实验动物的设施与环境

实验动物的设施与环境第1页，课件共188页，创作于2023年2月主要内容环境因素对实验动物的影响实验动物的生物学分类常规实验动物设施分类、使用和管理同济大学实验动物中心简介※同济大学实验动物中心岗前培训※李天明2第2页，课件共188页，创作于2023年2月引言第3页，课件共188页，创作于2023年2月小样！你们想拿我干什么？第4页，课件共188页，创作于2023年2月设计实验的基本原则1：对照原则2：随机化原则3：条件一致性原则4：重复性原则√√？第5页，课件共188页，创作于2023年2月第6页，课件共188页，创作于2023年2月树鼩适宜温度：25~28℃适宜湿度：60％以上第7页，课件共188页，创作于2023年2月EnvironmentRoomCage第8页，课件共188页，创作于2023年2月

9实验动物设施对环境控制的意义1.保证实验动物健康和质量标准化2.保障实验研究获得正确结果3.为动物实验工作者提供适宜的工作环境，避免伤害，确保研究的顺利进行第9页，课件共188页，创作于2023年2月第一节

环境因素对实验动物的影响第10页，课件共188页，创作于2023年2月11

动物对实验处理的反应：R=(A+B+C)×D+ER—实验动物的总反应（实验结果）；A—动物种的共同反应；B—品种及品系特有的反应；C—个体反应（个体差异）；D—环境影响；E—实验误差。环境因素与动物的总反应呈正相关，要尽量减少D的变化，排除实验处理以外的影响。第11页，课件共188页，创作于2023年2月

12环境因素对实验动物的影响R=（A+B+C）×D±EA+B+C

——实验动物本身的反应，遗传因素起决定性作用。D——动物生活环境影响和实验处理影响的综合作用。

第12页，课件共188页，创作于2023年2月第二节

影响实验动物的自然环境因素第13页，课件共188页，创作于2023年2月

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影响实验动物的自然环境因素1环境温度2相对湿度3光照4噪声5空气洁净度6通风7人为因素第14页，课件共188页，创作于2023年2月152.1环境温度需控制的最关键的环境参数高温比低温的问题更严重与推荐范围的重大偏离是首要问题日温差≤3°第15页，课件共188页，创作于2023年2月温度对实验动物的影响：1：新陈代谢：低温时新陈代谢增加，摄食增加2：散热：除灵长类，其他动物汗腺不发达或无汗腺，高温时散热困难，难以维持体温恒定3：脏器重量：负相关4：生殖：高温时雄性睾丸萎缩，精子活力下降；雌性动物性周期紊乱，泌乳下降。第16页，课件共188页，创作于2023年2月17喜马拉雅（Himalaya）兔在20℃环境下饲养时，耳、尾、鼻和四肢尖端生长白毛，而饲养在10℃时，则生长黑毛。小鼠在21℃环境下每年能繁殖3代，而在13℃下仅能繁殖2代。（性周期）第17页，课件共188页，创作于2023年2月

气温与体温的关系适宜温区生理调节生理调节物理调节化学调节高体温低体温T临界10℃（小鼠为例）T临界：26℃小鼠为例）冷死热死舒适区等热区体温恒定区生存区第18页，课件共188页，创作于2023年2月

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几种实验动物的体温和舒适区温度动物种类体温℃舒适区温度℃小鼠37-3920-24大鼠38.5-39.520-24豚鼠38.2-38.918-22兔37-3916-23犬38-3917-20猕猴36-3918-25猪38-4018-25第19页，课件共188页，创作于2023年2月2.2相对湿度绝对湿度a：某温度下，样品空气中的水蒸气的实际含量饱和湿度b：某温度下，样品空气中所能容纳的水蒸气的最大值相对湿度c：某温度下，样品的绝对湿度与该温度下的饱和湿度的比值（和样品多少无关，能够客观衡量湿度的大小）c=（a/b）×100％空气中的含水量和温度有关，温度越高，能容纳的水蒸气也越多推荐湿度：40％~70％第20页，课件共188页，创作于2023年2月

21相对湿度--

偏高微生物易于繁殖饲料、垫料易于霉变动物易发生传染病第21页，课件共188页，创作于2023年2月

22相对湿度--

偏低使动物皮肤和黏膜发生干裂使室内灰尘飞扬，易引起动物的呼吸道疾病相对湿度低于20%时，大鼠容易发生环尾症第22页，课件共188页，创作于2023年2月

23Ringtail第23页，课件共188页，创作于2023年2月24大鼠不耐低湿度，如湿度低于20%，容易发生一种表现为尾根部坏死的环尾症（ring-tail），死亡率甚高。

第24页，课件共188页，创作于2023年2月252.3光照光照对哺乳动物生物钟具有重要作用，光照的昼夜交替使动物体的一些活动，如血压、激素水平、体温、神经活动等都变成了一种节律。第25页，课件共188页，创作于2023年2月

