小柴胡汤对非酒精性脂肪肝大鼠肝功能及血脂的影响

小柴胡汤对非酒精性脂肪肝大鼠肝功能及血脂的影响

肝烹饪是指由各种原因引起的肝豆积累过多的病变。脂肪性肝病正严重威胁国人的健康,成为仅次于病毒性肝炎的第2大肝病。其特点是肝细胞发生显著脂肪变性,可导致肝细胞坏死,进一步演变为肝纤维化、肝硬化。目前,现代医学对脂肪肝的治疗缺乏有效的手段,而且降脂药物有肝脏损伤的副作用。祖国医学对肝脏的疾病有独特的认识,认为脂肪肝多由饮食、情志所伤,日久形成“瘀、痰、脂、食、气”五种病理改变,治疗上宜给予消导行滞,疏理解郁治疗。小柴胡汤方出自《伤寒论》,具有和枢机、解郁结、行气机、畅三焦、化痰浊之功效,现代药理研究表明其核心配伍药柴胡-黄芩有明确的保肝作用。因此,本研究拟探讨小柴胡汤治疗实验大鼠非酒精性脂肪肝的效果及其机制。1材料和方法1.1实验动物1.2化学试剂及试剂脱氧胆酸钠(中国医药(集团)上海化学制剂公司进口分装);甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)检测试剂盒(上海科欣生物技术研究所生产);丙硫氧嘧啶购自国药集团化学试剂有限公司;TC购自西安沃尔森生物技术有限公司,所有中药材均购自西安交通大学医学院第一附属医院中药房。1.3方法1.3.1甘草、生姜、甘草小柴胡汤的主要成分:柴胡240g,法半夏120g,黄芩120g,党参120g,大枣120g,甘草80g,生姜64g。按照各药在方中的比例准确称取,混匀,加入10倍量水,浸泡6h后加热煎煮1h,滤出药液,再加入8倍量水,煎煮1h,过滤,将两次煎煮所得药液合并,水浴浓缩为含生药1.50g/mL的液体,灭菌4℃冰箱储存备用,用时微温。1.3.2小柴胡汤灌胃脂肪肝模型大鼠的造模及给药:实验动物适应性喂养1周后,随机分为正常对照组、脂肪肝模型组、小柴胡汤治疗组和易善复治疗组共4组,每组各15只。正常对照组喂食全价营养颗粒饲料喂养,饮自来水;模型组和各治疗组均喂食高脂饲料(胆固醇2%,胆酸钠0.5%,丙硫氧嘧啶0.2%,蔗糖5%,猪油10%,基础饲料82.3%),共8周。实验第2天起,治疗组大鼠分别给予小柴胡汤1g/(kg·d)、易善复64mg/(kg·d)灌胃;对照组和模型组给予相同体积的生理盐水。1.3.3血脂指标的测定(1)实验结束后停止给药,普通喂养适应l周后,禁食12h处死大鼠,称取大鼠体重。(2)血清指标测定:心脏直接采集血样,全自动生化分析仪测定血清TG、TC、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)。(3)肝脏湿重及肝组织匀浆指标测定:处死大鼠后迅速完整分离肝脏,测定肝脏湿重,然后获取肝脏右叶剪取500mg,加入9倍于肝组织体积预冷的异丙醇中冰浴匀浆,制成10%的匀浆,4℃提取24h,3000r/min离心10min,吸取上清液,全自动生化分析仪测定测定TG、TC。1.4数据处理与分析数据分析采用SPSS13.0统计软件处理。所有数据用均数±标准差表示,组间比较采用单因素方差分析,并行正态性与方差齐性的检验,两两比较采用SNK-q检验,检验水准取0.05。2结果2.1体重和肝脏湿重的比较与正常对照组比较,模型组、小柴胡汤组及易善复治疗组大鼠的体重及肝湿重显著增加(P<0.05);与模型组比较,小柴胡汤治疗组和易善复组的大鼠体重及肝脏湿重下降明显(P<0.05);小柴胡汤治疗组与易善复组之间的大鼠体重及肝脏湿重无显著差别(P>0.05,表1)。2.2各组大鼠血清alt、ast、tc及tg比较与正常对照组比较,模型组、小柴胡汤治疗组及易善复组大鼠血清ALT、AST、TC及TG水平均显著升高(P<0.05);同模型组相比,易善复和小柴胡汤治疗组大鼠血清ALT、AST、TC及TG水平均显著降低(P<0.05);而小柴胡汤治疗组与易善复治疗组之间大鼠血清ALT、AST、TC及TG水平未见明显差异(P>0.05,表2)。2.3各组大鼠肝组织中tc和tg水平比较与正常对照组比较,模型组、小柴胡汤治疗组及易善复组大鼠肝组织中TC和TG水平均显著升高(P<0.05);同模型组相比,易善复和小柴胡汤治疗组大鼠肝组织中TC和TG水平均显著降低(P<0.05);小柴胡汤治疗组与易善复治疗组之间大鼠肝组织中TC和TG水平未见明显差异(P>0.05,表3)。3小柴胡汤治疗非酒精性肝损伤的作用机制模型模型检测据《伤寒论》记载,小柴胡汤方的证治范围非常广泛,涉及太阳、少阳、阳明、少阴、厥阴、差后劳复、呕吐哕下利病、妇人产后病、妇人杂病等十多个病症。现代中医在临床上将小柴胡汤广泛用于呼吸系统、消化系统、妇科、儿科、五官科、传染性疾病等多种疾病的治疗中。自上世纪90年代起,小柴胡汤在肝脏方面的特殊作用得到国内外学者的认可和重视。大量药理研究也表明,小柴胡汤有明显的抗炎、调节机体免疫平衡、改善肝功能、抗肝纤维化、促进肝组织再生等作用。脂肪肝不是一种独立的疾病,是由多种疾病和病因引起的肝脏脂肪变性,最常见的病因有肥胖、酒精中毒,其次为营养失调、糖尿病、药物中毒、妊娠、遗传等。其中饮食所致的非酒精性脂肪肝是目前临床上常见的疾病,而且这种肝脏的脂肪变性难以在短期内逆转,甚至长期进展可以发展为脂肪型肝炎及肝硬化,因此对于非酒精性脂肪肝的治疗有很大的需求,但目前方法有限。本研究采用的脂肪肝造模方法,是以高胆固醇、高脂肪饲料喂养大鼠,具有人为干扰因素少、饮食结构接近人类日常的饮食的优点,因而研究结果更具有说服力。本研究结果显示,造模8周后,模型组大鼠的体重增加、肝脏增大,血清及肝组织TC、TG浓度升高,同时存在血清ALT、AST明显增高,提示脂肪肝炎模型成功。小柴胡汤治疗后大鼠的体重及肝脏湿重显著低于模型组大鼠,血清和肝组织TC、TG含量以及血清ALT、AST活性也低于模型组大鼠,疗效与临