体内药物分析-生物样品的种类、采集和制备（药物分析课件）

2.尿液用于药物剂量回收、药物尿清除率、生物等效性

A:尿液中原形药、代谢物、缀合物等

B:尿液特点量大；非创伤性；尿液中药浓度较高

C:尿液缺点食物饮；水影响；排汗

D:尿液性质

淡黄色；成人日量1-5L；pH4.8-8.0；加防腐剂贮存

E:采集方法

采集24h尿液：8时排尿弃去，立即服药，尿液收集容器中，次日8时最后一次收集；分段收集

F:肾功影响药物的排泄；尿药浓度与血药浓度相关性差；婴儿尿液量难收集

3.唾液唾药浓度与血浆游离药浓度相关，药代动力学

A:唾液和唾液腺唾液由腮腺、舌下腺和颌下腺三腺体分泌会集而成的，日分泌量约1.2L

B:唾液的采集漱口后15min，安静情况下，用插入漏斗的试管接收自然流出的唾液，采集时间>10min；可用物理和化学方法刺激采集

C:刺激法采集优点缩短采集时间；减少pH（7.0）范围；药物浓度个体差异小

D:唾液样品的制备放置分层后，3000r/min离心10min,取上清作为药物浓度测定样品

E:唾液采集特点无痛、简便、经济等成为TDM的研究热点

非伤害性方法，病人易接受采集不受时间、地点限制，易收集灵敏度较高的血药浓度测定方法可以直接或稍加改进使用

一些药物的唾液药物浓度(S)与血浆游离药物浓度(P)密切相关，可使用唾液样品唾液样品的特点一、生物样品的种类、采集和制备

血液(血浆、血清)—体现药物浓度和治疗作用之间的关系(联接)

——最常用的生物样本

生物样品脏器组织体液血液、尿液、唾液、毛发、乳汁、精液、脑脊液、泪液、胆汁、胃液、胰液、淋巴液、粪便等尿液—用于药物剂量回收、尿清除率、生物利用度、内源性活性物质、药物代谢分型及代谢物等的研究测定唾液—用于某些S/P较为恒定的药物的测定一、生物样品的种类、采集和制备

肝、胃、肾、肺、脑等脏器组织

—动物试验研究药物吸收、分布状态及服药过量中毒死亡

毛发

—可用于药物滥用监测及微量元素测定一、生物样品的种类、采集和制备

（一）血液（blood）

因血液中药物浓度可以较好地体现药物浓度和治疗作用之间的关系，是最为常用的生物样品—分为全血、血浆和血清

1.血样的采集

一般用注射器直接采集静脉血，每次1~5ml；动物实验时，采血量不宜超过动物总血量的十分之一

测定血中药物的浓度，通常是指测定血浆或血清中的药物浓度，尤其是血浆，并非指全血

2.

血样的制备血浆的制备

采集的静脉血液置含有抗凝剂的试管中，混合后，以2500~3000r/min离心5~10min使与血球分离，所得淡黄色上清液即为血浆（plasma）

抗凝剂—最常用的是肝素（heparin）其它抗凝剂EDTA、枸橼酸盐、草酸盐等血清的制备

采集的静脉血液置试管中，于37℃或室温放置30min~1h。血液凝固后，用细竹棒或玻璃棒轻轻剥去试管壁上的血饼，再在2500~3000r/min离心5~10min，上层淡黄色液体即为血清（serum）

血清比血浆只是少一种纤维蛋白原

C血浆=C血清血浆比血清的分离快，而且制取量约为全血的50%~60%（血清为全血的20%~40%），多数用血浆进行分析。若血浆中含有的抗凝剂对药物浓度测定有影响时，则应使用血清样品

血浆与血清的区别

全血的制备成分血浆有形物质红细胞白细胞血小板全血的制备某些情况血浆内药物浓度波动大，或血浆浓度低，可用全血（全血净化较血浆和血清麻烦）血浆和红细胞中分配比不是常数，则应使用全血样品例：三环类降压药在个别病人体内血浆和红血球中的分配比不是一个常数，故宜采用全血样品进行药物动力学的研究全血制备

将采集的血液置含有抗凝剂的试管中，但不经离心操作，保持血浆和血细胞均相状态，即为“全血”

（wholeblood）

血样主要应用于：

药物动力学生物利用度临床治疗药物浓度监测血样的应用4.组织

1）匀浆化法

A:组织检材中加入一定量的水或缓冲液，在刀片式匀浆机中匀浆，取上清液供萃取

B:方法简便，回收率低

2）沉淀蛋白法

A:在组织匀浆中加入蛋白沉淀剂，取上清供萃取

B:方法简便，回收率低

C:常被采用，加入蛋白后上清液清澈，不乳化，杂质少

3）酸碱水解法

A:组织匀浆中加酸或碱，水浴加热，过滤或离心，上清萃取

B:适合热酸或热碱稳定的药物

4）酶水解法

A:在组织匀浆中加入酶和缓冲液，水浴，过滤或离心，取上清液萃取

B:酶为蛋白水解酶的枯草菌溶素，可使组织溶解、药物析出

C:优点可显著改善与蛋白结合紧密的药物的回收率；无乳化化现象；可避免在酸和热下药物分解；采用HPLC法无需过多

净化5.头发

A:用于体内微量元素测定

B:可用于用药史的估计

C:毒性药物的检测优点—取样方便、可重复采样

—通过测定某些特定的代谢物将

药物滥用和临床用药相区别

—能获数月~数年的长期用药信息缺点—预处理繁杂、干扰多

—分析对象的含量低、需精密仪器1．广谱性（代谢产物及微量元素排泄器官）2．积累性（长期富集各代谢产物）3．稳定性（ 水分含量少）

4．依时性（反应某时期药物的积累）5．相关性（与人体内部器官相关）6．指纹性（环境、饮食等）头发检测的性质

采集——代表性和同一性

—采集枕部发样

—微量元素在前额部位的头发中含量最低，枕部含量最高

洗涤—除去外源性污染物

头发的采集与洗涤