水产动物饲料中钙的测定

饲料中钙的测定一、适用范围本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。二、原理将宠物食品中有机物质破坏，钙变成溶于水的离子，用草酸铵定量沉淀，用高锰酸钾法间接测定钙含量。CaCl2+(NH4)2C2O2→CaC2O2↓+2NH4ClCaC2O2+H2SO4→CaSO4+H2C2O22KMnO4+H2C2O2→10CO2↑+2MnSO4+8H2O+K2SO4三、试剂1．盐酸溶液：1+3水溶液2．硫酸溶液：1+3水溶液3．氨水：1+1水溶液4．草酸铵溶液：4.2%水溶液5．甲基红指示剂：甲基红(HG3-958)配成0.1%乙醇溶液6．0.05mol/L高锰酸钾标准溶液盐酸溶液1+3硫酸溶液1+3氨水1+1草酸铵4.2%甲基红指示剂高锰酸钾溶液0.05mol/L高锰酸钾标准溶液配制：1．天平称取高锰酸钾（GB643）大约1.6克，溶于盛有1000毫升蒸馏水的烧杯中，放在电炉上加热，煮沸10分钟，冷却，静置1～2天。2．用烧结玻璃滤器把高锰酸钾溶液过滤到1000毫升的棕色容量瓶中。

0.05mol/L高锰酸钾标准溶液标定1．用分析天平称取干燥的草酸钠（GB1289基准级，105℃干燥2h，存于干燥器中）0.1克，准确至0.0002克，溶于盛有50毫升水的烧杯中，用量筒量取1:3的硫酸溶液10毫升加入，放在电炉上加热至75℃-85℃（3个平行样）。0.05mol/L高锰酸钾标准溶液标定2．棕色酸式滴定管装入高锰酸钾溶液，滴定热草酸钠溶液并搅拌，至溶液为粉红色且１分钟不褪色为滴定终点。此时溶液温度在60℃以上。3．空白试验：用高锰酸钾溶液滴定只加硫酸溶液的热蒸馏水至终点。0.05mol/L高锰酸钾标准溶液4．计算

mC＝————————————

（Ｖ1－Ｖ2）×0.0670式中：C—高锰酸钾标准溶液的浓度(mol/l)m—基准物草酸钠的质量(g)Ｖ1－滴定时消耗高锰酸钾溶液的体积(ml)Ｖ2－空白试验时高锰酸钾溶液消耗的体积(ml)0.0670－与1.00毫升高锰酸钾标准溶液相当的以克表示的草酸钠重量

四、仪器1．分析天平：感量0.00012．调温电炉：3．高温电炉：电加热，可控温度为550c左右4．坩埚：50ml瓷质5．容量瓶：250毫升6．酸式滴定管：25ml7．玻璃漏斗：7.5cm8.定量滤纸：中速11-12.5cm9．移液管：20或25ml10．烧杯：200ml11．玻棒：15cm分析天平调温电炉高温电炉坩埚容量瓶

滴定管

漏斗

移液管

烧杯滤纸五、测定步骤（一）坩埚的洗涤、烘干、冷却坩埚的洗涤干净、烘干（温度1050C）1小时，冷却至室温。（二）试样的称取、炭化、灰化1.称取风干样品：（1）天平预热（20分钟）、水平、灵敏度和零点的调节。（2）称量空坩埚质量（m1），准确至0.0002g。记录空坩埚质量（m0）。称取风干样品：（3）样品约重：粗天平称取2克左右风干样品。（4）将2g左右风干样品于坩埚内，称量称准至0.0002g。记录坩埚风干样品重（m1）。计算风干样品重（m）＝（坩埚风干样品重）－空称样皿重=m1-m0

2.样品的炭化

（1）将带有样品的坩埚置于电炉上，盖打开少许。

（2）调整电炉的温度为低温，小火加热（白烟）至无烟（禁止高温，忌有黑烟，），待烟冒完后，然后升温灼烧至样品无烟，即为炭化完毕

3.样品的灰化：（1）坩埚微开盖将其放入高温电炉中。（2）调整高温电炉的温度550℃。（3）灰化550℃左右，进行灰化3-4小时，直至呈灰白色，无碳粒。（4）切断电源，关闭高温电炉，待温度降到2000C以下，借助坩埚钳取出，空气中冷却1分钟，干燥器冷却30分钟。（三）试样分解液制备容量瓶和漏斗洗涤干净、编号。玻棒洗涤干净。在盛灰分的坩埚中加入10ml盐酸溶液（10ml刻度吸管移取）。加数滴浓硝酸，在电炉上小火煮沸。将此溶液借助漏斗无损转移到250ml容量瓶中，用蒸馏水冲洗坩埚几次，洗液转入容量瓶中，冷却到室温，用蒸馏水定容，摇匀即为样品分解液。