光周期光周期的控制对啮齿类动物至关重要动物设施内的光周期：12小时（明）/12小时（暗）14小时（明）/10小时（暗）

一般都会有手动操作的定时器

第26页，课件共188页，创作于2023年2月27

持续光照可使生殖系统过度兴奋，造成连续发情。还可性成熟年龄提早。第27页，课件共188页，创作于2023年2月光强度随距离光源的距离增大而递减高强度会引起白化鼠的视网膜病变工作照度150～300lx动物照度15～20lx（小鼠）第28页，课件共188页，创作于2023年2月2.4噪声引起动物听力性痉挛。≥60db对生殖影响较大，如豚鼠流产。引起动物呼吸、心跳、血压、肾上腺皮质激素等生理指标变化。心跳、呼吸次数及血压增加，大鼠出现高血压、心脏肥大第29页，课件共188页，创作于2023年2月30噪声对实验动物生殖生理具有严重不良影响噪声对实验动物的生殖生理具有严重不良影响。可使怀孕动物的妊娠过程中断；或使大鼠和小鼠雄雌双方的生育力都减退。

第30页，课件共188页，创作于2023年2月312.5空气洁净度尘埃：是各种生物粒子的载体，这些生物粒子可附着在1～20μm的尘埃上飘浮在空中生物粒子：包括病毒、细菌、芽孢、粉螨、霉菌孢子等

清洁级以上的动物设施，都采用3层过滤器过滤后的空气。第31页，课件共188页，创作于2023年2月32空气过滤器

初效过滤器：阻挡5微米直径以上的颗粒物。

中效过滤器：阻挡1~5微米直径的细颗粒物，过滤效率85％以上

高效过滤器：99.7％阻挡0.3微米直径以上的细颗粒物。此为医学级空气（1.12亿个0.3微米的微粒大小等同于铅笔尖）第32页，课件共188页，创作于2023年2月氨浓度动物室中的臭气物质，对人和动物具有卫生学意义的是含氮物质分解产生的氨。

在卫生管理方面，以氨的含量作为指标。高浓度的氨（≥200mg/m³）可引起呼吸器官黏膜异常，发生流泪、咳嗽黏膜发炎、肺水肿和肺炎。SPF动物房氨浓度≤14mg/m3第33页，课件共188页，创作于2023年2月

342.6通风我们想通过通风系统达到什么目的？可作用于动物体表皮肤的蒸发和对流散热，气流速度和散热正相关。可调节室内温度和湿度，又可降低室内粉尘和有害气体污染，控制传染病的流行。气流布局模式-水平层流式

-垂直层流式

-乱流式第34页，课件共188页，创作于2023年2月

35水平层流模式图送风墙回风墙第35页，课件共188页，创作于2023年2月

36垂直层流模式图天花板送风地面回风第36页，课件共188页，创作于2023年2月

37乱流式模式图送风口回风口回风口回风口第37页，课件共188页，创作于2023年2月

38乱流式饲养室第38页，课件共188页，创作于2023年2月影像资料第39页，课件共188页，创作于2023年2月40换气次数，洁净程度越高，要求换气次数越多。屏障环境：10～20次/h隔离环境：20～50次/h.压强梯度：洁净区高于污染区。饲养间60pa＞走廊40pa＞缓冲间20pa＞清洗区合理组织气流和风速可调节室内温度和湿度，又可降低室内粉尘和有害气体污染，控制传染病的流行。

通风系统中的两个重要参数第40页，课件共188页，创作于2023年2月412.7人为因素居住条件饲养技术工作人员的操作规范实验人员操作的管理第41页，课件共188页，创作于2023年2月第42页，课件共188页，创作于2023年2月43温度20～24℃换气次数10～20次/h日温差：≤3℃气流速度0.1~0.2m/s相对湿度40~70％压差强度20~60pa噪声≤60dB落下细菌数≤3个/皿氨浓度≤14mg/m³动物照度15~30lx工作照度150~300lx空气净化等级万级昼夜明暗交替时间12/2或10/14小时2.8动物实验设施环境指标（以屏障系统小鼠为例）第43页，课件共188页，创作于2023年2月第三节实验动物微生物学等级分类无菌级SPF级（无特定病原体级）清洁级普通级第44页，课件共188页，创作于2023年2月常用实验动物微生物学等级分类无菌级SPF级清洁级无菌级SPF级清洁级普通级小鼠大鼠豚鼠兔第45页，课件共188页，创作于2023年2月犬猴SPF级清洁级普通级猪第46页，课件共188页，创作于2023年2月3.1无菌动物与悉生动物无菌动物（Germfreeanimal；Gfanmial）:指通过无菌剖宫产手术或无菌胚胎移植进行无菌化获得的动物，第一代通过人工哺乳成长，利用无菌饲养方法维持于无菌隔离器，利用现有发放检测不到活的微生物或寄生虫的动物。悉生动物（Gnotobioticanimal；GNanimal)：源于gf动物，在绝对屏障系统内饲育，只能从动物体内外检测到已知生物体的动物。第47页，课件共188页，创作于2023年2月饲养隔离器第48页，课件共188页，创作于2023年2月SPF级动物即无特定病原体动物（指动物体内无特定的微生物和寄生虫）是不携带潜在感染或条件致病菌，但带有非特定的微生物和寄生虫的动物，要求在屏障系统内生长，国际上普遍采用的动物。3.2无特定病原体级动物（SpecificPathogenFree)第49页，课件共188页，创作于2023年2月

