《中国药典》2020年版四部通则修订内容ppt培训课件

《中国药典》2020年版

四部通则修订内容目录☞010512高效液相色谱法☞020861残留溶剂测定法☞030601相对密度测定法☞040612熔点测定法☞050613凝点测定法☞060631pH值测定法☞070713脂肪与脂肪油测定法☞080832水分测定法☞099001原料药物与制剂稳定性试验指导原则☞109101分析方法验证指导原则☞119102药品杂质分析指导原则☞12新增通则及指导原则010512高效液相色谱法1、色谱条件

色谱柱：色谱柱内径一般为2.1-4.6mm，填充粒径约为2-10um。

温度影响分离效果，为改善分离效果可适当调整（提高）色谱柱温度，但不宜超过60℃。

检测器：

新增电雾式检测器（源自于EP/USP标准。适用于非挥发性和半挥发性有机物的检查。检测器总体上灵敏度高，如在分析葡萄糖、蔗糖和乳糖时，能检测到0.5ng的柱上样量；不得使用含不挥发性成分的流动相。）

流动相：增加：流动相注入色谱仪的方式（洗脱方式：等度/梯度）

色谱参数调整：（详见参数调整表）品种正文向下规定的色谱条件（参数），除填充剂种类，流动相组分，检测器类型不改变外，其余如色谱柱内径与长度、填充粒径、流动相流速，流动相组分比例、等均可适当调整。若需使用小粒径（约2μm）填充剂和小内径（约2.1㎜）色谱柱或表面多孔的填充剂以提高分离度或缩短分析时间，输液泵性能、进样体积、检测池体积和系统的死体积等必须与之匹配，必要时，色谱条件可适当调整。参数变量参数调整等度洗脱梯度洗脱固定相不得改变填充剂的理化性质，如填充剂材质、表面修饰及键合相均需保持一致；从全多孔填料到表面多孔填料的改变，在满足上述条件的前提下是被允许的填充剂粒径(dp)柱长(L)改变色谱柱填充剂粒径和柱长后，L/dp值(或N值)应在原有数值的-25%～+50%范围内流速如果改变色谱柱内径及填充剂粒径，可按下式计算流速，F2=F1×[(dc

×dp1)/(dc

×dp2)]，在此基础上根据实际使用时系统压力和保留时间调整等度洗脱流速最大可在±50%的范围内调整除按上述公式调整外，不扩大调整范围进样体积调整以满足系统适用性要求，如果色谱柱尺寸有改变，按下式计算进样体积，并根据灵敏度的需求进行调整Vinj2=Vinj1×(L2×dc

)/(L1×dc)，检测波长不允许改变参数变量参数调整等度洗脱梯度洗脱梯度洗脱程序（等度洗脱不适用）保持不同规格色谱柱的洗脱体积倍数相同，从而保证梯度变化相同，并需要考虑不同仪器系统体积的差异。流动相比例

最小比例的流动相组分可在相对值±30%或者绝对值±2%的范围内进行调整（两者之间选择最大值）；最小比例流动相组分的比例需＜（100/n）%，n为流动相中组分的个数

可适当调整流动相组分比例，以保证系统适用性符合要求，并且最终流动相洗脱强度不得弱于原梯度的洗脱强度流动相缓冲液盐浓度可在±10%范围内调整柱温除另有规定外，可在±10℃范围内调整除另有规定外，可在±5℃范围内调整pH值除另有规定外，流动相中水相pH值可在±0.2pH范围内进行调整应评价色谱参数调整对分离和检测的影响，必要时对调整色谱参数后的方法进行确认。若调整超出表1中规定的范围或品种项下规定的范围，被认为是对方法的修改，需要进行充分的方法学验证。调整后，系统适用性应符合要求，且色谱峰出峰顺序不变。若减小进样体积，应保证检测限和峰面积的重复性；若增加进样体积，应使分离度和线性关系仍满足要求。

