血液病诊断中心资料大全

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表2.以白细胞增多为主要临床表现的血液系统肿瘤的特殊检查工程总结

首选必做(初诊病人)选做(提供免费专家咨询)CMLBCR/ABL(PCR定量)血/骨髓涂片、骨髓活检、细胞遗传流式、基因突变分析FISH，PCRMPNJAK-2(PCR定性)血/骨髓涂片、骨髓活检、细胞遗传流式、FISH、PCRAML流式血/骨髓涂片、骨髓活检、细胞遗传FISH、PCR、基因突变分析CLL流式血/骨髓涂片、骨髓活检FISH、PCR、细胞遗传ALL流式血/骨髓涂片、骨髓活检、细胞遗传FISH、PCR

贫血(Anemia)

绝大多数贫血不需要高端实验室诊断。只有那些经过常规治疗效果不佳又排除了一般常见贫血原因的病例才需要使用高端实验室诊断技术。在这些所谓的难治(顽固)性贫血中，MDS是一种肿瘤性干细胞疾病，也曾被称之为白血病前期。在MDS的诊断中，流式细胞学近年来异军突起开始发挥越来越大的作用。流式在MDS诊断中的应用主要有三个方面。第一个方面是通过CD34+细胞计数来判断干细胞/母细胞的含量，据此可以鉴别急性白血病和给MDS分级，即低度恶性的MDS(RA、RARS、RCMD、RCMD-RS、MDS-U、5q综合症)和高度恶性的MDS(RAEB-I和RAEB-II)。第二个方面是通过观察粒细胞、单核细胞、红系幼稚细胞、髓系幼稚细胞和前B-淋母细胞的外表抗原表达来发现各系的增生异常。比方CD11b/CD13/CD15/CD16，CD56在粒细胞成熟过程中表达顺序的异常，CD56在粒系和/或单核细胞外表的异常表达，CD71在红系幼稚细胞外表的丧失，髓系幼稚细胞表达异常淋系抗原和前B-淋母细胞数量及抗原表达的异常等。由于有很大一局部MDS病人没有细胞遗传学改变和明显的形态学特征，流式细胞学的异常就成了这些病人的唯一客观的诊断指标，经过结合临床表现可以为病人的最后诊断提供重要的依据。在这一方面业界已有了共识。第三个方面是通过高敏度流式分析技术检测微量PNH阳性细胞的存在。这对于低增生性(Hypocellular)MDS、再障(Aplasticanemia)及阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的诊断与鉴别诊断有重要意义。近年来人们发现，很多PNH病人并没有典型的血红蛋白尿病症而且也没有明显的溶血现象。他们中的一局部人以反复血栓形成为主要临床表现，更多的人以全血细胞减少为主要临床表现。这一局部病人其临床表现与MDS和再障(AA)重叠，给病人的临床诊断和治疗带来很大困难。高敏度流式细胞分析可以测出0.01%的PNH阳性细胞是解决这一难题的有效手段。PNH阳性细胞在10%以上可诊断典型的PNH。这些病人一般都有典型的血管内溶血。其中有一局部同时患有AA或者MDS。PNH阳性粒细胞超过50%有产生血栓形成的危险。PNH阳性细胞在1%到10%之间的病人一般没有明显的的溶血病症但大局部研究说明这些病人在接受免疫抑制治疗后贫血病症可有一定的缓解。对于PNH阳性细胞在0.1%以下的病人，临床研究的资料还不够多但也或多或少对免疫抑制疗法有反响。对于有条件接受依库珠单抗治疗(年费用40.95万美元)的病人，PNH阳性细胞一般应在20%以上。