无特定病原体动物的饲育通常是:先培育出无菌动物或悉生动物;然后,再将其后代转移到屏障系统设施内饲育繁殖建群。若屏障系统内有应排除的微生物或寄生虫污染动物,则须重新消毒或重建。第50页，课件共188页，创作于2023年2月3.3清洁级动物（cleananimal;CLanimal）亦称最少疾病动物MinimalDiseaseanimal。必须是不携带主要人兽共患病原体和动物烈性传染病的病原体，又不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。第51页，课件共188页，创作于2023年2月清洁动物通常来自SPF动物的后代或降级；饲育在屏障系统设施中；饲育所用的垫料，饲料，饮水和用具等均应经过高压蒸汽消毒。

工作人员需穿无菌服装才能进行饲育或实验操作。第52页，课件共188页，创作于2023年2月3.4普通级动物（

conventionalanimal;CVanimal）

在开放系统的动物室内饲养，空气未经过净化，动物本身所携带的微生物状况不明确。要求不携带主要人兽共患病和动物烈性传染病病原的动物。第53页，课件共188页，创作于2023年2月饲育在开放环境里,使用的垫料和饲料,只消毒不灭菌;其饮水须符合城市饮用水标准。普通动物只能用于教学实验和某些科研工作的预实验。

第54页，课件共188页，创作于2023年2月无菌操作及SPF环境设施影片第55页，课件共188页，创作于2023年2月第四节

常规实验动物设施分类实验动物设施根据对饲养动物的空气净化程度分为三类。开放系统(opensystem)屏障系统(barriersystem)隔离系统(isolationsystem)第56页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200757杨斐4.1开放系统—普通环境定义：符合动物基本居住要求，但在硬件设施上不能完全控制传染因子。温湿度、尘埃等受外界环境影响。空气净化；无空气净化适用：饲育普通级动物第57页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200758杨斐开放系统实验室第58页，课件共188页，创作于2023年2月59第59页，课件共188页，创作于2023年2月60第60页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200761杨斐4.2屏障系统—屏障环境定义：通过严格控制人员、物品和环境空气的进出，形成控制微生物进入的屏障空气净化:空气进出经高效过滤，空气净化等级达到万级适用：饲育SPF级动物和清洁级动物第61页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200762杨斐屏障系统照片第62页，课件共188页，创作于2023年2月63第63页，课件共188页，创作于2023年2月定义：采用无菌隔离装置以保证与外界环境的绝对隔离空气净化：空气进出经超高效过滤，空气净化等级达到百级适用：饲育无特定病原体动物，无菌动物和已知菌动物（悉生动物）

644.3隔离系统—隔离环境第64页，课件共188页，创作于2023年2月65隔离系统照片第65页，课件共188页，创作于2023年2月66第66页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200767杨斐贮存室和库房洗刷消毒室工作人员用房走廊后勤用房废物处理设施饲料原料仓库和饲料加工室第五节

常规实验动物设施组成与布局常规实验动物设施的组成1.隔离检疫室和健康动物观察室2.饲养室3.各种实验室4.辅助区域第67页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200768杨斐实验动物设施布局原则有利于防止疾病的传播、各种动物保持各自的独立性，避免相互干扰相互感染方便工作人员操作能够使人员、动物、其他物品和净化空气尽可能的按“单向”路线移动第68页，课件共188页，创作于2023年2月内准备室饲养室饲养室实验室实验室饲养室检疫室饲养室饲养室饲养室饲养室女二更女一更男一更男二更缓冲缓冲高压灭菌锅传递窗清洗间风淋饲养室屏障系统人流走向图第69页，课件共188页，创作于2023年2月一楼SPF大鼠实验室动物流走向图内准备室饲养室饲养室饲养室实验室实验室检疫室饲养室饲养室饲养室饲养室饲养室女一更女二更男一更男二更缓冲缓冲风淋高压灭菌锅传递窗清洗间屏障系统物流走向图第70页，课件共188页，创作于2023年2月内准备室饲养室饲养室饲养室实验室实验室检疫室饲养室饲养室饲养室饲养室饲养室高压灭菌锅缓冲缓冲女一更女二更男一更男二更风淋传递窗清洗间屏障系统动物流走向图第71页，课件共188页，创作于2023年2月72实验动物设施内所有数据的监控监控内容温度湿度压差人员进出情况

