《病原生物学》实验教学大纲（供五年制本科临床医学（卓越医师）专业使用）

PAGE《病原生物学》实验教学大纲（供五年制本科临床医学（卓越医师）专业使用）Ⅰ前言《病原生物学》主要是研究与医学有关的病原生物的生物性状、致病、免疫、实验诊断与防治的一门学科。它是临床医学等专业必修的基础医学课程,通过本课程的学习,使学生掌握《病原生物学》的基本理论、基本知识和基本技能。培养学生认真观察，独立思考和辩证分析问题的能力，建立严格的科学作风，严肃的科学态度和严密的工作方法。并启发学生的创新能力、为学习本专业其他基础课和临床医学,特别是传染病的诊断、预防和治疗奠定基础。本大纲适用于五年制本科临床医学（卓越医师）专业使用。为了使教师和学生更好地掌握教材，特对大纲作以下说明：一为了使教师和学生更好地掌握实验内容，大纲均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解，教学内容与教学要求对应，并统一标示(核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示)便于学生重点学习。二教师在保证大纲核心内容的前提下，可采取不同教学手段，讲授重点内容和介绍一般内容。三总教学参考学时为40学时。四使用教材：《医学微生物学实验技术》，第四军医大学出版，周艳萌，江吉富主编，2014年。《人体寄生虫学实验教程》，第二版黄学贵主编，第四军医大学出版社，2014年。Ⅱ正文实验一微生物的形态检查法一教学目的通过实验使学生掌握油镜的使用及保护；掌握细菌标本的制备及革兰染色方法。熟悉细菌的基本形态、特殊结构。通过实验培养学生严格的无菌观念。二教学要求（一）掌握油镜的使用及保护，细菌标本制备及革兰染色方法。

（二）熟悉细菌的基本形态、特殊结构。

（三）了解通过实验使学生树立严格的无菌操作观念。三教学内容（一）介绍实验室规则（二）检查细菌动力(1份/人)变形杆菌和葡萄球菌菌液制备压滴片，高倍镜暗视野观察细菌的运动情况。（三）细菌涂片制备及革兰染色法（1份/人)模拟标本制备细菌涂片，革兰染色，油镜下观察。（四）细菌基本形态、特殊结构(示教)基本形态：链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌、创伤弧菌、淋球菌（玻片标本）；特殊结构：肺炎双球菌的荚膜；变形杆菌的鞭毛；破伤风梭菌的芽胞；炭疽杆菌的芽胞（玻片标本）。（五）显微镜的使用及维护（讲解示教）讲解操作示教显微镜尤其是油镜的使用方法。（六）微生物学实验的基本操作技术(录像）实验二细菌分布与培养一教学目的认识微生物的分布对周围环境的影响及与医学的关系。掌握细菌分离培养的基本操作技术，培养环境，了解培养基制备的基本过程。学会观察细菌的生长情况，菌落特征及代谢产物等。二教学要求 （一）掌握细菌分离培养的基本技术。

（二）熟悉细菌代谢产物的观察。

