诺华诊断核酸检测系统介绍课件

诺华诊断核酸检测系统介绍诺华诊断核酸检测系统介绍诺华诊断公司介绍核酸检测及检测方法简介核酸检测原理介绍TMA检测方法原理及过程简介核酸检测设备与试剂全自动核酸检测分析系统TIGRIS®检测试剂ULTRIO®TIGRIS®检测流程操作者工作流程系统内部检测流程内容诺华诊断公司介绍内容诺华诊断（前chiron公司）专注诺华诊断是专门致力于预防输血传染性疾病的公司。从我们的产品设计，到客户服务支持，100%专注于提高血液的安全水平，保障血液供应安全。创新作为HCV病毒的发现者（1987年），诺华诊断一直注重提高创新研发能力，包括率先完成HIV病毒的基因组序列测定，HCV病毒的发现及病毒检测方法的建立等。在核酸检测（NAT）血液筛查领域，诺华诊断与合作伙伴共同开发了第一个获得美国FDA批准的可用于血液筛查的核酸检测试剂HIV-1/HCV，第一个包含HBV检测的多项联检试剂ULTRIO，第一台全自动核酸检测系统TIGRIS等。成功全球血液核酸检测领域的市场领导者美国市场占有率超过90%；亚太区10个进行核酸检测的国家和地区，有9个采用诺华产品。诺华诊断（前chiron公司）专注黄病毒家族成员之一；单股正链RNA病毒自1999年以来，美国每年夏天都会经历西尼罗病毒的爆发；已报告的人类感染病例20000，死亡至少785人。2002年8月28日-2003年3月1日，CDC接到61例可能是经过输血传播WNV的报告。经保留血样的检测结合流行病学调查，21例被确认为经输血传播的WNV感染（共涉及到14名供血者）2003年6月3日起，美国红十字会所属全部血液中心和美国其他采供血机构启动血液（包括成分）的WNV检测。至今尚没有特异有效的血清学检测方法。WNV病毒黄病毒家族成员之一；单股正链RNA病毒WNV病毒9个月后October200219June2003FDA要求开发用于西尼罗河病毒的核酸检测血液筛查方法和补充性试验方法PROCLEIX®WNV检测方法于2003年6月19日上市诺华

实现25对血液筛查领域的专注以及创新能力，保证了我们可以快速应对可能出现的对血液安全构成威胁的各种紧急疫情或病原体西尼罗河病毒诺华诊断（前chiron公司）9个月后October200219June2003FDA检测平台及检测试剂+全自动核酸检测分析系统TIGRIS®三项联检核酸检测试剂ULTRIO®检测平台及检测试剂+全自动核酸检测分析系统TIGRIS®三项混样设备--TECAN可支持4，8，16人份样品的混样处理混样设备--TECAN可支持4，8，16人份样品的混样处理诺华诊断公司介绍核酸检测及检测方法简介核酸检测原理介绍TMA检测方法原理及过程简介内容诺华诊断公司介绍内容DNA/RNA核苷酸A,G,C,T,orU碱基对

C-G

A-T(DNAonly)A-U(RNAonly)核酸检测基础知识

定义DNA/RNA核酸检测基础知识

定义寡核苷酸:OligonucleotideTarget核酸检测基础知识

定义探针:TargetOligonucleotide寡核苷酸:OligonucleotideTarget核酸检测

靶标捕获扩增

检测检测过程简介 靶标捕获检测过程简介检测过程检测过程诺华诊断公司介绍核酸检测及检测方法简介核酸检测原理介绍TMA检测方法原理及过程简介核酸检测设备与试剂全自动核酸检测分析系统TIGRIS®检测试剂ULTRIO®内容诺华诊断公司介绍内容检测平台TIGRIS®检测平台TIGRIS®PROCLEIX®

TIGRIS®System—PROCLEIX®TIGRIS®系统是第一个，也是唯一一个真正实现全自动核酸检测的系统，可以完成：样品吸取核酸靶标捕获扩增检测结果报告产物灭活—样品处理开始后，每个小时仅需要一分钟人工操作，添加耗材，最大地提高了工作效率—软件管理所有的系统操作，减少人为的操作和可能带来的误差—全自动化将操作者从简单重复性操作中解放出来，而把精力放在对结果的分析上PROCLEIX®TIGRIS®System—PROCL—一体化系统设计，轻松满足实验室空间要求—封闭的系统环境，保证样品与结果的完整性—尽可能少的操作者与样品的接触，保护操作者安全—确保仪器性能及检测结果的标准化PROCLEIX®

TIGRIS®System—一体化系统设计，轻松满足实验室空间要求PROCLEIX®—内置条码扫描，对样品及试剂进行全程跟踪—自动液面探测及加样体积校正功能，确保样品及试剂的精确添加—精密的机械系统，保证系统及结果的一致性和可靠性—软件自动进行系统维护保养等操作PROCLEIX®