设备运转情况第72页，课件共188页，创作于2023年2月关键服务的连续性应急电源-充足的发电机容量，足以维持基本的环境控制以及关键的研究设备（如样品冰柜、组织培养箱等）-自动转换及根据负载定期测试-应考虑将几个机组的负载通过交叉来分流，以防单个机组故障第73页，课件共188页，创作于2023年2月关键服务的连续性应考虑为以下提供后背供水-动物饮用水-冷却塔运行储存至少14天的饲料和垫料供给第74页，课件共188页，创作于2023年2月第六节动物设施的日常管理1：人员的走向2：物品的走向3：动物的走向4：动物尸体的处理第75页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200776杨斐6.1动物设施内人员的走向屏障系统中人的移动路线(双走廊或三走廊式)人员入口（脱衣）→一更（清洁）→二更（穿衣）→风淋室（风淋）→清洁走廊→饲养室或动物实验室（实验）→清洁走廊→人员出口→更衣→外部区域第76页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200777杨斐一更衣衣柜二更入口鞋柜第77页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200778杨斐二更衣通向一更通向风淋通向内准备室第78页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200779杨斐风淋第79页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200780杨斐清洁走廊通向实验室第80页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200781杨斐实验室入口压差计第81页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200782杨斐实验室内第82页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200783杨斐清洁走廊人员出口第83页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200784杨斐6.2动物设施内物品的走向清洁准备室→清洁物品储存室→清洁走廊→饲养室或动物实验室→清洁走廊→物品出口→外部区域高压灭菌锅紫外传递窗物品第84页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200785杨斐外准备室双扉高压灭菌器（外扉）传递窗高压喷雾器第85页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200786杨斐内准备室双扉高压灭菌器（内扉）传递窗第86页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200787杨斐清洁物品储藏室出入口第87页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200788杨斐清洁物品储存室内第88页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200789杨斐清洁走廊第89页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200790杨斐实验室第90页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200791杨斐实验室内第91页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200792杨斐清洁走廊污物出口第92页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200793杨斐清洗室第93页，课件共188页，创作于2023年2月94物品的消毒与灭菌高压锅：121℃，0.11Mpa，30分钟132℃，0.21Mpa，15分钟传递窗：紫外线，表面消毒，30分钟Co60照射2%过氧乙酸喷雾高锰酸钾、福尔马林熏蒸第94页，课件共188页，创作于2023年2月物品进出动物房的三个原则原则1：物品进入动物房尽可能采取高压灭菌的方式，不能高压的物品方可使用紫外照射灭菌。原则2：经传递窗紫外照射进入的物品，当天必须取出。原则3：经高压灭菌进入的物品，至多在动物房内存放7天。物品进出明细表（物品传递窗旁），见下图第95页，课件共188页，创作于2023年2月物品进出明细表途径适用物品高压灭菌121℃30min金属类：各类金属手术器械、小型仪器、容器、饲料铲等可以高压的金属制品。玻璃类：试管、玻片、烧杯、量筒、培养皿等可以高压的玻璃器皿。耐高压塑料制品：笼盒、EP管、移液枪枪头，小鼠运输盒等耐高压塑料制品。棉、纱类、纸制品：净化服、抹（拖）布、棉花、纱布、包装用纸盒、口罩、小鼠信息卡片。小鼠饲养用品：饮用水瓶、垫料、瓜子。传递窗过氧乙酸喷洒+紫外灯照射灭菌：紫外灯照射20min。紫外灯穿透力很弱，仅限于表面消毒，请尽量将物品摊开来。实验记录纸制品；不可高压的塑料和橡胶制品：文具，手套，果冻，饲料。不可高压的仪器设备：天平、接线板、血糖仪、环境监测仪，酒精灯，移液枪、进口离心管等。消毒液：酒精、84、文华、新洁尔灭。新进小鼠：请用动物传递窗，过氧乙酸喷洒表面后，紫外灯照射1min第96页，课件共188页，创作于2023年2月NOVEMBER,200797杨斐6.3动物实施内动物的走向屏障系统中动物的移动路线(双走廊或三走廊式)外来动物→传递窗→检疫室或健康动物观察室→清洁走廊→饲养室或动物实验室→清洁走廊→污物出口→外部区域第97页，课件共188页，创作于2023年2月6.4实验动物的居住环境第98页，课件共188页，创作于2023年2月开放式笼具第99页，课件共188页，创作于2023年2月IVC（IndividuallyVentilatedCages）第100页，课件共188页，创作于2023年2月101第101页，课件共188页，创作于2023年2月102IVC的特点IVC(IndividuallyVentilatedCages)是独立通风笼盒的简称.它的特点是具有一定的密闭性,同时让经HEPA过滤器的洁净空气流入盒内,使盒内保持正压,减少了可能的感染来源,适合于饲养SPF级动物,以及一些免疫缺陷动物第102页，课件共188页，创作于2023年2月6.5实验动物的饮水实验动物的饮用水应符合卫生部门颁发的人饮用水的质量和卫生指标。实验动物饮用水应由新鲜、纯净的水源直接提供。微生物质量等级不同的动物应供应与其级别相适应的饮用水，这些饮用水通常都采用高压、过滤、酸化等灭菌处理措施。第103页，课件共188页，创作于2023年2月各种动物每日的饮水需要量动物品种饮水需要量小鼠（成熟龄）4～7ml大鼠（50g）20～45ml豚鼠（成熟龄）85～150ml兔（1.4-2.3kg）60～140ml/kg(体重)金黄地鼠（成熟龄）8～12ml小型猪（成熟龄）1～1.9l狗（成熟龄）25～35ml/kg(体重)猫（2-4kg）100～200ml红毛猴（成熟龄）200～950ml第104页，课件共188页，创作于2023年2月各种饮水瓶（大、小鼠用）第105页，课件共188页，创作于2023年2月106第106页，课件共188页，创作于2023年2月天然饲料原料：如谷物、脱水蔬菜、草粉、鱼粉、骨粉、矿物质、酵母等加工饲料原料：如玉米淀粉作为饲料糖类来源，牛奶中提取酪蛋白作为蛋白质来源等纯化学物质：如氨基酸、必需脂肪酸等6.6实验动物的饲料第107页，课件共188页，创作于2023年2月饲料的配合任何单一的饲料都不能满足不同动物的不同生长时期对营养的需要，因此需要进行配制，使其含有全面而均衡的各种营养素，以满足动物生长繁殖或特殊实验的需要。这种饲料叫“全价营养饲料”。第108页，课件共188页，创作于2023年2月实验动物饲料加工生产原料的粉碎饲料配合饲料的混合成型成品分装第109页，课件共188页，创作于2023年2月饲料的分类饲料按物理性状的分类颗粒料粉料膨化料凝胶料液体饲料大、小鼠配合颗粒饲料第110页，课件共188页，创作于2023年2月颗粒饲料的优点加工过程中高温作用使蛋白质变性和淀粉糊化，容易消化吸收。加工过程中高温具有杀菌作用，使细菌数大量减少，饲料不易变质。加工过程中高温能灭活原料中有害物质。颗粒饲料便于运输、储存、饲喂。颗粒饲料适合于啮齿类动物啃咬习性。易掌握每日摄食量，不易造成浪费第111页，课件共188页，创作于2023年2月根据所含营养成分进行分类配合饲料浓缩饲料添加剂预混料代乳饲料按所饲喂的动物种类及生理阶段进行分类按所饲喂的动物种类分类按生理阶段分类：育成料、繁殖料、维持料按饲料的用途或功能分类高脂饲料高胆固醇饲料蛋白质缺乏料第112页，课件共188页，创作于2023年2月6.8实验动物的垫料1.垫料要求

