抗原抗体反应（免疫学检验课件）

第十二章抗原-抗体反应本章要点抗原抗体反应特点。1影响抗原抗体反应因素。2抗原抗体反应原理。3CONTENTS目录01020304抗原抗体反应原理抗原抗体反应特点抗原抗体反应的影响因素抗原抗体反应类型前言抗原抗体在体内体外能发生特异性结合。由于抗原理化性状和抗体类型不同，抗原抗体结合后表现出不同的反应类型，可用于疾病的诊断、病原鉴定、药物分析等检测。如何利用抗原抗体反应的特点准确的进行免疫学检测是一个重要内容。抗原抗体反应原理01基本概念抗原抗体反应抗原与抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。基本概念抗原抗体反应的原理和物质基础:抗原表位与抗体高变区间的互补结合在极短距离内才能发生抗原抗体反应原理一、抗原抗体结合力一、抗原抗体结合力静电引力：又称库伦引力指带电离子基团（如：—NH3+和COO-）之间的引力，距离越近引力越大。一、抗原抗体结合力范德华引力：原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力，其决定分子空间构型。能量小于静电引力。一、抗原抗体结合力氢键：由分子中H原子与电负性大的O和N原子等相互作用形成的引力，结合力较范德华力强，因为需要受氢体和供氢体之间的互补形成氢键，因此更具有特异性。一、抗原抗体结合力疏水作用：疏水集团相互排斥水分子而趋于聚集的力。作用力最强，占总结合力的50%。抗原抗体反应原理二、抗原抗体亲和性和亲和力二、抗原抗体亲和性和亲和力亲和性(affinity)抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的结合强度，用平衡常数K值表示，K值越高抗原抗体结合越牢固二、抗原抗体亲和性和亲和力亲合力(avidity)一个完整的抗体结合部位与若干个抗原表位之间结合的强度。抗原抗体反应原理三、亲水胶体转化为疏水胶体三、亲水胶体转化为疏水胶体形成可见抗原抗体反应抗原/抗体结合水化层变薄，失去亲水性电解质中和胶体粒子表面电荷，使各疏水胶体进一步靠拢疏水胶体抗原抗体反应的特点02抗原抗体反应的特点一、特异性抗原抗体反应的特点特异性：抗原与抗体结合反应的专一性。抗原抗体反应的特点特异性：分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性。抗原抗体反应的特点特异性：交叉反应：两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应。缺点：影响检测的准确性优点：协助检测抗原抗体反应的特点二、可逆性抗原抗体反应的特点二、可逆性抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性（非共价键结合）抗原抗体反应的特点二、可逆性影响因素：抗体对相应抗原的亲合力：亲合力越高，结合越牢固，越不易解离。环境因素对复合物的影响：pH（破坏离子间的静电引力）、离子强度（破坏离子间的静电引力）抗原抗体反应的特点三、比例性抗原抗体反应的特点三、比例性前带(prezone)：抗体过量后带(postzone)：抗原过量等价带(equivalencezone)：抗原抗体比例合适

免疫学检测时，由于带现象的干扰，导致假阴性结果。抗原抗体反应的特点四、阶段性抗原抗体反应的特点四、阶段性第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见（数秒或数分钟内完成）。第二阶段：反应可见阶段，反应慢（数分钟或数小时或数日）），出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象。受电解质、温度和酸碱度影响。抗原抗体反应的影响因素03抗原抗体反应的影响因素一、自身因素抗原抗体反应的影响因素一、自身因素抗原：可溶性抗原＋相应抗体→沉淀颗粒性抗原＋相应抗体→凝集单价抗原－－不凝集或沉淀抗原抗体反应的影响因素一、自身因素抗体来源：驴和马免疫血清：等价带较窄（H型抗体）兔：等价带较宽（R型抗体）浓度：比例合适出现可见反应亲合力抗原抗体反应的影响因素二、环境因素抗原抗体反应的影响因素二、环境因素电解质：中和胶体粒子上的电荷，使胶体粒子的电势下降，促使抗原抗体复合物从溶液中析出，形成可见的沉淀物或凝集物。抗原抗体反应的影响因素二、环境因素酸碱度：蛋白质具两性电离特性，有其故有的PI，pH达到或接近颗粒性抗原的PI时，引起的抗原非特异性自身凝集现象。抗原抗体反应的影响因素二、环境因素温度：温度升高可加速分子运动，使反应加速。但若温度高于56℃时，可导致已结合的抗原抗体再解离，甚至变性或破坏。抗原抗体反应类型04抗原抗体反应类型抗原-抗体反应的类型抗原抗体反应类型抗原-抗体反应的类型反应类型实验技术结果判断中和反应病毒中和试验检测病毒感染性毒素中和试验检测外毒素毒性标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象放射免疫技术检测放射性强度酶免疫技术检测酶底物显色发光免疫技术检测发光强度金免疫技术检测金颗粒沉淀小结