淋巴瘤诊断

淋巴瘤诊断一直是由病理科主导。组织病理加免疫组化是淋巴瘤诊断的最正确组合和大多数淋巴瘤诊断的金标准。对于体液(胸腹水)、脑脊液、细针穿刺、血液和骨髓中的淋巴瘤诊断和鉴别诊断，流式细胞分析可以弥补组织病理的缺乏。如果能取得未固定的新鲜组织样品，就可以及时送检流式、直接涂片FISH和细胞遗传学等现代临床检验。流式细胞分析在判断单克隆性方面明显优于免疫组化。而且，流式细胞术还能对骨髓内微量病变进行检测，对血液、体液、脑脊液和细针穿刺液中淋巴瘤的诊断和免疫分型，对T-细胞NK细胞淋巴瘤进行诊断等，且出报告时间短(24小时内)。流式法T-细胞克隆性分析(IOtest)是近年来逐渐普及的先进诊断技术。部它与常用的PCR法相比各有千秋。由于流式法T-细胞克隆性分析是与细胞外表抗原分析同时进行，其潜在的临床应用价值比PCR法多很多。它是一个尚未充分开发的信息宝库。流式细胞分析还可以做细胞DNA含量测定和细胞周期分析。将此与细胞外表抗原分析结合起来的DRAQ5染色法在大细胞淋巴瘤的流式细胞分析中较碘化丙啶(PI)有无可比较的优越性。

FISH和分子诊断对套细胞淋巴瘤、Burkitt's淋巴瘤、滤泡淋巴瘤和边缘区B细胞淋巴瘤等确实诊有决定意义，对小淋巴细胞淋巴瘤的预后有重要意义。对其他淋巴瘤的诊断有辅助意义。细胞遗传学可以发现FISH和分子诊断容易漏掉的染色体变异，特别是高二倍体，多倍体变异。对大细胞淋巴瘤、高度恶性淋巴瘤和淋巴母细胞淋巴瘤的诊断有重要意义。

免疫球蛋白增高和浆细胞肿瘤

血、尿中免疫球蛋白增高，在很多情况下是良性疾病的表现。反复持续性或大量的免疫球蛋白增高那么常常是浆细胞肿瘤或成熟B细胞淋巴瘤的临床表现。诊断浆细胞肿瘤(包括多发性骨髓瘤)和B-细胞淋巴瘤常常需要做骨髓活检或组织活检。有些基层医院因为没有病理科只能做骨髓穿刺抽吸不能做活检，导致阳性检出率大大降低。这是因为浆细胞肿瘤会造成肿瘤细胞周围骨髓组织的纤维化。后者使得抽吸失败或抽不到肿瘤细胞。在这种情况下将抽到的样品送高敏流式细胞学检查可以大大提高样品的阳性检出率。高敏流式细胞学分析可以在样品中检出0.1%的单克隆浆细胞。这对于骨髓中轻度浆细胞增多的鉴别诊断很有帮助。在能成功取到活检样品的情况下，组织病理加免疫组化仍然是诊断浆细胞肿瘤和成熟B细胞淋巴瘤的首选。用抗CD138的免疫组化试剂加抗kappa和lambda轻链的抗体一般情况下足矣。过去很多临床医生认为所有的多发性骨髓瘤都是不治之症，因而对病人的治疗没有按照公认的预后指标来进行有效管理。随着对此一疾病的深入了解和治疗手段的不断优化，人们逐渐认识到检查预后指标的重要性。在总结各种与骨髓瘤有关的预后指标以后，美国MayoClinic在2007年发表了骨髓瘤临床试验、患者咨询和治疗选择的实践指南。将骨髓瘤患者分为两大类，高危和低危。高危患者约占病人总数的25%。目前的治疗手段对这类病人根本无效。其他75%的患者可以继续用现有的治疗方案。区别高危和低危的指标见表5。

表5.MayoClinic多发骨髓瘤临床试验病人风险分组高危低危17染色体短臂缺失(17p13-)，造成p53基因缺失，可出现在核分裂间期(interphase)，或核分裂中期(metaphase)。荧光原位杂交(FISH)可以测interphase也可以测metaphase的基因突变。传统的细胞遗传学只能测metaphase的基因突变t(6;14)-FISH;t(11;14)-FISH

