检验科免疫学检查作业指导书汇编

XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-001页号第1页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙肝两对半可能出现的模式及其临床意义审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日序号HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb临床意义1+－－－－HBV感染，孕妇阳性致婴儿感染率10%2+－+－－HBV感染，传染性强，孕妇携带可致婴儿感染率90%3+－+－+急、慢性肝炎，病毒复制活跃，传染性强（大三阳）4+－－－+急、慢性乙肝，应加查HDV以确定是否为合并感染5+－－++急、慢性乙肝，传染性弱6－－－－+HBV既往或现症感染7－－－++急性HBV感染恢复期或有既往感染，少数人有传染性8－+－++乙肝恢复期，已有免疫力，HBeAb、HBsAb并存数月/年9－+－－－接种乙肝疫苗后或HBV感染后康复10+－+++急、慢性乙肝，趋向恢复11－－+－－乙肝早期，HBsAg量少，建议加做定量PCR12+－－++HBV急、慢性感染13++－－－亚临床HBV早期，不同亚型HBV两次感染14－－+++急性感染中期15－－+－+非典型急性感染16－－－+－HBV感染可疑，需做进一步鉴定试验，如定量PCR17－++－±非典型亚临床感染18++－+±有HBsAb-Ag复合物，也可能二者不同亚类XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-001页号第2页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙肝两对半可能出现的模式及其临床意义审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-002页号第3页共3页版本/修改次数第4版第0次修改乙肝两对半、HBV-DNA检查结果与临床处理一览表审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日序号乙肝两对半检测结果PCR模式临床意义1+－+－++93.6%乙肝病毒在复制，血液中有活的病毒颗粒，有传染性，有条件者可试行抗病毒治疗，以求病毒停止复制，消除传染性，HBV-DNA（－）约占6.7%，可判定其抗病毒治疗疗效情况。2+－－+++50%说明患者体内的乙肝病毒发生变异并重新复制，血中有变异的活病毒颗粒，有传染性，处理同1，若HBV-DNA呈（－），定期一年左右复查，若患者持续“小三阳”，HBV-DNA（+）HBV整合到病人肝细胞中，诱导癌变。3+－－－+－乙肝病毒感染恢复期，HBeAb随HBeAg消失后时间的下降而消失，HBeAb则可长期存在，病毒复制不活跃，血中无病毒，无传染性，无需抗病毒治疗，定期一年复查，若HBV-DNA（+）约38.7%，说明血中有活的乙肝病毒，有传染性，处理同14+－－－++此种情况，HBV-DNA（+）约占27.8%，说明血中有活的乙肝病毒，病毒在复制，临床处理同15－－－－++80.8%患者处于乙肝病毒感染早期，乙肝病毒大量复制，血中有活的病毒颗粒，传染性最强，需要隔离和抗病毒治疗，以求病毒停止复制，消除传染性。XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-002页号第4页共3页版本/修改次数第4版第0次修改乙肝两对半、HBV-DNA检查结果与临床处理一览表审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日序号乙肝两对半检测结果PCR模式临床意义6－－－－++患者血中仍有活的病毒，病毒复制，需抗病毒治疗，以求HBV-DNA转（－），若HBV-DNA呈（－），可注射乙肝疫苗，人体仍可产生免疫性应答7－－－++－既往感染过乙肝病毒，体内通过自身免疫力消灭乙肝病毒而康复，血中无病毒，无传染性，可注射乙肝疫苗，若HBV-DNA（+）11.1%，说明乙肝病毒发生变异并重新复制，有传染性，处理同18－－－－+－既往感染过乙肝病毒，体内通过自身免疫力消灭乙肝病毒而康复，并已产生保护性HBCDQRMAb，避免再次感染，若HBV-DNA（+）7.7%，则乙肝病毒发生变异并重新复制，有传染性，处理同19－－－－－+表明HBCDQRMAb不一定能中和病毒，这是由于HBCDQRMAg发生变异，引起免疫逃避10－－－－－+80.8%原因：（1）HBV血清标志浓度太低，无法用ELICDQRMA检测出；（2）病毒基因已变异，超量外膜蛋白抵制了HBCDQRMAg产生。因此，从基因水平上检测HBV-DNA的PCR法灵敏度高，可减少漏检率XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-002页号第5页共3页版本/修改次数第4版第0次修改乙肝两对半、HBV-DNA检查结果与临床处理一览表审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-003页号第6页共2页版本/修改次数第4版第0次修改人类免疫缺陷病毒HIV抗体快速检测审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日【测定原理】本品系用特异性重组HIV1/2抗原gp41和gp36及免疫HIV1/2多克隆抗体包被硝酸纤维素膜，配以红色标记物标记的重组HIV1/2抗原gp41和gp36及其他试剂制成，应用胶体金免疫技术和层析原理，定性检测全血/血清/血浆标本中HIV1/2抗体，用于现场筛查。【试剂组成】·英科人类免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗体诊断试剂·使用说明书·一次性吸管·缓冲液【样品要求】血清/血浆标本收集时尽快分离血清或血浆以避免溶血。标本若不能及时送检，可在2℃~8℃冷藏3天。长期保存需冷冻于—20℃，忌反复冻融。全血标本采集后尽可能立即使用，抗凝血在24小时内使用，以避免溶血。检测时尽量使用新鲜的标本。【检测所需设备】·秒表微量加样器【质控】在质控区（C）中出现的红色条带是作为一种内在的质量控制标准。标准阳性、阴性对照质控物没有与本试剂一起提供。但是建议作为良好的实验室测试手段，阳性、阴性对照应在每天检测样品前先进行结果测试，以确定是否使用了正确的操作步骤和得到正确的测试结果。【贮藏】原包装应储存于4~30℃干燥处，诊断试剂在效期内是稳定的，切忌冷冻或在过有效期后使用（有效期见包装袋）。【有效期】24个月【批准文号】国药准字2008第3401327号【操作步骤】在进行任何测试前必须先完整阅读使用说明书，使用前将试剂和全血/血小脚/血浆标本恢复至室温。在1小时内应尽快地使用，特别是在室温高于30℃或是在高度潮湿的环境中应尽快使用。将诊断试剂置于干净平坦的台面上，用一次性塑料吸管吸取全血/血清/血浆标本，垂直加入2滴或使用微量加样器吸取60μ1全血/血清/血浆标本于加样孔（CDQRM）中，然后滴入1滴缓冲液于加样孔（CDQRM）中。