PCT测定试剂盒(荧光免疫层析法)工艺规程

10 编年制人：月 日日期：审年核人：月 日日期：批年准人：月 日日期：生年效 日月 日期：颁发部门： 质量部分发部门： 质量部受控编号：

颁发份数： 2 份降钙素原〔PCT〕测定试剂盒〔荧光免疫层析法〕1.产品名称、剂型、注册分类、规格、定义、组成及用途中文名称：降钙素原〔PCT〕测定试剂盒〔荧光免疫层析法〕规 格：25人份/盒、40人份/盒剂 型：诊断试剂6840来体外定量测定人血清、血浆样本中降钙素原〔PCT〕的含量。依据：《降钙素原〔PCT〕测定试剂盒〔荧光免疫层析法〕产品技术要求》目 录生产工艺流程图试剂卡制备生产工艺质量掌握点主要原辅料、包装材料消耗定额、能源消耗定额、物料平衡的计算方法包装要求、标签、说明书(附样本)与产品贮存方法及有效期设备一览表技术安全及劳动保护PCT.羊抗兔IgG抗体

化学试剂 抗体

试剂

化学试剂

兔IgG抗体微球偶联物鼠抗人PCT

化学试剂十万 包被液配制级 〔C线〕. 洁净区

包被液配制〔T线〕

样品垫处理液配制

探针稀释液配制 样本稀释液配制探针配制.样品垫处理划线〔NC〕

样品垫制作 #★十万级洁 枯燥净 NC膜枯燥#★ 贴膜组装 环境区 #

分装★不合格不合格品掌握 半成品检验合切条 格干十 燥万 环级洁 压卡装袋 境净 #区不合格半成品检验 不合格品掌握合格万级净洁 标准曲线制作 烧数据卡 半成品检验 合格 贴签、组装净区不合格不合格品掌握成品检验

不合格品掌握★：关键工序

：质量掌握点 合格#：湿度≤30%入库.试剂卡制备生产工艺工序一：样品垫制作工序二：ＮＣ膜制备工序三：样本稀释液制备工序四：贴膜组装工序五：切条工序六：压卡装袋工序七：烧数据卡工序八：降钙素原〔PCT〕测定试剂盒〔荧光免疫层析法〕试剂盒组装工序一：样品垫制作探针稀释液标准配方名称探针稀释液

物料名称三羟甲基氨基甲烷

配制1000ml使用量2.4228g

75人份使用量调整PH=8.4±0.2蔗糖

150g牛血清白蛋白吐温-20Proclin300

5g5ml0.3ml

0.12ml纯化水定容至1000ml配制方法依据标准配方准确称取三羟甲基氨基甲烷2.4228g，放入干净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个干净的磁力搅PH值应在8.4±0.2150g、牛血清白蛋白5g、吐温-205ml、Proclin3000.3ml，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml31000ml4～30℃保存备用，有效期7天。样品垫处理液标准配方名称物料名称配制1000ml使用量75人份使用量样品垫处理液十二水合磷酸氢二钠5.73g二水合磷酸二氢钠0.62g40ml调整PH=7.4±0.2纯化水定容至1000ml配制方法依据标准配方分别准确称取十二水合磷酸氢二钠5.73g0.62g800ml，放入1PH值应在7.4±0.2范围内，将充分溶解并调好pH的溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，全部溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天。样品垫制作2.1.3.1样品垫处理(1)将玻璃纤维平铺到水平槽内，倒入足量样品垫处理液，应让玻璃纤维完全浸泡入样品垫处理液中；浸泡至少15分钟，保证玻璃纤维完全浸透，玻璃纤维外表无气泡；玻璃纤维浸透后，将玻璃纤维取出，45度恒温枯燥4-6小时；枯燥完成后4～30℃封存备用，有效期7天。2.1.3.2样品垫制作处理后的样品垫裁切成29mm宽度；兔IgG抗体微球偶联物：鼠抗人NT抗体微球偶联物：探针稀释液=1:3:20的比例配制探针溶液；按4μl/cm喷量，将配制好的探针溶液均匀喷点到已裁切的样品垫上。在45度恒温枯燥、湿度小于30%的环境下枯燥4-6小时。注：枯燥湿度的掌握是本岗位的工艺要点之一，湿度应掌握在30%以下。枯燥完成后4～30℃封存备用，有效期14个月。注：枯燥后应避开长时间放置于4～30℃环境。工序二：ＮＣ膜制备包被液2.2.1.1标准配方名称物料名称配制1000ml使用量 75人份使用量包被液磷酸氢二钾二水合磷酸二氢钠氯化钠1.82g0.22g8.76g2.2.1.2配制方法