（三）了解微生物在人体及物品中的分布；培养基制备的基本过程。三教学内容（一）人体、物品中细菌检查（1份/组）检查头发、衣服、钱、手指等人体物品中的细菌，培养基采用普通琼脂平板，培养37℃24小时后观察细菌菌落特点。（二）飞沫、空气中细菌检查（1份/桌）检查空气、飞沫中的细菌，培养基采用血琼脂平板，培养37℃24小时后观察细菌菌落特点。（三）细菌培养接种法（1套/组）普通琼脂平板分离培养；液体培养、半固体、斜面培养基接种；培养37℃24小时后，观察生长现象。（四）细菌代谢产物观察（讲解示教）观察糖发酵试验、甲基红试验、吲哚试验、枸橼酸盐利用试验及尿素酶试验中细菌的生化反应。细菌培养法(录像)实验三外界因素对细菌的影响及细菌分离鉴定程序一教学目的掌握和熟悉某些物理和化学因素对微生物的影响。熟悉理化因素对细菌的影响。了解高压灭菌器的使用。二教学要求（一）掌握抗生素的敏感性实验。

（二）熟悉湿热对微生物的作用。

（三）了解高压蒸汽灭菌器的使用，紫外线的杀菌作用及影响因素，细菌分离鉴定程序及全自动微生物分析仪的应用。三教学内容（一）热力对繁殖体、芽胞的影响作用（1套/组）芽胞菌（枯草杆菌）、繁殖体（葡萄球菌）分别接种三支液体培养基，分别在100℃10分钟、121.3℃15-20分钟处理，另一组不处理，然后37℃培养24小时后观察生长现象。（二）紫外线杀菌作用(1套/组)金黄色葡萄球菌涂布普通琼脂平板，一半用紫外线照射30分钟，37℃培养24小时后，观察生长现象。（三）细菌对抗菌药物的敏感性实验（1份/组）金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别涂布普通琼脂平板，分别均匀贴上青霉素、链霉素、复方新诺明、左氧氟沙星标准抗菌纸片，37℃培养24小时后，观察生长现象，测量抑菌环直径。（四）耐药性变异(示教)金黄色葡萄球菌敏感株和耐药株在含青霉素平板和不含青霉素平板培养物观察。（五）鞭毛变异(示教)变形杆菌在含石炭酸与不含石炭酸平板（迁徙现象）培养物观察。（六）高压灭菌器的使用(讲解示教)实物示教，讲解高压灭菌器的使用方法、注意事项及适用范围。（七）细菌分离鉴定程序及全自动微生物分析仪的应用(讲解示教)参观法国梅里埃VITEK2全自动微生物分析仪，简要介绍使用方法及用途。（八）细菌分离鉴定（录像）实验四病原性细菌及真菌检查法一教学目的掌握肥达试验的原理、方法、结果及效价判定。认识炭疽杆菌、破伤风梭菌、产气荚膜杆菌的基本形态特征。了解厌氧培养法、真菌培养特性及检查法。二教学要求（一）掌握肥达试验的原理、方法、结果及效价判定；抗酸染色；真菌检查法。（二）熟悉炭疽杆菌、破伤风梭菌的基本形态特征；真菌形态、培养特性。（三）了解厌氧培养法。三教学内容（一）肥达反应(1套/组)4个同学一组，用倍比稀释法分别测定模拟标本的O、H、甲副H、乙副H抗原的效价。（二）结核痰标本抗酸染色（1份/人）模拟痰标本制备细菌涂片，抗酸染色，油镜下观察。（三）厌氧培养及厌氧培养箱的使用（操作示教）焦性没食子酸法操作示教。（四）观察炭疽杆菌形态(示教)炭疽杆菌的玻片标本。（五）观察破伤风梭菌形态(示教)破伤风梭菌的玻片标本。（六）真菌检查法（1份/人）脚皮屑等，10%KOH透明法，显微镜观察菌丝和孢子。（七）真菌大小培养的观察（示教）酵母菌、新生隐球菌压片标本，丝状菌、假丝酵母菌革兰染色标本，丝状菌、酵母菌、假丝酵母菌小培养标本的观察。