2023学年度人教版选修1专题2第6课时土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案

2023-20232023-2023学年6课时土壤中分解尿素的细菌的分别与计数[学习导航]1.原理。2.结合试验设计，分析微生物数量测定试验中产生偏差的缘由及解决措施，学会微生物的计数方法，并对培育结果进展分析和评价。[重难点击]1.2.能利用选择培育基分别细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数问题。一、争论培育基对微生物的选择作用筛选菌株自然界中目的菌株的筛选①原理：依据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去查找。TaqDNATaq细菌就是从热泉中筛选出来的。试验室中目的菌株的筛选①原理：人为供给有利于目的菌株生长的条件(包括养分、温度、pH等)，同时抑制或阻挡其他微生物生长。②实例：从土壤中筛选能分解尿素的细菌。③方法：利用选择培育基进展微生物的筛选。选择培育基概念：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基。举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培育基是以尿素为唯一氮源，按物理性质归类为固体培育基。筛选分解尿素的细菌的选择培育基下面是本课题使用的培育基的配方，请分析并答复以下问题：KHKHPO2 4NaHPO24MgSO·7HO4 2葡萄糖1.4g2.1g0.2g10.0g尿素尿素琼脂1.0g15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL该培育基的配方中，为微生物的生长供给碳源和氮源的分别是什么物质？答案碳源是葡萄糖，氮源是尿素。分别分解尿素的细菌的选择培育基是如何进展选择的？答案该选择培育基的配方中，尿素是培育基中的唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培育基上生长？答案分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而为微生物供给氮源。设计比照试验如何设计比照试验验证该选择培育基确实筛选到了能分解尿素的细菌？答案增设牛肉膏蛋白胨根底培育基并进展涂布平板操作，假设牛肉膏蛋白胨培育基上的菌落数明显多于选择培育基上的菌落数，则说明选择培育基确实起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。如何设计比照试验验证所用的选择培育基没有受到污染？答案设置一个未涂布平板的能筛选分解尿素的细菌的选择培育基。归纳总结选择培育基的分类利用养分缺陷型选择培育基进展的选择培育：通过掌握培育基的养分成分，使养分缺陷型微生物不能正常生长。利用化学物质进展的选择培育：在完全培育基中参加某些化学物质，利用参加的化学物质抑制某些微生物的生长，同时选择所需的微生物。利用培育条件进展的选择培育：转变微生物的培育条件(如高温、特别pH等)，筛选特定微生物。1.以下有关微生物筛选的表达中，不正确的选项是( A.用全养分牛肉膏蛋白胨培育基筛选大肠杆菌B.用高NaCl的培育基筛选抗盐突变菌株C.含酚红的尿素培育基筛选鉴别出分解尿素的菌株D.利用高温条件筛选耐热的Taq细菌答案A解析全养分牛肉膏蛋白胨培育基常用于大肠杆菌的培育，该培育基对微生物无选择作用，A项错误；抗盐突变菌株具有耐高盐的力量，因此可以利用高NaCl的选择培育基进展选择培育，B项正确；分解尿素的菌株能将尿素分解成氨，使培育基pH上升，因此可以利用含CTaq细菌，D项正确。2.下表是微生物培育基的成分。以下有关说法错误的选项是(编号 ① ② ③)④⑤成分 (NH)SO KHPO FeSO42 4 2 4 4含量/g 0.4 4.0 0.5CaCl20.5HO2100mL此培育基可用来培育自养型微生物此表中的养分成分共有三类，即水、无机盐、氮源C.假设除去①，此培育基可培育圆褐固氮菌D.培育基中假设参加氨基酸，则它可充当碳源、氮源和生长因子答案C解析分析题表可知，该培育基成分中含有水、无机盐、氮源，但不含含碳有机物，可用来培育自养型微生物，A、B项正确；圆褐固氮菌同化类型为异养型，培育基中必需存在含碳有机物，所以该培育基不能用来培育圆褐固氮菌，C项错误。方法技巧选择培育基的常见类型(1)分别微生物所用的选择培育基肯定是固体培育基，由于菌落只能在固体培育基上形成。(2)常见的选择培育基①参加青霉素可以分别出酵母菌和霉菌。②参加高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。③无氮源培育基可以分别固氮微生物。④以石油为唯一碳源的培育基，可以分别能消退石油污染的微生物。⑤将培育基放在高温环境中培育，可以分别耐高温的微生物。二、进展微生物数量的测定统计菌落数目方法：统计样品中微生物数量的方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。常用来统计活菌数目的方法是稀释涂布平板法。统计依据：当样品的稀释度足够高时，培育基外表生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少活菌。操作①设置重复组，增加试验的说服力与准确性。②为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进展计数。③统计的菌落数往往比活菌实际数目低。计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。设置比照比照试验：是指除了被测试条件以外，其他条件都一样的试验。主要目的：排解试验组中非测试因素对试验结果的影响，提高试验结果的可信度。例如，为了确认培育基是否被杂菌污染，需以不进展接种的培育基培育作为空白比照。试验操作流程(1)土壤取样①取样缘由：土壤有“微生物的自然培育基”之称，同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。