可通过相关软件计算表1中流速、进样体积和梯度洗脱程序的调整范围，并根据色谱峰分离情况进行微调。调整梯度洗脱色谱参数时应比调整等度洗脱色谱参数时更加谨慎，因为此调整可能会使某些峰位置变化，造成峰识别错误，或者与其他峰合并。当对调整色谱条件后的其测定结果产生异议时，应以品种项下规定的色谱条件的测定结果为准。在品种项下一般不宜指定或推荐色谱柱的品牌，但可规定色谱柱的填充剂（固定相）种类（如键合相，是否改性、封端等）、粒径、孔径，色谱柱的柱长或柱内径；当耐用性试验证明必须使用特定牌号的色谱柱方能满足分离要求时，可在该品种正文项下注明。用于评价色谱柱的分离效能。由于不同物质在同一色谱柱上的色谱行为不同，采用理论板数作为衡量色谱柱效能的指标时，应指明测定物质，一般为待测物质或内标物质的理论板数。（1）色谱柱理论塔板数（n）用于评价色谱系统检测微量物质的能力，通常以信噪比（S/N）来表示。建立方法时，可通过测定一系列不同浓度的供试品或对照品溶液来测定信噪比。定量测定时，信噪比应不小于10；定性测定时，信噪比应不小于3。系统适用性试验中可以设置灵敏度实验溶液来评价色谱系统的检测能力。（3）灵敏度2、系统适用性（2）分离度（R）用于评价待测物质与被分离物质之间的分离程度，是衡量色谱系统分离效能的关键指标。除另有规定外，待测物质色谱峰与相邻色谱峰之间的分离度应大于不小于

1.5。（4）拖尾因子（T）无变化系统适用性用于评价色谱系统连续进样时响应值的重复性能。除另有规定外，采用外标法时，通常取各品种项下的对照品溶液，连续进样5次，其峰面积测量值（或内标比值或其校正因子）的相对标准偏差应不大于2.0%；采用内标法时，通常配制相当于80%、100%和120%的对照品溶液，加入规定量的内标溶液，配成3种不同浓度的溶液，分别至少进样2次，计算平均校正因子，其相对标准偏差应不大于2.0%。当待测成分是微量或痕量，进样量少或其色谱峰响应值较小时，或使用某些检测（器）方法时，对相对标准偏差的要求可适当放宽。视进样溶液的浓度和/或体积、色谱峰响应和分析方法所能达到的精度水平等，对相对标准偏差的要求可适当放宽或收紧，放宽或收紧的范围以满足品种项下检测需要的精密度要求为准。（5）重复性3、测定法3.1定性分析（新增）常用的定性方法主要有但不限于以下：（1）利用保留时间定性从进样到出现某组分色谱峰的顶点时为止所经历的时间，常以分（min）为时间单位，用于反映被分离的组分在性质上的差异。通常以在相同的色谱条件下待测成分的保留时间与对照品的保留时间是否一致作为待测成分定性的依据。在相同的色谱条件下，待测成分的保留时间与对照品的保留时间应无显著性差异；两个保留时间不同的色谱峰归属于不同化合物，但两个保留时间一致的色谱峰有时未必可归属为同一化合物，在作未知物鉴别时应特别注意。3、测定法（2）利用光谱相似度定性化合物的全波长扫描紫外-可见光区光谱图提供一些有价值的定性信息。待测成分的光谱与对照品的光谱的相似度可用于辅助定性分析。二极管阵列检测器开启一定波长范围的扫描功能时，可以获得得到更多的信息，包括色谱信号、时间、波长的三维色谱光谱图，既可用于辅助定性分析，还可用于峰纯度分析。同样应注意，两个光谱不同的色谱峰表征了不同化合物，但两个光谱相似的色谱峰未必可归属为同一化合物。（3）利用质谱检测器提供的质谱信息定性利用质谱检测器提供的色谱峰分子质量和结构的信息进行定性分析，可获得比仅利用保留时间或增加光谱相似性进行定性分析更多的、更可靠信息，不仅可用于已知物的定性分析，还可提供未知化合物的结构信息。3、测定法3.2定量分析（1）内标法：无变化（2）外标法：无变化（3）加校正因子的主成分自身对照法：无变化（4）不加校正因子的主成分自身对照法：无变化（5）面积归一化法：无变化

如适用，也可使用其他方法如标准曲线法等，并在品种正文项下注明。4．多维液相色谱多维色谱又称为色谱/色谱联用技术，是采用匹配的接口将不同分离性能或特点的色谱连接起来。理论上，可以通过接口将任意级色谱串联或并联起来，直至将混合物样品中所有的难分离、需富集的组分都分离或富集之。但实际上，一般只要选用两个合适的色谱联用就可以满足对绝大多数难分离混合物样品的分离或富集要求。一般的色谱/色谱联用都是二级，即二维色谱。接口技术是实现二维色谱分离的关键之一，原则上，只要有匹配的接口，任何模式和类型的色谱都可以联用。和一维色谱一样，二维色谱也可以和质谱、红外和核磁共振等联用。020861残留溶剂测定法1、测定法第一法：流速为1.0-2.0ml/min（一般适用于内径为0.32mm或0.25mm类的色谱柱。2、【附注】有机溶剂数量不多，且极性差异较小时，可采用等温法。有机溶剂数量较多，且极性差异较大时，可采用系统程序升温法。3、附表1：药品中常见的残留溶剂及限度四氢噻吩：改为环丁砜（四氢噻吩砜），0.016%;三乙胺（第三类）：0.5%（新增）；异丙基苯：由三类改为二类，0.007%；甲基异丁基酮：三类改为二类，0.45%4、附表2：常见有机溶剂在等温法测定时相对于丁酮的保留值参考值非极性色谱柱：SPB-1（30m*0.32mm，1.0μm）极性色谱柱：HP-INNOWAX（30m*0.32mm，0.5μm）新增中等极性色谱柱：DB-624（30m*0.32mm，1.8μm）5、附表3：常见有机溶剂在升温法测定时相对于丁酮的保留值参考值03