调整PH=7.2±0.2蔗糖 30g纯化水定容至1000ml

0.06ml依据标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g、二水合磷酸二氢钠0.22g、氯化钠8.76g，放入干净烧杯中，加纯化水800ml，放入1PH值应在7.2±0.2范围内，再参加蔗糖30g，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将充分溶解并调好pH的溶液缓缓倒入容积为1000ml31000ml，混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天。C线包被液使用包被液将羊抗兔IgG抗体稀释成终浓度为1mg/ml。充分混合后保存备用。注：现用现配T线包被液使用包被液将鼠抗人PCT抗体稀释成终浓度为1mg/ml。充分混合后保存备用。注：现用现配NC膜划线

按左图所示，将PVC底板摆好；除去PVC25mm面保护纸的下边缘，将硝酸纤维素膜〔NC〕贴在该区；注：1.粘贴上下边缘与相邻区上下边缘齐平；粘贴时留意动作轻柔，避开用手直接按压硝酸纤维素膜〔NC膜〕外表。贴吸水滤纸：按27mmPVC25mm处的保护纸，将切好的吸水滤纸贴在该区；注：吸水滤纸下边缘超出该区2mm掩盖硝酸纤维素膜〔NC膜〕；上边缘与底板边缘齐平。1μl/cmCTNC膜适当位置；C、T线区域间距应调整足够宽度以保证检测仪可以显著区分，习惯上C线NC10mm，CT6mm，T线与NC9mm。注：1、贴膜和包被过程应留意避开膜的污染。2、划线时的湿度条件是NC45％～65%。3、制备前需将CT〔NC〕平衡至一样温度。NC将包被的NC膜放置在相对湿度≤30%(环境温度18℃～26℃)条件下枯燥。NC膜枯燥时间至少6小时。枯燥完成后封存备用，有效期14个月。注：130%。枯燥后应避开长时间放置于4～30℃环境。工序三：样本稀释液制备2.3.1标准配方名称物料名称配制1000ml使用量 75人份使用量磷酸氢二钾1.82g二水合磷酸二氢钠0.22g氯化钠8.76g样本稀释液PH7.4±0.222.5mlS9Proclin300牛血清白蛋白

10g0.3ml5g配制方法依据标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g、二水合磷酸二氢钠0.22g、氯化钠8.76g，放入干净烧杯中，加纯化水800ml，放入1PH值应在7.4±0.2范围内，再依次参加S910g、Proclin3000.3ml、牛血清白蛋白5g，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，全部溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀后4-30℃保存备用，有效期7天。分装将上面配制好的样本稀释液依据300μl/支的装量进展分装，4-30℃条件下保存，有效期12个月。2.3.4标签打印、贴签2.3.5质控工程和标准工程标准外观样本稀释液为无色透亮液体，无悬浮物及沉淀物。净含量pH样本稀释液净含量应在标示值的90%～110%之间。7.4±0.2工序四：贴膜组装〔湿度≤30%〕贴样品垫：将样品垫贴在已包被好的NC28mm1mm掩盖NC贴好后，应如以下图所示；注：1NC膜三者之间的完全全都。未经清场，不得贴膜组装不同批号、规格、品种的产品。2、清场在本岗位必需得到强调。3、湿度的掌握是本岗位的工艺要点之一，湿度应掌握在湿度≤30%。工序五：切条接通切条机电源，设定切条程序，设定切割宽度为4mm；将大卡平放入切条机平台轨道中，正面朝上，调整切条机上的螺丝，调整卡槽宽度与大卡宽度一样按操〔4〕将全部大卡头尾相接，渐渐放于切条机上，收集切好的条子，除去有标记〔不合格〕的条子。注：湿度的掌握是本岗位的工艺要点之一，湿度应掌握在≤30%。工序六：压卡装袋装条：将切好的条子放置在底卡的卡槽内，面板加样孔位置对应样本垫；注：不得直接按压中间部位，如条子上消灭划痕，按不合格品处理。盖面板：将面板与底板对合，用力按压，使面板与底板吻合。压卡：按《平板压壳机操作规程》压卡注：压卡时应使卡竖向排列在传送带上，并严禁将卡重叠放置。1份试剂卡、1袋枯燥剂装入铝箔袋中，按《封口机操作规程》封好铝箔袋。标签打印、贴签。4-3012个月。质控工程和标准。工程线性范围

标准试剂的线性范围为〔0.1-60〕ng/mL，在此线性范围内，线性相关系数r应0.990。准确度 回收率在85%～115%之间。注：1、避开混淆是本工序的要点。确保指令、包装物标示和待包装产品三者之间的完全全都。未经清场，不得包装不同批号、规格、品种的产品。2、清场在本岗位必需得到强调。3、湿度的掌握是本岗位的工艺要点之一，湿度应掌握在≤30%。工序七：烧数据卡产品校准品赋值用PCTPCT103定结果的均值，以浓度点为自变量，以测定结果均值为因变量求出线性回归方程，做曲线。随机抽取的同一批号的不同浓度的PCT10PCT不确定度：U=Uc〔y〕*K，包含因子K=295%。产品校准品确认用PCT工作校准品和PCTPCT30两组测定数值间的相关系数rr0.97515%假设满足以上要求，则该批PCT产品校准品的值确定；假设无法满足，则需重复赋值过程，以确定该批PCT产品校准品的值。产品校准品做曲线用产品校准品检测待检半成品试剂盒，每个浓度点分别在四台荧光仪上【信号测试】模块平行检测三次并点击【EXCELEXCEL12个检测卡的T/C数值汇总到一个EXCEL的T/CT/C块中，依据需要在【拟合算法】中选择拟合方式并点击【拟合】即生成曲线。数据卡的生成在【生成ID文件】模块中点击左下方【生成IDHEX查看】中点击【写ID】，此曲线即烧制到数据卡〔ID〕中。烧制工序SnartPROSOP。质控工程和标准工程线性范围

