动物细胞融合与单克隆抗体 省赛获奖

动物细胞工程

动物细胞融合和

单克隆抗体广水一中高二生物组温故知新问题思考Q1Q2获得白菜-甘蓝利用了什么技术？植物体细胞杂交此技术的过程？？？？？再分化？植物细胞杂交技术利用什么原理？用什么方法可以诱导植物细胞融合？一、原理：细胞膜具有流动性细胞的全能性二、诱导方式：物理法、化学法植物细胞杂交技术最终获得什么？三、用途：获得杂种植株温故知新思考不同种动物体细胞能否杂交？过程如何？与植物体细胞杂交相比有何不同？请阅读课本P52，填写下表比较获得杂交细胞获得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振动、电激）化学（聚乙二醇）使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目结果诱导方法动物细胞融合技术意义细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。利用杂交瘤技术，制备单克隆抗体。单克隆抗体什么是抗体?由什么细胞分泌产生？是否具有特异性？人们获得抗体的传统方法：动物体内抗体（抗原不纯）（抗体不纯）筛选单一浆细胞不能无限增殖产生大量抗体

抗原

浆细胞血清思考怎样大量获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？B淋巴细胞

－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞

－－能无限增殖杂交细胞设计方案：一个（体外不能无限增殖）杰出的成果------单克隆抗体GeorgeKohlerCésarMilstein荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖单克隆抗体的制备问题思考Q1Q2细胞两两融合后，有哪些类型？B-B;B-瘤;瘤-瘤哪种是需要的类型，要筛选吗？单克隆抗体的制备问题思考Question经过选择培养基筛选的杂交瘤细胞群进行克隆是否就得到产生纯度高的抗体？还需怎么办？单克隆抗体的制备有限稀释法稀释多次稀释对能产生特异性抗体的单个杂交瘤细胞进行克隆，即单细胞克隆。由它产生的抗体，即单克隆抗体。将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。单克隆抗体杂交细胞灭活的病毒等手段小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞经免疫的小鼠提取杂交瘤细胞第一次筛选用特定的选择性培养基第二次筛选能产生专一抗体的杂交瘤细胞体外培养注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体1.单抗制备过程中应用了那些技术？动物细胞融合动物细胞培养2.此过程中至少进行了几次筛选？目的相同吗？3.单克隆抗体的优点？特异性强，灵敏度高，可大量制备。（1）作为诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速（如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等）单克隆抗体的应用（2）运载药物生物导弹=单克隆抗体+药物（治疗肿瘤）(“生物导弹”—单抗导向，药物为弹头)单克隆抗体的应用1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞

C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞A2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A.诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段基本相同C.操作步骤基本相同D.都能形成杂种细胞D考考你3.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（）A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成D4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（）

A．PEG

B．灭活的病毒C．电刺激D．离心B考考你5.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身