第二章抗原抗体反应课件

第二章抗原抗体反应第三临床医学院临床检验教研室王飞副主任医师,副教授第二章抗原抗体反应第三临床医学院1第一节抗原抗体反应的原理

一、抗原抗体结合力

二、抗原抗体的亲和性和亲和力

三、亲水胶体转化为疏水胶体第二节抗原抗体反应的特点一、特异性二、可逆性三、比例性四、阶段性第一节抗原抗体反应的原理

一、抗原抗体结合力

二、抗2第三节影响抗原抗体反应的因素

一、反应物自身因素

二、环境因素第四节免疫学检测技术的类型思考题小结第三节影响抗原抗体反应的因素

一、反应物自身因素

3一、教学目的：1、掌握抗原抗体反应的原理、特点和影响因素。2、熟悉抗原抗体反应的类型。3、了解免疫学检测技术的类型。

一、教学目的：4抗原指能刺激机体免疫系统，并能与相应免疫应答产物（抗体或致敏淋巴细胞）在体内或体外发生特异性结合的物质。抗原指能刺激机体免疫系统，并能与相应免疫应答产5抗原的两个重要特性免疫原性

抗原能刺激机体产生免疫应答，诱生抗体或致敏淋巴细胞的能力。抗原性（免疫反应性）抗原可在体内外与其所诱生的抗体或或致敏淋巴细胞发生特异性结合的能力。抗原的两个重要特性免疫原性抗原能刺激机体产生免疫应答，6按抗原的性能分类完全抗原：具有免疫原性和抗原性的物质。不完全抗原（半抗原）：只有抗原性而无免疫原性的物质。半抗原多为简单的小分子物质，当与大分子蛋白质载体结合后才具有免疫原性。按抗原的性能分类完全抗原：具有免疫原性和抗原性的物质。7抗原的特异性免疫原性的特异性：某种抗原只能刺激机体产生某种特定的应答产物（抗体或致敏淋巴细胞)如：伤寒杆菌→伤寒杆菌抗体抗原性的特异性：抗原只能与其相应的抗体或致敏淋巴细胞结合如：伤寒杆菌只能与伤寒杆菌抗体结合抗原的特异性免疫原性的特异性：某种抗原只能刺激机体产生某种特8抗原决定簇是指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学集团，又称表位。抗原决定簇与相应淋巴细胞表面的抗原受体结合，诱导免疫应答。抗原决定簇是指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学集团，又称表9第二章抗原抗体反应课件10共同抗原表位与交叉反应抗原的特异性是相对的，因为天然的抗原分子表面可存在着多种表位，不同的抗原分子表面可存在相同或相似的表位，可引起交叉反应。1）共同抗原表位：不同抗原之间含有的相同或相似的抗原表位2）交叉反应：

抗体或致敏淋巴细胞对具有相同或相似表位的不同抗原的反应共同抗原表位与交叉反应抗原的特异性是相对的，因为天然的抗原分11交叉反应血清：Ab1、Ab2+AgA特异性反应+AgB交叉反应意义与疾病发生有关：如急性肾小球肾炎用于疾病诊断：如外斐反应引起生物学假阳性：如肥达反应交叉反应血清：Ab1、Ab2+AgA12与疾病发生有关：如急性肾小球肾炎A组溶血性链球菌某些型别的胞壁抗原和胞浆抗原与人肾基底膜和心瓣膜成分相同用于疾病诊断：如外斐反应用普通变形杆菌的某些OX菌株抗原代替立克次体抗原引起生物学假阳性：如肥达反应伤寒沙门菌抗O增高，抗H不高与疾病发生有关：如急性肾小球肾炎13免疫球蛋白是B细胞识别抗原后活化增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质，主要存在于血清等体液中，约占血浆蛋白总量的20%。

免疫球蛋白是B细胞识别抗原后活化增殖分化为浆细14抗体是B细胞识别抗原后活化增殖分化为浆细胞所产生的一类能与相应抗原特异性结合的球蛋白。抗体是免疫球蛋白，而免疫球蛋白并非都具有抗体的活性。抗体是B细胞识别抗原后活化增殖分化为浆细胞所产生的一类能与相15免疫球蛋白的基本结构(一)重链(heavychain，H）2条轻链（lightchain，L）2条(二)可变区（variableregion,V区）恒定区（constantregion,C区）(三)超变区（hyper-variableregion,HVR）,又称互补决定区(complementarydeterminingregion,CDR)骨架区（frameworkregion,FR）(四)铰链区（hingeregion）免疫球蛋白的基本结构(一)重链(heavych16１Ｈ链：Ig分五类即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE，它们的Ｈ链分别由α链，γ链，μ链，δ链，ε链。２Ｌ链经二硫键连接在Ｈ链的氨基端。可将Ｌ链分为κ链和λ链