13染色体缺失或13染色体长臂缺失(-13/13q-)，由FISH查出者意义还有争议；由细胞遗传学查出：高危

非整倍体(aneuploidy)由细胞遗传学查出

t(4;14)-FISH;t(14;16)-FISH;t(14;20)-FISH

浆细胞标记指数(PCLI)>3.0

Beta2-微球蛋白升高>5.5mg/L

由于以上指南特别强调FISH和传统细胞遗传学的作用，取得细胞悬液样品就成为应用该指南的关键所在。淋巴组织或骨髓活检材料在未固定以前都可以放入细胞培养液(如RPMI)或生理盐水中送检。甚至裹在被生理盐水浸透的纱布里也行。这些未固定的样品如送检及时都可以在有经验的实验室工作人员手中制备成可用于各种高端实验室检验的细胞悬液。固定后的组织那么可以用组织病理和免疫组化方法来进行分析。用组织切片也可以做局部地区分子诊断方法和FISH方法的检测但效果不如细胞悬液样品。

表7.白血病以外的血液系统肿瘤性病变的特殊检查工程总结

首选必做选做(提供免费专家咨询)MDSFISH+细胞遗传血/骨髓涂片、骨髓活检、免疫组化流式淋巴瘤诊断组织病理+免疫组化涂片检查流式、FISH、PCR、细胞遗传淋巴瘤分期骨髓活检+流式血/骨髓涂片、FISH、PCR、细胞遗传组织病理加免疫组化多发性骨髓瘤诊断骨髓活检+流式血/骨髓涂片、免疫组化FISH、PCR、细胞遗传多发性骨髓瘤预后骨髓活检+流式FISH、细胞遗传、PCLI、Beta2-微球蛋白组织病理加免疫组化六、血液病理检测申请单及标本送检要求

GPS综合报告范例按血液肿瘤病种分类的检测工程及局部GPS综合报告范例

〔一〕急性淋巴细胞白血病〔ALL〕ALL相关检测工程

工程名称

临床应用骨髓组织活检检查与诊断诊断、鉴别诊断、MRD监测血液淋巴系统疾病。骨髓涂片检查〔细胞学检验+1项细胞化学染色+彩色图文报告〕诊断、鉴别诊断、MRD监测血液淋巴系统疾病。WHO骨髓细胞染色体核型分析用于血液肿瘤诊断与鉴别诊断，风险分组和预后评估。WHO外周血细胞染色体核型分析用于血液肿瘤诊断与鉴别诊断，风险分组和预后评估。BCR/ABL-t(9;22)-FISH检测BCR/ABLt(9;22)可见于84%经典CML，13%的ALL,1%的AML,2%MDS患者中。MLL(11q23)-FISH检测见于70%婴儿白血病和5-6%儿童白血病，提示预后较差；可见于5%成人ALL，提示预后较差；可见于AML-M4、M5、MDS、治疗相关性白血病和双表型白血病。融合基因BCR/ABL检测(定量,p210)CML、Ph+ALL诊断、鉴别诊断、预后和风险评估、治疗效果监测。融合基因BCR/ABL检测(定量,p190)CML、Ph+ALL诊断、鉴别诊断、预后和风险评估、治疗效果监测。成人ALL-FISH探针组合：包括BCR/ABL、MLL、E2A、IgH、MYC成人ALL辅助诊断、预后和风险评估、治疗效果监测。儿童ALL-FISH探针组合：包括BCR/ABL、MLL、E2A、TEL/AML1儿童ALL辅助诊断、预后和风险评估、治疗效果监测。伴嗜酸细胞增多血液肿瘤-FISH探针组合：CBFβ、PDGFRα、PDGFRβ、FGFR1伴嗜酸细胞增多急慢性白血病的辅助诊断、预后和风险评估、治疗效果监测。急性白血病快速鉴别诊断CD系列检测〔15CD〕急性白血病快速鉴别诊断