-对动物无刺激作用或其他有毒、有害作用

-吸水性能好，并应有吸附臭气的作用

-使用方便2.垫料种类木屑（粗、细），木刨花，打碎的玉米棒及秆，吸水纸，棉花

第113页，课件共188页，创作于2023年2月114第114页，课件共188页，创作于2023年2月115第115页，课件共188页，创作于2023年2月第116页，课件共188页，创作于2023年2月3.垫料的使用（1）需经灭菌后才能使用（2）根据不同要求选择使用（3）使用后及时更换清除，频度视饲养动物数量和通风换气条件而定第117页，课件共188页，创作于2023年2月第七节同济动物中心简介第118页，课件共188页，创作于2023年2月同济大学实验动物中心位于同济大学本部的西南角，成立于2010年，是一个集教学、科研为一体的综合性公共服务平台。同时也是上海市实验动物管理委员会的团体会员单位。中心使用面积2000㎡，各类仪器设备500余件，设备总值达1000余万。拥有SPF大鼠笼位500个，SPF小鼠笼位接近10000个，普通级兔共有216个笼位，全部房间都有全自动温控送风系统，可满足大批科研课题需求。第119页，课件共188页，创作于2023年2月申请实验流程申请-需要到同济动物中心进行饲养试验的人员，需提前两周到动物中心填写申请表。审查-每周五同济动物管理委员会进行开会讨论。培训-讨论通过后可到动物中心参与岗前培训，培训通过后方可进行实验。第120页，课件共188页，创作于2023年2月QUESTION第121页，课件共188页，创作于2023年2月同济大学SPF级动物房操作培训李天65983907tianmingpumpkin@

同济大学实验动物中心第122页，课件共188页，创作于2023年2月基本概念第123页，课件共188页，创作于2023年2月实验动物（laboratoryanimal）：用于科学实验的动物。这些动物应是经人工培育、其携带微生物状况受到控制、遗传背景明确、来源清楚、符合科学实验、要配及生物制品的鉴定及其他科学研究的要求。第124页，课件共188页，创作于2023年2月无特定病原体（SpecificPathogenFree)：即无特定病原体动物（指动物体内无特定的微生物和寄生虫）是不携带潜在感染或条件致病菌，但带有非特定的微生物和寄生虫的动物，要求在屏障系统内生长，国际上普遍采用的动物。第125页，课件共188页，创作于2023年2月基本原则第126页，课件共188页，创作于2023年2月

