盲管和生物指示剂安装对在线湿热灭菌工艺的影响研究

II摘要研究背景：因为饱和蒸汽能在较短时间内有效杀死微生物及芽胞体，所以被广泛用但是，由于尺寸和结构的限制，大量的工艺设备无法使用灭菌柜灭菌，而整个系统的在线灭菌可以将无菌操作（如连接）的工作大幅降低甚至消除，所以被越来越广泛的使用。本系统在对无菌灌装罐的在线灭菌测试过程中，位于无菌气体过滤器进气口的生物指示剂挑战性实验失败。研究目的：本文希望通过研究，找到位于无菌气体过滤器进气口的生物指示剂挑战性实验失败的根本原因。研究方法：本文首先通过因果分析法（鱼骨图分析法）对各层别类别找出所有可能原（因素并选取重要因素,再综合重要因素进行试验设计最后实施试验根据实验结果对上述重要因素进行论证。研究结果：通过因果分析法确定了盲管和生物指示剂的安装对湿热在线灭菌工艺造成了重要的影响。通过实验设计及其实施验证了因果分析法（鱼骨图分析法）的结论。研究结论：无菌过滤器入口处的三通是比较敏感的区域，生物指示剂的安装使其成为关键的位置。在日常生产过程中，不会安装生物指示剂，这样就不会阻碍蒸汽的流通和冷凝水的排净，因此这一敏感区域就会很好的被灭菌。虽然在过滤器前端的灭菌效果不会破坏罐内的无菌状态，但是为了增加无菌保障，作为改进措施，会在进气口的手动阀门前增加连通管，以确保手动阀门的灭菌效果。值；DT值IIIIofDeadLegandBioIndicatoronMoistHeatinPlacethecanbekilledinashorttimebywatersteam,itiswidelyintheisconcentratedinequipmentbyautoclve.Howeve,duetotheliitationofeandstructue,algenumberofequipmentcannotbebyautoclave.inplace”canoreventheasepticoperationforthesystem,soitisusedandtheinplacetestforfillingtank,thechallengetestpositionedatthefilterfailed.Purpose:thispaperaims,tofindthecauseforthefailedbio-indicatorchallengingtestattheofanairfilterMethod:findoutallpossiblecauses(factors)andtheimportantfactorsbycausalanalysis(fishboneandthentheimportantfactorsintheexperimentdesign,andfinallyexecutetheexperimentandtheimportantfactorsbyexperimentalResult:causalanalysisitisthatthedeadlegandhaveimportantonheatinplace”Thisconclusionisverifiedthedesignandteejointisaarea,anditbecomesaman-madecriticalplacewithBIDuringroutineisnotandwillnotforsureblockthissensitivearea(forboththesteamflowandthecondensateThisareacanbefullyAlthoughsterilizingeffectoftheinletofafilterdoesnotdestroythestateofthetank,asanimprovementactiontoincreaseassurance,,acommunicatingpipewillbebeforethevalveofthetotheoftheKeyords:teriliztioninPlace,oistHeat,oIndicato,F-value,D-valuePAGEPAGE4目 录第1章11.111.22233451.361.4677910121.5131414141515第2章17人员 17171818机器 181818环境 1919191919方法 1919材料 212121测试 22222222第3章23实验设计 232323252528第4章3232323232第5章34讨论一 34讨论二 34PAGEPAGE1第1章背景介绍1.1灭菌法概述[2]灭菌法系指用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去，从而使物品残存活微生物的概率下降至预期的无菌保证水平的方法。本法适用于制剂、原料、辅料及医疗器械等物品的灭菌。无菌物品是指物品中不含任何活的微生物。对于任何一批灭菌物品而言，绝对无菌既无法保证也无法用试验来证实。一批物品的无菌特性只能相对地通过物品中期的无菌保证水平最终灭菌的物品微生物存活概率即无菌保证水平不得高于106。已灭菌物品达到的无菌保证水平可通过验证确定。灭菌产物品的无菌保证不能依赖管理和良好的无菌保证体系。灭菌工艺的确定应综合考虑被灭菌物品的性质、灭菌方法的有效性和经济性、灭菌后物品的完整性和稳定性等因素。灭菌程序的验证是无菌保证的必要条件。灭菌程序经验证后，方可交付正式使用。验证内容包括：(1)(2)。(3)认。(4)确认各关键工艺参数符合预定标准，确定经灭菌物品的无菌保证水平符合规定（性能确认。(5)日常生产中，应对灭菌程序的运行情况进行监控，确认关键参数（如温度、压力、时间、湿度、灭菌气体浓度及吸收的辐照剂量等）均在验证确定的范围内。灭菌程序应定期进行再验证。当灭菌设备或程序发生变更（包括灭菌物品装载方式和数量的改变）时，应进行再验证。物品的无菌保证水平与灭菌工艺、灭菌前物品被PAGEPAGE6污染的程度及污染菌的特性相关。因此，应根据灭菌工艺的特点制定灭菌物品灭菌前的微生物污染水平及污染菌的耐受性限度并进行监控，并在生产的各个环节采取各种措施降低污染，确保微生物污染控制在规定的限度内。