白血病细胞CD系列检测〔28CD〕1、

评估不明原因成熟淋巴细胞增多。2、

确定淋巴增殖性疾病骨髓、外周血浸润。3、

急淋和急非淋鉴别诊断。4、

急淋免疫分型。5、

反响性淋巴细胞增生与淋巴瘤的鉴别诊断。6、

白血病与淋巴瘤鉴别诊断。7、

辅助诊断AML伴形态学未/微分化，AML进一步分型。8、

辅助诊断MDS及其风险评估。9、

辅助诊断CML及其风险评估。急慢性白血病/NHL/MDS全面CD系列检测〔40CD〕1、评估不明原因成熟淋巴细胞增多。2、确定淋巴增殖性疾病骨髓、外周血浸润。3、急淋和急非淋鉴别诊断。4、急淋免疫分型。5、反响性淋巴细胞增生与淋巴瘤的鉴别诊断。6、白血病与淋巴瘤鉴别诊断。7、辅助诊断AML伴形态学未/微分化，AML进一步分型。8、

辅助诊断MDS及其风险评估。9、

辅助诊断CML及其风险评估。10、慢性淋巴增殖性疾病免疫表型分类。11、确定单克隆浆细胞。12、微小残留白血病监测。毛细胞白血病〔HCL〕相关CD系列检测〔15CD〕诊断、鉴别诊断、MRD监测毛细胞白血病。外周血淋巴细胞增多快速鉴别诊断CD系列检测〔15CD〕快速鉴别诊断外周血淋巴细胞增多时，为反响性还是肿瘤性淋巴细胞。微小残留白血病检测〔28CD〕血液淋巴系统疾病治疗效果监测。

ALL-GPS综合报告实例

〔二〕急性髓细胞白血病〔AML〕AML相关检测工程

工程名称

临床应用骨髓组织活检检查与诊断诊断与辅助诊断血液淋巴系统疾病骨髓涂片检查〔细胞学检验+1项细胞化学染色+彩色图文报告〕诊断与辅助诊断血液淋巴系统疾病WHO骨髓细胞染色体核型分析用于血液肿瘤诊断与鉴别诊断，风险分组和预后评估。WHO外周血细胞染色体核型分析用于血液肿瘤诊断与鉴别诊断，风险分组和预后评估。BCR/ABLt(9;22)-FISH检测BCR/ABL-t(9;22)可见于84%经典CML，13%的ALL,1%的AML,2%MDS患者中。PML/RARα-t(15;17)-FISH检测辅助诊断急性早幼粒细胞白血病〔APL〕，APL占成人AML10%，其中PML/RARAt(15;17)占99%，另少见t(15;v)约占1%。AML1/ETOt(8;21)-FISH检测辅助诊断AML-M2b,提示预后较好，约占成人AML12%,占AML-M2约40－50%，另少量存在于AML-M0,M1或M4中。MLL(11q23)-FISH检测见于70%婴儿白血病和5-6%儿童白血病，提示预后较差；可见于5%成人ALL，提示预后较差；可见于AML-M4、M5、MDS、治疗相关性白血病和双表型白血病。急性髓细胞白血病FISH探针组合检测(5q31/D5S23,D5S721;7q31/CEP7;CEP8;20q12;AML1-ETO;MLL;CBFB;PML-RARA)AML诊断、鉴别诊断、预后和风险评估、治疗效果监测。FLT3/ITD突变检测(定性)正常核型AML(CN-AML)患者的预后和风险评估。AML中，40－49%成人AML为染色体核型正常，25%儿童AML染色体核型正常。FLT3/ITD〔14/15外显子〕突变可见于28－33%染色体核型正常的AML。FLT3/ITD突变存在提示预后较差。FLT3-D835突变检测(定性)正常核型AML(CN-AML)患者的预后和风险评估。NPM1基因突变检测(exon12,定性)正常核型AML(CN-AML)患者的预后和风险评估。融合基因BCR/ABL检测(定量,p210)CML、Ph+ALL诊断、鉴别诊断、预后和风险评估和治疗效果监测。融合基因BCR/ABL检测(定量,p190)CML、Ph+ALL诊断、鉴别诊断、预后和风险评估和治疗效果监测。伴嗜酸细胞增多血液肿瘤-FISH探针组合：CBFβ、PDGFRα、PDGFRβ、FGFR1伴嗜酸细胞增多急慢性白血病的辅助诊断、预后和风险评估和治疗效果监测。融合基因PML/RARα检测(定量)APL辅助诊断、判断ATRA的疗效、监测疗效和MRD检测。融合基因AML1/ETO检测(定量)AML-M2b辅助诊断、预测预后、监测疗效和MRD检测。CBF-AML中c-kit基因突变检测(exon8&17,定性)预测CBF-AML预后；存在突变预后较差并可局部预测对靶向药物的疗效。BCR-ABL融合基因ABL激酶区突变分析检测CML患者的耐药机制，辅助临床治疗方案的选择。JAK2-V617F基因突变检测(定性)非CML骨髓增殖性肿瘤的辅助诊断和监测疗效。JAK2基因exon12和13突变检测(定性)非CML骨髓增殖性肿瘤的辅助诊断和监测疗效。急性白血病快速鉴别诊断CD系列检测〔15CD〕急性白血病快速鉴别诊断。

