APTT测定理论课件

任务止凝血一般检验PARTONE十六目录一期止血缺陷的筛选检验1二期止血缺陷的筛选检验2纤溶活性增强的的筛选检验3抗凝物质检验4一期止血缺陷的筛选检验01

血小板计数PartOne

血小板计数（plateletcount,PC或plt）

正常值：（100～300）×109/L危险PC＜20×109/L可引起自发性出血02出血时间测定

PartTwo实验原理测定在皮肤受特定条件外伤后，出血自然停止所需的时间即为出血时间。此过程反映了毛细血管与血小板的相互作

用，包括内皮下组织与血小板粘附（通过vWF

的作用）、血小板的聚集和释放等反应，以及PGI2与TXA2的动态平衡方法和器材血压计，秒表，干净滤纸出血时间测定器器材方法Ivy法、出血时间测定器法（卫生部推荐方法）操作步骤01血压计袖带缚于测定上肢的上臂，加压并维持在40mmHg,儿童减半。02在肘前窝下5cm处的尺侧做局部消毒后，将测定器垂直贴于皮肤表面，按下按钮，同时启动秒表，移开测定器。03每隔30s,用干净滤纸吸去流出的血液，直至流血自然停止，并记录秒表读数。

2.5-9.5min参考区间延长

缩短

临床意义

高凝状态和血栓性疾病1、出血时间延长见于血小板减少症2、血小板功能异常3、血管性血友病4、血管壁异常5、某些严重的凝血因子缺乏

注意影响BT测定的因素

滤纸吸去血液时，避免与伤口接触

注意药物的影响质量控制

血小板的止血功能结缔组织外膜层3平滑肌中膜层2内皮细胞、基底膜.内膜层1血管壁的结构血小板——四处堵漏的快速反应部队01血小板的表面结构.03血小板细胞器和内容物02血小板骨架系统和收缩蛋白04血小板特殊膜系统血小板的结构01血小板的表面结构PartOne（一）血小板的表面结构膜GPⅠbGPⅠbGPⅠbGPⅠbGPⅡbGPⅢaGPⅡbGPⅢaGPⅡbGPⅢavWFvWFvWFvWF收缩蛋白肌动蛋白等GPⅡb-ⅢaGPⅡb-ⅢaGPⅡb-Ⅲa内容物

鞘磷脂

磷磷脂酰胆碱（PC）膜脂磷脂酰乙醇胺（PE）甘油磷脂磷脂酰丝氨酸（PS）脂磷脂酰肌醇（PI）

胆固醇溶血卵磷脂质糖脂02血小板骨架系统和收缩蛋白PartTwo

骨架系统和收缩蛋白是指膜内侧的微管（microtubules）、微丝（microfilaments）和膜下细丝（submembranefilaments）03血小板α-颗粒、致密颗粒的部分内容物PartThree

纤维蛋白原（Fg）ADP

vWFATP

凝血因子Ⅴ、ⅧcAMP

血小板促生长因子（PDGF）5-HTβ-血小板促生长因子（β-TG）Ca2+

血小板第4因子（PF4）α-颗粒致密颗粒04血小板特殊膜系统PartFour

1、开放管道系统（opencanalicularsystem，OCS）

2、致密管道系统（densetubularsystem，DTS）血小板的花生四烯酸代谢粘附功能（adhension）LOREM1聚集功能（aggregation）LOREM2释放反应(release)LOREM3血小板的促凝作用LOREM4血块收缩LOREM5血小板的功能01粘附功能（adhension）

指血小板粘附与血管内皮下组分或其他物质表面的能力。

1.粘附因素（1）血管内皮下成分或异物表面（2）GPⅠb-Ⅸ复合物（3）其他

2.粘附机制vWFGPⅠb-Ⅸ胶原纤维GPⅡb-Ⅲa纤维蛋白原GPⅡb-Ⅲa血小板血小板GPⅡb-Ⅲa纤维蛋白原纤维蛋白原血小板血小板黏附聚集02聚集功能（aggregation）

指血小板与血小板之间相互粘附形成血小板团的功能。

1.聚集因素（1）GPⅡb-Ⅲa复合物（2）纤维蛋白原（Fg）（3）Ca2+

（4）血小板被激活

2.血小板的聚集机制vWFGPⅠb-Ⅸ胶原纤维GPⅡb-Ⅲa纤维蛋白原GPⅡb-Ⅲa血小板血小板GPⅡb-Ⅲa纤维蛋白原纤维蛋白原血小板血小板黏附聚集

3.血小板的聚集类型（1）第一相聚集：指由外源性致聚剂诱导的聚集反应。它与GPⅡb-Ⅲa与Fg的相互反应有关。（2）第二相聚集：指由血小板释放出的内源性致聚剂诱导的聚集反应。