灭菌的冷却阶段，应采取措施防止已灭菌物品被再次污染。任何情况下，都应要求容器及其密封系统确保物品在有效期内符合无菌要求。1.2常用的灭菌方法有湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭菌法、气体灭菌法和过滤除菌法。可根据被灭菌物品的特性采用—种或多种方法组合灭菌。只要物品允许，应尽可能选用最终灭菌法灭菌。若物品不适合采用最终灭菌法，可选用过滤除菌法或无菌生产工艺达到无菌保证要求，只要可能，应对非最终灭菌的物品作补充性灭菌处理(如流通蒸汽灭菌)。1.2.1湿热灭菌法本法系指将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。该法灭菌能力强，为热力灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌方法。药品、容器、培养基、无菌衣、胶塞以及其他遇高温和潮湿不发生变化或损坏的物品，均可采用本法灭菌。流通蒸汽不能有效杀灭细菌孢子，一般可作为不耐热无菌产品的辅助灭菌手段。湿热灭菌条件的选择应考虑灭菌物品的热稳定性、热穿透力、微生物污染程度等因数。湿热灭菌条件通常采用或的程序，也可采用其他温度和时间参数，但无论采用何种灭菌温度和时间参数，都必须证明所采用的灭菌工艺和监控措施在日常运行过程中能确保物品灭菌后的121℃的灭菌条件时该灭菌程序致死微生物的效果与121℃的灭菌效果相同在121℃下的灭菌时间，应采取特别措施来确保灭菌物品能得到足够的无菌保证，此时，除对灭菌程序进行验证外，还必须在生产过程中对微生物进行监控，证明污染的微生物指标低于设定的限度。对热稳定的物品，灭菌工艺可首选过度杀灭法，以保证灭菌物品获得足够的无菌保证值。对热不稳定性物品，其灭菌工艺的确定依赖于在一定的时间内，一定的生产批次的灭菌物品灭菌前微生物污染的水平及其耐热性污染的情况。因此，日常生产全过程应对产品中污染的微生物进行连续地、严格地监控，并采取各种措施降低物品微生物污染水平，特别是防止耐热菌的污染。热不稳定性产品的般不低于8以保证灭菌的有效性和均一性。湿热灭菌法应确认灭菌柜在不同装载时可能存在的冷点。当用生物指示剂进一步确认灭菌效果时，应将其置于冷点处。本法常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子(SporesofBacillus1.2.2干热灭菌法本法系指将物品置于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备中、利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原物质的方法。适用于耐高温但不宜用湿热灭菌法灭菌物品的灭菌，如玻璃器具、金属制容器、纤维制品、固体试药、液状石蜡等均可采用本法灭菌。干热灭菌条件一般为160～170℃×120min以上、170～180℃×60min以上或250℃×45min以上，也可采用其他温度和时间参数。无论采用何种灭菌条件，应保证灭菌后的产品的生物的测定。250℃×45min的干热灭菌也可除去无菌产品包装容器及有关生产灌装用具中的热原物质。采用干热灭菌时，被灭菌物品应有适当的装载方式，不能排列过密，以保证灭菌的有效性和均一性。干热灭菌法应确认灭菌柜中的温度分布符合设定的标准及确定最冷点位置等。常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子（sofBacillussubtili素灭活验证试验是证明除热原过程有效性的试验。一般将不小于1000单位的细菌内毒素加入待去热原的物品中，证明该去热原工艺能使内毒素至少下降3个对数单位。细菌内毒素灭活验证试验所用的细菌内毒素一般为大肠杆菌内毒（Eacherichiacoliendoxi。1.2.3辐射灭菌法灭菌。医疗器械、容器、生产辅助用品、不受辐射破坏的原料药及成品等均可用本参数主要是辐射剂量(指灭菌物品的吸收剂量)性及可能污染的微生物最大数量及最强抗辐射力，所使用的剂量事先应验证不影响被灭菌物品的安全性有效性及稳定性常用的辐射灭菌吸收剂量为y对最终产品、原料药、某些医疗器材应尽可能采用低辐射剂量灭菌。灭菌前，应对被灭菌物品微生物污染的数量和抗辐射强度进行测定，以评价灭菌过程赋予该灭菌物品的无菌保证水平。对于已设定的剂量，应定期审核，以验证其有效性。灭菌时，应采用适当的化学或物理方法对灭菌物品吸收的辐射剂量进行监控，以充分证实灭菌物品吸收的剂量是在规定的限度内。如采用与灭菌物品一起被辐射的放射性剂量计，剂量计要置于规定的部位。在初安装时剂量计应用标准源进行校正，并定期进行再1.2.4气体灭菌法本法系指用化学消毒剂形成的气体杀灭微生物的方法。常用的化学消毒剂为环采用气体灭菌法时，应注意灭菌气体的可燃可爆性、致畸性和残留毒性。本法中最常用的气体是环氧乙烷，一般与80％～90％的惰性气体混合使用，在充有灭菌气体的高压腔室内进行。该法可用于医疗器械，塑料制品等不能采用高温灭菌的物品灭菌。含氯的物品及能吸附环氧乙烷的物品则不宜使用。采用环氧乙烷灭菌时，灭菌柜内的温度、湿度、灭菌气体浓度、灭菌时间是影响灭菌效果的重要因数。可采用下列灭菌条件：温度相对湿度(60±10)％灭菌压力8×105Pa灭菌时间灭菌条件应予验证。灭菌时，将灭菌腔室先抽成真空，然后通入蒸汽使腔室内达到设定的温湿度平衡的额定值，再通入经过滤和预热的环氧乙烷气体。灭菌过程中，应严密监控腔室的温度、湿度、压力、环氧乙烷浓度及灭菌时间。必要时使用生物指示剂监控灭菌效果。本法灭菌程序的控制具有一定难度，整个灭菌过程应在技术熟练人员的监督下进行。灭菌后，应采取新鲜空气置换，使残留环氧乙烷和其他易挥发性残渣消散。并对灭菌物品中的环氧乙烷残留物和反应产物进行监控，以以确认灭菌腔室的密闭性。灭菌程序确认时，还应考虑物品包装材料和灭菌腔室中物品的排列方式对灭菌气体的扩散和渗透的影响。