【五味子配方颗粒的制备研究4700字（论文）】

五味子配方颗粒的制备研究

目录TOC\o"1-2"\h\u21231五味子配方颗粒的制备及其粉体学研究 111786摘要 1220531.绪论 1176011.1五味子的基本介绍 2190901.2五味子的药理作用 2289002实验部分 342382.1材料和仪器 330442.2实验步骤 452073.实验结果与分析 6121093.1出膏率分析 657383.2方法学考察结果 6313044结论与展望 9326404.1结论 9102564.2展望 926026参考文献 9摘要目的：建立五味子的HPLC标准曲线，优化提取工艺，进行粉体流动性参数测定。方法：采取煎煮法对五味子进行提取，并设计L9(34)正交试验；减压蒸发制备五味子浸膏；采用湿法挤压制粒工艺制备五味子配方颗粒；建立五味子的HPLC标准曲线，以五味子出膏率为指标，优化五味子的提取工艺。结果：该方法精密度、稳定性、重复性良好；测定了9份五味子浓缩液，4份五味子配方颗粒，8号提取工艺，即加14倍水，煎煮2次，每次2小时，总体质量较为稳定，为最佳提取工艺；结论：该方法简便可靠，可以优化最佳提取工艺，并为五味子配方颗粒的质量控制和评价提供依据。关键词：五味子；提取工艺；配方颗粒；HPLC；粉体流动性参数测定；1.绪论1.1五味子的基本介绍五味子Schisandrachinensisfructus为木兰科植物五味子Schisandrachinensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果实，始载于《神农本草经》。《新修本草》记录其“五味皮肉甘酸，核中辛苦，都有咸味”，故名五味子。五味子收载于2020年版《中国药典》一部，具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心的功效[1]。用于慢性咳嗽哮喘、精液湿滑、迁延性腹泻、自汗盗汗、水伤口渴、内热口渴、心悸失眠。为临床常用中药饮片之一。研究表明，五味子中主要含有木脂类素[1-2]、挥发油类[3]、萜类[4]、有机酸[5]、维生素C、钨、铁、锰等活性成分，临床上起主要作用的主要是五味子乙素、丙素，五味子醇甲，五味子酯甲等木质索类成分[6-7]。五味子具有较好的保护消化系统、中枢神经系统、内分泌系统、免疫系统和肾脏作用，还具有保肝护肝脏[8-9]、镇静催眠、降血糖[10]、抗氧化[11]、增强免疫力、抗癌、抗艾滋病病毒(HIV)的作用，同时对于肾病、哮喘、肺癌等疾病也有一定的医治作用[12-14]，在疾病的治疗方面具有广泛的应用前景。五味子通过调节神经、细胞等体内微小物质，促使致病菌的代谢，诱导异常细胞凋亡，从而保护正常细胞发挥作用的。1.2五味子的药理作用1.2.1对中枢神经系统的作用五味子中的木脂素对我们的中枢神经系统有很好的保护作用。从五味子中提取的木脂素可以让本来会在大脑皮层和海马体内堆积的β淀粉样蛋白(Aβ1-42)量减少,而且能够十分明显地抑制乙酰胆碱酶活性。能明显改善由于β淀粉样蛋白的神经毒性导致的认知功能障碍[15]。而且，北五味子还具有明显的镇静和催眠作用。五味子可以显著提高睡眠质量且不产生药物依赖性[16]。1.2.2对免疫系统的作用五味子多糖不仅能提高小鼠胸腺指数，而且能增强巨嗜酸性粒细胞的吞噬作用，增加吞噬作用率和吞噬作用指数，具有显著的免疫调节作用[17]。五味子乙素的用药剂量可以改善小鼠的脾指数和胸腺指数，且用药剂量越大作用越明显,五味子醇甲能提高小鼠的免疫功能[18-19]。五味子可以通过促进淋巴细胞中DNA的合成的方式进而加速淋巴细胞的形成，促进脾脏的免疫功能，而五味子醇甲可增强肾上腺皮质激素的免疫抑制作用，从而对异种移植的排斥产生抵抗作用[20]。1.2.3对肝脏的作用五味子对于患有病毒性感染慢性肝炎的病人有很好的治疗效果，且对人体的危害较小。除此之外，五味子增强胆液的代谢能力，加快有毒物质的在体内的代谢，也是十分有效的养肝中药。五味子还对肝损伤造成的血细胞谷丙转氨酶上升有抑制作用。五味子及其主要化学成分五味子甲素、乙素、丙素等均对保肝和降酶有着显著的作用，是多种保肝降酶中成药的主要成分[21]。五味子能明显提高肝脏中抗氧化酶系统、超氧化物歧化酶和超氧化物歧化酶的活性，可以有效减轻肝细胞的损伤[22]。