②土壤要求：富含有机质，pH接近中性且潮湿。3～8cm的土壤层。(2)样品稀释①稀释缘由：样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目。②稀释标准：选用肯定稀释范围的样品液进展培育，以保证获得菌落数在30～300之间，便于计数。微生物的培育与观看①培育：依据不同微生物的需要，掌握适宜的培育温度和培育时间。②观看a.24h统计一次菌落数目，最终选取菌落数目稳定时的记录作为结果。b.菌落的特征：包括菌落的外形、大小、隆起程度和颜色等。菌种鉴定①原理：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，使培育基的碱性增加。②方法：以尿素为唯一氮源的培育基中参加酚红指示剂，培育某种细菌后，假设指示剂变红，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。操作提示(1)无菌操作①取土样的用具在使用前都需要灭菌。②试验操作均应在火焰旁进展。做好标记：本试验使用的平板和试管比较多，为避开混淆，使用前应标明培育基的种类、培育日期以及平板上培育样品的稀释度等。制定打算：对于耗时较长的生物试验，要事先制定打算，以便提高工作效率。下面是土壤中尿素分解菌的分别与计数的试验流程示意图，请结合教材供给的资料分析答复以下问题：试验流程试写出分别土壤中分解尿素的细菌的试验流程(用文字和箭头表示)。答案土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培育→观看并记录结果→细菌计数。统计菌落数目甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培育基中，得到以下两种统计结果。甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果是否真实牢靠？为什么？答案不真实。为增加试验的说服力与准确性，应设置重复试验，在同一稀释度下涂布3个平板，统计结果后计算平均值。321、212、25621舍去，然后取平均值。该同学对试验结果的处理是否合理？为什么？答案不合理。微生物计数时，假照试验中消灭重复试验的结果不全都的状况，应分析试验过程中可能的影响因素，找出差异的缘由，而不能简洁地舍弃后进展计数。平板稀释度0.1mL的菌液涂布平板，统计菌落数，得到以下的数据，试1g平板稀释度123104320360356105212234287106212318答案105的稀释度下取0.1mL涂布的三个平板上的菌落数在30～300(212＋234＋287)/3≈244。进一步可以换算出1g(244÷0.1)×105＝2.44×108个。(4)为什么统计的菌落数比活菌的实际数目低？答案当两个或多个细菌连在一起时，平板上观看到的只是一个菌落。比照试验设计的分析分析教材P “设置比照”中的实例，探讨以下问题：22在AA两种？答案可能是他选择的土壤样品不同于其他同学；也可能是培育基受到了污染或操作失误。如何设计比照试验帮助A同学排解上述两个可能影响试验结果的因素？答案A同学一样的土样进展试验，假设结果与AA同AA同学配制的培育基在不加土样的状况下培育作为空白比照，以推断培育基是否受到污染。微生物数量测定的试验设计为什么分别不同的微生物要承受不同的稀释度？答案土壤中各种微生物的数量是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进展分别。本试验中应如何统计培育基上生长的菌落数？答案24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。(3)试验中的无菌操作主要有哪些？答案①培育基、锥形瓶、试管、铲子、信封等，需要进展灭菌。②称取土壤要在火焰旁进展。③稀释土壤溶液的每一步操作都要在火焰旁进展。归纳总结分别尿素分解菌操作中的留意事项在试验操作中，每个步骤都要留意无菌操作，以防培育基被污染，影响试验效果。样品稀释液的最正确浓度为培育后每个平板上有30～300个菌落的浓度。细菌一般选104、105106103104105102、103、104倍稀释液进展培育。为排解非测试因素(培育基)的干扰，试验需设置牛肉膏蛋白胨培育基进展空白比照。每一稀释倍数的菌液都至少要涂布3个平板，作为重复试验，求其平均值，假设其中有菌落数与其他平板悬殊过大的，需要对该平板重制作。如图为“土壤中分解尿素的细菌的分别和计数”试验中样品稀释示意图。据图分析以下表达正确的选项是( )A.4号试管中稀释液进展平板培育得到的菌落平均数肯定恰为510倍B.5号试管的结果说明每克该土壤中的菌株数目为1.7×108个C.在用移液管吸取菌液进展梯度稀释时，可用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与无菌水充分混匀D.3个平板，该试验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目高答案C自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在争论微生物时一般要将它们分别提纯，然后进展数量的测定。下面是对大肠杆菌进展数量测定的试验，请答复有关问题：试验步骤102、103、104、105、106的系列稀释液。②为了得到更加准确的结果，应选用 法接种样品。③适宜温度下培育。结果分析①测定大肠杆菌数目时，在对应稀释倍数为106的培育基中，得到以下几种统计结果，与事实更加接近的是 。230220260240三个平板，统计的菌落数分别是400、212256289四个平板，统计的菌落数分别是210、260、240250240②一同学在稀释倍数为16的培育基上测得平板上菌落数的平均值为21那么每毫升样品的菌落数约是(涂布平板时所用的稀释液体积为0.2mL) 。③用这种方法测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量“少”)，由于

