TNAIA 0218-2023 污水中11种毒品及其代谢物和人口标记物可替宁的测定 液相色谱-三重四极杆质谱法

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TB团 体 标 准T/NAIA0218-2023污水中11种毒品及其代谢物和人口标物可替宁的测定 液相色谱-三重四极杆质谱法Determinationof11illicitdrugsandtheirmetabolitesresidues&cotinineofdemographicmarkerinsewageLiquidchromatography-tandemmassspectrometry2023-08-28发布 2023-08-31实施宁夏化学分析测试协会 发布前言本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。（宁夏宁夏凯普检测有限公司、宁夏化学分析测试协会。宏、杨永刚、曹伟、何晓丽、周晶晶、李宁军、孙飞、撒世军、李超、张小飞。本文件为首次发布。PAGEPAGE1污水中11种毒品及其代谢物和人口标记物可替宁的测定液相色谱-三重四极杆质谱法范围11（O6-爱康宁、吗啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、3,4-亚甲基二氧甲基苯丙胺（MDMA）、3,4-亚甲二氧基苯丙胺（MDA）、甲基苯丙胺、苯丙胺）和人口标记物可替宁含量的液相色谱-三重四极杆质谱测定方法。本文件适用于污水中11种毒品及其代谢物和人口标记物可替宁含量的测定。规范性引用文件（有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法HJ91.1污水监测技术规范GA/T122毒物分析名词术语术语和定义GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。原理净化、浓缩，采用液相色谱-三重四极杆质谱法在多反应监测模式下检测，以保留时间和特征离子对进行定性，内标法定量。试剂与材料除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T6682中规定的一级水。盐酸（HCl）。甲醇（CH3OH）：HPLC级。乙腈（C2H3N）：HPLC级。甲酸（HCOOH）：HPLC级。氨水（NH3·H2O）：HPLC级。甲酸水溶液：0.1%(CH3OH)。移取1000μL甲酸（5.4）于1000mL水中。5.7氨水-甲醇溶液(5+95)：用氨水（5.5）和甲醇（5.2）按5+95体积比混合。标准溶液以下所有标准溶液应恢复至室温并摇匀后使用。标准贮备液：ρ=100μg/mLO6-吗啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、MDMA、MDA、甲基苯丙胺、苯丙胺，溶剂为甲醇。贮备液于-20℃冷冻密封避光保存或参照制造商的产品说明保存。可替宁标准贮备液：ρ=1000μg/mL购买市售有证可替宁标准贮备溶液，溶剂为甲醇。-20℃冷冻密封避光保存或参照制造商的产品说明保存。混合标准物质中间液：5.9.15.9.2116个月。混合标准物质使用液：5.9.30.5~50L5~500L，1个月。氘代内标溶液：氘代内标标准贮备液：ρ=100μg/mL购买市售氘代内标标准贮备液，推荐组分为O6-单乙酰吗啡-D3、可卡因-D3、可待因-D3、苯甲酰爱康宁-D3、吗啡-D3、氯胺酮-D4、去甲氯胺酮-D4、MDMA-D5、MDA-D5、甲基苯丙胺-D5-D5-D3-20℃冷冻密封避光保存或参照制造商的产品说明保存。氘代内标混合中间液：5.10.110μg/mL氘代内标混合中间液，溶剂为甲醇。密封，置于冰箱-206个月。氘代内标混合使用液：250μg/L的氘代内标混合使用液，溶剂为甲醇。密封，置于冰箱-201个月。仪器与设备液相色谱-三重四极杆质谱仪：带有梯度洗脱功能，质谱为带电喷雾离子源（ESI）的。1.8μm100mm2.1mmC18反向液相色谱柱，或及其它等效柱。