进入SPF动物房，必需严格遵循动物中心的操作流程。每天每人只能进入一次SPF动物房。不同饲养区域、不同饲养级别的实验人员不得串流。门禁卡一人一张，不得擅自外借。动物中心工作人员门禁卡不外借。人流、物流、动物流必需分开。手机一律不准带入SPF动物房。7：00PM~7：00AM为动物的休息时间禁止人员进入。以免频繁开关灯而影响动物节律。饲养笼盒禁止带回实验室。第127页，课件共188页，创作于2023年2月实验动物的福利第128页，课件共188页，创作于2023年2月合理地选择实验动物品种、数量与质量科学地避免或减少实验动物的不安、不适及疼痛请有资质的技术人员从事或指导实验动物的饲养管理工作3R原则第129页，课件共188页，创作于2023年2月3R原则Replacement（替代）是指使用其他方法来代替动物而达到某一试验的目的，或者说使用没有自觉的试验材料代替以往使用神智清醒的活的脊椎动物进行试验的方法。Reduction（减少）是指在科学研究中，使用较少的动物获得同样多的试验数据或使用一定数量的动物能获得更多的试验数据的方法Refinement（优化）是指通过改进和完善实验程序，减轻活减少给动物造成的疼痛和不安，以提高动物福利的方法。第130页，课件共188页，创作于2023年2月美国动物福利专家提出动物应有五大自由转身自由，舔梳自由，站起自由，卧下自由，伸腿自由。第131页，课件共188页，创作于2023年2月分笼第132页，课件共188页，创作于2023年2月实验动物长期在生活在高动物密度的环境内生活，饮水会变得困难、氨浓度、温湿度也会因自身产热、排泄等原因造成笼盒内环境相应的不稳定，动物经常会出现呼吸困难、难产、食仔等状况，也极易感染动物传染病，如螨虫、蛲虫、小鼠肝炎、仙台病毒等等。第133页，课件共188页，创作于2023年2月大鼠根据体型大小来进行分笼：4只（200g以下）3只（200——300g)2只（300——400g)1只（400g以上）第134页，课件共188页，创作于2023年2月小鼠每笼≤5只单一性别小鼠每笼肥胖鼠（≥32g）≤3只繁育笼内交配小鼠不得超过4只，最佳交配繁殖比例：1:2怀孕小鼠1只一笼，小鼠出生后21天必须分笼分笼标签贴出后，一周内分笼，否则将进行强制分笼，雌雄分开，数量各半。第135页，课件共188页，创作于2023年2月实验申请、审查、预约第136页，课件共188页，创作于2023年2月申请需到动物中心SPF级动物房进行实验、饲养的人员，必须提前2周填写实验申请审查表。必须详细写明：是否携带有毒有害物品，是否为感染性实验，实验过程的描述需尽可能的详细，包括所有将会使用到的实验耗材。如EP管、手术器械、试剂、麻醉品等。第137页，课件共188页，创作于2023年2月审核动物中心收到审查表后，在3个工作日内给予实验人员回复。动物中心主任审查通过后，方可进入预约环节。第138页，课件共188页，创作于2023年2月预约审核通过后，需正确填写小鼠笼位预约单。实验人员从实验起始日期的三个月内，必须达到预约笼位的80%。否则工作人员有权将其剩余笼位进行重新分配。即将超过预约笼位的，应与楼面主管沟通后，进行再一次的笼位预约。以保证实验有序进行。第139页，课件共188页，创作于2023年2月预约单日期课题组预约人预约笼位联系方式

第140页，课件共188页，创作于2023年2月实验动物的引进与代购第141页，课件共188页，创作于2023年2月引进进入到SPF动物房内的动物，首先必须是SPF级动物；来源必须是从有资质的生产单位引进的。且必须提供最近3个月的健康证明。国内有四家生产单位的SPF级动物可以直接进入上海中科院斯莱克实验动物有限公司上海西普尔—必凯实验动物有限公司南京大学模式动物研究所上海南方模式生物研究中心第142页，课件共188页，创作于2023年2月代购中心提供免费的代购服务（仅限斯莱克与必凯）：订购电话：65983907戴老师每周二订购小鼠送到。周一下午3点前与动物中心取得联系。自行订购的小鼠必须提前一周通知，否则一律不得进入第143页，课件共188页，创作于2023年2月临时动物房临时动物房位于医学类B119，是为因特殊原因不能进入SPF动物房饲养的校内课题组而开放使用的，没有特殊原因的课题组不得在临时动物房内饲养动物。需要使用临时动物房的课题组，需提前3天与本中心取得联系并填写申请表，批准通过后方能在临时动物房进行饲养、实验。一个饲养周期不得超过3个月，超过饲养时间的动物，需到动物中心办公室重新办理申请手续，逾期不办者，动物中心有权对其动物进行安乐死。第144页，课件共188页，创作于2023年2月SPF级动物房人员的进出及操作流程第145页，课件共188页，创作于2023年2月内准备室饲养室检疫室饲养室男女二更男女一更缓冲清洗间一楼SPF屏障系统人流走向图第146页，课件共188页，创作于2023年2月内准备室饲养室饲养室实验室实验室饲养室检疫室饲养室饲养室饲养室饲养室女二更女一更男一更男二更缓冲缓冲高压灭菌锅传递窗清洗间风淋饲养室二、三楼SPF屏障系统人流走向图第147页，课件共188页，创作于2023年2月进门脱鞋，将自己的鞋子放在鞋柜上。进门，随即关门。登记，来到缓冲走廊填写进房登记。并仔细阅读《人员进出屏障设施标准操作流程》第148页，课件共188页，创作于2023年2月一更室刷卡进入一更。用0.1%新洁尔灭浸泡双手30秒，擦干。第149页，课件共188页，创作于2023年2月二更室在确认一更室的门关上后，开门进入二更室。无菌防护，在二更室内按顺序戴好手套、口罩，穿上灭菌过的隔离衣（联体式）。门禁卡放入无菌衣右内侧口袋。穿戴完毕跨过防鼠板后穿拖鞋。整理装着：要求头发不能外露、口罩必须盖住鼻孔，袖口盖住手套、领口的纽扣需全部扭上等第150页，课件共188页，创作于2023年2月风淋室进入风淋前用酒精喷雾消毒手部及脱鞋底部。进入风淋室，随即关门，风淋自动启动（时间为20秒）。风淋过程中举起双手，叉开双腿，适当的旋转，使身体每一部分都能尽量被风淋到。每次限进一人。出风淋检查门是否关好第151页，课件共188页，创作于2023年2月

