抗体工程重点

第二章能*重点章节）1b体抗白。免疫球（I白3.功：Ig分的H和L链可通过链内二硫键结由110，具有一定的生能。4.ri:之的值。5族immuollnpfiyF疫Ig分子的子6、按免疫球蛋白抗原特性分类：1型，要括Ig的类。2）同间Ig分子所在Ig的恒。3）独特型：由H或VL的所。与。7、R表：H和VL紧密地结为Fv6个R于v的N，做CDRRe抗部。8、结抗原抗体合电引力、、范德华力需适的温度、H、离子强度及完整的抗体，结可。9、抗体依赖性细胞介导的细胞毒作(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity，ADCC)子表其c段与杀伤细的c为ADC噬、粒K胞章）1、多念传统的抗体制备方法是将一种天然抗原经不同免疫途径免疫动物，由于抗原性物质具有多个抗原决定簇，可以刺体抗细和簇,所以称这种免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体。2、抗体应答反。初次应答长最生Ig着才产生Ig2～2m生I体持。亲力弱。记忆应答：潜伏期短。抗体类型IG，IM很。3、免疫）挥称。生物学1、增性 2、提高抗体的度）3、型IgM—IG 4应用部存库表积局炎应主要的免疫佐剂的剂工。4、蛋体Ig：概念：是指蛋黄中存在的抗体，也称蛋黄免疫球蛋白特点：Y化学性质稳定。抗体产量大。成功。素的。的IY的Y。加。章（）1、原理：一个淋巴细胞只接受一个抗原决定簇刺激及经刺激后扩增的淋巴细胞产生均一的同质抗体，此即单克隆抗体技术的理论基础。2定义的B细。3、。A淋巴细胞亚群分类、淋巴细胞亚群分离纯化；细胞受体研究（受体的分离纯化、细胞定位、结构研究、功能分析；B判检中标断究治生弹）4、单。A融合织料(备养水基血清素原物择免途径）B细胞融合：骨髓瘤细胞的选择（生化缺陷系NS1胞，S0）于9％需1108用含8）骨髓瘤细胞悬液的制备的备养胞制备细胞融合与选择性培养C杂孔。换液在7％C2培养养2天以。从要检测的孔取100μl上测如EA。D：a抗体分泌细胞和无关抗体分泌细胞分开。有限稀释法）b冻存：细胞在加清和甲基砜的养基以一的缓慢度下温度可在-6℃液氮氮中保的处期好。c细胞的苏E单备体化提纯。第五章）1、基因用DA子导体。2、基：（甚。（透。（3。（。3、各种类型基因工程抗下7个问）（合：该；用RR方法从该细胞的mRNA中增VH及VL。（：二氢叶酸还原（df）统CHO的选→细选甲氨喋呤→r高（？A的天构象。B将骨架区内可能影响基C合留CDR的列D抗体可的N末是轻的N与R改形抗体时择将N。（。原决定簇的人抗体，称为（。过如下：：得人体功抗保证4）小。结为。包括：抗原结合片段（)、（)、单链抗体(v。1、（和d结合位点；分子50kDa无c疗2、变区片段（)：区H区VL。3链(ScFv在DNA将一链的分子。相对分子量的1/。4、单的1/12。，原。5）单链抗体的基本原理和构建流程。基原理在A水。总RN为cDNA第一链→扩增体L（Gl4e3接基将HVL成Sv基因→R增ScFv克→ScFv全序定（6点优点：A免疫原性起HAMA；B穿过血管壁；C肿底；D半衰期短,；E制低；F。，期影。（用A抗。构建方含Fv段合白向连嵌受体含c白检化血期能B价细胞伤效应第六章抗）1、抗念（e直接表达有功能的抗异。2、势1）化2）可化3）简单易行备4）产3、建抗体库容量多次构建累在109-1010容6500）A增于CR多样）B法载感细载击）数C高效的包装和呈现效率超噬菌体系统（Hyperphage）PⅣ（分子量小，无空间位阻和干扰效应）辅助噬菌体的选择（如CT）4、点概念：粒丝。特点：A本熟，、的。B在pgid。CPaeid在A重组操作上比较简。5、噬菌体抗体库构建的。1）基因的获取（因2用PR增Ig的H和VL因2）：3选4）扩集5（A异定()6、抗体库技术有哪些方面的应用。生的；生的究；瘤治的；设的；制备各种功能抗体片段章人Ig基鼠1源DNA与受体体DA细的法2、转基因动物：指用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内，并能稳定传代的一类动物3、转人Ig基因小鼠的优点：1人DA亲和成熟）2）建立种系后，通过免疫获得不同的抗体（任体）3）精确地重现人抗体的产生过程（能够提供几乎完全相同的人免疫球蛋白基因环境并在鼠体内精确的重现了人抗产程4、。DA显注射↓移S胞↓受精卵→血细原物↑微注射 染DA DNA备人Ig：1）人Ig基(链H和轻链Iκ)人Ig的C文获。2）(byicemces，)培养。3）制备内源性Ig基因除鼠。4）获人s的，入鼠s建立达人Ig的小鼠胞)。5）小鼠和Ig-ESs人Ig