等待紫色色条带的出现，在1-30分钟内读取测试结果，30分钟后读取的结果无效。XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-003页号第7页共2页版本/修改次数第4版第0次修改人类免疫缺陷病毒HIV抗体快速检测审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日【结果判断】阳性结果（+）：两条紫红色条带出现。一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阴性结果（－）：仅质控区（C）出现一条红色条带，在测试区（T）内无红色条带出现。无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止此批号产品，并与当地供应商联系。注意：由于标本中抗HIV1/2抗体滴度的不同，测试区（T）内的红色条带会显现出不同深浅的颜色，均表示阳性结果。当样本中含有低滴度的HIV1/2抗体时，可能会导致出现的T线颜色很淡。测试结果不能做为判定样本中抗体滴度高低的依据。【注意事项】必须在1-30分钟内判读结果，否则结果无效。人类免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗体诊断试剂适用于无偿献血人员的现场检测，并只用于检测全血/血清/血浆样本中的HIV1/2抗体。人类免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗体诊断试剂仅供一次性使用。阳性结果仅表示样本中（HIV1/2）抗体的存在的可能，而不能作为机体感染HIV的标准。对阳性结果必须用ELICDQRMA或WeCDQRMternBlot作进一步分析确证。如有临床症状存在，应用如WeCDQRMternBlot法检测作出判定。阴性结果并不能排除感染HIV的可能性。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-004页号第8页共1页版本/修改次数第4版第0次修改伤寒、副伤寒血清学检查标准操作作业指导书审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日【操作步骤】1、取试管1支，加生理盐水1.9ml，待测血清0.1ml，使血清作1：20稀释。2、在4排×5孔，孔径1.5ml的“U”型孔反应板上分别标以O、H、A、B。3、取1：20稀释血清分别加入各排的第1孔中，每孔0.2ml，共4孔，舍去0.2ml，再加1ml生理盐水，使血清作1：40稀释。混合后加入第2列孔中，每孔0.2ml，共4孔，舍去0.2ml，再加1ml生理盐水，使血清作1：80稀释……。以此类推，稀释至血清稀释度为1：160止（第4列的4孔）。第5列设阴性对照。每孔加生理盐水0.2ml。4、各排分别加相应菌液0.1ml，再补加生理盐水0.1ml，液体总量为0.4ml。1~4孔血清最终稀释度为1：40、1：80、1：160、1：320。5、充分混匀2~3分钟，反应板上加盖玻片或其他板。37℃水浴过夜，次日观察结果。【结果判断】阳性结果表现为液体澄清。菌液细颗粒均匀平摊于整个孔底。阴性表现为菌液集中于一点，沉积于孔底。与菌液对照相同。以出现50%（2+）凝集的血清最大稀释倍数的倒数为待检血清滴度。【正常参考值】伤寒（O）凝集效价＜1：80；伤寒（H）凝集效价＜1：160；副伤寒甲、乙、丙（H）凝集效价＜1：80。【临床意义】O和H凝集效价均增高者，多见于伤寒病；H凝集效价低于正常，可能是非特异性回忆反应；O凝集效价高而H凝集效价低于正常，可能是早期感染或其他沙门氏菌感染的交叉反应；若O凝集效价高可能是微荚膜（Vi）抗原对O抗原的遮蔽作用。【注意事项】1、应在光亮处先观察管底凝集状态，然后轻轻摇动判定结果，不能激烈振荡。2、菌液稀释后应及时使用且应在标签载明的有效期内使用。3、菌液有摇不散的凝块时，不能使用。【保存条件】保存于2~8℃暗处。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-005页号第9页共2页版本/修改次数第4版第0次修改甲型肝炎病毒IgM(HAvIgM)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[前言]这种抗体是感染甲肝病毒（HAV）后病人血中最早出现的一种抗体，属于HAV衣壳抗体。[原理]本试剂盒采用捕获法检测人血清或血浆中的甲肝IgM抗体。具有简便、快速、准确、样本不需稀释等优点，适用于甲型肝炎的早期诊断。[试剂组成]1、包被板条 6、底物液A 2、阴性对照血清 7、底物液B 3、阳性对照血清 8、终止液 4、酶标记物溶液 9、浓缩洗涤液5,HA.Ag（用蒸馏水1：20稀释后使用) [试剂厂家]北京现代高达生物技术有限公司[试剂的稳定性与贮存]试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。[标本的收集与处理]标本为无溶血血清。[操作步骤] 1、加样：将包被板预先编号。设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔。加阴、阳性对照血清各50ul于相应孔内，其余各孔分别加入50ul待测样本（不能稀释），轻轻振荡后封板。2、温育：置37℃水浴箱温育30分钟。 3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置2分钟，扣去洗涤液，重复4次，最后一次在吸水纸上拍干。4、加酶：除空白对照孔外，每孔加入HA.Ag50ul，酶标记物溶液50ul，轻轻振荡后封板。 5、温育：置37℃水浴箱温育30分钟。 5、洗涤：同步骤3洗涤6、显色：每孔加底物液A1滴（50ul）、底物液B1滴（50ul），轻拍混匀后，置37℃水浴15分钟，目测结果或加入终止液1滴（50ul）用酶标仪判读[结果判定] 1、目测法：在白色背景下观察各孔颜色，无色或极淡兰色判为阴性，呈明显兰色判为阳性。2、酶标仪检测法（选择波长450nm）：用空白孔校零，测定各孔吸光度值。样本与阴性对照比较P/N值≥2.1时，为抗-HAV·IgM阳性；否则为阴性。注：阴性对照孔OD值小于0.05时，按0.05计算；大于0.05时，按实际值计算。XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-005页号第10页共2页版本/修改次数第4版第0次修改甲型肝炎病毒IgM(HAvIgM)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[质量控制]每批检测同步进行质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。[参考值]阴性[临床意义]:（1）感染后的甲型肝炎病人血中很快就可出现此种抗体，并在血中能够维持3－6个月的时间。（2）有少部分病人测不出这一抗体，这种结果临床上称作HAVAb-IgM应答“缺失”。这类患者可借助于检测HAAg或甲型肝炎总抗体来明确诊断。