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文档简介
课时作业(三十四)34微生物的培育和利用
时间/30根底稳固1.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的有用性产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图K34-1K34-1进展①过程的目的是,②过程所使用的接种方法是法。从用途上来说,Ⅰ号培育基属于培育基,配制时仅以作为唯一碳源;从物理状态上来说,Ⅱ号培育基属于固体培育基,配制时应参加作为凝固剂。Ⅰ、Ⅱ号培育基配制和灭菌时,灭菌与调整pH的先后挨次是。一般对配制的培育基承受法灭菌。培育一段时间后,应从Ⅰ号培育基上挑出的菌落,接种到Ⅱ号培育基上。2.[2023·四川达州一诊答复与微生物试验室培育有关的问题:pH或“后”)调整。为防止外来杂菌入侵,对等可承受干热灭菌法进展灭菌。K34-2如图K34-2为平板划线法接种后的示意图用稀释涂布平板法统计活菌数目时,每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目,最终选取作为结果,这样可以防止因培育时间缺乏而遗漏菌落,从而导致所得菌落数目不准确。3[2023]示,试验步骤如图K34-3KHKHPO2 4NaHPO2 4MgSO·7HO4 2葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g10g1g15g溶解后自来水定容到1000mLK34-3在试验过程中:①培育基;②培育皿;③玻璃棒、试管、锥形瓶、吸管;④瘤胃中液体。其中需要灭菌是(填序号)。150个菌落,而其他同学只选50以为唯一氮源的培育基培育“目的菌”后,参加酚红指示剂后变为红色,说明。比较细菌与酵母菌的构造最明显的区分:细菌。从同化作用类型来看的,筛选出来的“目的菌”属于。为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,用法接种,然后将接种的培育皿放置在37℃恒温培育箱中培育24~48h,观看并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中倍的稀释比较适宜。稀释倍数103 104105106107菌落数 >50036724836184.[2023·广东揭阳高三模拟]根本工作流程。答复以下问题。K34-4自然界中①环节需要的微生物大多分布在的环境中。②中获得的酶是酶。假设从土壤中分别出上述微生物,应以为唯一碳源的培育基进展培育,并参加形成红色复合物进展筛选,培育基上会消灭以该菌的菌落为中心的。接种后一个平板经培育后的菌落分布如图乙所示,推想接种时可能的操作失误是。向试管内分装含琼脂的培育基时,假设试管口黏附有培育基,需要用酒精棉球擦净的缘由是。(4)生产中可以满足④环节的常见菌种是。玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长供给。力量提升5.[2023·河南三门峡二模]某试验小组对酸奶中乳酸菌的数量进展了测定,取6支灭菌的试9mLAAAAAA1mL1 2 3 4 5 6A中,然后另取一支吸管从A1
1mL溶液,参加A2
中,依此类推,最终从试管A中取60.1mL251265、276问题:pH调至。制备乳酸菌培育基的过程中,对培育皿灭菌的常用方法是低,缘由是;待平板冷凝后,要将平板倒置,其目的是。该试验小组对乳酸菌接种所承受的方法是/mL小”)。为了使测量结果更加准确,该试验比照组的设置是。6.随着社会的进展,石油产品的使用越来越多,石油烃污染也越来越严峻油烃力量强的微生物,人们不断地进展争论。如图K34-5为猎取能分别出分解石油烃的微生物的土壤样品后的争论过程,请答复有关问题:猎取土壤样品的取样地点最好选在所用的选择培育基只能以石油烃作为唯一碳源,其缘由是。K34-5依据⑤平板上生长的菌落,对④进展接种承受的方法是,假设觉察在⑤中无法区分菌落,可以将图中③取出的菌液。纯化菌株时,通常使用的划线工具是第一划线区域的划线上都不连续地长满了菌落,其次划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是(写出一点即可)。综合拓展7.[2023·湖北黄冈第三次联考]水污染是全球性的环境问题,微生物降解是水污染治理的有(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物,PVA分解菌能产生PVAPVA,PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物,当PVA被分解时蓝绿色复合物消逝,形成白色透亮斑,请答复以下问题:要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌,应承受以为唯一碳源的选择培育基,试验中还应设置比照组。将菌液稀释一样的倍数,比照组培育基上生长的菌落数目应明显(填“多于”或“少于”)选择培育基上的数目,从而说明选择培育基具有筛选作用。100mL含有PVA104倍后,取0.1mL得菌落数的平均值为160个,空白比照组平板上未消灭菌落,则100mL原菌液中有PVA分解菌个,该方法的测量值与实际值相比一般会(填“偏大”“偏小”或“相等”)。要鉴定分别出的细菌是否为PVA分解菌,培育PVA分解菌的培育基中除了参加必需的养分物质外,还需要参加用于鉴别PVAPVA力量的大小,用含一样PVA浓度的上述培育基来培育不同菌株,肯定时间后,通过测定来确定不同菌株降解PVA力量的大小。