微生物检验实验室奈瑟菌属标准操作规程

微生物检验实验室奈瑟菌属标准操作规程菌名葡萄糖麦芽糖乳糖蔗糖硝酸盐还原DNA酶淋病奈瑟菌+-----菌名葡萄糖麦芽糖乳糖蔗糖硝酸盐还原DNA酶淋病奈瑟菌+-----脑膜炎奈瑟菌++----卡他莫拉菌----++奈瑟菌属是一群触酶、氧化酶试验均阳性的革兰阴性球菌，包括脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、解乳糖奈瑟菌、灰色奈瑟菌、粘液奈瑟菌等11个种，临床上以脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌最为重要。2.标本类型血液、脑脊液、分泌物、痰、穿刺液、脓液标本。3.鉴定3.1形态与染色革兰阴性双球菌，肾形或咖啡豆状，，常成双排列，凹面相对。3.2培养特性初次分离时需在5%~10%二氧化碳环境中生长。在血琼脂平板上形成灰色、光滑、湿润、有光泽、透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落，直径1~2mm；在巧克力琼脂平板上，形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰蓝色的似露滴状菌落。3.3生化反应：氧化酶、触酶试验阳性；分解葡萄糖和麦芽糖，不分解蔗糖、甘露醇及乳糖；尿素酶、吲哚及硝酸盐还原试验均为阴性。3.4鉴别要点：3.4.1本菌特征：革兰阴性双球菌，氧化酶和触酶试验阳性，分解葡萄糖、硝酸盐还原试验阴性。3.4.2奈瑟菌与相似菌的鉴别；见表5-37。表5-37奈瑟菌与相似菌鉴别的关键性试验注：“+”为90%以上菌株阳性，“-”为90%以上菌株阴性，“V”为11%~89%菌株阳性。3.4..3淋病奈瑟菌和卡他莫拉菌的鉴别淋病奈瑟菌分解葡萄糖，硝酸盐还原试验阴性，而卡他莫拉菌则相反。两者虽可根据标本来源加以区分，但并非绝对，因为通过性行为，卡他莫拉菌也可引起尿道炎，而淋病奈瑟菌也能引起咽炎，应引起注意。涂片不典型，作淋病奈瑟菌培养，同时作普通培养，有细菌生长可排除淋病奈瑟菌。3.5操作步骤3.5.1涂片染色观察菌落特征，在血平板上挑取可以菌落，涂片染色镜检。3.5.2氧化酶试验参见《触酶试验标准操作规程》3.5.3鉴定从血平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最新版本文件.5.质量控制参见《质量控制程序》6.检验结果解释与分析脑膜炎奈瑟菌对青霉素、磺胺类、链霉素和金霉素敏感。产酶株引起感染应考虑用头孢曲松或头孢噻肟替代。检出B-内酰胺类酶阳性的淋病奈瑟菌则提示青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药。7.临床意义脑膜炎奈瑟菌存在于携带者和脑膜炎患者的鼻咽部，通过飞沫经空气传播，冬末春初为流行高峰。感染者为幼儿和青少年，感染后多数患者呈携带状态或隐性感染。少数出现上呼吸道感染症状，仅极少数发展成败血症，进而累及脑膜、脊髓膜，形成化脓性脑脊髓炎。8.鉴定流程菌落观察：灰色、湿润、透明或半透明菌落观察：灰色、湿润、透明或半透明涂片染色：G-双球菌，肾形或咖啡豆状脑膜炎奈瑟菌+麦芽糖-淋病奈瑟菌氧化酶和触酶试验阳性参考文献[1]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23；2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008[2]周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007[3]叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京：东南大学出版社，2006[4]MurrayPR.ManualO/FClinicalMircrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,2007[5]I