激活血小板的物质称为致聚剂或诱导剂。

弱：ADP、肾上腺素、去甲肾上腺素、血管加压素、5-HT

中等：TXA2

强：凝血酶、胶原、A2318703释放反应(release)

指体内血小板活化后或体外血小板被机械或诱聚剂等激活后,血小板α、γ及溶酶体等贮存颗粒中的内容物通过OCS释放到血小板外的过程。

1.释放因素（1）诱聚剂：（2）完整的骨架系统：完整的骨架系统是释放反应的基本条件。（3）Ca2+：血小板释放反应需要Ca2+的参与。2.释放机制

诱聚剂作用于血小板膜上的相应受体，释放出Ca2+，使血小板胞质内Ca2+浓度增高。Ca2+促进肌动蛋白聚合形成微丝，肌动蛋白结合蛋白结合到肌动蛋白微丝中，组成交联的微丝；Ca2+激活肌球蛋白轻链激酶，使肌球蛋白轻链磷酸化，促进肌球蛋白聚合形成微丝。肌动蛋白微丝和肌球蛋白微丝相互作用，收缩蛋白使贮存颗粒移向中央，贮存颗粒膜与OCS膜融合，颗粒内容物经OCS向外释放。04血小板的促凝作用血小板血栓素A2

5HT缩血管PF3凝血反应FⅫFⅪ前激肽释放酶高分子量激肽原FⅫa

FⅪa诱导更多的血小板聚集ADP、肾上腺素05血块收缩

血小板在纤维蛋白网架结构中心，血小板变形后的伪足可以搭在纤维蛋白上，由于肌动蛋白细丝和肌球蛋白粗丝的相互作用，伪足可向心性收缩，使纤维蛋白束弯曲，在挤出纤维蛋白网隙中血清的同时，也加固了血凝块，有利于止血和血栓形成。血管因素血小板因素有序、逐级放大的激活凝血因子纤维蛋白形成白色血栓红色血栓凝血因子的作用ⅠⅫ组织损伤ⅦTFⅦaPF3Ca+++ⅠaⅫPF3Ca2+ⅨaⅧaⅨ血管内皮损伤ⅫⅫaⅨⅪaⅩⅤ凝血酶原纤维蛋白原1Ca++ⅩaⅤaPF3①凝血活酶凝血酶②纤维蛋白③Ca2+激活因子,加速稳定性纤维蛋白形成ⅫⅠ加速凝血酶原向凝血酶的转变诱导血小板的不可逆性聚集，加速其活化和释放反应激活因子Ⅻ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ激活蛋白C系统，增强纤维蛋白溶解活性凝血酶②1Ca++ⅩaⅤaPF3①凝血活酶

血管壁受损TF释放启动外源凝血释放5-HTTXA2胶原暴露激活血小板血小板血栓VWF血栓与止血的病理过程血肿压迫血管收缩血流变缓ET启动内源凝血

血栓形成止

血血液凝固过程动画抗血液凝固系统4止血

抗血栓一抗凝系统

细胞抗凝体液抗凝血管内皮细胞单核–巨噬细胞系统抗凝血酶（AT）系统蛋白Ｃ（PC）系统组织因子途径抑制物（TFPI）灭活凝血蛋白产生抗凝和激活抗凝物质单核巨噬细胞肝血管内皮细胞

组织凝血活酶凝血酶IXa、Xa、VIIa

巨球蛋白（α2MG）抗胰蛋白（α1AT）抗凝血酶III（AT-III）蛋白C、蛋白SAT-III、PGI2、α2-MG血栓调节蛋白（TM）激活蛋白C1．抗凝血酶（AT）系统：

包括AT和肝素肝素AT-III凝血酶丝氨酸AT-III抗凝机制丝氨酸位点2.蛋白C系统

蛋白C（PC）蛋白C系统蛋白S（PS）包括血栓调节蛋白（TM）内皮细胞蛋白C受体（EPCR）蛋白C的抗凝途径BloodFlowThrombomodulinProteinCAPC损伤处下游的抗凝作用ThrombinThrombinThrombus血管损伤处发生的血栓EPCRPCPSAPC凝血活酶TM凝血酶凝血酶原PF3Ca++ⅨaⅧ2．蛋白Ｃ（PC）系统