[注意事项] 1、试剂盒2-8℃贮存，有效期6个月。2、试剂盒用前先平衡至室温。3、尽快完成加样过程，严格控制反应温度和反应时间。4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。5、洗涤必须充分，洗涤时各孔均须加满，防止孔口内含有游离酶不能洗净。6、若洗涤液出现结晶时，可于37℃放置至溶解。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-006页号第11页共2页版本/修改次数第4版第0次修改丙型肝炎病毒抗体IgG(抗-HCV·IgG)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[原理]本试剂盒用间接法检测人血清或血浆中的抗-HCV·IgG抗体。具有简便、快速、准确及可多次使用等优点。[试剂盒组成]1、包被板条 6、底物液A 2、阴性对照血清 7、底物液B 3、阳性对照血清 8、终止液 4、酶标记物溶液 9、浓缩洗涤液 5、样本稀释液（用蒸馏水1：20稀释后使用）[试剂厂家] 北京现代高达生物技术有限公司[试剂的稳定性与贮存]试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。[标本的收集与处理]标本为无溶血血清。[操作步骤] 1、加对照：设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔，并直接加入100ul阴、阳性对照血清。 2、加样：(1:11)稀释：在板孔底部，加入2滴（100ul）样本稀释液，再分别加入10ul样本，轻轻振荡封板后，置37℃水浴20分钟。 3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次，最后一次在吸水纸上拍干。 4、加酶：除空白对照孔外，每孔加入2滴酶标记物，轻轻振荡封板后，置37℃水浴15分钟。 5、洗涤：同步骤3。 6、显色：每孔加底物液A、B各1滴，轻拍混匀后，置37℃水浴15分钟。 7、每孔加终止液50ul。[结果判定] 1、目测：在白色背景下观察各孔颜色，呈明显兰色或显色深于阴性对照者判为阳性；显色与阴性对照相近或稍深于阴性对照者判为阴性。2、酶标仪检测（选择波长450nm）：每孔加终止液1滴，用空白孔校零，测定各孔OD值。临界值（C.O.）=0.140+阴性对照平均OD值；样本OD值＞临界值,为抗-HCV·IgG阳性;否则为阴性。注：阴性对照孔OD值小于0.05时，按0.05计算；大于0.05时，按实际值计算。[质量控制]每批检测同步进行质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管进行测定。XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-006页号第12页共2页版本/修改次数第4版第0次修改丙型肝炎病毒抗体IgG(抗-HCV·IgG)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[参考范围]酶联免疫吸附试验：阴性[临床意义]:（1）在输血后患肝炎有80－90%的病人是丙型肝炎，其中大部分为阳性。（2）在乙型肝炎患者中，特别是经常使用血制品（血浆、全血）的病人可以引起丙肝病毒的合并感染，使疾病转为慢性化、肝硬化或者肝癌。所以对乙型肝炎的复发病人或是慢性肝炎病人要进行HCV－Ab的检测。[注意事项] 1、不同批号的试剂不可混用。2、试剂用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。5、若浓缩洗涤出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。6、本试剂盒应视为为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-007页号第13页共2页版本/修改次数第4版第0次修改戊型肝炎病毒抗体IgG(抗-HEV·IgG)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[前言]戊型肝炎。原来称作肠道传染性非甲非乙型肝炎，在同一个地区可以同甲型肝炎相伴发生，散在流行。HEAb包括HEAb．IgG和HEAb．IgM两类抗体。 [原理]本试剂盒采用间接法检测人血清或血浆中的抗-HEV·IgG抗体。具有简便、快速、准确及可多次使用等优点。[试剂厂家]北京现代高达生物技术有限公司[试剂盒组成]1、包被板条 6、底物液A 2、阴性对照血清 7、底物液B 3、阳性对照血清 8、终止液 4、酶标记物溶液 9、浓缩洗涤液5、样本稀释液 （用蒸馏水1：25稀释后使用）[试剂的稳定性与贮存]试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。[标本的收集与处理]标本为无溶血血清。[操作步骤] 1、加对照血清：设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔，并在阴、阳对照孔内直接加入相应血清各100ul。 2、加样（1：21稀释）：在板孔底部，加入2滴（100ul）样本稀释液，再加入5ul样本，轻拍混匀封板后，置37℃水浴25分钟。 3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次后在吸水纸上拍干。4、加酶：除空白对照孔外，每孔加2滴酶标记物，轻轻振荡封板后，置37℃水浴25分钟。 5、洗涤：同步骤3。 6、显色：每孔加底物液A、B各1滴，轻拍混匀后，置37℃水浴10分钟。 7、每孔加终止液50ul,450nm比色。[结果判定] 1、目测：在白色背景下观察各孔颜色，呈明显兰色或显色明显深于阴性对照者判为阳性；显色与阴性对照相近或稍深于阴性对照者判为阴性。2、酶标仪检测（选择波长450nm）：每孔终止液1滴后，用空白孔校零，测定各孔吸光度OD值。CutoffValue=阴性对照平均OD值+0.22XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-007页号第14页共2页版本/修改次数第4版第0次修改戊型肝炎病毒抗体IgG(抗-HEV·IgG)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日样本OD值>CutoffValue为抗-HEV·IgG阳性；样本OD值<=CutoffValue为抗-HEV·IgG阴性。质量控制]每批检测同步进行质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。[参考范围]酶联免疫吸附试验（ELICDQRMA）：阴性[临床意义]:（1）HEAb．IgM阳性，表示近期感染戊肝炎病毒。（2）凡急性期与恢复期双份血清的HEVAb．IgG效价〉＝4倍增高，可判为HEVAb．IgG阳性，表明新近感染戊型肝炎病毒，有临床确诊价值。 [注意事项] 1、不同批号的试剂不可混用。2、试剂盒用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直。