白血病细胞CD系列检测〔28CD〕

1、

评估不明原因成熟淋巴细胞增多。2、

确定淋巴增殖性疾病骨髓、外周血浸润。3、

急淋和急非淋鉴别诊断。4、

急淋免疫分型。5、

反响性淋巴细胞增生与淋巴瘤的鉴别诊断。6、

白血病与淋巴瘤鉴别诊断。7、

辅助诊断AML伴形态学未/微分化，AML进一步分型。8、

辅助诊断MDS及其风险评估。9、辅助诊断CML及其风险评估。急慢性白血病/NHL/MDS全面CD系列检测〔40CD〕1、评估不明原因成熟淋巴细胞增多。2、确定淋巴增殖性疾病骨髓、外周血浸润。3、急淋和急非淋鉴别诊断。4、急淋免疫分型。5、反响性淋巴细胞增生与淋巴瘤的鉴别诊断。6、白血病与淋巴瘤鉴别诊断。7、辅助诊断AML伴形态学未/微分化，AML进一步分型。8、辅助诊断MDS及其风险评估。9、辅助诊断CML及其风险评估。10、慢性淋巴增殖性疾病免疫表型分类。11、确定单克隆浆细胞。12、微小残留白血病监测。

AML-GPS综合报告实例

〔三〕骨髓增生异常综合征〔MDS〕

MDS相关检测工程

工程名称

临床应用骨髓组织活检检查与诊断诊断、鉴别诊断、MRD监测血液淋巴系统疾病。骨髓涂片检查〔细胞学检验+1项细胞化学染色+彩色图文报告〕诊断、鉴别诊断、MRD监测血液淋巴系统疾病。WHO骨髓细胞染色体核型分析用于血液肿瘤诊断与鉴别诊断、险分组和预后评估。WHO外周血细胞染色体核型分析用于血液肿瘤诊断与鉴别诊断、风险分组和预后评估。MDS-FISH探针组合检测MDS诊断、鉴别诊断、预后和风险评估和治疗效果监测。包括以下探针：1.LSIEGR1(5q31)/D5S23，D5S721(5p15.2);2.LSID7S486(7q31)/CEP7;3.CEP8;4.LSID20S108(20q12)MDS相关CD系列检测〔15CD〕1、

辅助诊断MDS及其风险评估。2、

确定/除外MDS急性白血病转化。急性白血病快速鉴别诊断CD系列检测〔15CD〕急性白血病快速鉴别诊断。

白血病细胞CD系列检测〔28CD〕

1、

评估不明原因成熟淋巴细胞增多。2、

确定淋巴增殖性疾病骨髓、外周血浸润。3、

急淋和急非淋鉴别诊断。4、

急淋免疫分型。5、

反响性淋巴细胞增生