生物指示剂一般采用枯草芽孢杆菌孢子（sofBacillussubtili。1.2.5过滤除菌法本法系利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理以除去气体或液体中微生物的方法。常用于气体、热不稳定的药品溶液或原料的除菌。除菌过滤器采用孔径分布均匀的微孔滤膜作过滤材料，微孔滤膜分亲水性和疏水性两种。滤膜材质依过滤物品器的孔径定义来自过滤器对微生物的截留，而非平均孔径的分布系数。所以，用于最终除菌的过滤器必须选择具有截流实验证明的除菌级过滤器。过滤器对滤液的吸附不得影响药品质量，不得有纤维脱落，禁用含石棉的过滤器。过滤器的使用者应了解滤液过滤过程中的析出物性质、数量并评估其毒性影响。滤器和滤膜在使用前应进行洁净处理，并用高压蒸汽进行灭菌或作在线灭菌。更换品种和批次应先清洗滤器，再更换滤芯或滤膜或直接更换滤器。过滤过程中无菌保证与过滤液体的初始reduction系指规定条件下，被过滤液体过滤前的微生物数量与过滤后的微生物数量比的常对数值。即：为产品除菌前的微生物数量。N为产品除菌后的微生物数量。V用于表示过滤器的过滤除菌效率对孔径为022m的过滤器而言要求每1c2应不小于7。因此过滤除菌时，被过滤产品总的污染量应控制在规定的限度内。为保证过滤除菌效果，可使用两个除菌级的过滤器串连过滤，或在灌装前用过滤器进行再次过滤。在过滤除菌中，一般无法对全过程中过滤器的关滤除菌前后均应作滤器的完整性试验，即气泡点试验或压力维持试验或气体扩散流量试验，确认滤膜在除菌过滤过程中的有效性和完整性。完整性的测试标准来自于相关细菌截留实验数据。除菌过滤器的使用时间应进行验证，一般不应超过一个工过滤除菌法达到无菌的产品应严密监控其生产环境的洁净度，应在无菌环境下进行过滤操作。相关的设备、包装容器、塞子及其他物品应采用适当的方法进行灭菌，并防止再污染。1.3无菌生产工艺无菌生产工艺系指必须在无菌控制条件下生产无菌制剂的方法。无菌制剂的生产通常分为最终灭菌工艺和无菌生产工艺。采用最终灭菌工艺的产品常见的包括大容量注射剂和小容量注射剂等采用无菌生产工艺的产品常见的包括无菌灌装制剂、无菌分装粉针剂和冻干粉针等。无菌生产工艺应严密监控其生产环境的洁净度，并应在无菌控制的环境下进行过滤操作。相关的设备、包装容器、塞子及其他物品应采用适当的方法进行灭菌，并防止被再次污染。无菌生产工艺过程的无菌保证应通过培养基无菌灌装摸拟试验验证。在生产过程中，应严密监控生产环境的无菌空气质量、操作人员的素质、各物品的无菌性。无菌生产工艺应定期进行验证，包括对环境空气过滤系统有效性验证及培养基模拟灌装试验。1.4湿热灭菌详述在中国药典收载的灭菌方法中湿热灭菌是这些灭菌方法中使用最广泛的一种。它系指物质在灭菌器内利用高压蒸汽或其他热力学灭菌手段杀灭细菌，具有穿透力强，传导快，灭菌能力甚强，为热力学灭菌中最有效及用途最广的方法。由于蒸汽湿热灭菌本身具备无残留，不污染环境，不破坏产品表面，容易控制和重现性好等优点，被广泛应用于最终灭菌药品（尤其是注射剂）的除菌过程中。湿热灭菌的原理是使微生物的蛋白质及核酸变性导致其死亡。这种变性首先是分子中的氢键分裂，当氢键断裂时，蛋白质及核酸内部结构被破坏，进而丧失了原有功能。蛋白质及核酸的这种变性可以是可逆的，也可以是不可逆的。虽然微生物功能性结构被破坏，若氢键破裂的数量未达到微生物死亡的临界值，则其分子很可PAGEPAGE33能回复到它原有的形式，微生物就没有被杀死。为有效地使蛋白质变性，就需要水蒸气有足够的温度和持续时间，这对灭菌效果十分重要。高温饱和水蒸气可迅速使蛋白质变性，在规定操作条件下，蛋白质发生变性的过程即微生物死亡的过程，是可预见和重复的。1.4.1湿热灭菌的影响因素灭菌物中微生物的种类和数量不同的微生物耐热性相差很大，微生物处于不同的发育阶段，所需灭菌的温度与时间也不相同。根据一级动力学反应规律，最初微生物的数量越少，所需要的灭菌时间越短。微生物的存活能力因介质的酸碱度差别而不同。一般微生物在中性溶液中耐热性最大在碱性溶液中次之酸性介质最不利于微生物的生长发育如p为8时不灭菌物的性质溶液中若含有营养物质如糖类、氨基酸等，会对微生物有营养保护作用，并增强其耐热性。蒸汽的饱和度饱和蒸汽的穿透性比过热蒸汽、干热空气的穿透性强很多，而蒸汽冷凝时会将释放的大量潜热传递给被灭菌物，使微生物被杀灭，因此尽可能使用饱和蒸汽进行灭菌。1.4.2灭菌模式及相关参数微生物的灭活符合一级动力学方程微生物死亡速率是微生物耐热参数和杀灭时间的函数。即在给定的时间下被灭活的微生物与仍然存活数成正比。-Z的T温度的等效灭菌时间。性。当用一级动力学存活曲线模式来描述生物指示剂对某一灭菌剂的耐受特性时，位时，温度需调节的度数。它类似于半对数模式中的温度系数。在比较不同温度下值。分钟，3℃为16.0分钟湿热灭菌通常总设定在一个小的温度范围以内例如110-135℃灭菌率（Lethal这可采用以下方法计算：当于121℃下灭菌0.79分钟。值是一个灭菌程序杀灭时间的量度Tf,是参照温度Ref和温度系数下以灭个积分值是通过对梯形模式的数字累计而得：式中：d=每次温度读数之间的间隔时间式中：=LR=灭菌程序使生物指示剂下降的对数单位1.4.3灭菌指示剂控。下面将介绍灭菌指示剂的种类和应用方式。生物指示剂以其死亡所遵循的具有可预见性对数规则为基础，来确定并记录微生物存活概率的合格标准。生物指示剂的选定，取决于所用的灭菌方法和所选择的灭菌程序。因为生物指示剂是确定杀灭效果的关键材料，因此，生物指示剂应当具有可预测性和重现性。在过度杀灭程序的确认过程中，最常采用生物指示剂是嗜热脂肪芽孢杆菌采用其他对湿热灭菌耐热性强的微生物。在采用生物负载程序的确认过程中，典型所选用生物指示剂的数量应比产品或物品的生物负载高，耐热性应比生物负载强。只能采用芽孢来做蒸汽灭菌程序的挑战性试验。这些孢子必须达到一定的纯度（基本没有生长态菌、微小的残骸和团块），有确定的耐热特性，其母代菌株应该从公认的菌种库购买。