(填“多”或。问题导析(1)由于题中操作的目的是对大肠杆菌进展数量的测定，所以接种的方法是稀释涂布平板法。(2)测定活菌数量时，选择的平板越多误差越小，且选择的平板要能形成30～300个菌落。(3)所做的多个平板中，假设其中一个平板中菌落的数目明显多于或少于其他几个平板，则说明该平板不符合要求，应重做或舍弃。答案(1)②稀释涂布平板(2)①D ②1.06×109个③多当两个或多个细菌连在一起时，平板上观看到的只是一个菌落解析(1)(2)①应选取多个菌落②212÷0.2×106＝1.06×109(个)。③由于一个菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。一题多变(1)假设某同学的稀释倍数仅为104，则测定的数值要比题中测定的数值高还是低？为什么？答案(2)第(2)问第①小题C400平板的可能的缘由。答案①培育基被污染，一些菌落是由杂菌生殖而成的；②接种过程中由于操作不当感染了杂菌；③取菌液时没有摇匀，导致所取菌液中细菌个体浓度偏大等。方法技巧用稀释涂布平板法计数微生物的方法稀释涂布平板操作要求：依据平行重复的原则，每一稀释度的菌液涂布3个或3个以上的平板。计数的时机：当各平板上菌落数目稳定时进展计数。选择可用于计数的平板30～300之间的平板(一样稀释度的平板均符合该特点)进展计数，然后取平均值。选择培育基是依据某一种或某一类微生物的特别养分要求或对一些物理、化学抗性而设计的培育基。利用这种培育基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分别出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培育基分别为()伊红美蓝培育基、含青霉素的培育基B.含青霉素的培育基、含氨的无机培育基C.含氨的无机培育基、含青霉素的培育基D.含青霉素的培育基、伊红美蓝培育基答案B解析酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培育基进展选择培育，由于青霉素能够抑制细菌生长，但不能够抑制真菌生长。硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量把无机物转变为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培育基可进展选择培育。以下操作步骤挨次正确的选项是()10g90mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL土壤溶101、102、103、104、105、106、107稀释度A.①→②→③→④C.①→②→④→③答案C