TIGRIS®System—内置条码扫描，对样品及试剂进行全程跟踪PROCLEIX®—可以同时处理单人份检测样品和小混样样品—同时使用多种条码格式（Code128,Codabar,Code39,Interleaved2of5）—减少对反应管死体积的要求—兼容所有的工业标准尺寸的反应管（12×75mm—16×100mm）PROCLEIX®

TIGRIS®System—可以同时处理单人份检测样品和小混样样品PROCLEIX®—初筛和确认实验可在同一平台上同时进行—不间断装载样品和消耗品，灵活处理检测任务—检测通量：1000个单人份检测/14小时。PROCLEIX®

TIGRIS®System—初筛和确认实验可在同一平台上同时进行PROCLEIX®TAssayReagents(ARs)靶标捕获试剂(TCR)内标试剂扩增试剂酶试剂检测探针试剂鉴别探针试剂选择试剂AssayFluids检测用液体洗液油灭活缓冲液自检测液1自检测液2系统液防腐剂一次性耗材MTUs(多联反应管)DiTis(一次性移液器吸头，1000ml)其他实验室消耗品废物垃圾袋（套）标准品&质控品检测试剂和耗材AssayReagents(ARs)AssayFlui检测试剂ULTRIO®第一个三合一的多重检测血液筛查试剂基于独特的TMA技术，在一个试管中同时检测HIV-1,HBV,HCV所有反应步骤在同一管中进行，无需样品转移和传递内标分子监控整个反应过程，确保结果可靠初筛和鉴别试验在同一平台上同时进行可以进行最大16人份混合样品的检测检测的病毒包括所有亚型：HIV-1GroupM,SubtypesA,B,C,D,E,F,GHIV-1GroupsNandOHCVGenotypes1,2,3,4,5,6HBVGenotypesA,B,C,D,E,F,G检测试剂ULTRIO®第一个三合一的多重检测血液筛查试剂必须同批号使用纪录为成套试剂，并使用AssayReagents靶标捕获试剂TCR扩增试剂（A）酶试剂（E）检测探针试剂（P）选择试剂（S）AssayReagents必须同批号使用AssayReagentsAssayRe靶标捕获试剂

(wTCR)去污剂病毒裂解捕获寡核苷酸与靶标核酸分子结合磁珠颗粒固相磁力分离内标全程监控系统检测性能靶标捕获试剂(wTCR)去污剂引物核苷酸A,G,C,T,U辅酶因子扩增试剂(A)引物扩增试剂(A)逆转录酶（RT）以单链RNA或DNA为模板，合成互补DNARNAseH活性RNA聚合酶（RP）以双链DNA为模板，转录合成单链RNA分子酶试剂(E)逆转录酶（RT）酶试剂(E)标记有AcridiniumEster(AE)分子的寡核苷酸不同的探针，序列分别与 内标 病毒扩增子互补检测探针试剂(P)标记有AcridiniumEster(AE)分子的寡核苷降解游离探针分子上标记的AE分子选择试剂(S)选择试剂(S)AssayFluids检测用液体通用试剂洗液灭活液缓冲液油系统液防腐剂自检测液1自检测液2AssayFluidsAssayFluids检测用液体洗液自检测液1自检测液ULTRIO®初筛和鉴别试剂

分析灵敏度

病毒类型检测试剂95%LimitofDetectionHIV-1Ultrio®28.79c/mL(25.85–32.68)HIV-1dHIV-132.15c/mL(28.74–36.70)HCVUltrio®3.01IU/mL(2.71–3.42)HCVdHCV3.17IU/mL(2.85–3.59)HBVUltrio®10.44IU/mL(9.20-12.16)HBVdHBV8.52IU/mL(7.56-9.84)初筛和鉴别试验在同一平台进行，并且两种方法灵敏度相当，可以保证准确快速完成病毒种类的鉴别试验。ULTRIO®初筛和鉴别试剂

分析灵敏度病毒类型检测试诺华诊断公司介绍核酸检测及检测方法简介核酸检测原理介绍TMA检测方法原理及过程简介核酸检测设备与试剂全自动核酸检测分析系统TIGRIS®检测试剂ULTRIO®TIGRIS®检测流程操作者工作流程系统内部检测流程内容诺华诊断公司介绍内容检测方案的选择方案1–单人份检测提供最高的检测灵敏度（1，2，3，4）。高效的检测流程，与血清学同步进行，不影响血液的发放。方案2–混样检测（可进行4，8，16人份混合）