5、若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗涤要充分，各孔均需加满，防止孔口内游离酶不能洗净。6、试剂盒置于2-8℃贮存，效期6个月。7、本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-008页号第15页共1页版本/修改次数第4版第0次修改快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[原理]用VDRL抗原重悬至含有特制炭末的溶液中制成，供在白色卡片或磁板上进行凝集试验以检测血清或血浆反应素之用。此试验可做为梅毒血清学快速检查及临床疗效之参考。[试剂组成]1，RPR抗原悬液2，梅毒阳性血清对照3，滴加抗原用专用滴管及针头4，试验专用卡片[试剂的稳定性与贮存]试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。[标本的收集与处理]标本为无溶血血清。[操作步骤]1，待检血清及RPR抗原于用前置室温（23--29C）。2，取待检血清或血奖（不需灭活）1滴约50ul,均匀涂满1个卡圈内。3，轻轻摇动抗原使之均匀，以专用滴管针头垂直滴加抗原1滴于血清圈内。4，置卡片于震摇器上100rpm8分钟，如用手摇，需保持相应速度及时间。5，三分钟内肉眼判断结果，参考图片标准以强阳性，弱阳性及阴性记录结果。6，如做定量试验，可将待检血清做2倍系列稀释，再按上述定性方法进行试验。[结果判断]1.阳性反应（+++～++++）：可见中等或较大的红色凝聚物。2.弱阳性反应（+～++）：可见较小的红色凝聚物。3.阴性反应（-）：可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。[质量控制]为确保测试结果准确可靠，每批测试均应放置阳性质控血清与被检样品同时测试，用以检查试剂性能。[临床意义]梅毒的非特异性筛选实验。也可用于梅毒治疗效果的评价。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-009页号第16页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[前言]HBsAg是乙型肝炎病毒（HBV）颗粒（Dane氏颗粒）的外壳部分，由蛋白质所组成。[原理]本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强及可多次使用等优点。[试剂厂家]北京万泰生物药业有限公司[试剂盒组成]1、包被板条 6、底物液A 2、阴性对照血清 7、底物液B 3、阳性对照血清 8、终止液 4、酶标记物溶液9.浓缩洗涤液（用蒸馏水1：20稀释后使用）[试剂的稳定性与贮存]试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。[标本的收集与处理]标本为无溶血血清。[操作步骤] 1、编号：拆取所需用量微孔，固定于板架，按序编号。设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔。 2、加样：分别加阴、阳性对照1滴（50ul）和50ul待测样本于相应孔内。 3、加酶：除空白对照孔外，每孔加1滴（50ul）酶标记物溶液，轻拍混匀后封板。4、温育：置37℃水浴箱温育30分钟。 5、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次，最后一次在吸水纸上拍干。6、显色：每孔加底物液A1滴（50ul）、底物液B1滴（50ul），轻拍混匀，置37℃水浴15分钟。 7、终止：每孔加终止液1滴（50ul），轻拍混匀。8、测定：用酶标仪（450nm波长）测定各孔吸光度OD值（先用空白孔校零）。[结果判定] 1、临界值（C.O.）：本室界值室内标准品平均OD值。（界值室内标准品平均OD值/部检验中心2ng/ml质控品OD值应小于2.5且大于1.5。2、样本OD值CDQRM/C.O.≥1者为HBsAg阳性。（即CDQRM≥临界值）XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-009页号第17页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日样本OD值CDQRM/C.O.＜1者为HBsAg阴性。（即CDQRM＜临界值）注：阴性对照孔OD值小于0.05时，按0.05计算；大于0.05时，按实际值计算。[试剂盒灵敏度] ≤0.5ng/ml [质量控制]每批检测同步进行标准和质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。[参考范围]酶联免疫吸附试验（ELICDQRMA）：阴性[临床意义]:（1）HBsAg阳性，常为慢性HBsAg携带者、急性乙型肝炎潜伏期、慢性迁延性肝炎与慢性活动性肝炎、肝硬化。（2）HBsAg阳性还可见于输血后肝炎病人的血中，有少数急性黄疸性肝炎的病人血中HBsAg呈阳性反应，随着病情的好转HBsAg消失。[注意事项] 1、试剂盒2-8℃贮存，有效期6个月。2、试剂盒用前先平衡至室温。3、未用完的包被板条应及时封存于密封塑料袋中。包被板起封使用后，于1周内用完。4、含血球的标本易出现假阳性结果，应尽量避免使用。5、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。6、洗涤必须充分，洗涤时各孔均须加满，防止孔口内含有游离酶不能洗净。7、若浓缩洗涤液出现结晶时，可于37℃放置至溶解。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-010页号第18页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[前言]HBsAb是病人感染了乙型肝炎病毒（HBV）以后，对乙型肝炎表面抗原蛋白质所产生的一种免疫反应性抗体（保护性抗体），它对HBsAg有一定的中和作用。 [原理]本试剂盒采用双抗原夹心法原理检测人血清或血浆中的抗-HBCDQRM。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强等优点。[试剂厂家]北京万泰生物药业有限公司[试剂盒组成]1、包被板条 6、底物液A 2、阴性对照血清 7、底物液B 3、阳性对照血清 8、终止液 4、酶标记物溶液9、浓缩洗涤液（用蒸馏水1：20稀释后使用）[试剂的稳定性与贮存]试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。[标本的收集与处理]标本为无溶血血清。[操作步骤] 1、加样：设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔。分别加阴、阳性对照血清各1滴（50ul）和50ul待测样本于相应孔内。 2、加酶：除空白对照孔外，每孔加1滴酶标记物，轻轻振荡封板后，置37℃水浴30分钟。 