2023版药典培养基适用性验证

2024版药典培养基适用性验证培育基验证文件

验证文件名称验证文件编码计数培育基适用性检查验证方案TS-YZ-2522-01

制药有限公司

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验证立项申请表

验证立项题目计数培育基适用性检查的验证立项编号TS-YZ-2522-01验证形式验证

立项部门质量部申请日期年月日验证对象计数培育基适用性

验证目的及验证内容

需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培育基应进行培育基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培育基和沙氏葡萄糖琼脂培育基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌数测定。

主管部门

审核意见

同意对计数培育基适用性检查试验方案进行验证。

年月日

对验证方案的编制及实施要求验证方案编制应科学，合理，方法应切实可行，实施必需根据方案进行。

验证总负

责人批准

经审核批准对计数培育基适用性检查进行验证。

签字：年月日

验证方案的审批

起草部门签名日期化验室

质量部

批准部门签名日期质量部

验证总负责人

验证方案名目

1、概述

2、验证目的

3、验证范围

4、验证项目小组成员及职责

5、验证合格标准

6、试验材料

7、菌液制备

8、适用性检查

9、验证记录

10、验证结论及综合评价

计数培育基适用性检查的验证方案

1.验证目的：

需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培育基应进行培育基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培育基和沙氏葡萄糖琼脂培育基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌总数测定。

2.参照标准：《中国药典》2024年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。

3.验证项目：胰酪大豆胨琼脂培育基和沙氏葡萄糖琼脂培育基的适用性检查。

4.验证小组人员及职责：

人员组成姓名部门职务/职称职责

组长质量部副部长

负责验证期间各部门的协调及整个验

证过程的详细实施。

成员化验室主任

负责验证方案的起草及详细实施，确

保验证过程能按方案规定的程序进

行，负责各种验证资料（检查结果）

的整理，负责验证报告的编写。

化验室化验员

化验室化验员

负责验证方案的审核及批准；负责出具检

验报告；审查验证报告及发放验证报告；

负责验证文件的管理

化验室化验员

负责验证报告的编写规范；审查验证

报告及发放验证报告。

5.合格标准：被检固体培育基上的菌落平均数与对比培育基上的菌落平均数的比值应在0.5～2范围内，且菌落形态大小与对比培育基上的菌落全都。

6.试验材料：

6.1.被验证产品：胰酪大豆胨琼脂培育基、沙氏葡萄糖琼脂培育基。

6.2.仪器设备：

6.2.1.YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器

6.2.2.GHT-00双人净化工作台

6.2.3.BSC-110011A2-X生物平安柜

6.2.4.MJ-250I型霉菌培育箱(20～25℃)

6.2.5.LRH-250生化培育箱(30～35℃)

6.2.6.电热恒温干燥箱

6.2.7微波炉

6.3.验证用培育基

名称生产厂家批号

6.4.验证用菌株：(第代)

验证菌株培育基培育温度培育时间（小时）

7.菌液制备

按6.4规定程序培育各试验菌株。取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽

孢杆菌、白色念珠菌的新奇培育物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为

50~100cfu∕ml的菌悬液；取黑曲霉的新奇培育物加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将孢子洗脱。然后，采纳相宜的方法吸

出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋

白胨缓冲液制成约为50~100cfu∕ml的黑曲霉孢子悬液。

8.适用性检查：

8.1.取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的菌液（50～100cfu/ml）各

1ml，每株试验菌平行制备2个平皿，分别注入2个无菌平皿中，马上倾注胰酪大豆胨琼脂培育基，并作阴性对比，混匀，凝固，置30～35℃培育24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分别注入2个无菌平皿中，马上倾注沙氏葡萄糖琼脂培育基，并作阴性对比，混匀，凝固，置20～25℃培育72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50～100cfu/ml）1ml，注入无菌平皿中，马上倾注沙氏葡萄糖琼脂培育基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对比，混匀，凝固，置20～25℃培育168小时，计数。

8.2.取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的菌液（50～100cfu/ml）各

1ml，分别注入无菌平皿中，马上倾注胰酪大豆胨琼脂对比培育基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对比，混匀，凝固，置30～35℃培育24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，马上倾注沙氏葡萄糖琼脂对比培育基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对比，混匀，凝固，置20～25℃培育72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，马上倾注沙氏葡萄糖琼脂对比培育基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对比，混匀，凝固，置20～25℃培育168小时，计数。

9.验证记录

10.验证结论及综合评价

评价人：日期：

附表1：

计数培育基适用性检查验证记录

试验时间年月日完成时间年月日

验证菌株平皿号验证培育基组

（cfu∕ml）

阴性对比

（cfu∕ml）

对比培育基组

(cfu∕ml)

阴性对比

（cfu∕ml）

菌落平均数的比值

（应在0.5～2范围

大肠埃希菌(培育3天计数)