B.①→③→②→④D.①→④→②→③对尿素分解菌进展初步鉴定时，可在培育基中参加( )重铬酸钾C.刚果红答案B

酚红指示剂D.结晶紫解析对尿素分解菌进展初步鉴定，可在培育基中参加酚红指示剂。从土壤中分别以尿素为氮源的细菌，以下试验操作不正确的选项是( A.将土壤用无菌水稀释，制备103～106倍的土壤稀释液B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C.用参加刚果红指示剂的选择培育基筛选分解尿素的细菌D.从四周消灭红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株答案C解析用参加酚红指示剂的鉴别培育基可以鉴别分解尿素的细菌。KHPO2 4NaHPO22.1gKHPO2 4NaHPO22.1g4MgSO·7HO1.4g4 20.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。(1)此培育基 (填“能”或“不能”)用于植物组织培育，理由是 。(2)培育基中参加尿素的目的是 ，这种培育基属于 培育基。“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培育基中的 和 试验需要振荡培育，缘由是 。图中将细菌转到固体培育基上时，可承受 或 在含尿素的培育基上接种，获得单菌落后连续筛选。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在以尿素为唯一氮源的培育基中参加 指示剂，接种并培育初步筛选的菌种，假设指示剂变成 色，则可准确说明该菌种能够分解尿素。在试验中，以下材料或用具需要灭菌的是 ，需要消毒的是 (填序号)。①培育细菌用的培育基与培育皿②玻棒、试管、锥形瓶和吸管③试验操作者的双手试验完毕后，使用过的培育基应当进展 处理后，才能倒掉。答案(1)不能缺少植物激素(或缺少植物需要的一些养分成分) (2)筛选目的菌 选择(3)尿素 葡萄糖 为目的菌供给氧气 (4)平板划线法 稀释涂布平板法 酚红 红(5)①②③(6)灭菌解析(1)植物组织培育的培育基中需要含有氮、磷、钾及锌、铜、钼、铁等元素，需要蔗糖(2)该培育基中尿素是唯一的(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培育基中的尿素和葡萄糖，分解尿素的微生物是需氧型微生物，所以在培育(4)假设pH(5)微生物培育时，(6)为避开试验后培育基中的微生物污染环境，使用过的培育基必需经过灭菌处理后才能丢弃。[根底过关]在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或者阻挡其他种类微生物生长的培育基称做( )鉴别培育基C.选择培育基答案C

加富培育基D.根底培育基解析选择培育基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。可以分别并鉴定出分解尿素的细菌的方法是( A.以尿素为唯一氮源的培育基中参加酚红指示剂B.以尿素为唯一氮源的培育基中参加二苯胺试剂C.以尿素为唯一氮源的培育基中参加刚果红试剂D.以尿素为唯一氮源的培育基中参加双缩脲试剂答案A解析尿素在尿素分解菌的作用下分解产生氨和CO2，氨会使培育基的碱性增加，pH上升，酚红指示剂变红。尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制选择培育基时( A.葡萄糖在培育基中越多越好B.尿素分解菌有固氮力量，故培育基中只需无机氮C.尿素在培育基中越少越好D.尿素分解菌无固氮力量，故培育基中的尿素为化合态氮答案D解析尿素既可以作为尿素分解菌的氮源，也可以作为其碳源，葡萄糖在培育基中并不是越多越好，葡萄糖过多会使培育基的渗透压过高，不利于尿素分解菌的生长生殖，A错误；尿素分解菌没有固氮力量，故培育基中需要添加尿素作为氮源，B错误；添加尿素的目的是筛选尿素分解菌，其他微生物不能很好地生活在该培育基上，尿素在培育基中不是越少越好，过少就失去选择作用，过多又会使细胞失水死亡，C错误；尿素分解菌无固氮力量，故培育基中的尿素为化合态氮，D正确。产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培育基分别是()A一个细菌、液体培育基C.一个细菌、固体培育基答案C

B.很多细菌、液体培育基D.很多细菌、固体培育基解析(液体培育基中肉眼不行见)，菌落可作为菌种鉴别的重要依据，而多种细菌形成的菌落，就不行能有比较标准的形态。以下关于土壤取样的表达，错误的选项是( A.土壤取样，应选取肥沃、潮湿的土壤B.3～8cm左右的土壤层C.取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D.应在火焰旁称取土壤答案C解析土壤取样过程中，为防止杂菌污染，取样用的小铁铲和信封在使用前必需灭菌。某同学对101、102、103倍稀释液中的细菌进展计数，平均菌落数分别为2760、295和16，则样品中菌落总数为(所用稀释液体积为0.1mL)( )A.2.76×104个/mLC.4.6×104个/mL答案B