实验五病毒学实验一教学目的在学习病毒的培养知识基础上，认识病毒的分离鉴定方法；了解鸡胚结构及可供接种的部位；掌握血凝试验原理及方法。认识螺旋体形态。二教学要求（一）掌握血凝试验原理及方法；病毒分离培养方法。（二）熟悉包涵体的概念及CPE的观察法。（三）了解螺旋体形态；鸡胚结构及可供接种的部位。三教学内容（一）血凝试验（1份/人）模拟病毒标本用倍比法稀释，加入鸡红细胞悬液，室温静置45分钟，观察凝集情况。（二）观察梅毒螺旋体形态（示教）梅毒螺旋体银染玻片标本。（三）鸡胚形态结构观察鸡胚尿囊腔接种（四）病毒的细胞培养及CPE（五）病毒包涵体的观察（示教）内基小体观察（六）病毒组织培养法（录像）（七）实验总结实验六总则吸虫一教学目的在掌握寄生虫学实验基本要求的基础上，学习各吸虫形态、中间宿主及病理标本。二教学要求（一）了解寄生虫学实验的基本要求；熟悉技术操作及生物学绘图法的要求。（二）巩固显微镜低、高倍镜使用法，进一步掌握油镜使用法；熟悉寄生虫学标本观察法。（三）熟悉肝吸虫、肺吸虫、姜片虫、血吸虫成虫的形态特征；掌握肝吸虫、肺吸虫、姜片虫、血吸虫虫卵的形态；掌握它们中间宿主（媒介）的形态特征及病理标本。（四）了解两种并殖吸虫的形态差异；了解肝吸虫尾蚴、肺吸虫尾蚴及囊蚴、血吸虫尾蚴及毛蚴的形态特征。（五）了解姜片虫与肝片虫的形态区别。三教学内容（一）总则一般介绍寄生虫学实验的基本要求；结合寄生虫标本观察的特点，讲解显微镜的使用方法；讲解标本观察法；一般介绍技术操作要求；重点讲解生物学绘图法。（二）卫氏并殖吸虫与斯氏狸殖吸虫（肺吸虫）卫氏并殖吸虫成虫（小瓶装标本，玻片标本）；卫氏并殖吸虫卵（玻片标本）；川卷螺（小瓶装标本）；小豆螺（小瓶装标本）；卫氏并殖吸虫尾蚴（玻片标本）；卫氏并殖吸虫囊蚴（玻片标本）；斯氏狸殖吸虫成虫（玻片标本）；蝲蛄、淡水蟹（大体标本）；肺吸虫病肺病理标本（大体标本）。（三）华支睾吸虫（肝吸虫）肝吸虫成虫（小瓶装标本，玻片标本）；肝吸虫卵（玻片标本）；豆螺（小瓶装标本）；肝吸虫尾蚴（玻片标本）；淡水鱼、虾（大体标本）；肝吸虫病肝病理标本（大体标本）。（四）布氏姜片吸虫（姜片虫）姜片虫成虫（小瓶装标本；玻片标本）；姜片虫卵（玻片标本）；肝片形吸虫成虫（小瓶装标本，玻片标本）；扁卷螺（小瓶装标本）；水红菱、茭白、荸荠等水生植物（大体标本）。（五）日本裂体吸虫（血吸虫）血吸虫成虫（小瓶装标本，玻片标本）；血吸虫卵（玻片标本）；血吸虫毛蚴及尾蚴（玻片标本）；钉螺（小瓶装标本）；血吸虫病肝病理标本（大体标本）；血吸虫病兔肠系膜标本（大体标本）。实验七绦虫、钩虫、旋毛虫、蛲虫、鞭虫、病案讨论一教学目的学习各绦虫形态、中间宿主及病理标本；学习钩虫、旋毛虫、蛲虫、鞭虫形态及病理标本；学习寄生虫病病例分析的思维方法。二教学要求（一）掌握两种带绦虫头节、孕节及带绦虫卵的形态特征；了解两种带绦虫成虫、猪囊尾蚴形态；熟悉带绦虫的检查方法；掌握猪囊尾蚴病的病理标本。（二）熟悉曼氏迭宫绦虫裂头蚴形态特征及病理标本；了解细粒棘球绦虫棘球砂的形态特征及细粒棘球蚴的病理标本。（三）掌握钩虫、鞭虫、蛲虫成虫和虫卵的形态特征及两种钩虫成虫的鉴别要点；熟悉钩蚴培养法；掌握钩虫病、鞭虫病病理标本；了解肛门拭子检查法。