化学监测器化学监测系统是对一个或多个关键灭菌参数有响应的装置。它们可作为定性指示剂，证明一个产品已灭过菌了。如对化学指示剂的反应作了定量化处理，它们还化学监测系统不能代替生物指示剂和温度/压力/时间的物理测试。1.4.4热力学和蒸汽质量在一定温度下，不同加热介质的内能有很大差别。过热水、饱和蒸汽、蒸汽/空气混合物含有的热能是不同的。在日常生产的灭菌程序中，必须达到在灭菌程序设计中确定的饱和蒸汽温度和压力之间的严格关系，以保证灭菌的效果。以下将阐述灭菌程序具体参数的重要性。温度和热量温度是热能的度量。热量是物体及其周围环境之间因温差而发生能量转移的结果。应当理解，在同一温度下，不同加热介质（如饱和蒸汽、空气、蒸汽混合物或过热水）所含的热能差异极大。蒸发/冷凝是饱和蒸汽灭菌中热能传递给被灭菌品的主要的手段1克100℃的饱和蒸汽含有2,675焦/克的能量这是100℃的水所含能（419焦耳/克和蒸发所需热能（2,256焦耳/克）或蒸汽冷凝释放热量之和。在100℃时，1克蒸汽冷凝时，可将2,256焦耳的热量传递给物体。相关数据可以在美国机械工程师学（E的网站获得应检查任何饱和蒸汽灭菌程序的压力和温度，以保证数值与蒸汽表中基本一致。如果不一致，就可能表示灭菌过程中，饱和蒸汽冷凝的热效应没有完全发挥作用。此情况下，传递的能量会少于计算得到的能量。蒸汽工厂蒸汽指一般的工业蒸汽，将生产的工业蒸汽分配并应用于各种能量转移，如设施、水和生产中加热，或者驱动发动机或涡轮机。对于湿热灭菌而言，如果腔室中的蒸汽并非来自夹套，则通常认为灭菌器的夹套可采用工厂蒸汽。在过热水灭菌方法中，工厂蒸汽也用于热交换器非洁净的一侧加热过热水。工艺蒸汽和工业蒸汽相类似，所不同的是，工艺蒸汽的源水不得加入有挥发性添加剂（胺或肼）。当容器已经完成灌封，需灭菌时，可用工艺蒸汽对液体产品作湿热灭菌。纯蒸汽（有时叫做洁净蒸汽或高质量蒸汽）的冷凝水须符合药典注射用水要求（I纯净蒸汽主要通过特定设计的纯蒸汽发生器生产或用多效蒸馏水机的第一个柱生产，多效蒸馏水机的供水应采用符合化学质量要求的水。药典中规定的软水、去离子水和纯化水，均可生产纯蒸汽。为系统的正常运行，需要注意对蒸汽分多孔/固体物品的灭菌，始终应采用纯净蒸汽。纯蒸汽质量的测试饱和蒸汽灭菌的半对数模式有一个假设，即饱和蒸汽中没有不凝性气体以及过热现象。湿蒸汽、过热蒸汽和含有不凝性气体的蒸汽，对多孔/固体物品程序的灭菌率有潜在的不良影响。蒸汽的质量对饱和蒸汽灭菌中灭菌率L影响的大小，取决于蒸汽质量偏离理想蒸汽状态的程度以及装载中被灭菌品的类型。对于多孔/固体物品的灭菌而言，由于灭菌器的供汽属确认的内容，应按公司内部的确认方针或按照适用的法规要求，对灭菌器供汽的质量特性定期、重复地进行测试及评估。测试项目包括：不凝性气体，干燥度和干燥值，过热不凝性气体：不凝性气体是蒸汽发生器生产的蒸汽中可能夹带的气体。这些不凝性气体（比如空气、氮气和二氧化碳）是蒸汽从纯的、汽相状态的水成为蒸汽和气体的混合物。干燥度蒸汽的干燥度与它的潜热密切相关潜热水平在50%的蒸汽其干燥度是干蒸汽，其干燥度为1.0.干燥值蒸汽的干燥值是饱和蒸汽灭菌程序所用蒸汽中携带液相水量的测试值。干燥值为0表示有100%的水，干燥值为1.0表示不含液相水的干燥蒸汽。干燥值小于1.0的蒸汽所含的能量会明显小于纯的饱和蒸汽。过热蒸汽对微生物的灭菌率小于该温度下的预期的灭菌率。造成过热的主要原因有1.4.5灭菌程序对于湿热灭菌来说，有两种常用的灭种程序：饱和蒸汽灭菌程序和空气加压灭菌程序。饱和蒸汽灭菌程序通常用于多孔/坚硬物品，而空气加压灭菌程序通常用于液体产品。下面对这两种灭菌程序作一概述。饱和蒸汽灭菌程序饱和蒸汽灭菌程序主要有两种类型：预真空和重力置换。饱和蒸汽最常见的灭菌程序是预真空程序该程序是在灭菌阶段开始之前通过机械真空泵或蒸汽喷射器将空气从腔室中抽走。预真空程序尤其适用于可以包藏或夹带空气的装载物，比如软管、过滤器和灌装机部件。在制药行业中，脉动真空程序常用于难以去除空气的多孔/坚硬装载的灭菌。灭菌程序开始之前，对装载的处理是很重要的。如果每次抽真空至0.1个大气压，那么每个脉冲将使灭菌器内的空气减少90%或者1个对数单位的下降值，至高于大气压，以避免空气进入腔室）。通过这个方法，提高去除空气的效率，这样平衡时间就会缩短。在制定灭菌程序时，要准确地确定脉冲的次数和类型。典型的重力置换程序建立在如下理论基础上：腔室中的冷空气比进入的蒸汽重，因而将下沉到腔室的底部。蒸汽进入灭菌器腔室迫使空气从腔室底部的排水管排出（和冷凝水一起通过蒸汽疏水阀排出）。排除空气成功与否取决于疏水阀的正确运行和适当的蒸汽分布。蒸汽通过导流板或散流器（例如多孔管）注入灭菌器腔室。如果蒸汽进得过快或分布不合理，装载的顶部或周围可能会夹带空气层。如果进汽过于缓慢，空气受热而扩散入蒸汽中，从而使排除空气更加困难。重力置换灭菌器排除空气的效率低于其他设计形式的灭菌器，但是，对于在线灭菌工艺来说，通常采用此程序。当然，工艺上对于进汽速率和方式就要求的更为严格。空气加压程序空气加压的灭菌程序通常包括两种：蒸汽-空气混合物程序和过热水灭菌程序。当蒸汽中加入空气，从而产生一个高于一定温度下饱和蒸汽压的压力时，这种灭菌程序即称为蒸汽-空气混合物的灭菌程序。尽管加入空气是必要的，与饱和蒸汽灭菌相比它的热传递速率低通常采用风扇来使蒸汽-空气混合物循环蒸汽-混合物程序在灭菌后，可以使用多种方法来冷却产品。最常用的方法是向灭菌器夹套或盘管通冷却水，保持空气循环冷却。有些蒸汽-空气灭菌器通过在产品上方的喷淋冷却水使其降温。过热水灭菌程序是用过热水循环来灭菌已灌封容器的很有效的方法。最常用的方法是通过泵将水从灭菌器底部（被灭菌品下方）打入喷淋球，不断喷淋和循环。另一种循环过热水灭菌法是将产品完全浸没在水中灭菌。所有这类过热水循环的灭菌程序都使用空气加压。在灭菌过程中，空气的加压是可以控制的。加压的最低值由以下因素决定：采用的温度；保持产品期望特性所需的压力；及保持循环泵正常运行所需的压力。过热水灭菌所用水的微生物水平是最重要的质量特性。