洁净走廊

进入洁净走廊，随即关门。不得再经风淋间返回。进入洁净走廊后根据工作需要进入相关饲养间、实验室，切记随手关门，不能同时开两扇门进行操作。第152页，课件共188页，创作于2023年2月清扫实验室实验结束后，将实验动物放回原处，如笼位有变化，即时在实验动物饲养记录状况表上做好登记。清理房间，清扫、拖地、将废弃物装入垃圾袋，并做好相关记录。离开时随手关门。每一位实验人员都有责任，保证实验室的干净整洁。第153页，课件共188页，创作于2023年2月离开屏障区经人员出口进入缓冲间，确认门关上后，退出屏障区，随即关门。脱下隔离服、手套、口罩、拖鞋，扔入指定桶内。登记离开时间，换上自己的鞋子，离开。第154页，课件共188页，创作于2023年2月SPF级动物房物品的进出第155页，课件共188页，创作于2023年2月内准备室饲养室检疫室饲养室男女二更男女一更清洗间一楼SPF屏障系统物流走向图缓冲第156页，课件共188页，创作于2023年2月一楼SPF大鼠实验室动物流走向图内准备室饲养室饲养室饲养室实验室实验室检疫室饲养室饲养室饲养室饲养室饲养室女一更女二更男一更男二更缓冲缓冲风淋高压灭菌锅传递窗清洗间二、三楼SPF屏障系统物流走向图第157页，课件共188页，创作于2023年2月物品进出动物房的三个原则原则1：物品进入动物房尽可能采取高压灭菌的方式，不能高压的物品方可使用紫外照射灭菌。原则2：经传递窗紫外照射进入的物品，当天必须取出。原则3：经高压灭菌进入的物品，至多在动物房内存放7天。物品进出明细表（物品传递窗旁），见下图第158页，课件共188页，创作于2023年2月物品进出明细表途径适用物品高压灭菌121℃30min金属类：各类金属手术器械、小型仪器、容器、饲料铲等可以高压的金属制品。玻璃类：试管、玻片、烧杯、量筒、培养皿等可以高压的玻璃器皿。耐高压塑料制品：笼盒、EP管、移液枪枪头，小鼠运输盒等耐高压塑料制品。棉、纱类、纸制品：净化服、抹（拖）布、棉花、纱布、包装用纸盒、口罩、小鼠信息卡片。小鼠饲养用品：饮用水瓶、垫料、瓜子。传递窗过氧乙酸喷洒+紫外灯照射灭菌：紫外灯照射20min。紫外灯穿透力很弱，仅限于表面消毒，请尽量将物品摊开来。实验记录纸制品；不可高压的塑料和橡胶制品：文具，手套，果冻，饲料。不可高压的仪器设备：天平、接线板、血糖仪、环境监测仪，酒精灯，移液枪、进口离心管等。消毒液：酒精、84、文华、新洁尔灭。新进小鼠：请用动物传递窗，过氧乙酸喷洒表面后，紫外灯照射1min第159页，课件共188页，创作于2023年2月实验物品的进出方向物品进入：传递窗→准备室→清洁走廊→动物饲养室或实验室。物品离开：动物饲养室或实验室→清洁走廊→准备室→传递窗。传递窗紫外照射向内传递的物品需详细登记，包括传入时间、传入物品、使用人等相关信息。传递窗向外传递物品，从外侧取出物品后，必须将传递窗门关上，并将紫外线再次开启。第160页，课件共188页，创作于2023年2月细节需高压灭菌进入动物房的实验用品可提前一天交给动物中心办公室205，在第二天的下午就可以拿到自己实验用品。（免费）每个饲养间内都放有利器盒，针头、枪头等利器使用后放在利器盒内，动物中心每周统一收集处理，不得随意丢弃。第161页，课件共188页，创作于2023年2月SPF级动物房实验动物（生物活性物）的进出第162页，课件共188页，创作于2023年2月内准备室饲养室检疫室饲养室清洗间男女二更男女一更缓冲一楼SPF屏障系统动物流走向图第163页，课件共188页，创作于2023年2月内准备室饲养室饲养室饲养室实验室实验室检疫室饲养室饲养室饲养室饲养室饲养室高压灭菌锅缓冲缓冲女一更女二更男一更男二更风淋传递窗清洗间二、三楼SPF屏障系统动物流走向图第164页，课件共188页，创作于2023年2月实验动物（生物活性物）的进入动物进入动物房必须由工作人员进行操作。确认外包装盒完好无破损。通过清洗间的动物传递窗进行内外传递，并做好传递窗使用登记。用过氧乙酸消毒液喷洒外包装盒四周、底部放入传递窗，打开紫外灯照射1Min。待紫外灯熄灭（灭菌结束）后，从内侧取出建议动物进入1周后进行试验。第165页，课件共188页，创作于2023年2月实验动物（生物活性物）的离开中心提供一次性小碗或运输笼作为大小鼠转移的临时载体，请勿将饲养笼盒带回实验室。从内侧打开动物传递窗，将小鼠放入，确认关闭传递窗门。从外侧取走小鼠后，必须打开紫外灯再次消毒。第166页，课件共188页，创作于2023年2月饲养笼盒的管理制度1：禁止将饲养笼盒带回实验室。活动物在实验室存放时间不许超过24小时。2：提供消毒处理过的类似一次性饭盒作为小鼠临时转移的载体，放置在二楼、三楼饲养间内。如有疑问或找不到情形请随时与工作人员联系。3：提供专门的运输笼盒作为大鼠临时转移的载体，在一楼的清洁级动物房内存放，需要是可找工作人员领取并做好登记，及时归还。4：提供白色的普通饲养笼盒外借服务，需要在实验室临时短期饲养的课题组，请动物中心205办公室办理租借手续，大鼠白色饲养笼盒一套押金300元，小鼠白色饲养笼盒一套押金200元，租借不收取租借费，所有押金在笼盒归还后一并退还。5：动物中心的所有工作人员（包括保安、保洁）将加强监管，对于发现将饲养笼盒带回自己实验室的人员进行劝阻。每一位工作人员都有责任和义务。善意的提醒：动物中心每个楼层和出入口均安装有摄像监控装置。第167页，课件共188页，创作于2023年2月进口小鼠种源地健康报告审查生物净化（非JAX的进口小鼠）新引入的动物（研究人员互相交换转基因小鼠）,是小鼠感染微生物的最重要的来源！第168页，课件共188页，创作于2023年2月进口小鼠的隔离检疫PI如果自己进口小鼠，需提前跟动物房申请笼位，不允许小鼠到中心后临时通知按SOP接收小鼠（外包装消毒、小鼠笼盒挂标牌标明进口单位和日期等）专门的人员照料小鼠，对小鼠每日进行观察，如有特殊情况，及时通知兽医。JAX进口的小鼠在检疫室饲养繁殖，F1代需取一只做第三方检测，检测合格后方可进入普通饲养间饲养。检测费用由PI承担。第169页，课件共188页，创作于2023年2月生物净化（Rederivation）目的：减小或预防进口小鼠所带来的病原体感染的风险一、剖腹产对怀孕小鼠进行子宫摘除取胎，取出仔鼠进行代乳二、胚胎移植将着床前胚胎植入干净的假孕母体内，净化后小鼠的干净程度与代孕鼠及其饲养环境相同比剖腹产清除病原体更可靠降低某些感染子宫或胎盘的传染因子风险第170页，课件共188页，创作于2023年2月胚胎移植（Embryotransfer）将着床前胚胎植入干净的假孕母体内，净化后小鼠的干净程度与代孕鼠及其饲养环境相同比剖腹产清除病原体更可靠降低某些感染子宫或胎盘的传染因子风险，如Pasteurellapneumotropica,Mycoplasmapulmonis透明带（附植前胚胎）可以阻挡传染性因子的侵入避免了剖腹产对怀孕时间的精确要求，因为转基因和敲除品系的怀孕期会有所不同第171页，课件共188页，创作于2023年2月注意事项第172页，课件共188页，创作于2023年2月