节约检测成本。1.ReddyR.Presentation.Aug/Sep2009

2.Castroetal.,2006,VoxSanguinis,91(Suppl.3),p77,P-11

3.Brojeretal.,2006,Hepatology,44:1666-1674

4.Zanettietal.,2006,JClinVirol,36Suppl.1,S51-55检测方案的选择方案1–单人份检测1.检测方案的选择混样规模与灵敏度及窗口期缩短时间的关系病毒HIV-1HCVHBV复制周期（天）0.850.452.56检测方案的选择混样规模与灵敏度及窗口期缩短时间的关系病毒HI新加坡：单人份检测“FailureofroutineHIV-1testsinacaseinvolvingtransmissionwithpreseroconversionbloodcomponentsduringtheinfectiouswindowperiod”:Lingetal.,JAMA,vol.284July20001997年，发生一起HIV输血传播，一名献血者捐献的血液感染了两名受血者（血小板，红细胞）。测序结果证实输血传播。献血者抗体，抗原检测均为阴性。定量检测结果病毒水平5-39copies/ml。NAT检测结果表明，该样品可以被单人份检测办法检出，而被混样检测漏掉。2000年，新加坡开始实行核酸检测，并且为单人份检测。新加坡：单人份检测“FailureofroutineH南非（SANBS）：2005.10-2007.9，1,460,000份样品单人份检测ReddyR.Presentation.Aug/Sep2009南非（SANBS）：2005.10-2007.9，1,460HBVJ.P.Allain.ISBTNagoya2009HBVJ.P.Allain.ISBTNagoya20多中心合作项目（COE）2009.4.16-2009.11.17，有四个血液中心参与，共检测样品40107份。全部进行单人份检测HBVNAT检出率1:1294（31/40107）其中，6例窗口期样品，病毒载量为13，25.6及<12IU/mL（4例）。隐匿性乙肝（OBI）25例。全部病毒载量<12IU/mL或不可测。多中心合作项目（COE）2009.4.16-2009.11.混样设备--TECAN混样设备--TECAN混样方式—P16256样品管16个混样管混样方式—P16256样品管混样方式—P8384样品管48个混样管混样方式—P8384样品管混样方式—P4320样品管80个混样管混样方式—P4320样品管ARbaySamplebayFluiddrawerWastedrawerPROCLEIX®

TIGRIS®SystemARbaySamplebayFluiddrawerWa

操作者流程仪器工作流程PROCLEIX®

TIGRIS®System

核酸检测工作流程

操作者流程PROCLEIX®TIGRIS®System

1:准备试剂PROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程0:实验室消毒

1:准备试剂PROCLEIX®TIGRIS®Syst准备试剂试剂运输温度开瓶后储存温度是否需要RPI处理?TCR2-8度2-8度(aswTCR)yes内标干冰冷冻N/Ano扩增试剂酶试剂检测探针鉴别探针干冰冷冻2-8度yes选择试剂常温常温onlyforSelectionRecovery准备试剂试剂运输温度开瓶后储存温度是否需要RPI处理?TCR—试剂准备孵育器（RPI）

自动化，标准化试剂准备，使实验结果更可靠PROCLEIX®

TIGRIS®System

File1–冷冻试剂(1h45m)File2–冷藏试剂(1h)File3–过夜准备(8-16h)File4–选择试剂的恢复(1h)—试剂准备孵育器（RPI）PROCLEIX®TIGRIS®

2:装载耗材（MTU,DiTi）PROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程

2:装载耗材（MTU,DiTi）PROCLEIX®TI

3:下层液体管理PROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程

3:下层液体管理PROCLEIX®TIGRIS®Sy替换液体，扫描条码，清空垃圾袋SystemFluidWashBWashAAutoDetect2OilBarCodeScannerTipletWasteDeactivationFluidABABABAutoDetect1替换液体，扫描条码，清空垃圾袋SystemFluidWasLiquidWaste

1LiquidWaste

2MTUWaste清空垃圾LiquidWaste1LiquidWaste2MT系统排空（Prime）所有的液体管道全部需要排空排空需要约20分钟系统排空（Prime）所有的液体管道全部需要排空排空需要约2

4:日保养PROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程记录实验室条件检查系统托盘，外表面，真空压力清洗DiTiCone和试剂加样器管道

4:日保养PROCLEIX®TIGRIS®Syste

5:创建工作列表PROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程

5:创建工作列表PROCLEIX®TIGRIS®Sy

6:装载试剂PROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程酶试剂选择试剂检测探针试剂扩增试剂

6:装载试剂PROCLEIX®TIGRIS®SystARbaywTCRPROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程ARbaywTCRPROCLEIX®TIGRIS®Sy

7:装载样品PROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程每个样品架可以摆放20个样品管系统样品盘可以同时摆放9个样品架

7:装载样品PROCLEIX®TIGRIS®Syst

8:开始检测PROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程

8:开始检测PROCLEIX®TIGRIS®Syst操作者确认样品开始加样后，即可以离开TIGRIS会提醒操作者结果输出的时间及需要用户返回的时间:LoadMTUsLoadRacksLoadDiTisPROCLEIX®

TIGRIS®System

仪器工作流程操作者确认样品开始加样后，即可以离开PROCLEIX®TI

样品、试剂准备，仪器调试保养1hrs一个熟练的操作者可以同时操作多达三台系统

样品处理开始后，每个小时仅需要一分钟人工操作，添加MTU系统连续上样，可以灵活添加新的样品系统预先通报操作者何时添加新的耗材及样品PROCLEIX®

TIGRIS®System

操作者流程

样品、试剂准备，仪器调试保养1hrsPROCLEIX®Logonadm