（四）草酸钙的沉淀1.烧杯洗涤干净、编号。2.20ml移液管洗涤干净，用被移灰粉液润洗3次。（四）草酸钙的沉淀3.准确移取20ml灰粉液于烧杯中。（四）草酸钙的沉淀4.加100ml蒸馏水（100ml量筒量取）（四）草酸钙的沉淀5.加入2～3滴甲基红指示剂。溶液呈红色。

（四）草酸钙的沉淀6.一滴滴加入1+1氨水，边滴边搅，至溶液呈橙色（四）草酸钙的沉淀7.一滴滴加入1+3盐酸溶液，边滴边搅，至溶液呈红色。玻棒不准拿出！！（四）草酸钙的沉淀8.将烧杯放电炉上加热至微沸，保持微沸。（四）草酸钙的沉淀9.慢慢加入10毫升草酸铵溶液（10毫升刻度吸管移取），并不断搅拌。10.如溶液变橙色，应补加1+3盐酸溶液至红色（一般1～2滴）保持微沸3～5分钟（五）草酸钙的洗涤1.漏斗洗涤干净备用，放在大锥形瓶上。（五）草酸钙的洗涤2.中速滤纸放入漏斗中，用水粘在漏斗内壁。（五）草酸钙的洗涤3.先倒入上清液（约为滤纸高度的1/3），多次冲洗（借玻棒）。(五)草酸钙的洗涤4.然后用1︰50氨水冲洗沉淀6～8次后，检查是否洗涤干净。可用热蒸馏水冲洗，最后确保将全部沉淀移入滤纸反复冲洗滤纸中沉淀。直至将多余草酸铵洗干净。（六）草酸钙的溶解1.烧杯冲洗干净，备用。（六）草酸钙的溶解2.将沉淀及滤纸移入烧杯中。（六）草酸钙的溶解3.在烧杯中加入1+3的硫酸10ml（用刻度吸管移取）(六)草酸钙的溶解4.再加入蒸馏水100ML，溶解沉淀。(六)草酸钙的溶解5.将烧杯放于电炉上，75～80℃加热。（七）滴定1.棕色滴定管洗净，漂洗干净，装入0.05mol/LKMnO4溶液。用0.05mol/LKMnO4溶液滴定。溶液呈粉红色半分钟不褪色为滴定终点，记录KMnO4用量（即消耗体积：终读数—初读数）。(八)空白测定1.在烧杯中加入10mlH2SO4+100mlH20+滤纸一张，置于电炉上75～80℃加热，用KMnO4溶液滴定，记录消耗KMnO4溶液体积。六、结果计算

(V-V0)×C×0.02V1Ca（%）=———————×———×100％

mV2V——测样品时0.05mol/LKMnO4溶液的用量（ml）V0——测空白时0.05mol/LKMnO4溶液的用量（ml）V1——试样分解液定容的体积（ml）V2——测定时移取的试样分解液体积（ml）C——KMnO4溶液浓度（0.05mol/L）m——试样质量（g）0.02—与1.00mlKMnO4溶液相当的以克表示的钙的质量重复性：试样取两个平行样其算术平均值为结果钙含量在5%以上，允许相对偏差3%钙含量在5~1%时，允许相对偏差5%钙含量在1%以下，允许相对偏差10%相对偏差=│测定值-平均值│/平均值钙测定记录表样品名称鱼粉样品号12坩埚号坩埚重（克）坩埚+样品重（克）样品重（M，克）测样品时KMnO4溶液的用量（V，ml）空白时KMnO4溶液的用量（V0，

ml）KMnO4溶液浓度（C）试样分解液定容的体积（V1，ml）测定时移取分解液的体积（V2，ml）钙含量（%）平均（%）饲料中钙的测定注意浓度不稳定，至少每月需要标定一次2.滤纸每种滤纸空白值不同，消耗高锰酸钾标准溶液的量也不同，至少每盒滤纸做一次空白测定。3.草酸钙沉淀形成向试样中要一滴滴加入1:1氨水和1:3盐酸溶液，边滴边搅，在此过程中玻璃棒不要随意拿出。3.草酸钙沉淀形成加入