微藻抑制病原菌研究

PAGE1微藻对于病原菌之抑菌实验1.I.galbana活藻抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的I.galbana活体细胞抑制103CFU/ml病原菌。实验结果显示出I.galbana在不同浓度下皆有抑制病原菌生长之成效，并且在72小时发现104的组别其菌量已下降至0，随后在96小时发现105及106的组别其菌量亦下降至0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，并且105的组别其菌量显着低于106的组别(p＜0.05)；添加菌液48小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，但是各处理组之间的菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液72小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，并且104的组别其菌量显著低于105、106的组别(p＜0.05)，而104的组别，其菌量已达到0；添加菌液96小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，且104、105、106的组别，其菌量皆达到0。2.I.galbana细胞内产物抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的I.galbana细胞内产物抑制103CFU/ml病原菌，实验结果显示出I.galbana在48-96小时，105、106的组别皆有抑制病原菌生长之效果。实验结果于统计上的分析可发现在添加菌液24及48小时，104的组别其菌量显著高于对照组及105、106的组别(p＜0.05)，105的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而106的组别与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，105的组别其菌量显著低于104、106的组别(p＜0.05)，而106的组别其菌量又显著低于104的组别(p＜0.05)；添加菌液72小时，104的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而105、106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，104的组别其菌量显著高于105、106的组别(p＜0.05)，而106的组别其菌量亦显著高于105的组别(p＜0.05)；添加菌液96小时，104的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而105、106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，104的组别其菌量显著高于105、106的组别(p＜0.05)，而105、106的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。3.C.muelleri活藻抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的C.muelleri活体细胞抑制103CFU/ml病原菌，实验结果显示出C.muelleri在不同浓度下皆有抑制病原菌生长之成效，并且在72小时，各处理组其菌量已下降至0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，104、105的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而106的组别与对照组及104与105的组别之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液48小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，并且各处理组之间的菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液72小时及96小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，而各处理组之间的菌量没有显著差异(p＞0.05)，并且各处理组的组别其菌量已达到0。4.C.muelleri细胞内产物抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的C.muelleri细胞内产物抑制103CFU/ml病原菌，实验结果显示出C.muelleri在48-96小时，105的组别有抑制病原菌生长之效果，期间亦可发现106的组别其菌量有明显下降之趋势。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，104、106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而105的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，105的组别其菌量显著低于104、106的组别(p＜0.05)，而104、106的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液48小时，104、106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，105的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，105的组别其菌量显著低于104、106的组别(p＜0.05)，而104组别其菌量亦显著低于106的组别(p＜0.05)；添加菌液72小时，104、106组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而105的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，105组别其菌量显著低于104、106组别(p＜0.05)，而104、106的组别之间没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液96小时，104的组别其菌量显著高于对照组(p＞0.05)，而105、106的组别其菌量显著低于对照组(p＞0.05)。在各处理组中，105、106组别其菌量显著低于104的组别(p＜0.05)，而105组别其菌量亦显著低于106的组别(p＜0.05)。