混合型强阳离子交换反相柱：MCX，30mg/3mL或等效固相萃取柱。固相萃取装置：自动或手动，流速可调节。氮吹浓缩或真空浓缩装置。一般实验室常用仪器和设备。样品样品采集与保存HJ/T911000mL。PP时间不超过10d。试样制备预处理将污水样品完全解冻后，充分摇匀。过0.45μm玻璃纤维滤膜，并量取50.00mL加入20μL氘代内标混合使用液（5.10.2）。固相萃取及浓缩4mL甲醇（5.2）、4mL4mLpH2的水对固相萃取小柱（6.3）进行通过活化好的固相萃取小柱，控制24mL4mL4并增加固相萃取装置（6.3）4mL氨水-甲醇溶液（5.7）1mL/min。250μL0.1%甲酸溶液（5.6）0.22μm滤膜，待测。空白样品以自来水为空白样品，与污水样品平行操作，得到空白提取液。分析步骤仪器参考条件液相色谱参考条件A：0.1%甲酸水溶液B：乙腈10.2mL/min，柱温：35℃，进样体积：5μL。表1 推荐梯度洗脱条件时间/min流动相A/%流动相B/%195528515870308.559513595质谱参考条件电离方式：电喷雾离子源（ESI），正离子模式。监测方式：多反应离子监测（MRM）。其余参考条件见附录B。仪器调谐质谱进行仪器质量数和分辨率的校正，以确保仪器处于最佳质量状态。校准标准工作曲线的建立取与污水等量自来水过膜，并量取50.0mL20μL氘代内标标准使用液（5.10.3），添加混合标准使用液（5.9.4），使其目标物（除可替宁）1ng/L~500ng/L10ng/L~5000ng/L标准工作曲线提取液，待测。按照仪器参考条件1—O61—O6单乙酰吗啡，2—O6D3，3—苯丙胺，4—D5，5—苯甲酰安康宁，6—苯甲酰爱康D3，7—可卡因，8—D3，9—可待因，10—D3，11—可替宁，12—D3，13—氯胺酮，14—氯胺酮D4，15—MDA，16—MDA-D5，17—MDMA，18—MDMA-D5，19—甲基苯丙胺，20—甲基苯丙胺D5，21—吗啡，22—吗啡D3，23—去甲氯胺酮，24—去甲氯胺酮D4图111种毒品及代谢物和人口标记物可替宁总离子流图在本标准推荐的仪器参考条件下，目标化合物的总离子流图见图1（除可替宁浓度为500ng/L，其余目标物浓度为50ng/L，氘代内标物浓度均为20ng/L）。8.3试样测定按照与标准工作曲线的建立（8.2.1）相同的仪器条件进行试样（7.2）的测定。8.4空白试验响应值时间（min）1—O6单乙酰吗啡，2—O6D3，3—苯丙胺，4—D5，5—苯甲酰安康宁，6—苯甲酰爱康D3，7—可卡因，8—D3，9—可待因，10—D3，11—可替宁，12—D3，13—氯胺酮，14—D4，15—MDA，16—MDA-D5，17—MDMA，18—MDMA-D5，19—甲基苯丙胺，20—甲基苯丙胺D5，21—吗啡，22—吗啡D3，23—去甲氯胺酮，24—去甲氯胺酮D4图1目标化合物总离子流图在本方法推荐的仪器参考条件下，目标化合物的总离子流图见图1（除可替宁浓度为500ng/L，其余目标物浓度为50ng/L，氘代内标物浓度均为100ng/L）。试样测定按照与标准工作曲线的建立（8.2.1）相同的仪器条件进行试样（7.2）的测定。空白试验按照与试样测定（8.3）相同的仪器条件进行空白试样（7.2）的测定。结果计算和表示定性测定12标化合物的保留时间与标准工作溶液中该目标化合物的保留时间的相对偏差的绝对值应小2.5%，且对试样中目标化合物定性子离子的相对离子丰度（Ksam）与浓度接近的标准工作溶液中对应的定性子离子的相对丰度（Kstd）2规定的范围，则可判定样品中存在对应的目标化合物。Kstd=

AstdAstd