（四）熟悉旋毛虫囊包的形态特征及检查方法。（五）了解线虫外形特征和生殖系统的特征。（六）掌握病例分析的思维方法。三教学内容（一）两种带绦虫两种带绦虫头节（玻片标本）；两种带绦虫孕节（小瓶装标本，玻片标本）；带绦虫卵（玻片标本）；猪带绦虫囊尾蚴（小瓶装标本，玻片标本）；头节翻出的猪带绦虫囊尾蚴（小瓶装标本）；两种带绦虫成虫（大体标本）；带绦虫孕节片检查法；猪囊尾蚴寄生的心脏、脑、肌肉标本（大体标本）。（二）细粒棘球绦虫（包生绦虫）细粒棘球蚴寄生的病理标本（大体标本）；细粒棘球砂（玻片标本）。（三）曼氏迭宫绦虫裂头蚴（玻片标本）；蛙、蛇体内的裂头蚴（大体标本）。（四）十二指肠钩口线虫与美洲板口线虫(十二指肠钩虫和美洲钩虫)1技术操作：钩蚴培养法；2标本：钩虫卵（玻片标本）；两种钩虫成虫（小瓶装标本）；两种钩虫口囊和交合伞（玻片标本）；十二指肠钩虫和美洲钩虫交合刺（玻片标本）；钩虫病的病理标本（大体标本）。（五）毛首鞭形线虫（鞭虫）鞭虫成虫（小瓶装标本）；鞭虫卵（玻片标本）；鞭虫病的病理标本（大体标本）。（六）蠕形住肠线虫(蛲虫)蛲虫成虫（小瓶装标本）；蛲虫卵（玻片标本）；肛门拭子检查法（棉签拭子法，透明胶纸法）。（七）旋毛形线虫（旋毛虫）1技术操作：旋毛虫肌肉压片法。2标本：旋毛虫囊包（玻片标本）。（八）病案讨论。实验八蛔虫、丝虫、粪便检查一教学目的学习蛔虫和丝虫的形态、中间宿主及病理标本；学习常见人体寄生虫的粪便检查方法。二教学要求（一）掌握蛔虫虫卵的形态特征；了解蛔虫成虫的形态特征；掌握蛔虫病的病理标本。（二）熟悉两种微丝蚴的鉴别要点；熟悉丝虫成虫的形态特征；了解丝虫主要传播媒介的形态特征。（三）通过自我粪便检查，掌握下列常用粪便检查方法：直接涂片法；饱和盐水浮聚法；定量透明法（改良加藤法）。（四）通过粪便检查复习常见肠道蠕虫卵的形态。三教学内容（一）似蚓蛔线虫（蛔虫）蛔虫成虫（浸制标本）；蛔虫虫卵：受精蛔虫卵、未受精蛔虫卵（玻片标本）、脱蛋白质膜蛔虫卵、感染期蛔虫卵；蛔虫成虫生殖系统（大体标本）；蛔虫唇瓣（玻片标本）；蛔虫病的病理标本（大体标本）。（二）班氏吴策线虫与马来布鲁线虫(班氏丝虫和马来丝虫)马来丝虫成虫（小瓶装标本）；两种微丝蚴（玻片标本）；丝虫的主要媒介蚊种（针插标本）；感染期幼虫由蚊下唇逸出（玻片标本）。（三）粪便检查直接涂片法、饱和盐水浮聚法、定量透明法（改良加藤法）。实验九阿米巴、鞭毛虫、间日疟原虫一教学目的学习溶组织内阿米巴包囊和结肠内阿米巴包囊、三种鞭毛虫及薄血膜上间日疟原虫各期的形态特征；学习疟原虫血液检查方法。二教学要求（一）掌握溶组织内阿米巴包囊和结肠内阿米巴包囊的形态特征及其鉴别要点；熟悉溶组织内阿米巴致病特点。（二）掌握杜氏利什曼原虫无鞭毛体、蓝氏贾第鞭毛虫包囊的形态特征；熟悉阴道毛滴虫滋养体的形态特征；了解杜氏利什曼原虫前鞭毛体形态特征。（三）掌握薄血膜上间日疟原虫红细胞内期各阶段和配子体的形态特征；熟悉疟原虫薄、厚血片的制作和染色方法；了解蚊胃壁上疟原虫囊合子的形态特征。三教学内容（一）溶组织内阿米巴与结肠内阿米巴溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊（混合滴片碘液染色玻片标本）；肠阿米巴病病理标本（大体标本）。