5.S.costatum活藻抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的S.costatum活体细胞抑制103CFU/ml病原菌，实验结果显示出S.costatum在不同浓度下皆有抑制病原菌生长之成效，而在72小时，106的组别其菌量已下降至0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，并且各处理组之间的菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液48小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，并且106的组别其菌量显著低于104、105的组别(p＜0.05)；添加菌液72小时及96小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，而106的组别其菌量显著低于104、105的组别(p＜0.05)，并且菌量已达到0(Table6)、(Fig.21)。6.S.costatum细胞内产物抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的S.costatum细胞内产物抑制103CFU/ml病原菌，实验结果显示出S.costatum在各处理组中皆能降低病原菌生长。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，105、106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而104的组别与对照组及105、106的组别间并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液48小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于104的组别(p＜0.05)，而105的组别其菌量亦显著低于106的组别(p＜0.05)；添加菌液72小时，105、106组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而104的组别其菌量与对照组并无显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于104的组别(p＜0.05)，而105、106的组别之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液96小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，并且105、106的组别其菌量显著低于104的组别(p＜0.05)，而105、106的组别之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)。7.N.oculata活藻抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的N.oculata活体细胞抑制103CFU/ml病原菌，实验结果显示出N.oculata在不同浓度下皆有抑制病原菌生长之成效，并且在72小时，106的组别其菌量已下降至0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时及48小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，并且106的组别其菌量显著低于104、105的组别(p＜0.05)；添加菌液72小时及96小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，而106的组别其菌量显著低于104、105的组别(p＜0.05)，并且菌量已达到0。8.N.oculata细胞内产物抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的N.oculata细胞内产物抑制103CFU/ml病原菌，实验结果显示出N.oculata在浓度105、106cell/ml环境下72小时以后有降低病原菌生长的现象。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而104、105的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，104、105组别其菌量显著低于106的组别(p＜0.05)，且104、105的组别之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液48小时，104、106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而105的组别与对照组之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，104、105的组别其菌量显著低于106的组别(p＞0.05)，而105的组别其菌量亦显著低于104的组别；添加菌液72小时，104、106的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而105的组别其菌量显著低于对照组(p＞0.05)。在各处理组中，105的组别显著低于104、106的组别(p＜0.05)，而104的组别其菌量亦显著低于106的组别(p＜0.05)；添加菌液96小时，104的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而105、106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于104的组别(p＜0.05)，而105的组别其菌量亦显著低于106的组别(p＜0.05)。9.T.chui活藻抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的T.chui活体细胞抑制103CFU/ml病原菌，实验结果显示出T.chui在不同浓度的组别下皆有抑制病原菌生长之成效，并且在24小时，104的组别其菌量已下降至0。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)，并且104的组别其菌量显著低于105、106的组别(p＜0.05)，而104的组别其菌量已达到0；添加菌液48小时、72小时及96小时，各处理组的菌量皆显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，104的组别其菌量显著低于105、106的组别(p＜0.05)，且104的组别其菌量已达到0。而106的组别其菌量亦显著低于105的组别(p＜0.05)(Table10)、9.1.T.chui细胞内产物抑制病原菌实验：本实验利用104、105、106cell/ml的T.chui细胞内产物抑制103CFU/ml病原菌。实验结果显示出T.chui在72-96小时，106组别可达到抑制病原菌生长之效果，其他处理组则否。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，各处理组的菌量皆显著高于对照组(p＜0.05)。