标准试剂的线性范围为〔0.1-60〕ng/mL，在此线性范围内，线性相关系数r应0.990。准确度 回收率在85%～115%之间。工序八：降钙素原〔PCT〕测定试剂盒〔荧光免疫层析法〕试剂盒组装本试剂盒内容物由以下组分构成：组 分试剂卡样本稀释液数据卡说明书注：

25人份/盒1/袋25/盒300μl/瓶25/盒11

40人份/盒1/袋40/盒300μl/瓶40/盒111、避开混淆是本工序的要点。确保指令、包装物标示和待包装产品三者之间的完全全都。未经清场，不得包装不同批号、规格、品种的产品。2、清场在本岗位必需得到强调。质控工程和标准工程 标准试剂卡外观平坦，材料附着结实；外观样本稀释液为无色透亮液体，无悬浮物及沉淀物。物理 净含量 样本稀释液净含量应在标示值的90%～110%之间。性状膜条宽度 膜条宽度应不小于3.9mm。液体移行速度液体移行速度应不低于25mm/min。空白限 ≤0.1ng/mL。线性范围准确度

试剂的线性范围为〔0.1-60〕ng/mLr0.990。85%～115%之间。测量周密度

重复性批间差

用质控品重复测试，所得结果的变异系数〔CV〕≤15%。用质控品重复测试3个批号的试剂盒，所得结果的变异系数〔CV〕≤15%。试剂在4℃～30℃密封避光保存，原包装存放的试剂有效期为12个月；取效期稳定性 末的样品检测外观、膜条宽度、液体移行速度、空白限、线性范围、重复性、准确度，应分别符合其要求。质量掌握点工序 质量掌握点称量加样1、样品垫制作混合喷探针称量加样2、ＮＣ膜制备混合

生产过程重量体积装量、时间、转速速度、喷量重量体积装量、时间、转速

质量掌握项

频次中间产品性状外观每批均匀度均匀度性状外观每批均匀度划线速度划线速度均匀度称量重量性状加样体积外观贴签品名、位置端正、结实、无皱褶摆管数量与装配数目核对外观分装体积外观、体积准确度封盖严密度、外漏严密、无外漏物每批制备标签打印

速度、位置

位正、字迹清楚，无错印、漏印贴签品名、位置端正、结实、无皱褶4、贴膜组装贴膜位置端正、结实每批5、切条切条速度、位置宽度每批6、压卡装袋压卡封口速度、位置速度、位置过紧、过松漏气每批标签打印贴签7、烧数据卡 标准曲线制作装盒8、试剂盒组装 标签打印贴签

速度、位置品名、位置作、需要复核速度、组分速度、位置品名、位置

位正、字迹清楚，无错印、漏印端正、结实、无皱褶准确写入数据、复核无误 每批组分齐全、无缺漏位正、字迹清楚，无错印、每批漏印端正、结实、无皱褶生产过程物料平衡的计算方法、数据处理各工序分步收率本产品每个批次，每个关键工序生产完毕都必需物料平衡，进展物料平衡是避开或准时觉察过失与混淆的有效措施。NCNC膜物料平衡=实际反响膜制备量/理论反响膜制备量×100%95-100%。注：理论反响膜制备量=液体配制量/30μl〔板〕样品垫物料平衡样品垫物料平衡率=实际样品垫量/理论样品垫量×100%95-100%。注：理论样品垫量=液体配制量/120μl〔板〕稀释液物料平衡稀释液物料平衡=实际分装瓶量/理论分装瓶量×100%95-100%。注：理论分装瓶量=稀释液总量/300μl数据卡物料平衡数据卡物料平衡=实际烧数据卡量/理论烧数据卡量×100%95-100%包材物料平衡包材物料平衡=实际包材用量/理论包材用量×100%95-100%成品物料平衡成品物料平衡=实际产量/理论产量×100%95-105%。数据处理凡收率在合格范围内的，方可“流转”投入下一工序。凡收率高于或低于合格范围内，应马上贴“待验”标志，不能递交下工序，并由觉察人填写偏差处理单，经况下，方可放行。包装要求、标签、说明书(附样本)与产品贮存方法及有效期包装规格：25/盒、40/盒。铝箔袋规格：1/袋。试剂盒装量25T251