0601相对密度测定法相对密度测定法1、“密度”：密度系指在规定的温度下，单位体积内所含物质的质量数，即质量与体积的比值。2、液体药品的相对密度也可采用振荡型密度计法测定。3、新增测定方法：振荡型密度计法--仪器：振荡型密度计

3.1仪器主要组成部分：U型振荡管（一般为玻璃材质，用于放置样品）、电磁激发系统（使振荡管产生震荡）、频率计数器（用于测定振荡周期）、控温系统。

3.2原理：利用基于电磁引发的玻璃U型管的振荡频率，即利用一块磁铁固定在U型玻璃测量管上，由振荡器使其产生振动，玻璃管的振动周期将被振动传感器测量得到。每一个U型玻璃管都有其特征频率或按固有频率振动。当玻璃管内充满物体后其频率会发生变化，不同的物质频率变化会有所不同，其频率为管内填充物质质量的函数。当物质的质量增加时其频率会降低，即振动周期T增加。测量时选择已知密度的物质（如脱气水、空气等）作为标准物质，测量频率后通过被测物质与标准物质之间振荡频率的差值计算出被测物质的密度值。

3.3优点：高精确度，受人为因素影响小；耗样量少，每次只需要0.7-1ml；测量速度快，每次只需要1-5min；便于恒温控制。

040612熔点测定法熔点测定法1、“全熔”改为“终熔”（熔点仪上按钮为“终熔”）。2、“熔距”：熔距系指初熔与终熔的温度差值。其可反应供试品的化学纯度；对于多晶型的供试品，在保证化学纯度的基础上还可反映其晶型纯度。3、对传温液中的温度计作具体规定：或使用经对照品校正后的玻璃温度计或电阻式数字温度计（第一法测定易粉碎的固体药品A.传温液加热法）3.1实际操作中，采用自动熔点仪直接读数（即B.电热块空气加热法）。3.2B.电热块空气加热法：必要时，测定结果的准确性需经A法验证；B法测定结果有异议时，应以A法结果为准。3.3建议：测定各品种熔点时采用温度计同时读数，按A法标准操作，确保实验的准确性。附：具体操作：温度计汞球底端与容器底部相距2.5cm以上，传温液恰好浸没温度计汞球；毛细管浸入传温液并贴附在温度计上（橡皮圈/毛细管夹固定），使毛细管内容物部分适在温度计测量区（汞球）中部05

0613凝点测定法凝点测定法1、某些药品具有确定的凝点，纯度变更，凝点亦随之改变。（原标准：“一定”）2、仪器装置：外烧杯中新增温度计E（如图所示）。2.1温度计E：用于控制外烧杯中的水或冷却液的温度。2.2实际操作中外烧杯有用到温度计。3、读数：连续读数次数应≥4次，各次读数范围应＜0.2℃，将该读数的平均值作为供试品凝点。060631pH值的定法pH值测定法1、实验测得的数值只是溶液的近似pH值。（原标准：“表观”）2、“酸度计”改为“pH计（酸度计）”。3、“苯二甲酸盐标准缓冲”改为“邻苯二甲酸盐标准缓冲液”。（勘误）4、【注意事项】修改/新增5处：4.1选择三种或两种合适的标准缓冲液对仪器进行校正。（举例说明）

“三种”--若所测供试品pH值跨度较大，如9.20，则先用pH6.86和pH12.45两种标准缓冲液校正仪器，使斜率为90%～105%，漂移值在0±30mV或±0.5pH单位之内，再用pH值介于两者之间且与供试品接近的第三种缓冲液（pH9.18）验证，至仪器示值与验证缓冲液的规定数值相差≤±0.05pH单位。

