8404\u7cd6\u82f7\u9176

【第1空】酶

实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法，原理是,为分离得到纤维素分解菌，使用的培

养基应以作为主要碳源.

A\u6839\u636e\u67d0\u79cd\u5fae\u751f\u7269\u7684\u7279\u6b8a\u8425\u517b\u8981\u6c42\u6216

\u5176\u5bf9\u67d0\u5316\u5b66\u3001\u7269\u7406\u56e0\u7d20\u7684\u6297\u6027\u800c\u8bbe\u8ba

1

B\u7ea4\u7ef4\u7d20

【第1空】根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计

【第2空】组S表

梯度稀释前进行选择培养的目的是，这一步一般选用（填"固体"或"液体"）培养基.

A\u589e\u52a0\u7ea4\u7ef4\u7d20\u5206\u89e3\u83cc\u7684\u6d53\u5ea6

B\u6db2\u4f53

【第1空】增加纤维素分解菌的浓度

【第2空】液体

梯度稀释后用（仪器）将菌种接种在培养基表面.

A\u6d82\u5e03\u5668

【第1空】涂布器

用染色法鉴定纤维素分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈，其大小反映.

A\u521a\u679c\u7ea2

B\u4ea7\u751f\u7ea4\u7ef4\u7d20\u9176\u80fd\u529b\u5927\u5c0f\uff08\u6216\u4ea7\u751f\u7ea4\u

7ef4\u7d20\u9176\u7684\u591a\u5cll\uff09

【第1空】刚果红

【第2空】产生纤维素酶能力大小（或产生纤维素酶的多少）

【答案】：

【解析】：

【解答】解：（1）纤维表酶是兔合酶，由C1酶、Cx酶和葡萄糖甘酶组成.（2）实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方

法，原理是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计.筛选纤维表分解菌应先将从土壤中获得的

微生物，在以纤维素为唯一碳源的液体培养基上进行选择培养，选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度.（3）梯度稀释前

进行选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度,这一^~^选用液体培养基.（4）梯度稀释后用涂布器将菌种接种在培养基

表面.（5）用刚果红染色法鉴定纤维表分解菌时，培养基上的菌落周围会形成透明圈,其大小反映产生纤维森酶能力大小

（或产生纤维素酶的多少）故答案为：（1）葡萄糖甘酶（2）根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因森的抗性

而设计纤维森（3）增加纤维素分解菌的浓度、液体（4）涂布器（5）刚果红、产生纤维素酶能力大小（或产生纤维素酶的

多少）

【分析】分解纤维素的微生物的分离：（1）实验原理:

①土壤中存在着大量纤维素分解酶,包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶.纤维羲酶是一种复合酶，可以把纤

维森分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维森作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很

好地生长，其他微生物则不能生长.

②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出

现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌.（2）实验过程:

土壤取样：采集土样时，应选择富含纤维素的环境

悌度解：用选择培养基培养，以增加纤维羲分解菌的浓度

梯度稀释

涂布平板：将样品涂布于含刚果红的鉴别纤维素分解菌的固体培养基上

打峭H生中心透明圈的菌落：产生纤维表酶的菌落周围出现透明恩,从产生明显的透明圈的菌落上拟缴部分细菌，并接种到纤

维森分解菌的选择培养基上，在30〜37℃条件下培养，可获得较纯的菌种.

＞第17题【综合题】

请回答下面与微生物的培养与应用有关的问题：

在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是;对玻璃器皿的灭菌方法为.

A\u9632\116b62\u5916\u6765\u6742\u83cc\u7684\u5165\u4fb5

B\u5e72\u70ed\u706d\u83cc\u6cd5

【第1空】防止外来杂菌的入侵

【第2空】例灭菌法

微生物常用的接种方法有2种，但只有方法可用于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往

比实际结果

A\u7a00\u91ca\u6d82\u5e03\u5e73\u677f\u6cd5

B\u504f\u5c0f

【第1空】稀释涂布平板法

【第2空】廨卜

农作物秸秆中含有大量的纤维素，利用微生物可以将纤维素转化为酒精以供人类所需.将纤维素转化

为酒精需要先将纤维素转化为葡萄糖，将纤维素转化为葡萄糖的酶是一种复合酶，它包括C1酶、

，将葡萄糖转化为酒精的微生物是.