3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次后在吸水纸上拍干。 4、显色：每孔加底物液A、B各1滴，轻轻振荡封板后，置37℃水浴15分钟。[结果判定] 1、目测：在白色背景下观察各孔颜色，呈明显兰色判为阳性，无色或极淡兰色判为阴性。2、酶标仪检测（选择波长450nm）：每孔加终止液1滴后，用空白孔校零，测定各孔OD值。临界值（C.O.）=2.1×阴性对照平均OD值；样本OD值CDQRM/C.O.≥1者为抗-HBs阳性。（即CDQRM≥临界值）样本OD值CDQRM/C.O.＜1者为抗-HBs阴性。（即CDQRM＜临界值＝XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-010页号第19页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日注：阴性对照孔OD值小于0.05时，按0.05计算；大于0.05时，按实际值计算。[质量控制]每批检测同步进行标准和质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。[临床意义]:（1）HBsAb阳性证明以往有过乙型肝炎病毒感染的历史，机体产生了一定的免疫力。（2）注射乙型肝炎疫苗或打过HBsAb免疫球蛋白，HBsAb可呈阳性反应。（3）HBsAb是保护性抗体，血中抗体滴度在1：64或P/N〉10以上时才对机体有保护作用。[注意事项] 1、不同批号的试剂不可混用。2、试剂用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。包被板起封使用后，于1周内用完。4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。5、若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内含有游离酶不能洗净。6、本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-011页号第20页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[前言]HBeAg是乙肝病毒核心颗粒中的一种可溶性蛋白质。 [原理]本试剂盒用双抗体夹心法原理检测人血清或血浆中的HBeAg。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强等优点。[试剂盒组成]1、包被板条 6、底物液A 2、阴性对照血清 7、底物液B 3、阳性对照血清 8、终止液 4、酶标记物溶液 9、浓缩洗涤液（用蒸馏水1：20稀释后使用）[试剂厂家] 北京万泰生物药业有限公司[试剂的稳定性与贮存]试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。[标本的收集与处理]标本为无溶血血清。[操作步骤] 1、加样：设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔。分别加阴、阳性对照血清各1滴（50ul）和50ul待测样本于相应孔内。 2、加酶：除空白对照孔外，每孔加1滴酶标记物，轻轻振荡封板后，置37℃水浴30分钟。 3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次后在吸水纸上拍干。4、显色：每孔加底物液A、B各1滴，轻轻振荡封板后，置37℃水浴15分钟。 [结果判定] 1、目测：在白色背景下观察各孔颜色，呈明显兰色判为阳性，无色或极淡兰色判为阴性。2、酶标仪检测（选波长450nm）：每孔加终止液1滴后，用空白孔校零，测定各孔OD值。临界值（C.O.）=2.1×阴性对照平均OD值；样本OD值CDQRM/C.O.≥1者为HBeAg阳性。（即CDQRM≥临界值）样本OD值CDQRM/C.O.＜1者为HBeAg阴性。（即CDQRM＜临界值）注：阴性对照孔OD值小于0.05时，按0.05计算；大于0.05时，按实际值计算。[质量控制]XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-011页号第21页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日每批检测同步进行标准和质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。[参考范围]酶联免疫吸附试验（ELICDQRMA）：阴性[临床意义]（1）HBeAg增高说明患有乙型肝炎具有较强的传染性，它的出现往往是乙型肝炎的早期或者是活动期。（2）如HBeAg阳性持续时间大于10周以上或更长时间，病人可能进展为慢性持续性感染，肝组织常有较严重的损害，急性乙型肝炎容易演变成慢性肝炎或肝硬化。（3）HBeAg阳性孕妇有垂直传染性，9%以上的新生儿将受乙型肝炎病素感染，HBeAg也为阳性。 [注意事项] 1、不同批号的试剂不可混用。2、试剂用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。5、若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗涤要充分，各孔均须注满，防止孔口内含有游离酶不能洗净。6、本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-012页号第22页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[前言]一些乙型肝炎病人或带毒者体内可产生HBeAg，它作为抗原刺激机体免疫系统产生相对应的专一性抗体HBeAb。 [原理]本试剂盒采用竞争法原理检测人血清或血浆原液中的抗-HBe。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强等优点。[试剂盒组成]1、包被板条 6、底物液A 2、阴性对照血清 7、底物液B 3、阳性对照血清 8、终止液 4、酶标记物溶液 9、浓缩洗涤液（用蒸馏水1：20稀释后使用） [试剂厂家]北京万泰生物药业有限公司[试剂的稳定性与贮存]试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。[标本的收集与处理]标本为无溶血血清。[操作步骤] 1、加样：设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔。分别加阴、阳性对照血清各1滴（50ul）和50ul待测样本于相应孔内。 2、加酶：除空白对照孔外，每孔加1滴酶标记物，轻轻振荡封板后，置37℃水浴30分钟。3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次后在吸水纸上拍干。 4,显色：每孔加底物液A、B各1滴，轻轻振荡封板后，置37℃水浴15分钟。 [结果判定] 1、目测：在白色背景下观察各孔颜色，无色或兰色明显浅于阴性对照者判为阳性，兰色与阴性对照相近者判为阴性。