课时作业(三十四)1.(1)稀释稀释涂布平板选择淀粉琼脂先调整pH,后灭菌高压蒸汽灭菌透亮圈大[解析](1)据题图分析,①过程为稀释,②过程是为了筛选单菌落,一般用稀释涂布平板的方法给Ⅰ号培育基接种。Ⅰ号培育基按功能分属于选择培育基,配制培育基时需要以淀粉为唯一的碳源;在液体培育基中添加琼脂可以配制成固体培育基,Ⅱ号培育基属于固体培育基。培育基制作完成后要先调整pH,再灭菌;培育基一般进展高压蒸汽灭菌。培育一段时间后,菌落四周会消灭透亮圈,透亮圈越大说明菌落分解淀粉的力量越强,所以应从Ⅰ号培育基上挑出透亮圈大的菌落,接种到Ⅱ号培育基上。2.(1)琼脂前玻璃器皿和金属用具6倒置避开培育基被污染和防止培育基水分过快挥发菌落数目稳定时的记录[解析](1)在制备固体培育基时需参加的常用凝固剂是琼脂pH,(2)为防止外来杂菌入侵,对玻璃器皿和金属用具等可承受干热灭菌法进展灭菌(3)51次,以防止造成污染,因此完成步骤④共需灼烧接种环6(4一次菌落数目,最终选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培育时间缺乏而遗漏菌落,从而导致所得菌落数目不准确。3.(1)①②③(2)①②③尿素“目的菌”能分解尿素没有以核膜为界的成形的细胞核异养型生物稀释涂布平板106[解析](1液体不能灭菌,否则会杀死“目的菌”。(2)甲同学培育的菌落比其他同学多,可能是由于取(3所以培育基应当以尿素为唯一氮源。参加酚红指示剂后变为红色,说明“目的菌”能分解尿素。(4细菌以尿素为碳源,不能自己合成有机物,属于异养型微生物。(5)通过稀释的方式来接种的属于稀释涂布平板法。观看并统计具有红色环带的菌落数时,菌落不宜太多,以便于统计,因106倍的稀释比较适宜。4.(1纤维素刚果红(CR)透亮圈涂布不均匀避开培育基污染棉塞酵母菌碳源[解析](1)富含纤维素的环境中纤维素分解菌较多;②中获得的酶是纤维素酶,该酶是一种复合酶,包括C1
酶、Cx
酶、葡萄糖苷酶。(2)筛选纤维素分解菌时,用以纤维素为唯一碳源的选择培育基进展培育后,在培育基中参加刚果红,其可与培育基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培育基中会消灭以纤维素分解菌为中心的透亮圈,(3)纯化菌种时,为了得到单一菌落,常承受的接种方法有两种,即平板划线法和稀释涂布平板法,题图乙中承受的是稀释涂布平板法,但菌落分布不均匀,其(4的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长供给碳源。5.(1)中性或微碱性干热灭菌法温度太低会导致培育基凝固,无法铺展均匀防止平板冷凝后,培育皿盖上分散的水珠落入培育基中造成污染稀释涂布平板法2.64×109 偏小另增设一组培育基,接种等量灭菌的生理盐水[解析](1)乳酸菌是一种细菌,制备细菌培育基时,需将培育基的pH(2)制备培育基过程中,对培育皿灭菌的常用方法是干热灭菌法。温度太低会导致培育基凝固,无法铺展均匀,因此倒平板时培育基的温度不能太低;待平板冷凝后,要将平板倒置,其目的(3)取6支灭菌的试管,9mLAAAAAA1mL1 2 3 4 5 6A中,然后另取一支吸管从A1mLA中,依此类推,最终从试管A0.11 1 2 6mL101102、103、104、105、106倍的稀释液。从试管A0.1mL6数分别为251、265、276个,可推想原酸奶中乳酸菌的浓度为÷0.1×106=2.64×109个/mL。稀释涂布平板法测定活菌数目时,由于相邻的细菌可能形成一个菌落,因此测定值可能比实际值小。(4)为了使测量结果更加准确,需要另增设一组培育基,接种等量灭菌的生理盐水。6.(1)石油烃污染明显处只有能利用石油烃的微生物能正常生长生殖稀释涂布平板法进展(梯度)稀释接种环灼烧接种环灼烧后未冷却;划线未从第一区域末端开头划线[解析](1)要猎取相应的菌种,应到相应的环境中猎取,故猎取土壤样品的取样地点最好选在石油烃污染明显处。有些培育基可以抑制其他微生物的生长,这样的培育基可称作选择培育基。因此,为了能有效地分别出分解石油烃的微生物,过程①④所用培育基,其成分的特点是只含石油烃一种碳源,从而有利于目的菌的生长,抑制其他微生物的生长。(2)④中的培育基从物理特征看属于固体培育基,可参加凝固剂琼脂处理,常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。依据⑤平板上生长的菌落,对④进展接种承受的方法是稀释涂布平板法。假设⑤中觉察无法区分菌落,说明稀释度不够,可以将③中取出的菌液进展梯度稀释。(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是接种环。承受灼烧方法对其进展灭菌。划线的某个平板经培育后,第一划线区域的划线上都不连续地长满了菌落,其次划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却;划线未从第一区域末端开头划线。7.(1)聚乙烯醇(PVA)多于(2)血细胞(血球)1.6×109 偏小(3)碘白色透亮斑的大小(直径)[解析](1PVA(PVA)为唯一碳源的选择培育基,目的是淘汰不能分解聚乙烯醇(PVA生长的菌落数目应明显多于选择培育基上的数目,由于比照组没有淘汰不能分解聚乙烯醇(PVA)的细菌。(2)在显微镜下计数微生物细胞的数量可直接用血球计数
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