1Ca++ⅩaⅤaPF3①凝血活酶ⅩEPCRVIIIai蛋白C的主要抗凝作用BloodFlowVIIIaVaThrombusVaiAPCAPCPSPSFactorVLeidenVaia、灭活Va、VIIIa；b、抑制X因子与血小板膜磷脂的结合；c、激活纤溶系统，通过灭活纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1），促进纤溶；d、增强AT-III与凝血酶的结合。3．组织因子途径抑制物（TFPI）FⅩaTF/ⅦaCa++ⅩaPF3Ca++ⅨaⅧⅨ血管内皮损伤ⅫⅫaⅨⅪaⅩⅤ凝血酶原凝血酶纤维蛋白纤维蛋白原1Ca++ⅩaⅤaPF3①凝血活酶②③ⅠⅫ组织损伤ⅦTFⅦaPF3Ca+++ⅠaⅫATATAPCAPCTFPITFPIAPC

组成

1、纤溶酶原（PLG）及纤溶酶（PL）

2、纤溶酶原激活剂（tPA、uPA）

3、纤溶酶原激活物抑制物（PAI）,纤溶酶抑制物（PI）

4、纤维蛋白（Fb）、纤维蛋白原（Fbg）及其降解产物（FDP）二、纤维蛋白溶解系统（二）纤维蛋白（原）降解机制D-dimer形成示意图

纤溶酶D-dimer纤维蛋白原纤维蛋白凝血酶1、碎片X（X’）：由于与Fg和FM的结构相似，故可与Fg竞争凝血酶，并可与FM形成复合物，故他们阻止FM的交联。2、碎片Y（Y’）：可抑制FM的聚合及（或）抑制FM形成不溶性纤维蛋白。3、碎片D和E（E’）：碎片D抑制FM的聚合；碎片E（E’）竟争凝血酶而具有抗凝作用。4、极附属物A、B、C、H：可延长活化部分凝血活酶时间。活化部分凝血活酶时间测定

activatedpartialthromboplastintime，APTT一、原理APTT

Ca2+脑磷脂白陶土

Ca2+脑磷脂部分凝血活酶

二、操作（一）APTT手工法(试管法）血浆0.1ml＋APTT试剂各0.1ml+CaCl20.1ml

（混匀计时）结果观察：缓慢倾斜试管，观察液体流动状态，流动停止停止计时

参考值25∼45s(二）仪器法

37℃水浴5min37℃温浴APTT延长缩短因子VIII、IX、XI活性减低高凝状态三、临床意义

肝素抗凝监测APTT纠正试验

于患者血浆中分别加入1/4的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆、正常血清，再作APTT试验。硫酸钡吸附血浆VIII、XI、XII

正常血清IX、XI、XII

新鲜血浆VIII、IX、XI、XII血友病甲血友病乙FⅪ缺乏正常血浆硫酸钡吸附血浆（缺Ⅸ）正常血清(缺Ⅷ)APTT纠正试验----血友病纠正不纠正纠正纠正纠正纠正不纠正患者血浆纠正纠正凝血酶原时间测定Prothrombintime，PT一、原理

Ca2+脑磷脂PT组织因子Ca2+

磷脂

1、直接报告患者及正常对照的PT秒数

2、报告凝血酶原时间比值（PTR）

PTR=受检者PT（秒）/正常对照PT（秒）

3、报告国际标准化比值（INR）

INR=PTRISI二、报告方式

组织凝血活酶的国际敏感指数（internation

sensetivity

index,ISI）是用组织凝血活酶试剂与ISI已知的国际参比品或经其标定过的参比品之间敏感度相比较的一个参数。测定方法：用多份凝血因子水平不同的血浆（包括正常人和口服抗凝剂患者的血浆），用参比品测得它们的PT的对数（lgPT），再用待标定的组织凝血活酶测得它们的lgPT，以前者为纵坐标，后者为横坐标作图，经回归求得直线斜率。待标定的组织凝血活酶的ISI=已知的ISI×斜率PT延长缩短因子II、V、VII、X、Fg活性减低高凝状态三、临床意义

口服双香豆素类抗凝药物监测要保证止凝血检验的质量

必须做好以下十点：1.采血须顺利，尽量用大号针头，动作要轻柔；2.标本用加盖有刻度标记的塑料试管或硅化管收集；3.抗凝剂用109mmol/L的枸橼酸钠，抗