B.2.95×105个/mLD.3.775×104个/mL解析为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300295符合要求，其稀释倍数为102，所用稀释液体积为0.1mL，套入计算公式得样品中菌落总数为2.95×105个/mL。[力量提升]在“土壤中分解尿素的细菌的分别与计数”课题中，以土壤中的细菌为争论对象，要到达的目的是( )①从土壤中分别出能够分解尿素的细菌②从土壤中分别出能够分解氨的细菌③统计每克土壤样品中到底含有多少分解尿素的细菌④统计所取土壤样品中到底含有多少分解尿素的细菌A.①③C.①②答案AB.②④D.③④解析从土壤中分别分解尿素的细菌并对其计数，统计的是每克土壤样品中含多少分解尿素的细菌，用公式“每克样品中菌株数＝(C/V)×M”进展推想，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。8.给无氮培育基接种土壤稀泥浆的正确方法是( )翻开培育皿盖，取一根接种环沾取少许稀泥浆，轻轻地点接在培育基的外表上取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后沾取少许稀泥浆，略微翻开培育皿盖，在培育基的外表轻点翻开培育皿盖，取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后沾取少许稀泥浆，在培育基的外表轻点略微翻开培育皿盖，取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌，冷却后沾取少许稀泥浆，在培育基的外表轻点答案D解析接种过程中要防止外来杂菌的入侵，左手将培育皿翻开一条缝隙，右手将接种环在火焰上灭菌，冷却后沾取少许稀泥浆，在培育基的外表轻点，用未冷却的接种环沾取稀泥浆会杀灭菌种。333条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)373天，结果如下图。从试验结果分析，以下表达不正确的选项是()链霉素能阻挡结核杆菌的生长链霉素对结核杆菌比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核杆菌比对伤寒菌更有效D.链霉素可以用于治疗伤寒病人答案D解析分析题图可知，该培育基是含有链霉素的选择培育基，接种的三种细菌中，霍乱菌和结核杆菌都可以被杀灭，并且链霉素对结核杆菌杀灭的有效程度大于对霍乱菌的有效程度，而伤寒菌的生长不受影响，所以选项D错误。以下是关于“检测土壤中细菌总数”试验操作的表达，其中错误的选项是( A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨固体培育基，经高温、高压灭菌后倒平板B.104、105、1060.1mL，分别涂布于各组平板上C.将试验组和比照组平板倒置，37℃恒温培育D.确定比照组无菌后，选择菌落数在300以上的试验组平板进展计数答案D解析检测土壤中细菌总数的试验中，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基，经高温、高压灭菌后倒平板，A项正确；取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于不同的平板上，B项正确；接种后要将培育皿倒置，置于37℃恒温培育，C项正确；在确定30～300之间的平板进展计数，D项错误。广东省是我国甘蔗生产区之一。甘蔗是一种高光效的C 植物，单位面积产量很高，种植4面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗→榨汁(蔗糖)―→酵母发酵→蒸馏→成品(燃料酒精)。选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：步骤1：野生菌液体培育一段时间后承受紫外线照耀诱变处理。步骤2：制备选择培育基。在根本培育基的根底上，留意 和 ，加琼脂后灭菌，制成固体平板。步骤3：将紫外线照耀后的菌液稀释涂布平板。4：依据2、34的依据分别是

，筛选出突变菌。。答案(1)添加高浓度蔗糖(葡萄糖) 调低pH 是否能在选择培育基上生长(2)供给高糖和酸性的筛选环境；获得单菌落；能生长的菌落具有耐高糖和耐酸的特性解析(1)要筛选耐高糖和耐酸的菌种，培育基中必需参加高浓度蔗糖和调低pH，能在选择培育基上生长的即为所需菌种。(2)步骤2是给其供给高糖和酸性的筛选环境；步骤3是为了4是依据能生长的菌株具有耐高糖和耐酸的特性筛选出突变菌。请答复以下有关微生物的问题：微生物的分布：微生物主要分布在富含 的土壤表层；不同微生物对pH的要求不同，细菌常生活在酸碱度 的潮湿土壤中。微生物的消毒和灭菌：在微生物培育中，对培育基常法进展灭菌。假设要检测灭菌是否彻底，可以承受的方法是 。微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反响式： 。在果醋制作时，运用醋酸菌在 和糖源充分的条件下，将糖分解成醋酸。微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是 和 。微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的 (填“选择”或“鉴别”)培育基中参加 指示剂，假设存在尿素分解菌，则指示剂将变 色。答案(1)有机质接近中性(2)高压蒸汽灭菌将灭过菌的培育基在适宜的温度下放置一段时间观看培育基上是否有菌落产生(3)CH O

酶2CH

OH＋2CO

有氧(4)平板划6线法稀释涂布平板法(5)选择酚红红

12 6 2 5 2解析(1)壤中。(2)对培育基常用高压蒸汽灭菌法灭菌；可通过在适宜的温度下放置灭过菌的培育基，(3)(4)最常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(5)用选择培育基筛选目的菌——尿素分解