水可以在来保持所要求的低的微生物水平。水循环为最终灭菌产品提供了有效的冷却方法，因而提高了灭菌器的效率。1.5因果分析法(鱼骨图分析法)[10]因果分析法(CausalFactor是通过因果图表现出来，因果图又称1953石川馨最早使用的，是为了寻找产生某种质量问题的原因，发动大家谈看法，做分析，将群众的意见反映在一张图上，就是因果图。用此图分析产生问题的原因，便效果好，所以得到了许多企业的重视。使用该法首先要分清因果地位；其次要注意因果对应，任何结果由一定的原因引起，一定的原因产生一定的结果。因果常是相互对应的，不能混淆；最后，要循因导果，执果索因，从不同的方向用不同的思维方式去进行因果分析，这也有利于发展多向性思维。1.5.1鱼骨图定义问题的特性总是受到一些因素的影响，我们通过头脑风暴找出这些因素，并将它们与特性值一起，按相互关联性整理而成的层次分明、条理清楚，并标出重要因素的图形就叫特性要因图因其形状如鱼骨所以又叫鱼骨图(以下称鱼骨图)它是一种透过现象看本质的分析方法同时鱼骨图也用在生产中来形象地表示生产车间的流程。1.5.2鱼骨图的三种类型鱼骨图基本结构1.整理问题型鱼骨图(各要素与特性值间不存在原因关系，而是结构构成关系，对问题进行结构化整理)2.原因型鱼骨图(鱼头在右，特性值通常以“为什么……”来写)3.对策型鱼骨图(鱼头在左，特性值通常以“如何提高/改善……”来写)1.5.3鱼骨图制作制作鱼骨图分两个步骤：分析问题原因/结构、绘制鱼骨图。1.分析问题原因/结构。、针对问题点，选择层别方法（如人机料法环测量等。、按头脑风暴分别对各层别类别找出所有可能原因（因素。分析要点：般从“人事时地物”层别，应视具体情况决定；b大要因必须用中性词描（不说明好坏中小要因必须使用价值判（如…不良；掌控或正在执行的内容。对人的原因，宜从行动而非思想态度面着手分析；d中要因跟特性值小要因跟中要因间有直接的原因-问题关系小要因应分析至可以直接下对策；e请以关联性最强者为（必要时考虑三现主义：即现时到现场看现物，通过相对条件的比较，找出相关性最强的要因归类）选取重要原因时，不要超过7项，且应标识在最未端原因；2.鱼骨图绘图过程、填写鱼头（按为什么不好的方式描述，画出主骨要点：绘图时，应保证大骨与主骨成60度夹角，中骨与主骨平行1.5.4鱼骨图使用步骤1.查找要解决的问题；2.把问题写在鱼骨的头上；3.召集同事共同讨论问题出现的可能原因，尽可能多地找出问题；4.把相同的问题分组，在鱼骨上标出；5.根据不同问题征求大家的意见，总结出正确的原因；6.拿出任何一个问题，研究为什么会产生这样的问题？7.针对问题的答案再问为什么？这样至少深入五个层次（连续问五个问题；8.当深入到第五个层次后，认为无法继续进行时，列出这些问题的原因，而后列出至少20个解决方法。1.6选题意义和目的由于尺寸和结构的限制，大量的工艺设备无法使用灭菌柜灭菌，而整个系统的在线灭菌可以将无菌操作（如连接）的工作大幅降低甚至消除，如配液罐和充填管线的灭菌等。本论文所述的在线灭菌系统用于不同规格灌装罐的灭菌。该在线灭菌系统的设计中，几乎在每一个低点处和支管末端均设计了排空口和疏水阀，并对灌装罐和管路进行了良好的坡度设计，以确保蒸汽容易供应到各个使用点，并且及时排走空气和蒸汽冷凝产生的冷凝水（见图1-1）。对于灭菌后的容器，通入除菌过滤的无油压缩空气，清除系统残留的湿气，同时保持系统在使用前处于正压的保护状态。图1-1其SIP工艺流程为：准备阶段→泄漏测试→升温阶段→灭菌阶段→干燥阶段→加压阶段→结束程序（见图1-2）。图1-2在对无菌灌装罐的灭菌测试过程中，位于无菌气体过滤器进气口的生物指示剂挑战性实验失败（见图1-3。

图1-3第2章利用因果分析法（鱼骨图分析法）进行分析2.1人员2.1.1生物指示剂安装影响无菌过滤器作为灌装罐的一部分,是被反向灭菌的。洁净蒸汽通过插底管进入灌装罐，一方面通过罐底的冷凝水排放口进行灭菌，另一方面通过无菌过滤器的出气口进入滤芯内部，穿透滤芯对其进行灭菌，穿透滤芯的蒸汽一部分从顶部的冷凝水排放口排出，另一部分进入无菌过滤器的进气口，沿着冷凝水排放口排出。挑战性实验失败的生物指示剂正是处于这样一个离洁净蒸汽源最远，同时又是排出灭菌过程中产生冷凝水的位置，所以这也是该位置被选择为最差条件的原因。因为此区域空间狭小，生物指示剂的安装位置会影响到整个灭菌过程冷凝水的排出，从而增加灭菌失败的风险。更为关键的是，因为空间狭小，最初的生物指示剂安装位置可能会在接下来管路连接过程中发生变化。所以，这一原因被划分为高可能性。2.1.2检测人员污染发现生物指示剂失败的同时，实验室人员已经展开了实验室调查，分别从人、机、料、法、环、测六个方面进行分析，因不在本论文讨论范围之内，所以不进行赘述。调查结果显示生物指示剂失败并不是由实验室检测造成的，所以这一原因被划分为无关。2.1.3测试人员污染该生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌，专门用于灭菌确效。测试呈阳性的生物指示剂通过进一步确认证实是由嗜热脂肪芽孢杆菌造成。测试过程是将生物指示剂瓶内装有培养基的安瓶夹碎，直接在培养箱中进行培养，在此过程中未发现有瓶子的泄漏。由此可排除测试人员在拆卸过程中对生物指示剂造成污染。所以这一原因被划分为无关。2.2机器2.2.1管路及阀门安装错误管路及阀门为专用配件，其安装位置和方式均与之前的测试一致，所以这一原因被划分为无关。2.2.2软管连接段为盲管本在线灭菌站用于两种规格的灌装罐的灭菌，因罐型不同，需要用软管连接灌装罐和其它固定的公用管道无菌过滤器的入口就是通过一根长约1.5米的软管同压缩空气控制阀门相连。压缩空气控制阀门位于高点，这样在灭菌过程中产生的冷凝水就会通过无菌过滤器入口处的冷凝水排放支管排出。因为在灭菌过程中压缩空气阀门处于关闭状态，尽管干燥的洁净饱和蒸汽密度比空气小，但是不能正常在软管内流通。所以，这一原因被划分为高可能性。