（一）重链和轻链１Ｈ链：（一）重链和轻链17第二章抗原抗体反应课件18（二）可变区和恒定区１可变区：在Ig多肽链Ｎ端Ｌ链的1/2与Ｈ链的1/4或1/5区域内，氨基酸的种类，排列顺序与构型变化很大，故称该区为可变区２恒定区：在Ig多肽链羧基端（Ｃ端）Ｌ链的1/2与Ｈ链的３/4或４/5区域内，氨基酸的种类，排列顺序与构型相对恒定，故称该区位恒定区（二）可变区和恒定区１可变区：在Ig多肽链Ｎ端Ｌ链的1/2与19（三）超变区HVRVH和VL的三个高变区共同组成Ig与抗原结合的部位，该部位形成一个与表位互补的表面，称为互补性决定区。不同的抗体其CDR序列不相同，并因此决定抗体的特异性。（三）超变区HVRVH和VL的三个高变区共同组成Ig与抗原20（三）绞链区在IgＧ，IgＡ的CH1与CH2之间的区域称为绞链区。此区域含有大量脯氨酸，富有弹性及伸展性，能使抗体分子与不同距离的抗原决定簇结合，也利于暴露Ig分子上的补体C1q结合点而激活补体。（三）绞链区在IgＧ，IgＡ的CH1与CH2之间的区域称为绞21第二章抗原抗体反应课件22第二章抗原抗体反应课件23第一节抗原抗体反应的原理

抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。物质基础:抗原表位与抗体高变区间的互补结合抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合抗原抗体之间的结合力亲水胶体转化为疏水胶体第一节抗原抗体反应的原理抗原抗体反应:指抗原与相应抗体24静电引力（electrostaticforces）范德华引力:作用最小（vanderWaalsinteractions）氢键:最具特异性（hydrogenbond）疏水作用力:作用最大（hydrophobicinteractions）

抗原抗体结合力示意图一、抗原抗体结合力静电引力抗原抗体结合力示意图一、抗原抗体结合力25抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而结合的强度，是抗原抗体间固有的结合力亲和性(affinity)抗原抗体亲和力示意图二、抗原抗体的亲和力和亲合力抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而结合的26一个抗体分子与整个抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关。即多价优势。亲合力(avidity)抗原抗体亲合力示意图亲合力(avidity)抗原抗体亲合力示意图27

可见反应抗原抗体复合物(疏水胶体)电解质抗原(亲水胶体)

抗体(亲水胶体)

+三、亲水胶体转化为疏水胶体可见反应抗原抗体复合物电解质抗原抗体+28第二节抗原抗体反应的特点特异性可逆性比例性阶段性第二节抗原抗体反应的特点29特异性：抗原与抗体结合反应的专一性抗原抗体反应特异性示意图分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性一、特异性特异性：抗原与抗体结合反应的专一性抗原抗体反应特异性示意图分30两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应交叉反应（crossreactions）抗原抗体交叉反应示意图两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此31二、可逆性可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性影响因素：抗体对相应抗原的亲合力－亲合力越高，结合越牢固，越不易解离环境因素对复合物的影响－pH、离子强度

二、可逆性可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下32三、比例性比例性：以沉淀反应为例，若在加入固定量抗体的一组试管中在依次加入递增浓度的相应可溶性抗原，根据所形成的沉淀及抗原抗体的比例关系可绘制出反应曲线。三、比例性比例性：以沉淀反应为例，若在加入固定量抗体的一组试33前带(prezone)：抗体过量后带(postzone)：抗原过量等价带(equivalencezone)：

抗原抗体比例合适

比例性：抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系三、比例性前带(prezone)：抗体过量比例性：抗原与抗体发生可见反34第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象四、阶段性第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见四、阶段性35第三节影响抗原抗体反应的因素抗原、抗体反应物的自身因素环境因素第三节影响抗原抗体反应的因素抗原、抗体反应物的自身因素36一、反应物自身因素抗原:理化性状、表位种类和数目抗体:来源、特异性、亲和性、效价一、反应物自身因素抗原:理化性状、表位种类和数目37电解质:生理盐水或缓冲液酸碱度:pH6～pH9温度:15℃～40℃，37℃最适二、环境因素电解质:生理盐水或缓冲液二、环境因素38反应类型实验技术结果判断凝集反应直接凝集试验观察凝集现象间接凝集试验同上抗球蛋白试验同上沉淀反应液相沉淀试验观察沉淀，检测浊度免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧补体参与的反应补体溶血试验观察测定溶血现象补体结合试验同上第四节免疫学检测技术的类型反应类型实验技术结果判断凝集反应直接凝集试验观察凝集现象间接39反应类型实验技术结果判断中和反应病毒中和试验检测病毒感染性毒素中和试验检测外毒素毒性标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象放射免疫技术检测放射性强度酶免疫技术检测酶底物显色发光免疫技术检测发光强度金免疫技术检测金颗粒沉淀反应类型实验技术结果判断中和反应病毒中和试验检测病毒感染性毒40小结抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。抗原抗体之间的结合力涉及静电引力、范德华引力、氢键和疏水作用力。抗原抗体反应的特点是特异性、可逆性、比例性和阶段性。影响抗原抗体反应的因素包括反应物的自身因素和环境因素。免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应，免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。小结抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性411．什