免疫学临床应用课件

免疫学应用第一节免疫学防治一、免疫预防特异性免疫获得的方式有自然免疫主动免疫被动免疫主动免疫人工免疫被动免疫过继免疫免疫学应用第一节免疫学防治1

(一)人工主动免疫：

是给机体接种疫苗或类毒素等抗原物质，刺激机体产生特异性免疫应答而获得免疫力的方法，也称预防接种。

人工主动免疫常用的生物制剂1、死疫苗通过理化方法将病原微生物杀死而制成的制剂，又称灭活疫苗。如霍乱、流脑、乙脑等疫苗。

22、活疫苗

用人工变异或直接从自然界筛选出来的毒力高度减弱或基本无毒的活病原微生物制成的试剂，又称减毒活疫苗。如卡介苗、麻疹疫苗、风疹疫苗、脊髓灰质炎疫苗、流行性腮腺炎疫苗等。2、活疫苗3

死疫苗和活疫苗的比较————————————————————————项目死疫苗活疫苗————————————————————————制剂特点死、强毒活、弱毒或无毒接种剂量较大较小接种次数23次1次接种后反应反应较大反应较小保存及有效期易保存，1年不易保存，4℃数周免疫效果较差，维持数月较好，维持35年————————————————————————死疫苗和活疫苗的比较43、类毒素将细菌外毒素经0.3％～0.4％甲醛处理，使其毒性消失而保留免疫原性。如破伤风类毒素、白喉类毒素等。

百、白、破三联疫苗4、新型疫苗（1）亚单位疫苗（2）合成肽疫苗（3）结合疫苗重组抗原疫苗（4）基因工程疫苗重组载体疫苗DNA疫苗转基因植物疫苗3、类毒素5（二）人工被动免疫

是给机体输入抗体，使机体获得特异性免疫力。可立即获得，但免疫维持时间短，2-3周，多用于治疗或紧急预防。1、抗毒素是抗细菌外毒素的抗体。多为马血清制剂。具有双重性（二）人工被动免疫

是给机体输入抗体，使机62、人免疫球蛋白制剂（1）人丙种球蛋白：从正常人血浆或健康产妇胎盘中提取制成。

（2）人特异性免疫球蛋白：来源于恢复期病人及含高价特异性抗体供血者血浆，或接受类毒素和疫苗免疫者的血浆。3、细胞因子与单克隆抗体2、人免疫球蛋白制剂7免疫学临床应用课件8（三）计划免疫有计划地进行人群免疫接种，以提高人群免疫水平我国推荐的儿童免疫程序

免疫学临床应用课件9

年龄

疫苗

年龄

疫苗出生时卡介苗、乙肝疫苗8个月麻疹疫苗2个月三价脊髓灰质炎疫苗11.5-2岁百白破43个月三价脊髓灰质炎疫苗2，百白破14岁三价脊髓灰质炎疫苗44个月三价脊髓灰质炎疫苗3，百白破27岁卡介苗、麻疹疫苗、百白破三联疫苗5个月百白破312岁卡介苗（农村）年龄疫苗年龄10

二、免疫治疗（一）治疗性疫苗1.微生物抗原疫苗2.细胞疫苗3.分子疫苗（二）抗体（三）细胞因子（四）过继免疫治疗和造血干细胞移植二、免疫治疗（一）治疗性疫苗11过继免疫治疗：是指给患者转输具有在体内继续扩增效应细胞的一种疗法。如：给免疫缺陷患者转输骨髓细胞给肿瘤患者转输特异肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）或非特异性的淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）造血干细胞移植：用患者自身或健康人的造血干细胞移植回输给患者，让干细胞在患者体内定居、分化、增殖，使其恢复造血能力和免疫力。常用脐带血过继免疫治疗：是指给患者转输具有在体内继续扩增效应细胞的一种12（五）生物应答调节剂和免疫抑制剂1、免疫增强剂（IPA）：是增强、促进和调节机体免疫功能的生物或非生物制剂。主要用于恶性肿瘤、免疫缺陷病和传染病的辅助治疗。免疫增强剂只对免疫功能低下者起作用免疫增强剂分类分类举例细胞因子制剂IL-2、TNF、IFN微生物制剂卡介苗、短小棒状杆菌、脂磷壁酸化学药物左旋咪唑、西咪替丁多糖类制剂茯苓多糖、人参多糖（五）生物应答调节剂和免疫抑制剂免疫增强剂分类分132、免疫抑制剂：是一类抑制机体免疫功能的生物或非生物制剂。常见免疫抑制剂种类分类举例抗生素环孢霉素A、FK-506单克隆抗体制剂抗TC及亚群、抗MHC、抗IL和IL受体激素肾上腺皮质类固醇烷化剂环磷酰胺抗代谢药硫唑嘌呤、5-氟尿嘧啶2、免疫抑制剂：是一类抑制机体免疫功能的生物或非生物制剂。常14第二节免疫学诊断一、检测抗原和抗体的体外实验（一）体液免疫检测（血清学反应）1、抗原抗体反应的特点：特异性可逆性比例性阶段性第二节免疫学诊断一、检测抗原和抗体的体外实验（一）体液15抗体过剩比例适当抗原过剩抗原抗体的比例与其形成免疫复合物大小的关系抗体过剩比例适当抗原过剩抗原抗体的比例与其形成免疫复合物大小16可逆性：可逆性：17