2.3环境2.3.1破碎的生物指示剂污染了环境在之前的测试过程中，出现了灭菌结束后位于罐体底部冷凝水排放口的生物指示剂瓶子开封，生物指示条裸漏的情况。但是，之前的多次测试表明，位于罐体底部冷凝水排放口的生物指示剂可以很好的被灭菌，通过位于该点的温度监测探头所监测到的灭菌温度也远高于设定温度。同时，即使菌种泄露，如果其它的生物指示剂瓶子未破损，也不可能造成污染。所以这一原因被划分为无关。2.3.2测试环境降级为不受控环境通过实验室调查报告得知呈阳性的生物指示剂是由嗜热脂肪芽孢杆菌造成的。尽管测试环境降级为不受控环境，但此菌种并未在日常环境监测和人员身上发现，且不会对未破损的生物指示剂瓶内造成污染。所以这一原因被划分为无关。2.3.3空调系统正在做烟雾实验通过实验室调查报告得知呈阳性的生物指示剂是由嗜热脂肪芽孢杆菌造成的。空调系统的烟雾实验不会引入嗜热脂肪芽孢杆菌，且不会对未破损的生物指示剂瓶内造成污染。所以这一原因被划分为无关。2.3.4微生物测试环境受到污染通过实验室调查报告显示生物指示剂失败并不是由实验室检测造成的。所以这一原因被划分为无关。2.4方法2.4.1修改后的测试条件太严格本次测试选择了更为严格的测试条件。相比较之前设定的122度的灭菌温度，本次的灭菌温度设定为121.1度这样做的目的是通过减少加热时间来缩短程序运行时间，同时减少蒸汽的损耗。根据生物指示剂的质量检测报告，可得到相应的数值：初始污染菌中的孢子数（eCount：1.91*106个微生物耐热参数（alue：2.3分钟灭菌温度系数（Zalue：19.4度根据过度灭杀的方法，不同温度下，通过计算得出所需的灭菌时间如下：当设定温度为121.1度时：分钟

=10

分钟==19.23分钟当设定温度为122度时：分钟

=10

分钟==15.62分钟通过计算得知，两个温度所需的灭菌时间相差3.58分钟。假设温度探头测到的温度为生物指示剂内的温度，通过计算，实际的值为21.88分钟，大于灭菌所需的时间19.20分钟如果因其它原因导致温度探头测到的温度和生物指示剂内的温度相差较多，实际的值有可能小于灭菌所需的时间19.20分钟，所以这一原因被划分为有可能。2.5材料2.5.1生物指示剂影响了冷凝水的排出生物指示剂瓶的形状为直径10毫米，长度49径为2290碍冷凝水从直径为8毫米的冷凝水排出口排出（见图1-3。所以，这一原因被划分为高可能性。2.5.2生物指示剂菌落数量差异通过调查发现，供应商检测报告中生物指示剂孢子数为2800000个，而内部测试的结果为1910000个。根据过度灭杀的方法，按照不同的孢子数目，通过计算得出所需的灭菌时间如下：当孢子数为1.91*106个时：分钟

=10

分钟==19.23分钟当孢子数为2.8*106个时：分钟

=10

分钟==19.04分钟通过上面的数据得出，按照内部检测报告给出的数据进行计算得出灭菌所需时间为19.23分钟按照供应商检测报告给出的数据进行计算得出灭菌所需时间为19.04分钟。虽然在测试时所设定的灭菌时间是根据内部给出的生物指示剂孢子数进行计算得出的但是设定值为20分钟所以这一原因被划分为无关。2.6测试2.6.1在线灭菌系统的温度和压力探头检测数据不可靠在线灭菌系统的温度和压力探头在使用前已经过校准，校验证书已放行。测试过程中无异常情况发生，无相关的报警产生。测试结束后，温度和压力探头又进行了校验，校验结果符合规格要求。所以这一原因被划分为无关。2.6.2测试仪器的温度和压力探头监测数据不可靠测试仪器的温度和压力探头在使用前已经过校准，校验证书已放行。测试过程中无异常情况发生，且所采集到的数据均为有效数据，可以被正常使用。测试结束后，温度和压力探头又进行了校验，结果符合规格要求。所以这一原因被划分为无关。2.7分析结果总结图2-1通过因果分析法确定盲管和生物指示剂的安装很可能对湿热在线灭菌工艺造成了重要的影响。第3章实验设计、实施和结果分析3.1实验设计3.1.1监测仪器和试验试剂仪器名称：ealidator用途：温度测量序列号：1001008用途：压力测量生产商：SGMBiotech型号：嗜热脂肪芽孢杆菌（Geobacillus用途：蒸汽灭菌确效初始污染菌中的孢子数（eCount：1.91*106个微生物耐热参数（Dae：2.3分钟灭菌温度系数（Zalue：19.4度3.1.2实验安排本方法通过增加温度检测点，增加生物指示剂，增加配件，监控灭菌过程中的压力等，用选定的实验进行验证。所有试验的压力监控是通过放置于软管初端的压力探头实现的，放置情况如下图所示：图图3-2图3-1图3-2试验一：在原瓶装生物指示剂附近增加温度检测探头（见图3-4，监测整个灭菌过程中相邻点的温度变化情况。图图3-4图图和试验二对瓶装生物指示剂的位置进行轻微调整避免生物指示剂接触管路底（见图3-5，观察温度检测探头在整个灭菌过程中监测到的温度变化情况。图3-5试验三：对实验二进行重复，此为平行试验。试验四：模拟失败验证实验的生物指示剂放置位置，在进气口的手动阀门前安装连通管，使得压缩空气软管中产生的冷凝水可以排放。观察新增温度检测探头在整个灭菌过程中的温度变化情况，同时加装生物指示剂，验证阀门进口的灭菌效果。图3-6新温度探（TC02和生指示（BI02其它度探头和生物指示剂位置与试验一相同。试验五：对实验四进行重复，增加温度监测和生物指示剂监测。观察新增温度检测探头在整个灭菌过程中的温度变化情况，同时利用加装的生物指示剂验证阀门进口和冷凝水排放口的灭菌效果。图3-7新温度探（TC05和生指示（BI03其它度探头和生物指示剂位置与实验四相同。3.2试验实施和结果分析3.2.1试验实施和独立结果分析：试验一：图3-8图3-9按照图检测仪器Kayealidtr的时间选定预设的测试程序后启动测试确保整个试验过程中无报警产生试验结束后从Kayealidatr阶段的温度数据，用Excel图3-9试验一温度图。通过图3-9可位于蒸汽流通的位置，所以温度远高于设定温度，而且温度比较稳定；和所处位置蒸汽流通不好，所以温度偏低，并且灭菌前期温度的波动较大，随着灭菌的推进，温度趋高且逐渐平缓。