“两种”--若所测供试品的pH介于相邻两种标准缓冲液之间，如10.20，则选择两种pH值约相差3个pH单位的标准缓冲液（pH9.18和pH12.45），先取与供试品pH较接近的第一种标准缓冲液（pH9.18）进行校正，使仪器示值与列表一致；再用第二种缓冲液（pH12.45）核对仪器示值，与列表数值相差≤±0.02pH单位。pH值测定法4.2清洗电极：每次更换标准缓冲液或供试品溶液前，应用纯化水充分洗涤电极，再用所换的标准缓冲液或供试品溶液洗涤；或者用纯化水充分洗涤电极后将水吸尽。4.3如果供试品溶液的pH值超出标准缓冲液的pH范围，选择pH接近供试品的三种或两个标准缓冲液进行校正。4.4在只需测量大致pH值的情况下，也可采用指示剂法或试纸法。4.5配制标准缓冲液与溶解供试品的水，应是新沸过并放冷的纯化水。（删除其pH值范围，原标准：pH值为5.5-7.0）07

0713脂肪与脂肪油测定法脂肪与脂肪油测定法1、本法适用于供药用或药用辅料的脂类物质及类似物（不包括挥发油）的测定。2、酸值、碘值、皂化值定义中的“中和脂肪、脂肪油或其他类似物质”改为“供试品”如：酸值系指供试品1g中含有的游离脂肪酸所需氢氧化钾的重量（mg）。3、酸值：（删除）“滴定酸值在10以下的油脂供试品时，可用10ml的半微量滴定管”。4、羟值：“具塞锥形瓶”改为“干燥碘瓶”。（实验使用的碘量瓶应干燥）5、新增检查项：5.1不皂化物：玉米油（公示稿）、大豆油、花生油（公示稿）5.2甾醇组成（气相）：玉米油（公示稿）5.3脂肪酸组成（气相）：玉米油（公示稿）、大豆油、花生油（公示稿）5.4碱性杂质：玉米油（公示稿）、大豆油（供注射用）、花生油（公示稿）5.5甲氧基苯胺值（紫外）：玉米油（公示稿）、花生油（公示稿）5.6反式脂肪酸（气相）：无具体例子6、附注：增加乙醇制氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）的配制方法。08

0832水分测定法水分测定法1、库仑滴定法（苯甲醇、正丁醇、乙酸乙酯）1.1增加：在适当的情况下，供试品中的水可以通过与容器连接的烘箱中的热量解吸或释放出来，并借助干燥的惰性气体（例如纯氮气）转移到容器中。因气体转移造成的误差应考虑并进行校正，加热条件也应慎重选择，防止因供试品分解而产生水。1.2供试品的取样量：含水约0.5-5mg或仪器建议使用量。1.3预滴定后将供试品迅速加入滴定杯中，或经适宜的无水溶剂溶解后，迅速加入滴定杯中。2、烘干法增加：若供试品的直径或长度＞3mm，在称取前应快速制成直径或长度≤3mm的颗粒或碎片平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中。099001原料药物与制剂稳定性试验指导原则稳定性试验的基本要求是：（1）稳定性试验包括影响因素试验、加速试验与长期试验。影响因素试验用1批原料药物或1批制剂进行；如果试验结果不明确，则应加试2个批次样品。生物制品应直接使用3个批次。加速试验与长期试验要求用3批供试品进行。（2）每批放大试验的规模，至少是中试规模。（3）加速试验与长期试验所用供试品的包装应与拟上市产品一致。（6）对包装在有通透性容器内的药物制剂应当考虑药物的湿敏感性或可能的溶剂损失。（7）制剂质量的“显著变化”通常定义为：①含量与初始值相差5%；或采用生物或免疫法测定时效价不符合规定。②降解产物超过标准限度要求。③外观、物理常数、功能试验（如颜色、相分离、再分散性、粘结、硬度、）等不符合标准要求。④pH值不符合规定。⑤12个制剂单位的溶出度不符合标准规定。（一）影响因素试验：摊成≤5mm厚的薄层，疏松≤10mm。供试品应分散放置，厚度不超过3mm（疏松原料药厚度可略高些）高温试验供试品开口置适宜的洁净容器恒温设备中，高于加速试验温度10℃以上，时间点应基于原料药本身的稳定性及影响试验条件下稳定性的变化趋势设置。通常可设定为0天、5天、10天、30天等。若供试品含量有明显变化，则在40℃条件下同法进行试验。高湿试验无变化强光照射试验供试品开口放在装有日光灯的光照箱或其它适宜的光照装置内，可选择任何输出相似于D65/ID65发射标准的光源，或同时暴露于冷白荧光灯和近紫外灯下，在照度为4500Lx±500Lx的条件下，且光源总照度应不低于1.2×106lux·hr，近紫外灯能量不低于200W·hr/m2，...原料药在溶液或混悬液状态时，或在较宽pH值范围探讨pH值与氧及其他条件应考察对药物稳定性的影响，并研究分析产物的分析方法。（二）加速试验：检测至少包括初始和末次的3个时间点（如0、3、6月）如在25±2℃、相对湿度60±5%条件下进行长期试验，当加速试验6个月中任何时间点的质量发生了显著变化，则应进行中间条件试验。中间条件为30±2℃，相对湿度60±5%，建议的考察时间为12个月，应包括所有的考察项目，检测至少包括初始和末次的4个时间点（如0/6/9/12月）对温度敏感的药物，预计只能在冰箱进行，温度为（5℃±3℃）（4-8℃），加速试验条件的相对湿度为60±5%新增拟冷冻贮藏的药物试验方法（三）长期试验：相对湿度：60%±5%（10%）对温度敏感的药物，温度设为5±3℃（6±2℃）新增拟冷冻贮藏的药物试验方法10

