实验室常用缓冲液配置

6%6%胶配置不同体积凝胶所需成分的体积/ml1020水5.310.630%丙烯酰胺混合液2.04.01.5mol/LTris（pH8.8）2.55.010%SDS0.10.210%过硫酸铵（APS）0.10.2TEMED0.0080.0168%胶配置不同体积凝胶所需成分的体积/ml1020水4.69.330%丙烯酰胺混合液2.75.31.5mol/LTris（pH8.8）2.5510%SDS0.10.210%过硫酸铵（APS）0.10.2TEMED0.0060.01210%胶（线性分离范围20-80kDa）配置不同体积凝胶所需成分的体积/ml1020水4.07.930%丙烯酰胺混合液3.36.71.5mol/LTris（pH8.8）2.55.010%SDS0.10.210%过硫酸铵（APS）0.10.2TEMED0.0040.008

12%胶（线性分离范围12-60kDa）配置不同体积凝胶所需成分的体积/ml1020水3.36.630%丙烯酰胺混合液4.08.01.5mol/LTris（pH8.8）2.55.010%SDS0.10.210%过硫酸铵（APS）0.10.2TEMED0.0040.00815%胶（线性分离范围10-43kDa）配置不同体积凝胶所需成分的体积/ml1020水2.34.630%丙烯酰胺混合液5.010.01.5mol/LTris（pH8.8）2.5510%SDS0.10.210%过硫酸铵（APS）0.10.2TEMED0.0040.008积层胶配置不同体积凝胶所需成分的体积/ml510水3.46.830%丙烯酰胺混合液0.831.71.0mol/LTris（pH6.8）0.631.2510%SDS0.050.110%过硫酸铵（APS）0.050.1TEMED0.0050.0110*PBS：TOC\o"1-5"\h\zNaCl 160 gKCl 4gNa2HP04 71.6 gKH2PO4 4.8 g用去离子水溶解，定容到2000ml,调pH7.410%吐温-20：50mltween-20+450ml去离子水，溶解5*电泳液：H201800ml3600mlTris30.2g60.4g甘氨酸188g376gSDS10g20g加水至2000ml4000ml1*转膜液：甘氨酸14.413gTris3.0286g甲醇200ml加水至1000ml5*转膜液（用时取1份5*转膜液，加1份甲醇，3份去离子水）：4度储存甘氨酸 72.065g 144.13gTris 15.143g 30.286g加水至 1000ml 2000ml10%APS：（10%，w/v）：1g定容至10ml,-20储存；4度，2-3周有效10%SDS：10gSDS+90ml水，加热至68度搅拌，加几滴浓HCl,调pH至7.2,定容至100ml。

丙烯酰胺混合液丙烯酰胺 146g甲叉丙烯酰胺 4g温热的去离子水定容至 500ml （pH<7.0）1.0mol/LTris(pH6.8)320mlH2048.44320mlH2048.44gTris加浓HCl调pH至6.8定容至400ml320mlH2072.66gTris加浓HCl调pH至8.8定容至400ml24.22gTris加浓HCl调pH至6.8定容至200ml1.5mol/LTris(pH8.8)160mlH2036.33gTris加浓HCl调pH至8.8定容至200ml0.1%PBS-T：取400ml10*PBS,定容至41,加入40ml10%吐温-20,孵抗体用1%BSA：1gBSA定容至100mlPBS-T中5%封闭用牛奶：5g牛奶加PBS-T定容至100ml。0.1%（w/v）丽春红：5%冰醋酸溶解1MHEPES储备液（pH7.0）：119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中，加051M的NaOH水溶液调节至所需pH（HEPES的有效pH范围6.8-8.2），然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存G418配置：1gG418用pH7.3的100mMHEPES溶解，定容至10ml，终浓度为100mg/ml，过滤分装，-20度储存。LB培养基，氨苄青霉素（Amp+）储备液：50mg/ml

卡那霉素（K+）储备液：50mg/ml链霉素：100U/ml青霉素：100U/ml5*TBE(工作液为0.5*)Tris碱54g硼酸 27.5g20ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)定容至1LLB培养基5g5g10g10g

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