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基因工程和蛋白质工程练习一、单项选择题1.下列关于体内DNA复制和PCR技术的叙述,错误的是()A.都遵循碱基互补配对原则B.都需要破坏氢键C.都需要DNA聚合酶D.都是从引物的5′端延伸子链2.真核生物核基因转录形成前体RNA后,需要剪接体对其进行“剪切”与“拼接”。下图是细胞核中S基因的表达过程图,下列分析正确的是()A.过程①需要的原料是脱氧核糖核苷酸,需要RNA聚合酶参与B.过程②④需要剪接体发挥作用,并且需要DNA聚合酶参与C.过程③在细胞质中进行,需要核糖体参与,并且消耗能量D.过程④检测并分解异常mRNA以阻止异常蛋白质的合成,不需要酶的参与3.下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是()A.基因表达载体中的胰岛素基因可通过人胰岛A细胞mRNA反转录获得B.借助抗生素合成基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来C.构建胰岛素基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用4.科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1,可与新冠病毒表面S蛋白的受体结合域(RBD)紧密结合,以干扰新冠病毒的感染。下列说法不合理的是()A.LCB1的作用机理与S蛋白的抗体类似B.可依据S蛋白的RBD结构设计LCB1C.LCB1可以通过细胞中原有基因表达产生D.LCB1的设计和生产属于蛋白质工程5.新型冠状病毒的检测主要包含核酸检测、抗体检测、抗原检测等几种方法。其中利用实时荧光RTPCR技术检测新型冠状病毒特异性核酸序列是最常用的方法。RTPCR是将逆转录(RT)、PCR以及荧光标记等相结合的技术。下列说法错误的是()A.与抗体检测方法相比,核酸检测能够检测到早期患者和无症状感染者B.利用上述技术检测新型冠状病毒时,PCR的模板实际上是逆转录得到的cDNAC.利用上述技术检测新型冠状病毒时,逆转录酶在每次循环中都能够发挥作用D.RTPCR反应中需加入样品、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、引物、逆转录酶等6.大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷酸的定点诱变仅需进行两轮PCR反应即可获得,第一轮加诱变引物和侧翼引物,第一轮产物作第二轮PCR扩增的大引物,过程如图所示。下列有关叙述正确的是()A.两轮PCR过程中退火时的温度一样B.单核苷酸的定点诱变所属变异类型为基因重组C.第二轮PCR所用的引物都是第一轮PCR的产物DNA的两条链D.利用该技术将某功能蛋白的结构改变属于蛋白质工程7.红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种激素物质,是当今最成功的基因工程药物,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)。其简要生产流程如图所示,下列相关叙述正确的是()A.过程①用到的工具酶有DNA聚合酶、限制酶和DNA连接酶B.构建的重组表达载体中终止子的作用是终止翻译过程C.检测重组细胞是否表达出rhEPO常用抗原—抗体杂交技术D.用乳腺生物反应器生产EPO可将人EPO基因导入哺乳动物体细胞获得8.图1为真核细胞DNA复制的电镜照片,其中泡状结构为复制泡,是DNA上正在复制的部分。滚环复制为某些环状DNA分子的一种复制方式,新合成的链可沿环状模板链滚动而延伸,其过程如图2所示。下列相关叙述不正确的是()图1图2A.每个复制泡中含有2条DNA母链和2条子链B.每个复制泡中一条子链是完全连续的,另一条子链是不连续的C.滚环复制起始时需要特异的酶在起始点切开一条链的磷酸二酯键D.滚环复制在3′OH端开始以该链为引物向前延伸9.转基因生物的安全性引起人们争论的技术原因是()①转基因的功能往往未知②转基因的结构往往未知③外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的④外源基因往往是异种生物的基因A.①②B.②③C.③④D.①③10.若转基因技术被滥用,恐怖组织就会将它用于恐怖行为。下列不属于恐怖行为的是()A.把蜡状杆菌通过转基因技术改造成像炭疽杆菌一样的致病菌B.把炭疽杆菌基因通过转基因技术重组到人体内,使人具有免疫力C.把流感病毒基因改造,只会使具有某种易感基因的人群感染,而其他人却不易感染D.将生物毒素分子的基因与流感病毒的基因拼接在一起二、非选择题11.基因定点突变是指按照特定的要求,使基因的特定序列发生插入、删除、置换、重排等变异。下图甲是一种PCR介导的基因定点突变示意图,图乙是研究人员利用基因M1构建基因表达载体的过程图。请回答下列问题。甲乙(1)进行基因定点突变的PCR反应体系中,除加入引物和模板DNA外,一般还需要加入__________________,图甲所示的基因定点突变技术需要________次PCR,获得产物A需要的引物是________________。(2)研究人员对PCR的中间产物A、B进行纯化后,利用图中相关酶对基因M和产物A、B进行充分酶切后得到不同的片段,长度(kb)如下表所示,则图中基因敲除片段的长度为________,基因M1的长度为________。基因MAB长度3.24、2.8、0.15、0.132.8、0.093.24、0.05通过图甲过程获得的基因M1仍需要大量扩增,此时选择的引物是________________,为了与图乙中的Ti质粒相连,还需要分别在它们的________端引入限制酶__________________的识别序列。(4)构建基因表达载体时,M1基因必需插入到Ti质粒的________中,原因是___________________________________________________________________。12.科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草,培育过程如图1所示,图2为相关限制酶识别序列及切割位点。请回答下列问题。图1限制酶BamHⅠBclⅠSau3AⅠHindⅢ识别序列及切割位点图2(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用______________________两种限制酶切割。若Sau3AⅠ酶切的DNA末端与BamHⅠ酶切的DNA末端连接,该连接序列________(填“能”“不能”或“不一定能”)被BamHⅠ酶识别。(2)步骤①构建的表达载体,除图1中质粒所示结构外,还需具有____________及目的基因;步骤②中需先用________处理农杆菌以便将重组质粒导入农杆菌细胞;步骤③中通常需要添加酚类物质,其目的是___________________________________________。(3)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,图3表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。在培养基A筛选的基础上,培养基B除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,还应加入____________。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是________菌落中的细菌。图3
参考答案1.D2.C3.C4.C5.C6.D7.C8.B9.C10.B11.(1)Taq酶、dNTP(缓冲液、Mg2+)等3引物1和引物3(2)0.23kb6.09kb(
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