（二）杜氏利什曼原虫杜氏利什曼原虫无鞭毛体（玻片标本）；杜氏利什曼原虫前鞭毛体（玻片标本）。（三）蓝氏贾第鞭毛虫（贾第虫）蓝氏贾第鞭毛虫包囊（铁苏木素染色玻片标本）。（四）阴道毛滴虫阴道毛滴虫滋养体（玻片标本）（五）间日疟原虫1技术操作：薄、厚血膜制作和染色方法。2标本：薄血膜上间日疟原虫环状体、大滋养体、裂殖体、配子体（玻片标本）；蚊胃壁上疟原虫囊合子（玻片标本）。实验十恶性疟原虫、弓形虫、医学节肢动物、病案讨论一教学目的学习薄血膜上恶性疟原虫环状体和配子体、弓形虫速殖子的形态特征；学习与医学有关的医学昆虫的形态特征；进一步掌握寄生虫学病例分析方法。二教学要求（一）掌握薄血膜上恶性疟原虫环状体和配子体的形态特征；了解弓形虫速殖子的形态特征。（二）了解三属蚊卵、幼虫、蛹的主要鉴别特征；掌握三属蚊成蚊形态及雌雄识别的要点；了解蚊的刺吸式口器；了解蚊消化系统的基本组成。（三）熟悉与医学有关的其它医学节肢动物的一般形态特征。（四）熟悉人体蠕形螨的检查方法。（五）进一步掌握病例分析的思维方法。三教学内容（一）恶性疟原虫薄血膜上恶性疟原虫形态：环状体、配子体（雄配子体，雌配子体）（玻片标本）。（二）刚地弓形虫（弓形虫）弓形虫速殖子（玻片标本）。（三）蚊按蚊、库蚊、伊蚊成虫（针插标本）；蚊口器（蚊喙）（玻片标本）；三属蚊生活史各期：卵、幼虫、蛹（玻片标本）；蚊的消化系统（玻片标本）。

（四）其他几种常见医学节肢动物1技术操作：人体蠕形螨检查方法（透明胶纸法）。2标本：成蝇（大体标本）；蝇头（玻片标本）；蝇口器（玻片标本）；蝇足（玻片标本）；蝇卵（小瓶装标本）；蝇幼虫（小瓶装标本）；蝇蛹（小瓶装标本）；白蛉成虫（玻片标本）；蚤（玻片标本）；虱（玻片标本）；臭虫（玻片标本）；蜚蠊生活史各期（浸泡标本）；全钩蜱（玻片标本）；软蜱（玻片标本）；革螨（玻片标本）；恙螨幼虫（玻片标本）；人疥螨（玻片标本）；尘螨成虫（玻片标本）。病案讨论Ⅲ教学组织与方法一实施机构：基础医学院微生物学教研室、寄生虫学教研室执行。二组织内容：教案讲义多媒体课件审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。三教学方法： 1实验教学：采用启发式、讨论式、互动式课堂教学方式及实验考试，辅助现代教育技术和传统教学手段。重点内容以学生自做为主，一般内容以示教为主。2教学点：微生物部分在微生物学与免疫学实验室教学，任课教师由微生物学教研室委派，寄生虫学部分在形态学实验室教学，授课教师由寄生虫学教研室委派。3辅导形式：课堂答疑、讨论、复习等结合。4启发式：多媒体教学片。四考核办法：实验占30%：微生物学部分占15%：每次实验报告（共5次）、平时成绩、PBL成绩分别占2.1%寄生虫学部分占15%：=1\*GB3①实验平时成绩9%（其中实验报告1分/次×5次=5分、课堂表现1分、实名观看寄生虫学教研室精品课程并评价同时手写300-500字的观后心德3分），=2\*GB3②PBL6%，=3\*GB3③实验考试15%。以上成绩总分乘以50%后为该生寄生虫学部分实验成绩。Ⅳ教学时