2实验部分2.1材料和仪器2.1.1药物、试剂表2-SEQ表\*ARABIC\s21药物和试剂名称规格生产厂家五味子批号：20200527宁安市北域珍奇山林食品有限公司五味子醇甲批号：20170623西安贝吉诺生物科技有限公司无水乙醇分析纯，批号：20160913华东医药股份有限公司三氯甲烷分析纯，批号：20160300浙江中星化工试剂有限公司糊精药用，批号：20151125镇江市康富生物工程公司甲醇分析纯，批号：20170510华东医药股份有限公司2.1.2仪器设备表2-2实验仪器设备设备名称型号生产厂家电子天平SQP赛多利斯科学仪器（北京）有限公司恒温水浴锅HH-2江苏金坛市江南仪器厂旋转蒸发器RE-52上海亚荣生化仪器厂智能粉体物性测定仪BT-1001丹东百特仪器有限公司高效液相色谱仪Agilenx1200美国安捷伦公司超纯水机UPWS杭州永洁达净化科技公司电炉CRLB-1500S(中外合资)肇庆金雅乐电器有限公司鼓风干燥箱DHG-9245A上海一恒科学仪器有限公司超声波清洗器KQ-500B昆山市超声仪器有限公司可见分光光度计TU-1810北京普析通用仪器有限公司2.2实验步骤2.2.1色谱条件色谱柱：EclipsePlusC18柱（250mm×4.6mm,5μm）；流动相：甲醇-水(65:35)，流速1mL·min-1，柱温25℃，进样量10μL；2.2.2五味子醇甲对照品溶液制备取适量五味子醇甲对照品，并且进行精密称定，加入适量甲醇制成浓度为0.3mg/ml的五味子醇甲溶液。2.2.3五味子供试品溶液制备取本品粉末(相当于原药材0.25g)适量，精密称定,置25ml量瓶中，加入18mL甲醇，超声处理(功率250W，频率20kHz)20min，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.2.4阴性对照液的制备分别按供试品处方称取辅料，按“2.2.2”项下供试品溶液制备方法制得不含五味子的阴性对照液。2.2.5方法方法学考察2.2.5.1标准曲线建立分别精密吸取五味子醇甲对照品溶液2.0、4.0、6.0、9.0、12.0μL注人色谱仪，按“2.2.1”项下色谱条件测定峰面积，以峰面积为纵坐标，五味子醇甲进样量为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程。2.2.5.2精密度试验精密度取五味子醇甲对照品溶液，以“2.2.1”色谱条件项下检测方法，连续进样6次，测五味子醇甲峰面积,计算RSD值2.2.5.3稳定性试验取五味子醇甲对照品溶液1份，并以“2.2.1”色谱条件分别在0、4、8、12、16和24h进样检测，测定五味子醇甲峰面积，计算RSD值，考察样品的稳定性。2.2.5.4重复性试验取同一批号样品6份，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件进行测定，并计算五味子醇甲质量分数的RSD值。2.2.6五味子提取采用煎煮法提取五味子，以五味子醇甲的得率和出膏率为综合评价指标，以加水量、煎煮时间、煎煮次数为因素，设计L9(34)正交试验，因素水平表见表2-3。根据L9(34)正交试验安排，取五味子药材，混合均匀，精密称取9份各100g，放入煎煮锅中，先用武火加热至水煎液沸腾再用文火继续煎煮以保持微沸得到9份不同浓度的五味子水煎液，冷藏。正交试验安排表见表2-4。表2-3煎煮法提取因素水平表因素水平加水量/倍煎煮时间/h煎煮次数1611282231033表2-4正交试验安排表试验号加水量(A)煎煮时间(B)煎煮次数(C)1111212231334212522362317313832193322.2.7制备五味子浸膏将五味子水煎液进行减压旋转蒸发至相对密度约1.38，得五味子浸膏，备用。2.2.8出膏率的计算分别称取9组浓缩液各5g置蒸发皿中，置烘箱烘干至恒重，计算出膏率。2.2.9制备五味子配方颗粒按实验所得最佳处方，称取10g五味子浸膏放于研钵中，与25g填充剂糊精通过等量递加的方法混匀，加11.5ml75%浓度的乙醇溶液混合制软材，使之“握之成团，轻压即散”即可，然后放于12目筛上，挤压制得湿颗粒，再将其放于60℃恒温烘箱中干燥，干燥完毕后取出，然后过10目-30目筛整粒，即得五味子配方颗粒。实验结果与分析3.1出膏率分析表3-1出膏率表试验号投药量/g浓缩液总质量/g取药量/g相当于原饮片质量/g干燥至恒重后重量/g出膏率%平均出膏率%1100.1262.05.211.990.2110.5617.632100.0266.15.231.970.3919.833100.1268.45.181.930.3718.664100.1260.55.212.000.3318.505100.2265.05.181.950.3616.876100.1261.25.222.000.3015.017100.2267.55.171.930.3920.188100265.75.201.960.420.449100.1260.55.191.990.3718.58RSD0.04%1.03%0.32%1.19%12.81%13.16%结论：根据上表所得RSD的结果可知，干燥至恒重后的重量以及出膏率具有显著性差异。