主管检验技师考试临床医学检验微生物检验讲义细菌形态学检查法

细菌形态学检查法•考点显微镜的种类及应用不染色细菌标本检查法细菌染色标本检查法【内容讲解】细菌的形态学检查：不染色标本检查法染色标本检查法显微镜是观察细菌形态所必备的基本工具形态学检查（镜检）的意义：可以迅速了解标本中有无细菌及大致的菌量；根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原菌的初步识别和分类，为进一步作生化反应、血清学鉴定提供依据。可得到初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义。一、显微镜普通光学显微镜暗视野显微镜相差显微镜荧光显微镜电子显微镜普通光学显微镜以自然光或灯光为光源，显微镜的最大分辨率为波长的一半，即0.25〃m。暗视野显微镜多用于检查不染色的活细菌和螺旋体的形态及运动观察。第1页共6页

ObjectivelensCondenserDark-fieldstopObjectivelensCondenserDark-fieldstop相差显微镜利用相差板的光栅作用，将光相的差异转换成光的强度的差异，使细菌中的某部分结构比其他部分深暗，衬托出鲜明的对比。本法主要用干检杳不染色活细菌的形态及某些内部结构A^nuitt Cood«nHrPhftscContrast：LightPalhwiysQl>14C(iv4™1Sp«cimonA^nuitt Cood«nHrPhftscContrast：LightPalhwiysQl>14C(iv4™1Sp«cimon1From iSource Flgum1PhaioRiftg□«n^ci4dLight荧光显微镜以高压汞灯产生的紫外光或蓝紫光为光源细菌经荧光素染色后，置于荧光显微镜下，即可激发荧光，在暗色的背景下可以看到发射荧光的细菌。用于细菌、病毒等的诊断或鉴别。第2页共6页电子显微镜以电子流代替光源能分辨1nm的物体，细菌的表面形态和内部超微结构均能清楚地显现。扫描电子显微镜：适于对细菌表面结构及附件的观察。透射电子显微镜：适于观察细菌内部的超微结构。二、不染色细菌标本的检查主要用于检杳生活状态下细菌的动力及运动状况压滴法悬滴法毛细管法：厌氧菌动力观察动力判断：细菌如有动力，有明显的方向性位移细菌如无动力，受水分子撞击细菌呈现布朗运动，只在原地颤动而无位置的改变。三、细菌染色标本的检查在普通光学显微镜下可以观察细菌的形态、大小、排列、染色性、特殊结构（芽胞、荚膜、鞭毛）、异染颗粒等。常用染料：①碱性染料（basicdye）一带正电染料。其阳离子部分为发色基团，可与细胞中带负电的组分结合。如碱性复红、结晶紫、美蓝等。②酸性染料（Aciddye）一带负电染料。其阴离子部分为发色基团，可与细胞中带正电的组分结合。如伊红、刚果红等。③复合染料一碱性染料和酸性染料的复合物。如瑞氏染料（伊红美蓝）、姬姆萨染料（伊红天青）等。细菌染色法第3页共6页细菌染色的基本程序：涂片f干燥,固定一染色(初染一媒染一脱色一复染)单染色法用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后，可观察其形态、排列、大小及简单的结构，但不能显示各种细菌染色性的差异。复染色法用两种或两种以上染料染色的方法，称为复染色法或鉴别染色法。常用的有革兰染色法和抗酸染色法。革兰染色法(GramStain)由丹麦医生HansChristianGram于1884年创立。是细菌学中最经典、最常用的染色方法。方法：结晶紫一一碘液一一95%酒精一一稀释石炭酸复红革兰染色法(GramStain)临床意义：鉴别细菌：将所有细菌分为G+菌和G-菌两大类，可初步识别细菌，缩小范围，有助于进一步鉴定。选择药物参考与细菌致病性有关：大多G+菌的致病物质是外毒素，而G-菌大多能产生内毒素，两种致病作用不同。抗酸染色将细菌分为两大类：即抗酸性细菌和非抗酸性细菌。临床上主要用于结核病、麻风病等的细菌检查。疑似结核分枝杆菌感染的标本，经抗酸染色后，若查见红色抗酸杆菌，可报告为“找到抗酸分枝杆菌”，即可作出初步鉴定。对临床疾病的诊断和治疗具有重要参考价值。【例题】用于观察细菌超微结构的显微镜是A、普通光学显微镜B、暗视野显微镜C、相差显微镜第4页共6页D、荧光显微镜E、电子显微镜[[答疑编号502389070101]【正确答案】E【例题】不属于细菌形态学观察的是A、平板分区划线观察单个菌落B、革兰染色观察细菌染色性C、鞭毛染色观察细菌的动力D、光镜观察细菌形态E、暗视野显微镜观察细菌动力t[答疑编号502389070102]【正确答案】A【例题】不染色标本在普通光学显微镜下主要用于检查细菌的A、形态B、动力C、结构D、大小E、排列方式翁[答疑编号502389070103]【正确答案】B【例题】不染色标本在普通光学显微镜下主要用于检查细菌的动力。常用方法有A、玻片法B、试管法C、压滴法D、划线法E、悬滴法翁[答疑编号502389070104]【正确答案】CE【例题】结核分枝杆菌常用的染色法是A、姬姆萨染色法B、抗酸染色C、革兰染色D、镀银染色法E、墨汁染色法第5页共6页•[答疑编号502389070105]【正确答案】B【例题】革兰染色所用染液的顺序是A、稀释复红一碘液一酒精一结晶紫B、结晶紫一酒精一碘液一稀释复红C、稀释复红一结晶紫一碘液