ACx\u9176\u548c\u8461\u8404\u7cd6\u82f7\u9176

B\u9175\u6bcd\u83cc

【第1空】Cx酶和葡萄糖昔酶

【第2空】酵母菌

如表是分离某种微生物的培养基配方：（tableborder=lcellspacing=Ocellpadding=O><tdwidth=85

valign=top>成分<1€1width=85valign=top>MgS04<tdwidth=85valign=top>葡萄糖<tdwidth=85valign=top>X

物质<tdwidth=86valign=top>zK<tdwidth=86valign=top>琼脂<tdvalign=top>用量<tdvalign=top>5g<td

valign=top>10g<tdvalign=top>7g<tdvalign=top>IOOOmL<tdvalign=top>20g</table>表中X物质最可能为

（碳源、氮源、无机盐）；培养基中添加琼脂的作用是.

A\u6c2e\u6e90

B\u4f5c\u4e3a\u51dd\u56fa\u5242\uff0c\u4f7f\u6db2\u4f53\u57f9\u517b\u57fa\u53d8\u6210\u56fa\u4f

53\u57f9\u517b\u57fa

【第1空】百

【第2空】作为凝固剂，使液体培养基蛔固体培养基

【答案】：

【解析】：

【解答】解：（1）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是无菌技术，即防"膜杂菌的污染，其中常用的对培养皿迸行

灭菌的方法是干热灭菌法.（2）常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法两种，但只有稀择涂布平板法可用于微

生物的计数；由升个菌落可能是由两个或多个细菌长成，因此运用该方法计数的结果往往比实频目低.（3）纤维素分解菌

187^分解强森的壮素酶,该建f复合酶,为它阐Cxggffi葡WW酶三种组分;酵母菌可进行有

氧呼吸和无氧呼吸，獐呼吸时能产生酒精.（4）据表中数据可知,表中营养物质缺乏氮源，故X物质最可能为血源；培养基

中添加琼脂可作为凝固剂，使液体培养基变成固体培养基.故答案为：（1）防止^膜杂菌的入侵干热灭苗法（2）稀释涂布

平板法偏小（3）Cx酶和葡萄糖甘酶酵母菌（4）氮源作为凝固剂，使液体培养基变成固体培养基

【分析】（1）培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质.营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和

水.根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、娥！1培养基.根据性质分为液体、半固体和固体培

养基.（2）筛选目的微生物需要使用选择培养基.微生物的接种方法主要有平板划线法和箱释涂布平板法,其中稀释涂布平板

法可以用来进行微生物的计数.

A第18题【综合题】

回答下列（1）、（2）小题

研究小组从土壤中筛选以多环芳煌（PAHs）为碳源和能源的细菌，用以降解工业废水和生活污水中的

PAHs«请回答：

①为了从土壤中筛选PAHs降解菌，需配制以为唯一碳源的培养基，培养基经[A.121℃

（500g/cmA2压力）,15minB.90℃（500g/cmA2压力），15minC.121℃（lkg/cmA2压力），15minD.

90℃（500g/cmA2压力），30min]高压蒸汽灭菌，待冷却至60℃后倒平板。

②倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是o在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与

皿底之间的部位，则这个平板不能用来培养PAHs降解菌，原因是o

③制备土壤稀释液，用方法接种于固体培养基表面，培养时，需将培养皿并放在37℃

恒温培养箱中培养24h。

④用划线法纯化PAHs降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时，须从上一次划线的末端开始

划线，原因是o

【第1空】PAHs

【第2空】C

【第3空】防止杂菌污染

【第4空】空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生

【第5空】涂布

【第6空】倒置

【第7空】使细菌数随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落

下图为某大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛的大致过程，请据

图回答问题：

1）图中获得赖氨酸基因常用的酶是，若我们己知赖氨酸基因的碱基序列，一般采用法获

取该目的基因。

2）黑白花奶牛乳腺组织常用分散成单细胞，然后作为核供体。将得到的体细胞的细胞核移植到

去核的未受精的卵细胞中才能发育成新个体，其原因是（A.卵细胞大，便于操作B.卵细胞含有的营

养物质多C.卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达D.重组细胞才具有全能性）。

3）从④到⑤的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎，常采用的方法是进行。

4）克隆牛的诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有：、o

【第1空】限制性核酸内切酶

【第2空】化学合成

【第3空】胰蛋白酶

【第4空】C

【第5空】Z

【