2、酶标仪检测（选波长450nm）：每孔加终止液1滴后，用空白孔校零，测定各孔OD值。临界值（C.O.）=0.3×阴性对照平均OD值；样本OD值CDQRM/C.O.≤1者为抗-HBe阳性。（即CDQRM≤临界值）样本OD值CDQRM/C.O.＞1者为抗-HBe阴性。（即CDQRM＞临界值）注：阴性对照孔OD值大于1.5时，按1.5计算；小于1.5时，按实际值计算。XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-012页号第23页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日 [参考范围]酶联免疫吸附试验（ELICDQRMA）：抑制率〈50%为阴性[临床意义]:慢性乙型肝炎HBeAb阳性占48．3%，肝硬化为68．3%，肝癌为80%。（2）HBeAb阳性率增高，表明多数患者乙型肝炎病毒感染的时间可长达7－27年。（3）HBeAb阳性仍会有一定的传染性。在HBeAb阳性的孕妇分娩婴儿中可有20%感染乙型肝炎病毒。 [注意事项] 1、不同批号的试剂不可混用。2、试剂用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。5、若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内含有游离酶不能洗净。6、本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-013页号第24页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒核心抗体IgG(HBcIgG)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日[前言]HBcAb是由乙型肝炎核心抗原刺激肝细胞产生的一种免疫球蛋白，其中有IgG、IgM、IgA和IgE型。临床上常规检测的有IgM和IgG型。[原理]本试剂盒采用竞争法原理检测人血清或血浆原液中的抗-HBc。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强等优点。[试剂厂家]北京万泰生物药业有限公司[试剂盒组成]1、包被板条 5、底物液A 2、阴性对照血清 6、底物液B 3、阳性对照血清 7、终止液 4、酶标记物溶液 8、浓缩洗涤液（用蒸馏水1：25稀释后使用）[试剂的稳定性与贮存]试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。[标本的收集与处理]标本为无溶血血清。[操作步骤] 1、加样：设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔。分别加阴、阳性对照血清各1滴（50ul）和50ul待测样本于相应孔内。（待测标本用生理盐水作1：30稀释，检测结果为临床意义；原血清不作稀释，检测结果为流行病学意义） 2、加酶：除空白对照孔外，每孔加1滴酶标记物，轻轻振荡封板后，置37℃水浴30分钟。 3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次后在吸水纸上拍干。4、显色：每孔加底物液A、B各1滴，轻轻振荡封板后，置37℃水浴15分钟。 [结果判定] 1、目测：在白色背景下观察各孔颜色，无色或兰色明显浅于阴性对照者判为阳性，兰色与阴性对照相近者判为阴性。2、酶标仪检测（选波长450nm）：每孔加终止液1滴后，用空白孔校零，测定各孔OD值。原倍血清临界值（C.O.）=0.3×阴性对照平均OD值；1：30稀释血清临界值（co)=0.5X阴性对照平均OD值；样本OD值CDQRM/C.O.≤1者为抗-HBc阳性。（即CDQRM≤临界值）样本OD值CDQRM/C.O.＞1者为抗-HBc阴性。（即CDQRM＞临界值）XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-013页号第25页共2页版本/修改次数第4版第0次修改乙型肝炎病毒核心抗体IgG(HBcIgG)审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日注：阴性对照孔OD值大于1.5时，按1.5计算；小于1.5时，按实际值计算。 [参考范围]酶联免疫吸附试验（ELICDQRMA）：抑制率〈50%为阴性[临床意义]:（1）乙肝核心抗体IgM增高可诊断急性乙型肝炎。（2）单纯核心抗体IgG增高常表示有既往感染。（3）HBcAb的出现表明肝内乙肝病毒复制活跃，肝细胞受损较重，并且传染性较强。（4）HBcAb对乙型肝炎无保护作用，其持续阳性可长达数十年甚至保持终身。[注意事项] 1、不同批号的试剂不可混用。2、本试剂盒为原液血清检测抗-HBc，对于非原液血清样本（卫生部临检中心林（流）、质控血清等）请将酶标记物用酶稀释液1：10稀释后使用。3、试剂盒用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。4、未用完的板条应及时封存于易封袋中。5、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。6、若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内含有游离酶不能洗净。7、本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作。修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-014页号第26页共3页版本/修改次数第4版第0次修改人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体酶联免疫诊断审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体酶联免疫诊断（双抗体夹心法）[原理]本试剂盒用HIV1+2型抗原包被酶联板。待检血清中的抗-HIV抗体与包被抗原反应，再与酶标HIV-1+2型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。加底物（TMB）显色，在酶标仪上测定后根据OD值判定有无HIV抗体存在。[试剂盒组成（96人份）]1.说明书1份7.底物液A1瓶2.HIV抗原包被板1块8.底物液B1瓶3.HIV酶标抗原工作液1瓶9.终止液1瓶4.50倍浓缩洗液1瓶10.封口胶2张5.HIV阳性对照（已灭活）1支11.塑料袋1个6.HIV阴性对照1支[操作步骤]取出HIV抗原包被板。每次试验设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔。除空白对照孔外，分别加入HIV阴、阳性对照各50微升，其余孔加入待检血清各50微升。贴上封口胶，置37℃温育30分钟。将50倍浓缩洗液用纯化水50倍稀释后备用。弃去各孔中样品、拍干。每孔加满洗液，静置数秒后弃去，如此重复洗5次，拍干。4.