9101分析方法验证指导原则药品质量标准分析方法验证（analyticalmethodvalidation）分析方法验证指导原则表1检验项目和验证指标：删除校正因子方法验证内容：专属性、准确度

如方法专属性不强，应采用一种或多种不同原理的方法予以补充。

在规定范围内，取同一浓度（相当于100%浓度水平）的供试品，至少用6份样品的测定结果进行评价；或设计至少3种不同浓度，每种浓度分别制备至少3份供试品溶液进行测定，用至少9份样品的测定结果进行评价，且浓度的设定应考虑样品的浓度范围。两种方法的选定应考虑分析的目的和样品的浓度范围。（原标准：数据要求下）方法验证内容：准确度方法验证内容：准确度3、中药化学成分测定方法的准确度可用已知纯度的对照品进行加样回收测定，即向已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法测定。4、数据要求：样品中待测定成分含量和回收率限度关系可参考表2。

方法验证内容：精密度

在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性；在同一实验室内的条件改变，如不同时间、不同分析人员、不同设备等测定结果之间的精密度，称为中间精密度；不同实验室测定结果之间的精密度，称为重现性。1、重复性在规定范围内，取同一浓度（分析方法拟定的样品测定浓度，相当于100%浓度水平）的供试品，用至少6份的测定结果进行评价；或设计至少3种不同浓度，每种浓度分别制备至少3份供试品溶液进行测定，用至少9份样品的测定结果进行评价。采用至少9份测定结果进行评价时，浓度的设定应考虑样品的浓度范围。2、中间精密度：无变化3、重现性：无变化方法验证内容：精密度4、数据要求：均应报告标准偏差、相对标准偏差或置信区间。样品中待测定成分含量和精密度RSD可接受范围参考表3（可接受范围可在给出数值0.5-2倍区间，计算公式，重复性：RSDr=C-0.15；重现性：RSDR=2C-0.15，C为待测定成分含量）。在基质复杂、组分含量低于0.01%及多成分等分析中，精密度限度可适当放宽。方法验证内容：检测限、定量限、线性信噪比法：一般以信噪比为3:1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。

五、定量限：无变化四、检测限：六、线性：线性系指在设计的范围内，线性试验结果与试样中被测物浓度直接呈比例关系的能力。数据要求：应列出回归方程、相关系数、残差平方和、线性图（或其他数学模型）。验证方法内容：范围、耐用性八、耐用性：无变化七、范围：范围系指分析方法能达到精密度、准确度和线性要求时的高低限浓度或量的区间。

如果一个试验同时进行含量测定和纯度检查，且仅使用100%的对照品，线性范围应覆盖杂质的报告水平至规定含量的120%。

溶出度或释放度中的溶出量测定，范围一般为限度的±30%。11

9102药品杂质分析指导原则杂质：是药品的关键质量属性，可影响产品的安全性和有效性有机杂质可在药品的生产或贮存中引入，也可由药物与辅料或包装结构的相互作用产生，这些杂质可能是已鉴定或者未鉴定的、挥发性的或非挥发性的，包括起始物、副产物、中间体、降解产物、试剂、配位体和催；其中化学结构一般与活性成分类似或具渊源关系的有机杂质，通常称为有关物质。无机杂质可能来源于生产过程，如反应试剂、配位体、催化剂、元素杂质、无机盐和其他物质（例如：过滤介质，活性炭等），一般是已知和确定的。残留溶剂指原料药或辅料的生产中，以及制剂制备过程中使用的，但在工艺操作过程中未能完全去除的有机溶剂，一般具有已知的毒性。杂质定义：质量标准中杂质检查项目的确定新药需