因为干燥的饱和蒸汽密度低和冷凝水的影响，所以位于顶部的所监测的温度高于位于底部的所监测的温度，8所在位置的0肯定不能满足工艺要求生物指示（BI01显示为阴性嗜热脂肪芽孢杆菌被杀死。试验二：图3-10图按照图3-10（试验二位置图）放置温度探头和生物指示剂。同步在线清洗灭菌系统和检测仪器Kayealidatr中无报警产生试验结束后从Kayealidtr中导出温度监测数据选取灭菌阶段的温度数据，用Excel软件进行制图（见图3-1。通过图3-1可看和所处位置蒸汽流通不好，所以温度偏低，并且灭菌前期温度的波动较大，随着灭菌的推进，温度趋高且逐渐平缓。因为干燥的饱和蒸汽密度低和冷凝水的影响，所以位于顶部的所监测的温度高于位于底部的所在位置的肯定不能满足工艺要求。生物指示剂（BI01）显示为阴性，嗜热脂肪芽孢杆菌被杀死。试验三：图3-12图3-13按照图3-12（试验三位置图）放置温度探头和生物指示剂。同步在线清洗灭菌系统和检测仪器Kayealidatr中无报警产生试验结束后从Kayealidtr中导出温度监测数据选取灭菌阶段的温度数据，用Excel软件进行制图（见图3-13试验三温度图。通过图3-13可看和所处位置蒸汽流通不好，所以温度偏低，并且灭菌前期温度的波动较大，随着灭菌的推进，温度趋高且逐渐平缓。因为干燥的饱和蒸汽密度低和冷凝水的影响，所以位于顶部的所监测的温度高于位于底部的所在位置的肯定不能满足工艺要求。生物指示剂（BI01）显示为阴性，嗜热脂肪芽孢杆菌被杀死。试验四：图3-14图3-15按照图3-14（试验四位置图）安装连通管，放置温度探头和生物指示剂。同步在线清洗灭菌系统和检测仪器Kayealidatr整个试验过程中无报警产生。试验结束后，从Kayealidatr选取灭菌阶段的温度数据用l软件进行制（见图3-15试验四温度图通过图3-15可看出，安装连通管后，所有的温度探头均位于蒸汽流通的位置，所以温度都高于设定的温度，而且温度比较稳定。因为干燥的饱和蒸汽密度低和冷凝水的影所监测的温度高于位于底部的指示剂（BI01和BI02）显示为阴性，嗜热脂肪芽孢杆菌均被杀死。试验五：图3-16图3-17按照图3-16（试验五位置图）安装连通管，放置温度探头和生物指示剂。同步在线清洗灭菌系统和检测仪器Kayealidatr整个试验过程中无报警产生。试验结束后，从Kayealidatr选取灭菌阶段的温度数据用Excel图3-17试验五温度图通过图3-17可看出，安装连通管后，所有的温度探头均位于蒸汽流通的位置，所以温度都高于设定的温度，而且温度比较稳定。因为干燥的饱和蒸汽密度低和冷凝水的影所监测的温度高于位于底部的指示剂（BI01、BI02和BI03）显示为阴性，嗜热脂肪芽孢杆菌均被杀死。3.2.2五次试验比较分析：图3-18通过图3-18这主要是由于灌装罐的灭菌是利用干燥的饱和蒸汽密度比空气低的原理，通过快速通入的干燥饱和蒸汽将灌装罐及管路内的空气通过排空管路排出体系，利用蒸汽冷其是表面微生物发生水合作用，从而加速了它们的死亡。因为这节软管的初端为封闭状态，蒸汽无法在软管内顺利流通，干燥的饱和蒸汽在进入的过程中随着温度的降低而冷凝，所以可以判断在灭菌的过程中会有大量冷凝水产生，而这些冷凝水会沿着软管，流经手动阀门后通过排放口排出。从而验证了因果分析法（鱼骨图分析法）的结论。表3-1压力试验一试验二试验三试验四试验五最大值2.42Bar2.42Bar2.42Bar2.42Bar2.42Bar最小值2.35Bar2.35Bar2.35Bar2.34Bar2.34Bar通过表3-1可以看出在五次试验的灭菌过程中压力的波动范围比较稳定通过查询美国国家标准与技术研究（NationalIntitteoftandardsandechnologT）中的相关数据表格，可以判定该压力下的蒸汽为干燥的饱和蒸汽，同时也证明饱和蒸汽的汽源很稳定，没有对测试结果造成影响。图3-19通过比较图3-19五次测试灭菌期间的温度，可以看出测试四和五的温度明显高于其它的三个测试，这主要是由以下两方面造成：了通路，在升温和灭菌过程中，洁净蒸汽可以顺利通过手动阀门。进入了排空管，从而不会对手动阀门低端的温度造成太大的影响。前三个测试的主要不同是生物指示剂的安装位置不同，通过比较它们的灭菌温度曲线可以看出，由于测试一是将生物指示剂安装在管路的底部，在灭菌前期的时候温度明显低于将生物指示剂安装在管路顶部时该点的温度，随着灭菌的进行，温度的差异趋于减小，所以可以推断出是由于生物指示剂阻挡了冷凝水的流动，随着灭菌的进行，盲管的温度逐渐升高，该点受到冷凝水的影响逐渐减小。从而验证了因果分析法（鱼骨图分析法）的结论。图3-20通过比较图3-20汽流通的位置，所以温度一直都很高，而且波动范围比较小。虽然可以看出不同的生物指示剂安装位置和管路结构会对温度造成影响，但是影响不是很明显。图3-21通过比较图3-21五次测试灭菌期间的温度，可以看出测试四和五的温度明显高于其它的三个测试，这主要是由以下两方面造成：成了通路，在升温和灭菌过程中，洁净蒸汽可以顺利通过手动阀门。进入了排空管，从而不会对手动阀门低端的温度造成太大的影响。前三个测试的主要不同是生物指示剂的安装位置不同，通过比较它们的灭菌温度曲线可以看出，由于测试一是将生物指示剂安装在管路的底部，在灭菌前期的时候温度低于将生物指示剂安装在管路顶部时该点的温度，随着灭菌的进行，温度的差异趋于减小，所以可以推断出是由于生物指示剂阻挡了冷凝水的流动，随着灭菌的进行，盲管的温度逐渐升高，该点受到冷凝水的影响逐渐减小。从而验证了因果分析（鱼骨图分析法的结论但是和温度探头1比较来说由于温度探头是安装在贴近管路底部的位置，所以更容易受到冷凝水的影响，由此导致前三次试验的温度差异不是很明显，同时由于安装操作较难重复，所以第二次和第三次试验该点温度的重现性较差。第四次和第五次试验该点温度的重现性也较差。第4章实验结论4.1瓶装生物指示剂的安装影响分析无菌过滤器入口处的三通连接是比较敏感的区域，生物指示剂的安装使其成为关键的位置。生物指示剂的安装不但会影响蒸汽的流通，而且会影响冷凝水的排放。