除空白外孔外，每孔加入酶标抗原工作液50微升，贴上封口胶。置37℃温育20分钟。5.弃去各孔中酶液，用洗液反复洗涤5次（操作同步骤3）。每孔加入底物液A50微升，再加入底物液B50微升，轻拍混匀，置37℃避光显色10分钟。7.显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，立即以空白对照孔调零，置酶标仪450nm或双波长450nm/630nm下测定OD值。[要求]XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-014页号第27页共3页版本/修改次数第4版第0次修改人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体酶联免疫诊断审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日阳性对照OD值有效范围：≥0.50阴性对照OD值有效范围：≤0.10[结果判定]阴、阳性对照和被检样本的OD值减去空白对照OD值即为计算值。若阴性对照OD均值小于0.02按0.02计算。临界值（cutoff值）的设定：cutoff值=0.10+阴性对照OD均值被检样本的OD值≥临界值应判为HIV抗体阳性反应，＜临界值为阴性反应。检测样本的OD值≥临界值判为HIV抗体阳性，应重新取样双孔复试，复试阳性者应按照“全国HIV检测管理规范”送“HIV确认实验室”进行确认试验。[注意事项]本试剂的使用单位必须是当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测工作规范》严格防止交叉感染。操作时必须戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。HIV-1/HIV-2抗体测定结果的判定必须以酶标仪读数为准。各步加液均应使用加样器，并经常校对其准确性。洗涤时各孔均需加满洗液，防止孔口有游离酶不能洗净。所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。微孔板条从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽方可使用，未用完者须放入有干燥剂的密封袋中保存。用于检测的样品应保持新鲜。剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。不同批号试剂组分不得混用。[保存条件及有效期]2-8℃储存。自生产日期起，有效期半年。[试剂批文]批准文号：国药准字S20010045XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-014页号第28页共3页版本/修改次数第4版第0次修改人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体酶联免疫诊断审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日修改状态/日期修改记录修改代号修改单号修改人/日期XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-015页号第29页共5页版本/修改次数第4版第0次修改人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定（化学发光法）审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定（化学发光法）【前言】获得性免疫缺陷综合症(艾滋病，AIDS)由两种人类免疫缺陷病毒引起，总称为人类免疫缺陷病毒(HIV)。1-7人类免疫缺陷病毒(HIV)为艾滋病的病原体。1,3,6,7其传播途径包括性接触、暴露于血液或血液制品，及胎儿的出生前感染或新生儿的围产期感染。8艾滋病患者和HIV感染无症状的个体中几乎都能检测到HIV抗体。8,9另外，艾滋病患者和血清阳性个体中通过RNA和/或前病毒DNA的培养或扩增检测都能检测到HIV感染.【检验原理】ARCHITECT人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合项目采用两步免疫检测法，运用Chemiflex技术，即化学发光微粒子免疫检测(CMIA)技术与灵活的检测模式的结合，测定人血清和血浆中的HIVp24抗原及HIV-1（M组和O组）/HIV-2抗体。第一步，混合样本、ARCHITECTi清洗缓冲液、项目稀释液和顺磁微粒子。样本中的HIVp24抗原和HIV-1/HIV-2抗体结合至HIV-1/HIV-2抗原和HIVp24单克隆(小鼠)抗体包被的微粒子上。冲洗后进入第二步，HIVp24抗原和HIV-1/HIV-2抗体与吖啶酯标记的结合物(HIV-1/HIV-2抗原[重组]、合成多肽及HIVp24抗体[小鼠，单克隆])相结合。再次冲洗后，将预激发液和激发液加入到反应混合物中。测量产生的化学发光反应，以相对发光单位（RLUs）表示。样本中的HIV抗原及抗体和ARCHITECTi光学系统检测到的RLUs值之间成正比。通过比较反应产生的化学发光信号和ARCHITECTHIV抗原及抗体联合校准品的cutoff信号，测定样本中是否含有HIVp24抗原或HIV-1/HIV-2抗体。样本信号的Cutoff(S/CO)值大于等于1.00，则可考虑样本对HIVp24抗原或HIV-1/HIV-2抗体呈反应性。S/CO值小于1.00，则可考虑样本对HIVp24抗原或HIV-1/HIV-2抗体呈非反应性。ARCHITECTHIV抗原及抗体联合检测中初检呈反应性的样本应当进行重检。复检反应性可高度预测样本中存在HIVp24抗原和HIV-1/HIV-2抗体。但是，同所有免疫检测法一样，ARCHITECTHIV抗原及抗体联合项目可能由于其他原因出现非特异性反应，尤其是在检测流行率较低的群体时。复检反应性的样本应使用灵敏的HIV特异性检测进一步检测，如免疫印迹法、抗原检测和HIV核酸检测。针对艾滋病感染高危人群的复检反应性样本所做的附加检测通常可确认样本中存在HIV抗体或HIV抗原和HIV核酸。诊断艾滋病及艾滋病相关状况的全面鉴别诊断病情检查方法包括对患者免疫状态的评估及临床病史的检查。有关系统和检测技术的详细信息，参见ARCHITECT系统操作手册第3节。【试剂厂家】雅培贸易（上海）有限公司【试剂盒主要组成成份】ARCHITECT人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定试剂盒(4J27)XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-015页号第30页共5页版本/修改次数第4版第0次修改人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定（化学发光法）审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日（1）微粒子：1或4瓶(6.6mL/100测试瓶；27.0mL/500测试瓶)微粒子：HIV-1/HIV-2抗原（重组）和HIVp24抗体（小鼠，单克隆）包被的微粒子，储存于TRIS缓冲液中。