×100%………（1）式中：Kstd——标准样品中目标化合物定性子离子的相对丰度，%；Astd2——标准样品中目标化合物二级质谱定性子离子响应值；Astd1——标准样品中目标化合物二级质谱定量子离子响应值。表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差Kstd/%Ksam允许偏差/%Kstd＞50±2020＜Kstd≤50±2510＜Kstd≤20±30Kstd≤10±50结果计算和表达以目标物与对应内标定量离子对的峰面积比（3）计算待测样品中目标物浓度。C=Y-a （2）b式中：C——待测样品中目标物质量浓度，ng/L；Y——待测样品中目标物与内标定量离子对的峰面积比；a——线性方程的截距；b——线性方程的斜率。注：测定结果小数点后位数的保留与方法检出限一致，最多保留三位有效数字。精密度平行测定结果相对偏差应≤20%。方法检出限和定量限方法检出限及定量限见附录A.1。附录A（资料性附录）方法的检出限及定量限本方法中目标化合物的方法检出限和测定下限见表A.1。序号目标物检出限（ng/L）序号目标物检出限（ng/L）定量限（ng/L）1O6-单乙酰吗啡1.04.02可卡因0.52.03可待因1.56.04苯甲酰爱康宁0.52.05吗啡1.56.06氯胺酮0.52.07去甲氯胺酮0.52.08MDMA0.52.09MDA1.04.010甲基苯丙胺0.52.011苯丙胺0.52.012可替宁1.56.0质谱参考条件:a）电喷雾电压：4000V。b）雾化器压力：45psi。c）离子源温度：350℃。

附录B（资料性附录）质谱参考条件d）目标化合物的多反应监测条件见表B.1。表B.1 目标化合物多反应监测条件序号化合物名称母离子（m/z）定量子离子（m/z）碰撞能量（V）定性子离子（m/z）碰撞能量（V）碎裂电压（V）1O6-单乙酰吗啡328.221128165441402可卡因304.21821682.1321203可待因300.2199.231165.3521154苯甲酰爱康宁290.11682077.1651105吗啡286.216540152651506氯胺酮238.12201212532807去甲氯胺酮224.1206.98125.226708MDMA194.1163810524909MDA180.1163.16104.9226010甲基苯丙胺150.1119891208011苯丙胺136.1119491167012可替宁177.1982080269013O6-单乙酰基吗啡-D3331.1211261654012514可卡因-D3307.1185201113410515可待因-D3303.2165581527811516苯甲酰爱康宁-D3293.0171.2181053610017吗啡-D3289.1165441527012018氯胺酮-D4242.021112129347519去甲氯胺酮-D4228.1211.18129.1267520MDMA-D5198.016725138337521MDA-D5185.21686138.1167022甲基苯丙胺-D5155.2124.1496.1166523苯丙胺-D5141.1124.2493.1225524可替宁-D3180.078.1691012275附录C（资料性附录）检测目标物及对应氘代内标相关信息检测目标物及对应氘代内标相关信息见表C.1。表C.1 检测目标物及对应氘代内标相关信息序号化合物名称英文名或缩写CAS号1O6-单乙酰吗啡6-Acetylmorphine2784-73-82可卡因Cocaine50-36-23可待因Codeine76-57-34苯甲酰爱康宁Benzoylecgonine519-09-55吗啡Morphine57-27-26氯胺酮Ketamine1867-66-97去甲氯胺酮Norketamine79499-59-583,4-亚甲基二氧甲基苯丙胺MDMA42542-10-993,4-亚甲二氧基苯丙胺MDA4764-17-410甲基苯丙胺Methamphetamine7632-10-211苯丙胺Amphetamine300-62-912可替宁Cotinine486-56-613O6-单乙酰基吗啡-D36-Acetylmorphine-D3136765-25-814可卡因-D3Cocanine-D3138704-14-015可待因-D3Codeine-D370420-71-216苯甲酰爱康宁-D3Benzoylecgonine-D3115732-6