抗原抗体反应的影响因素1、电解质浓度（多用生理盐水）2、酸碱度（pH:6～8）3、温度（37℃）抗原抗体反应的影响因素1、电解质浓度（多用生理盐水）18常见的抗原和抗体检测方法：根据抗原性质、出现结果的现象、参与反应成分的不同，可将抗原抗体反应分为：凝集反应沉淀反应采用标记物的抗原抗体反应等

常见的抗原和抗体检测方法：根据抗原性质、出现结果的现象、参与19凝集反应颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体结合后形成凝集团块，这一类反应称为凝集反应(agglutination)。该类反应可检测到ug/ml水平的抗体。凝集反应颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体结合后形成凝集201.直接凝集反应细菌或红细胞等颗粒性抗原

抗体1.直接凝集反应细菌或红细胞等颗粒性抗原抗体21免疫学临床应用课件22间接凝集和间接凝集抑制试验间接凝集和间接凝集抑制试验23沉淀反应血清蛋白质、细胞裂解液等可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀物，此类反应称为沉淀反应(precipitation)。

沉淀反应血清蛋白质、细胞裂解液等可溶性抗原与相应抗体结合后出24沉淀反应：单向琼脂扩散试验用于Ig、C3等的定量测定沉淀反应：单向琼脂扩散试验用于Ig、C3等的定量测定25沉淀反应：双向琼脂扩散试验沉淀反应：双向琼脂扩散试验26沉淀反应对流免疫电泳-+沉淀反应对流免疫电泳-+27补体结合反应补体结合反应补体结合反应补体结合反应28免疫标记技术(immunolabellingtechnique)

是指用荧光素、放射性核素、酶、发光剂或电子致密物质(胶体金、铁蛋白)作为示踪剂标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应。免疫标记技术(immunolabellingtechniq29

此类方法具有灵敏、特异、快速，能够定性、定量甚至定位测定，结果易于观察、适合自动化检测等很多优点。广泛用于各种生物活性物质的分析鉴定与定量检测。此类方法具有灵敏、特异、快速，能够定性、定量甚30免疫标记技术：——免疫荧光技术免疫荧光直接法免疫荧光间接法免疫标记技术：——免疫荧光技术免疫荧光直接法免疫荧光间接法31免疫标记技术：——免疫酶技术1、包被抗体

洗2、加抗原

洗3、加酶标抗体

洗4、加底物显色1、包被抗原

洗2、加抗体

洗3、加酶标抗球蛋白

洗4、加底物显色ELISA双抗体夹心法ELISA间接法免疫标记技术：——免疫酶技术1、包被抗体

32免疫标记技术：—放射免疫测定法（RIA）

放射免疫测定法（RIA）是将放射性核素分析的灵敏性和抗原抗体反应的特异性结合的测定技术。具有灵敏、精确、特异性高、易规范化及自动化等优点的一种先进的免疫标记技术。免疫标记技术：—金免疫技术（金标法）

金免疫技术是一处以胶体金作为标记物的免疫标记技术。是目前应用广泛、简便、快速的检验方法。免疫标记技术：—放射免疫测定法（RIA）33二、免疫细胞及功能测定细胞免疫检测——T细胞总数测定（1）E花环试验：

正常情况下，外周血淋巴细胞中能形成花环的细胞（即

T细胞）约60%-80%。二、免疫细胞及功能测定细胞免疫检测——T细胞总数测定（1）E34（2）荧光抗体染色

从外周血分离单个核细胞（PBM）后，用鼠抗人CD3的单克隆抗作第一抗体与PBM结合，再用荧光素（FITC）标记的兔抗鼠IgG抗体作第二抗体进行间接荧光染色。（2）荧光抗体染色

从外周血分离单个核细胞（P35细胞免疫检测——T细胞亚群测定

用间接荧光法检测CD4和CD8T细胞CD4/CD8正常比值为1.7-2.0左右。细胞免疫检测——T细胞亚群测定用间接荧光法检测C36细胞免疫检测——淋巴细胞转化试验---细胞介导的细胞毒试验细胞免疫检测——淋巴细胞转化试验---细胞介导的细胞毒试验37B细胞的检测B细胞数量的检测(1)膜表面免疫球蛋白(SmIg)的检测：SmIg是B细胞特有的表面标志，因此是鉴定B细胞的可靠指标。用抗SmIg抗体，借助直接免疫荧光法或免疫组织化学法进行检测。B细胞的检测38(2)间接免疫荧光法：应用针对B细胞表面抗原(CDl9、CD20、CD21、CD22等)的特异性单克隆抗体，以间接免疫荧光法对B细胞进行鉴定和计数。(2)间接免疫荧光法：应用针对B细胞表面抗原(CDl9、CD39B细胞功能测定B细胞增生试验

原理与T细胞增生试验相同；但刺激物主要为美洲商陆(PWM)、富含SPA的金葡菌、细菌脂多糖等。B细胞功能测定40体内免疫学检测（一）体液免疫检测

1、I型超敏反应皮肤试验

用常见变应原作皮内注射或划痕后，在20分钟内引起红斑及丘疹。如超过1cm或无红肿但注射处有痒感，或全身有不适反应者均为阳性，反之为阴性。

体内免疫学检测（一）体液免疫检测1、I型超敏反应皮肤试验

412、中和反应皮肤试验

将微量外毒素注射于受试者前臂屈侧皮内，24-48小时局部出现皮肤红肿者为阳性反应，表示无免疫力。阴性反应为有免疫力。2、中和反应皮肤试验

将微量外毒素注射于受试者前臂屈42（二）细胞免疫检测

以特异性抗原或有丝分裂原注入皮内，剌激体内致敏T细胞分化增殖，释放淋巴因