在各处理组中，104、106的组别其菌量显著低于105组别(p＜0.05)，而106的组别其菌量亦显著低于104的组别(p＜0.05)；添加菌液48小时，104、105的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，而106的组别其菌量与对照组并无显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，104、106的组别其菌量显著低于105的组别(p＜0.05)，而106的组别其菌量亦显著低于104的组别(p＜0.05)；添加菌液72小时，104的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而105的组别与对照组之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于104组别(p＜0.05)，而106的组别其菌量亦显著低于105的组别(p＜0.05)；添加菌液96小时，106的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，而104、105的组别与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。在各处理组中，105、106的组别其菌量显著低于104的组别(p＜0.05)，而106的组别其菌量亦显著低于105的组别(p＜0.05)。交叉比较五种微藻抑制病原菌之成效1.活藻细胞11×104cell/ml：实验结果显示出在104的组别中五种微藻皆有抑制V.alginolyticus生长之效果，抑制效果以T.chui的组别为最佳，其菌量在24小时以后下降至0；其次是I.galbana以及C.muelleri的组别，其菌量在72小时下降至0。实验结果于统计上的分析可发现在添加菌液24小时，T.chui、I.galbana以及S.costatum的组别其菌量显着低于对照组(p＜0.05)，而N.oculata以及C.muelleri的组别与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。而在各处理组中，T.chui的组别其菌量显著低于N.oculata、I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至0，I.galbana以及S.costatum的组别其菌量显著低于N.oculata以及C.muelleri的组别(p＜0.05)，而N.oculata与C.muelleri的组别及I.galbana与S.costatum的组别之间的菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液48小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，T.chui的组别其菌量显著低于N.oculata、I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至0，I.galbana的组别其菌量显著低于N.oculata的组别(p＜0.05)，而N.oculata与C.muelleri、S.costatum的组别以及I.galbana与C.muelleri、S.costatum的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液72小时及96小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，T.chui、I.galbana、C.muelleri的组别其菌量显著低于N.oculata、S.costatum的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至0，而N.oculata与S.costatum的组别其菌量并无显著差异(p＞0.05)(Table12)、(Fig.27)。21×105cell/ml：实验结果显示五种微藻皆有抑制病原菌生长之在72小时以后下降至0。实验结果于统计上的分析可发现在添加菌液24小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，I.galbana的组别其菌量显著低于N.oculata的组别以及C.muelleri的组别(p＜0.05)，而与T.chui以及S.costatum的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，T.chui、N.oculata、S.costatum的组别之间其菌量亦无显著差异(p＞0.05)；添加菌液48小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别其菌量显著低于T.chui和N.oculata的组别(p＜0.05)，且三者之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)。而N.oculata的组别其菌量亦显著低于T.chui的组别(p＜0.05)；添加菌液72小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，C.muelleri的组别其菌量显著低于T.chui、N.oculata、I.galbana、S.costatum的组别(p＜0.05)，且C.muelleri的组别其菌量已下降至0。其余四种微藻之间其菌量并无显著差异(p＞0.05)；添加菌液96小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，I.galbana、C.muelleri的组别其菌量皆显著低于T.chui、N.oculata、S.costatum的组别(p＜0.05)，且I.galbana、C.muelleri的组别其菌量已下降至0，而N.oculata、S.costatum的组别其菌量亦显著低于T.chui(p＜0.05)，且两者之间并无显著差异(p＞0.05)(Table13)、。31×106cell/ml：实验结果显示出在106的组别中五种微藻皆有抑制V.alginolyticus生长之效果，抑制效果以C.muelleri、S.costatum、N.oculata的组别为最佳，其菌量在72小时以后下降至0；其次是I.galbana的组别，其菌量亦在96小时下降至0。实验结果于统计上的分析可发现在添加菌液24小时，T.chui、N.oculata、I.galbana、S.costatum的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，C.muelleri的组别其菌量与对照组没有显著差异(p＞0.05)。而在各处理组中，T.chui、N.oculata、S.costatum的组别其菌量显著低于I.galbana、C.muelleri的组别(p＜0.05)，且三者的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而I.galbana的组别其菌量亦显著低于C.muelleri的组别(p＜0.05)；添加菌液48小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，五种微藻之间其菌量皆无显著差异(p＞0.05)；添加菌液72小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，N.oculata、C.muelleri、S.costatum的组别其菌量显著低于T.chui、I.galbana的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至0，而T.chui、I.galbana的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液96小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，N.oculata、I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别其菌量皆显著低于T.chui的组别(p＜0.05)，且菌量已下降至0(Table14)、(Fig.29)。