消毒每周五下午2：30~3：00为动物中心内部消毒时间。一切人员不得进入。第173页，课件共188页，创作于2023年2月传递窗的使用传递物品必须登记。消毒水喷洒范围完全覆盖物品表面且仔细。传递窗外侧门一旦打开，必需用消毒水和紫外再次消毒。第174页，课件共188页，创作于2023年2月超净台的使用超净台使用前应填写使用记录。使用时玻璃门尽量压低，以保持台内静压，避免外界细菌、微生物等进入超净台内。使用完毕用酒精棉球清洁台面。第175页，课件共188页，创作于2023年2月屏障系统内无菌水使用后，确认开关是否关死。顺时针方向拧紧。清洁用无菌水使用后，用笼盒盛装，当天必须传出SPF动物房，污水源不得在动物房内过夜。

无菌水的使用第176页，课件共188页，创作于2023年2月不得随意丢弃和处理实验动物尸体。实验人员自行处死后的动物尸体，放至物品出口后，出屏障后从清洗间拿出，直接放入一楼清洗间的指定冰箱。工作人员人员在工作中发现动物尸体。工作人员把动物尸体详细信息登记在《实验动物死亡状况记录表》中（每个房间新增夹板），然后把尸体用密封袋包装好并且贴上标签写上此动物的详细信息（课题组、动物种类、数量、死亡等原因），一起保存在指定的冰箱中（一楼仓库专用存放实验意外死亡动物尸体冰箱）。工作人员将以邮件形式告知实验人员。实验人员自行检查或取走尸体，动物尸体只保存一周。实验动物死亡及尸体的处理第177页，课件共188页，创作于2023年2月疾病小鼠的防治与处理第178页，课件共188页，创作于2023年2月传染性疾病鼠肝炎病毒感染仙台病毒感染蛲虫感染螨虫感染。。。。。。第179页，课件共188页，创作于2023年2月小鼠肝炎(MHV）小鼠肝炎病毒感染是有冠状病毒引起的一种病毒病，分为二大类呼吸型和肠道型,在国内仅分离到呼吸型，包括MHV-1,MHV-3,MHV-JHM。病理变化主要在肝脏有坏死点等。传播方式：空气和接触。预防：定期检测，一旦感染，群体淘汰。

小鼠肝炎第180页，课件共188页，创作于2023年2月仙台病毒属副粘病