最低浓度：0.07%固体物质。防腐剂：叠氮钠。（2）结合物：1或4瓶（5.9mL/100测试瓶；26.3mL/500测试瓶）结合物：吖啶酯标记的HIV-1抗原（重组）、吖啶酯标记的HIV-1/HIV-2合成多肽及吖啶酯标记的HIVp24抗体（小鼠，单克隆）结合物，储存于磷酸盐缓冲液（含牛蛋白和表面稳定剂）中。最低浓度：0.05μg/mL。防腐剂：叠氮钠。（3）项目稀释液：1或4瓶（5.9mL/100测试瓶；26.3mL/500测试瓶）项目稀释液：HIV抗原及抗体联合项目稀释液，包含TRIS缓冲液。防腐剂：叠氮钠。（4）其他试剂ARCHITECTi预激发液.预激发液：预激发液含有1.32%(w/v)过氧化氢。ARCHITECTi激发液.激发液：激发液含有0.35N氢氧化钠。ARCHITECTi清洗缓冲液.清洗缓冲液：清洗缓冲液含有磷酸盐缓冲液。防腐剂：抗菌剂。【储存条件及有效期】1.储存条件.ARCHITECT人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定试剂盒必须在2-8℃储存，从2-8℃环境中取出后可立即使用。试剂盒必须竖直储存。.ARCHITECT人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定试剂盒在ARCHITECTi系统上最长可以储存30天。30天后，必须丢弃试剂盒。有关查询在机时间的信息，参见ARCHITECT系统操作手册第5节。.按照指导储存和操作时，试剂在效期内保持稳定。.试剂可以在ARCHITECTi系统上储存，也可以脱离系统储存。如果试剂脱离系统储存，需将其竖直向上储存于2-8℃(盖有软盖和替换盖)。试剂从系统上取出后，建议将其放回原始托架和包装盒中储存，以确保其竖直向上放置。如果微粒子试剂瓶在脱离系统冷藏储存时没有竖直向上放置(盖有软盖)，那么必须丢弃该试剂盒。有关试剂卸载的信息，参见ARCHITECT系统操作手册第5节。试剂变质的指征。2.有效期：10个月【样本要求】样本类型.人血清(包括采集于血清分离管中的血清).血浆，采集于：EDTA钾、枸橼酸钠、肝素钠、ACD,CPDA-I,CPD、肝素锂、草酸钾、血浆分离管【产品名称】通用名称:人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定试剂盒(化学发光微粒子免疫XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-015页号第31页共5页版本/修改次数第4版第0次修改人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定（化学发光法）审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日检测法)英文名称:ARCHITECTHIVAg/AbComboReagentKit【检验方法】1、检测程序.第一次将ARCHITECT人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定试剂盒装机前，需要混合微粒子试剂，使运输过程中沉淀下来的微粒子重新悬浮。.翻转微粒子试剂瓶30次。.目视检查试剂瓶，确定微粒子已重新悬浮。如果微粒子仍附着在瓶子上，需要继续翻转直至微粒子完全悬浮为止。.如果微粒子没有重新悬浮，则不能使用。.微粒子重新悬浮后，取下瓶盖并丢弃。佩戴干净的手套，从包装袋中取出软盖。小心地把软盖安在瓶口上。.必要时申请校准。.有关申请校准的信息，参见ARCHITECT系统操作手册第6节。.申请检测。.有关申请患者样本、质控品以及常规操作程序的说明，参见ARCHITECT系统操作手册第5节。.将ARCHITECT人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定试剂盒安装到ARCHITECTi系统上。.检查检测所需试剂是否齐全。确保所有试剂瓶都有软盖。.系统计算出样品杯所需的最小样本量，并打印在申请报告中。每个样品杯的重复取样次数不能超过10次。为了最大程度上减小蒸发的影响，运行检测前要确保样品杯中的样本量充足。.优先方案：第一次进行ARCHITECTHIV抗原及抗体联合检测需要150μL样本，每增加一次ARCHITECTHIV抗原及抗体联合检测需要在同一样品杯中增加100μL样本。.在机时间≤3小时：第一次进行ARCHITECTHIV抗原及抗体联合检测需要150μL样本，每增加一次ARCHITECTHIV抗原及抗体联合检测需要在同一样品杯中增加100μL样本。.在机时间＞3小时：需要增加样本量。更多有关样本蒸发和用量的信息，参见ARCHITECT系统操作手册第5节。.如果使用样本采集管或试管，则需使用样本刻度来确保患者样本量充足。.校准品和质控品的制备.ARCHITECTHIV抗原及抗体联合校准品1和质控品在使用前应轻轻颠倒混匀。.要达到ARCHITECTHIV抗原及抗体联合校准品1和质控品的建议用量，需要垂直握住试剂瓶，向相应的样品杯中分别加入每种水平的校准品各20滴或每种水平的质控品各10滴。.加载样本。XX市XX区人民医院检验科作业指导书文件编号LAB-WHSCDQRMYY-SOP.MY-05-015页号第32页共5页版本/修改次数第4版第0次修改人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定（化学发光法）审核人王楚明批准人肖昌国发布日期2016年07月16日.有关加载样本的信息，参见ARCHITECT系统操作手册第5节。.按下RUN启动。.为使系统达到最佳状态，必须依照ARCHITECT系统操作手册第9节进行日常保养。2、样本稀释程序ARCHITECTHIV抗原及抗体联合检测不能使用稀释过的样本。3、校准.进行ARCHITECTHIV抗原及抗体联合校准时，需要对校准品1重复测试3次。校准品1优先装机。评估校准情况时，必须将所有水平的ARCHITECTHIV抗原及抗体联合质控品各检测一次。确保质控值在质控品说明书规定的S/CO范围内。.系统接受并保存ARCHITECTHIV抗原及抗体联合校准后，无需进一步校准即可检测随后的样本，除非发生以下情况：.使用新批号的试剂盒.质控值超出规定范围.有关如何进行校准的详细信息，参见ARCHITECT系统操作手册第6节。4、质量控制程序ARCHITECTHIV抗原及抗体联合项目的建议质控要求为每24小时(使用中)将所有水平的质控品各检测一次。【检验结果的解释】.样本S/CO值<1.00被认定为非反应性(NR)。.样本S/CO值≥1.00被认定为反应性(R)。注意：初检结果为反应性的样本必须经离心后复检两次。更多信息，参见本说明书中样本要求一节。ARCHITECTHIV抗原及抗体联合检测结果【注意事项】用于体外诊断必须严格按照说明书使用。任何有悖说明书的操作都有可能降低检测结果的可靠性。1、安全注意事项.警告:使用本产品时需要处理人源性样本。建议将所有人源性材料视为潜在感染源并按照OSHA血源性致病菌标准66处理。对于含有或可能