4五种微藻在活体细胞下之抑菌效果统合实验结果显示出五种微藻在不同浓度活体细胞与病原菌共生之环境下皆能够降低病原菌生长，其中又以I.galbana、C.muelleri的组别为最佳，两者在不同浓度下达到完全抑制病原菌生长，而S.costatum、N.oculata的组别在浓度106cell/ml以及T.chui的组别在浓度104cell/ml亦可完全抑制V.alginolyticus生长。10.细胞内产物11×104cell/ml：实验结果显示出在此浓度下除了S.costatum的组别以外，其余4种微藻皆无法有效抑制病原菌生长。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，T.chui、I.galbana、C.muelleri的组别其菌量显著高于N.oculata、S.costatum的组别及对照组(p＜0.05)，并且T.chui、I.galbana、C.muelleri的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而S.costatum的组别与对照组之间其菌量无显着差异(p＞0.05)，N.oculata的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)；添加菌液48小时及72小时，T.chui、I.galbana、C.muelleri的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，N.oculata的组别与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而S.costatum的组别其菌量显着低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，S.costatum的组别其菌量显著低于T.chui、N.oculata、I.galbana、C.muelleri的组别(p＜0.05)，而T.chui、N.oculata、I.galbana、C.muelleri的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)；添加菌液96小时，T.chui、N.oculata、I.galbana、C.muelleri的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，S.costatum的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，S.costatum的组别其菌量显著低于T.chui、N.oculata、I.galbana、C.muelleri的组别(p＜0.05)，而T.chui与N.oculata的组别其菌量亦显著低于I.galbana与C.muelleri的组别(p＜0.05)。(Table16)21×105cell/ml：实验结果显示出T.chui的组别无法抑制病原菌生长，而I.galbana、C.muelleri、S.costatum、N.oculata的组别虽不能完全抑制病原菌滋生，但已有降低菌量现象。实验结果于统计上的分析可发现添加菌液24小时，T.chui的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，N.oculata、I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，其中各处理组中，I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别其菌量显著低于T.chui、N.oculata的组别(p＜0.05)，且三者之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而N.oculata的组别其菌量亦显著低于T.chui的组别(p＜0.05)；添加菌液48小时，T.chui的组别其菌量显著高于对照组(p＜0.05)，I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)、而N.oculata与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。而在各处理组中，I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别其菌量显著低于T.chui、N.oculata的组别(p＜0.05)，且I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而N.oculata的组别其菌量亦显著低于T.chui的组别(p＜0.05)；添加菌液72小时，I.galbana、C.muelleri、S.costatum、N.oculata的组别其菌量显著低于对照组(p＜0.05)，T.chui的组别与对照组之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)。而在各处理组中，I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别其菌量显著低于T.chui、N.oculata的组别，且I.galbana、C.muelleri、S.costatum的组别之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而N.oculata的组别其菌量亦显著低于T.chui的组别(p＜0.05)；添加菌液96小时，N.oculata、I.S.costatum的组别其菌量显著低于N.oculata、I.galbana、C.muelleri的组别(p＜0.05)，且两者之间其菌量没有显著差异(p＞0.05)，而I.galbana的组别其菌量显著低于N.oculata、C.muelleri的组别(p＜0.05)，C.muelleri的组别其菌量亦显著低于N.oculata的组别(p＜0.05)；添加菌液96小时，各处理组其菌量显著低于对照组(p＜0.05)。而在各处理组中，T.chui、I.galbana、S.costatum的组别其菌量显著低于N.oculata、C.muelleri的组别(p＜0.05)，而T.chui、I.galbana、S.costatum的组别以及N.oculata、C.muelleri的组别其菌量并无显著差异(p＞0.05)。