我们只能用后面的测试尽量模拟失败的灭菌验证，但是无法达到完全一样。特别是在靠近管路底部的位置，即使是生物指示剂位置的微小变化也会对生物指示剂的结果造成非常大的影响，这就是为什么该位置的生物指示剂在灭菌验证过程中的结果为阳性，但在后面的模拟测试为阴性的原因。4.2验证结果对日常生产的影响分析通过测试可以看出，即使是生物指示剂安装位置的微小变化也会对相关探头的监测数据造成非常大的影响。而在日常生产过程中，不会安装生物指示剂，这样就不会阻碍蒸汽的流通和冷凝水的排放，从而使得这一敏感区域就会被很好的灭菌。4.3盲管对验证及生产的影响分析压缩空气软管因一端封闭而形成了盲管。这样其内部的空气在充入洁净蒸汽时很难排出，所以软管的初端在整个灭菌过程中温度很低，由此而导致大量的冷凝水，影响进气口处手动阀门的灭菌效果。虽然在过滤器前端的灭菌效果不会破坏罐内的无菌状态，但是为了增加无菌保障，作为改进措施，会在进气口的手动阀门前增加连通管，以确保手动阀门的灭菌效果。在灭菌结束后，会通入无油压缩空气，清除系统残留的湿气，在关闭手动阀门后，整个灌装罐在使用前均处于正压的保护状态。4.4测试条件的影响分析在使用因果分析法进行分析时指出，因为修改后的测试条件太严格，有可能会导致该试验的失败。在试验设计阶段，为减少变量，同时也考虑到当时修改参数的初衷是为了通过减少加热时间来缩短程序运行时间并减少蒸汽的损耗，所以未对该条件进行修改。通过接下来的试验可以看出，修改后严格的测试条件并不是造成该生物指示剂挑战性实验失败的原因。第5章实验讨论5.1讨论一为避免软管连接处存水，配置的软管均较短，以达到坡度的要求。以上两点在客观上造成瓶装生物指示剂的安装困难。在进行设计试验的操作过程中，测试人员只能尽量模拟瓶装生物指示剂放置位置，无法完全保证试验的重现性，所以生物挑战性失败的实验的未能得到重现。5.2讨论二因为此次生物指示剂挑战性实验的失败并不会影响到罐装罐的灭菌效果的考察，而且测试期间时间紧迫，所以试验设计的目的只是为了通过尽可能少的试验调查此前实验失败的原因。所以没有设计三次试验来验证试验操作的重复性，只是通过横向比较进行趋势分析，没有统计学意义。[1]GMP指南，中国医药科技出[2][3]俞秀丽田耀华，对制药设备CIP与SP相关问题的讨论，医药工程设计，28，9（：[4]李颖，菌药品生产车间灭菌系统设计探讨，广州化工，2124（1：8788[5][6]郑珂菌制剂生产设备在线清洗与在线灭菌的重要性探讨齐鲁药事209（51233[7]ofUsingCycleVo.7,issue6,2004[8]1,[9]4,1,PAGEPAGE36目录第一章总论 11.1项目背景 11.1.1项目名称及承办单位 11.1.2承办单位 11.1.3项目建设地点 11.1.4可行性研究报告编制单位 11.2报告编制依据和研究范围 11.2.1报告编制依据 11.2.2研究范围 21.3承办单位概况 21.4项目提出背景及必要性 31.4.1项目提出的背景 31.4.2项目建设的必要性 41.5项目概况 51.5.1建设地点 51.5.2建设规模与产品方案 51.5.3项目投资与效益概况 51.6主要技术经济指标 6第二章市场分析及预测 82.1绿色农产品市场分析及预测 82.1.1生产现状 82.1.2市场前景分析 92.2花卉市场分析及预测 112.2.1产品市场现状 112.2.2市场需求预测 122.2.3产品目标市场分析 132.3中药材产品市场分析及预测 132.3.1产品简介 132.3.2产品分布现状分析 152.3.3市场供求状况分析 162.3.4市场需求预测 17第三章建设规模与产品方案 203.1项目的方向和目标 203.2建设规模 203.3产品方案 213.3.1优质高产粮食作物种植基地 213.3.2无公害蔬菜种植基地 213.3.3中药材种植基地 213.3.4花卉种植基地 21第四章建设场址及建设条件 224.1建设场址现状 224.1.1建设场址现状 224.1.2厂址土地权属类别及占地面积 224.2建设条件 224.2.1气象条件 224.2.2水文及工程地质条件 234.2.4交通运输条件 234.2.5水源及给排水条件 244.2.6电力供应条件 244.2.7通讯条件 244.3其他有利条件 244.3.1农产品资源丰富 244.3.2劳动力资源充沛 254.3.3区位优势明显 25第五章种植基地建设方案 265.1概述 265.1.1种植基地运营模式 265.1.2种植基地生产执行标准 265.23000亩优质高产粮食作物种植基地建设方案 285.2.1品种选择 285.2.2耕作技术 285.2.3种植基地建设内容和产量预期 335.32000亩无公害蔬菜种植基地建设方案 345.3.1概述 345.3.2无公害蔬菜质量标准 345.3.3蔬菜栽培与田间管理 355.3.4种植基地建设内容和产量预期 375.42000亩中药材种植基地建设方案 385.4.1概述 385.4.2GAP基地建设要求 385.4.3选择优良品种 395.4.4金银花栽培与田间管理 395.4.5种植基地建设内容和产量预期 435.52000亩花卉种植基地建设方案 445.5.1概述 445.5.2技术方案 455.5.3种植基地建设内容和产量预期 49第六章田间工程及配套设施建设方案 516.1概述 516.23000亩绿色粮食作物种植基地灌溉方案 516.2.1总体布局 516.2.2设计依据 526.2.3灌溉制度的确定 526.2.4渠道衬砌工程设计 536.32000亩无公害蔬菜种植基地灌溉方案 556.3.1总体布局 556.3.2设计依据 556.3.3主要设计参数 566.3.4灌水器选择与毛管布置方式 566.3.5滴灌灌溉制度拟定 576.3.6支、毛管水头差分配与毛管极限长度确定 586.3.7网统布置与轮灌组划分 596.3.8管网水力计算 606.3.9水泵扬程及选型 646.42000亩中药材种植基地灌溉方案 656.4.1设计依据