3.2方法学考察结果3.2.1标准曲线的绘制表3-2五味子醇甲标准曲线结果：回归方程为Y=36106X+10423，r=0.9997，线性范围为0.594μg~3.130μg3.2.2精密度试验结果表3-3精密度试验进样序号共有峰面积RSD%保留时间RSD%1206.90.4356408613.4060.253983732213.32120513.3213205.113.394420713.4115206.713.4076206.313.395结论：6个共有峰的峰面积对数比RSD<1.8%，相对保留时间RSD<0.5%，说明该仪器精密度良好。3.2.3稳定性试验结果表3-4稳定性试验时间主要成分的峰面积RSD%峰面积对数比RSD%0209.90.4511208552.3220125490.0843116434208.12.318272188207.12.316181089122082.31806323516207.72.31733549724208.32.318689236结论：6个共有峰的峰面积对数比值的RSD<1.7%且峰面积RSD<0.6%，说明供试品溶液在测定时间内有良好的稳定性。3.2.4重复性试验结果表3-5重复性试验进样序号保留时间RSD%共有峰面积RSD%113.5050.302130285220.92.490063677213.422218313.484211.1413.421208513.467209.7613.485209.3结论：6个共有峰的峰面积对数比的RSD<2.5%，相对保留时间RSD<0.5%。说明该方法重复性良好。3.3.5提取正交试验结果分析表3-6提取正交试验结果试验号加水量（A）煎煮时间（B）煎煮次数（C）出膏率%111110.56212219.84313318.65421218.5522316.88623115.01731320.18832120.44933218.57I49.05%48.47%56.91%II50.09%55.16%46.91%III59.19%52.23%55.71%I/316.35%16.16%18.97%II/316.70%18.39%15.33%III/319.73%17.41%18.57%极差R3.38%2.23%3.64%总结：由上表计算所得极差的大小可知，煎煮次数对出膏率的高低影响是最大的，次之是加水量，影响最小的是煎煮时间。所以可以得出最佳制备方案是加14倍的水，煎煮一次，每次煎煮2h，即试验号8为最优。4结论与展望4.1结论本文通过对五味子的提取工艺、处方设计以及对其粉体学性质的全面检测。并且简要阐述了五味子以及中药颗粒剂近期的研究进展。同时也充分展现了中药配方颗粒剂的严格质量指标，进而确定了不同煎煮水平因素对五味子提取的影响以及不同辅料配比对制粒工艺好坏的影响。本文还通过智能粉体测定仪对所制得颗粒进行了较为全面的粉体学性质考察，为处方设计的选择提供了更为科学的依据。4.2展望本文过对五味子配方颗粒的粉体学参数的研究，对五味子配方颗粒进行了更为具体的综合质量评价，对更好地控制产品质量，保证产品质量的相对稳定以及更好地应用于临床有着很大的帮助。但本文所采用的实验方法仍有所欠缺，比如制粒方法有所单一、实验过程由于操作不当造成产品损耗等。五味子医疗用途广泛，但它也只是中华本草中沧海一粟。通过这次的研究让我对中药配方颗粒的发展前景更加充满信心，我相信中药颗粒剂会在日后的医疗运用上更加广泛。参考文献［1］国家药典委员会编.中华人民共和国药典,2020年版,一部[S].北京:中国医药科技出版社,2020:68.［2］中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].北京:科学出版社,1996:252．［3］葛洪.抱朴子[M].北京:蓝天出版社,2002:83［4］李时珍．本草纲目[M].北京:华夏出版社,2004:145．［5］吴东南,肖政,范世平.谈五味子“五脏皆治”[J].河南中医,2016,36(10):1847-1848.［6］李晓光,高勤,翁文,等.五味子有效部位及其药理作用研究进展[J].中药材,2005,28(2):156-158.［7］陈业高,秦国伟,谢旒元.五昧子科植物木脂素成分生物活性研究进展[J].中药材,2001,24(1):62-65.［8］范增光,王淑荣,周亚滨.周亚滨运用药对治疗室性期前收缩经验[J].辽宁中医杂志,2020,47(3):51-53．［9］李瑾.中医治疗多囊卵巢综合征经[J].河南中医,2013,33(8):1272-273．［10］王志明,刘久石,郭耀杰,等.五味子果实不同部位中木脂素成分的分布规律[J].中国实验方剂学杂志,2015,21(18):35-39．［11］王哲申书昌．超高效液相色谱-质谱联用法快速测定生脉饮中7种木脂素的含[J].中国医院药学杂志,2017,37(16):1590-1593．［12］陈振羽.五味子乙素通过Nrf2/AＲE信号通路对肾病综合征