4五种微藻之细胞内产物的抑菌效果统合实验结果显示出五种微藻在104cell/ml细胞内产物与病原菌共生之环境下除了S.costatum的组别以外，其余四种微藻皆无法降低病原菌生长；I.galbana、C.muelleri、S.costatum、N.oculata的组别在浓度105cell/ml中可降低V.alginolyticus生长，T.chui的组别则否；五种微藻在浓度106cell/ml环境下皆能够降低病原菌生长。讨论1、生长曲线实验结果发现细胞大小与细胞数目呈现反比关系。细胞型态由大到小为Skeletonemacostatum(15-25μm)、Tetraselmischui(8-16μm)、Chaetocerosmuelleri(6-9μm)、Isochrysisgalbana(3-7μm)、Nannochloropsisoculata(2-5μm)；而指数生长期最高之细胞数目由高至低为N.oculata(2.1×107cell/ml)、I.galbana(3.6×106cell/ml)、C.muelleri(2.4×106cell/ml)、T.chui(9.4×105cell/ml)、S.costatum(4.3×105cell/ml)。由结果可知微藻在同一环境下，细胞型态越大者在短时间内可达到生长阶段之高峰期，随即达到平稳期后接着进入死亡期。其中以S.costatum细胞最大，则在培养第8-9天为高峰期，而以N.oculata细胞为最小，则在培养第23-27天为高峰期。2、抑菌实验在现场养殖中，微藻为一种非常重要的饵料生物，主要是因为其中含有许多的不饱和脂肪酸，可提供鱼虾苗作为生长发育的营养来源。另外在许多的研究报告当中指出，Isochrysisspp.、Chaetocerosspp.、Skeletonemaspp.、Nannochloropsisspp.、Tetraselmisspp.此五株微藻对于养殖池水中的病原菌有抑制效果，可与病原菌在营养盐及空间上做竞争，以达到生物防制中抑制病原菌之能力(AustinandDay,1990；Austinetal.,1992；Rico-Moraetal.,1998；Navineretal.,1999；Salvesenetal.,2000)。2.1活藻实验：本实验发现，五种微藻N.oculata、I.galbana、C.muelleri、T.chui、S.costatum皆能达到降低病原菌生长，其中以T.chui抑制病原菌生长效果最为明显，即浓度104cell/ml环境中在24小时已完全抑制病原菌生长。但是随着T.chui浓度的增加，反而无法达到完全抑制病原菌生长的效果，而在浓度105cell/ml环境中发现，24小时后的菌量有上升之趋势，因此推断三种浓度在相同体积下，由于低浓度104cell/ml培养出来年轻的藻体细胞较105cell/ml、106cell/ml为多，以致于其活性最佳，进而与病原菌在同一水体中相互竞争下短时间内可达到抑制V.alginolyticus的生长；添加I.galbana的抑菌实验中，可发现在三种浓度下皆可达到完全抑制病原菌生长之效果，其中以浓度104cell/ml培养环境中较佳，72小时可达到完全抑制病原菌生长；添加C.muelleri的抑菌实验中，可发现在三种浓度下皆可降低病原菌生长之效果，并且三种浓度皆在72小时可达到完全抑制病原菌生长之效果；添加S.costatum抑菌实验中，可发现在三种浓度下皆可降低病原菌生长之效果，且浓度106cell/ml环境下在72小时即可达到完全抑制病原菌生长之效果；添加N.oculata抑菌实验中，可发现三种浓度皆可降低V.alginolyticus生长，其中以浓度106cell/mlN.oculata环境下的效果最佳，在72小时达到完全抑制病原菌生长。Nieman(1954)和GalbraithandMiller(1973a,b,c)指出，微藻的抑菌活性取决于脂肪酸碳链的长短，当脂肪酸连接10个以上的碳原子，会使细菌的活性降低，而在后期的研究报告亦证实了微藻的抗菌活性取决于脂肪酸链的长短(Duffetal.,1966；Aubertetal.,1968a,b；AubertandGambarotta,1972；Berlandetal.,1972；Aubertetal.,1979；Gauthier,1980；Cooperetal.,1983；FindlayandPatil,1984；Pesando,1985；Viscoetal.,1987；Kellametal.,1988)，另外苏(1999)指出五种微藻N.oculata、I.galbana、C.muelleri、T.chui、S.costatum皆富含高度不饱和脂肪酸(DHA及EPA)，故推论本实验结果中的五种微藻皆会抑制病原菌生长的原因，可能是其所含有的不饱和脂肪酸皆为碳原子10以上，所以有抑制V.alginolyticus生长的效果。Kogureetal.(1979)指出，利用不同的光度培养微藻S.costatum(700、3000、9000Lux)对于病原菌抑制的效果，其中以3000Lux抑制效果最佳，另外赵等(2002)指出此五种微藻的最适培养光照为3000～4000Lux，这其中意味着当微藻在最适光照环境下，其生长速率较快，对于病原菌的抑制效果也最好。另外，研究报告也指出微藻在指数生长期间可有效的抑制病原性弧菌的生长(Waksmanetal.,1938；DroopandElson,1966；Sieburth.,1968；BellandMitchell,1972；Simiduetal.,1977)。而本实验所设置5种微藻的培养光照范围为2500~3500Lux，并且实验初期所接种的微藻皆为指数期的藻种，而在此条件下所培养的微藻对于病原性弧菌病原菌的抑制皆有良好的效果，推测可能是因为此光照适合五种微藻在指数期的生长，而其生长速率上升会与病原性弧菌病原菌竞争营养盐及生长空间，进而达到抑制弧菌的效果。另外在本实验当中亦发现，将五种微藻震碎后，其细胞内产物亦有抑制病原性弧菌病原菌的效果，而本实验在活体抑制试验当中，所使用的微藻为指数期的活藻，但其中还是会有些许的的藻类会提早老化死亡，这些藻类死亡后所释放出来的胞内产物，可能对于病原性弧菌病原菌有抑制的效果，但有待进一步的实验来探讨其抑制的机制。比较五种微藻S.costatum、C.muelleri、I.galbana、T.chui、N.oculata对于病原性弧菌病原菌的抑制效果中发现，S.costatum及N.oculata对病原菌生长抑制效果不如T.chui、I.galbana、C.muelleri(Table.15)。虽然S.costatum及N.oculata皆有抑制病原菌生长之效果，但是却要在最高的浓度106cell/ml才有最佳的抑制效果，而T.chui、I.galbana及C.muelleri只要在低浓度的情况下就有抑制病原菌的生长，而在现场养殖环境中，若藻色过浓，常会有倒藻、清晨溶氧不足及底部缺氧的情况发生，故在抑制病原性弧菌病原菌生长的前提之下，建议以较低浓度的T.chui、I.galbana及C.muelleri三种微藻来做水，对于养殖池的管理较为容易。2.3细胞内产物实验：微藻之细胞内产物抑制病原性弧菌的实验中显示出五种微藻皆能达到降低病原菌生长的效果。针对五种微藻在不同浓度下之抑菌实验中发现，C.muelleri在浓度105cell/ml环境中抑制效果最佳，24小时后即有降低菌量趋势，而在浓度106cell/ml环境下，48小时后菌量有明显下降趋势，但是在浓度104cell/ml环境下，菌量呈现上升现象，因此推断在细胞内产物实验