1--

2--平均值

金黄色葡萄球菌(培育3天计数)

1--

2--平均值

枯草芽孢杆菌(培育3天计数)

1--

2--平均值

白色念珠菌

(培育5天开头计数)

1--

2--平均值

黑曲霉菌1--

文案大全

(培育5天开头计数)2--平均值

结论

复核人试验人

复核人试验人

文案大全

验证报告的审批

起草部门签名日期化验室

质量部

批准部门签名日期质量部

验证总负责人

验证报告

1.验证目的：

需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培育基应进行培育基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培育基和沙氏葡萄糖琼脂培育基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌总数测定。

2.参照标准：《中国药典》2024年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。

3.验证项目：胰酪大豆胨琼脂培育基和沙氏葡萄糖琼脂培育基的适用性检查。

4.验证小组人员及职责：

人员组成姓名部门职务/职称职责

组长质量部副部长

负责验证期间各部门的协调及整个验

证过程的详细实施。

成员化验室主任

负责验证方案的起草及详细实施，确

保验证过程能按方案规定的程序进

行，负责各种验证资料（检查结果）

的整理，负责验证报告的编写。

化验室化验员

化验室化验员

负责验证方案的审核及批准；负责出具检

验报告；审查验证报告及发放验证报告；

负责验证文件的管理

化验室化验员

负责验证报告的编写规范；审查验证

报告及发放验证报告。

5.合格标准：被检固体培育基上的菌落平均数与对比培育基上的菌落平均数的比值应在0.5～2范围内，且菌落形态大小与对比培育基上的菌落全都。

6.试验材料：

6.1.被验证产品：胰酪大豆胨琼脂培育基、沙氏葡萄糖琼脂培育基。

6.2.仪器设备：

6.2.1.YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器

6.2.2.GHT-00双人净化工作台

6.2.3.BSC-110011A2-X生物平安柜

6.2.4.MJ-250I型霉菌培育箱(20～25℃)

6.2.5.LRH-250生化培育箱(30～35℃)

6.2.6.电热恒温干燥箱

6.2.7微波炉

6.3.验证用培育基

名称生产厂家批号

6.4.验证用菌株：(第代)

验证菌株培育基培育温度培育时间（小时）

7.菌液制备

按6.4规定程序培育各试验菌株。取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽

孢杆菌、白色念珠菌的新奇培育物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为

50~100cfu∕ml的菌悬液；取黑曲霉的新奇培育物加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将孢子洗脱。然后，采纳相宜的方法吸

出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋

白胨缓冲液制成约为50~100cfu∕ml的黑曲霉孢子悬液。

8.适用性检查：

8.1.取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的菌液（50～100cfu/ml）各

1ml，每株试验菌平行制备2个平皿，分别注入2个无菌平皿中，马上倾注胰酪大豆胨琼脂培育基，并作阴性对比，混匀，凝固，置30～35℃培育24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分别注入2个无菌平皿中，马上倾注沙氏葡萄糖琼脂培育基，并作阴性对比，混匀，凝固，置20～25℃培育72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50～100cfu/ml）1ml，注入无菌平皿中，马上倾注沙氏葡萄糖琼脂培育基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对比，混匀，凝固，置20～25℃培育168小时，计数。

8.2.取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的菌液（50～100cfu/ml）各

1ml，分别注入无菌平皿中，马上倾注胰酪大豆胨琼脂对比培育基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对比，混匀，凝固，置30～35℃培育24小时，计数；取白色念珠菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，马上倾注沙氏葡萄糖琼脂对比培育基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对比，混匀，凝固，置20～25℃培育72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50～100cfu/ml）各1ml，分别注入无菌平皿中，马上倾注沙氏葡萄糖琼脂对比培育基，每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对比，混匀，凝固，置20～25℃培育168小时，计数。

9.验证记录

10.验证结论及综合评价

附表1：

计数培育基适用性检查验证记录

试验时间年月日完成时间年月日

验证菌株平皿号验证培育基组

（cfu∕ml）

阴性对比

（cfu∕ml）

对比培育基组

(cfu∕ml)

阴性对比

（cfu∕ml）

菌落平均数的比值

（应在0.5～2范围

大肠埃希菌(培育3天计数)

1--

2--平均值

金黄色葡萄球菌(培育3天计数)

1--

2--平均值

枯草芽孢杆菌(培育3天计数)

1--

2--平均值

白色念珠菌

(培育5天开头计数)

1--

2--平均值

黑曲霉菌1--

文案大全

(培育5天开头计数)2--平均值

结论

复核人试验人

复核人试验人

文案大全

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验证证书

验证文件名称计数培育基适用性检查的验证验证文件编号TS-YZ-2522-01

验证对象计数培育基适用性检查

验证结论合格

证书编号YZ-2522

验