植物磷含量的测定

植物磷含量的测定(钼锑抗比色法)一、 实验目的1.掌握钥锑抗比色法测定磷的方法。练习实际测量以及定容的操作。练习分光光度计的使用。二、 实验原理植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钥酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸，后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物，可用吸光光度法测定。三、 实验试剂2mol/LNaOH溶液0.2%二硝基酚指示剂0.5mol/LH2SO4硫酸溶液:28mL浓H2SO4加水稀释至1L。钥锑贮存溶液：量取153ml浓硫酸(分析纯，密度1.84g/ml),缓缓加入到400ml蒸馏水中，不断搅拌，冷去吼另称取经磨细的钥酸铵［(NH4)6Mo7O24・H2O,分析纯］10g溶于温度约60笑300ml水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钥酸铵溶液中。再加入0.5%酒石酸锑钾［KSbOC4H4O6-1/2H2O，分析纯］溶液100ml，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钥酸铵1%，硫酸2.75mol/L。钥锑抗显色剂：称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钥锑贮存溶液中，此溶液有效期不长，宜随配随用。5mg/L磷标准溶液：0.4394g在50T烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4，分析纯)，100ml水，加5ml浓硫酸(防腐)，用水定容到1L，浓度为100mg/L磷(P)，此溶液可以长期保存。吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中，加水至标度，浓度为5mg/L磷(P)标准溶液，此溶液不宜久存。四、 实验步骤1、 吸取定容过滤或澄清后的消煮液2.00〜5.00ml(V2，含P5〜30ug)于50ml容量瓶中，用水稀释至约20ml，加1〜2滴二硝基酚指示剂，滴加2mol/LNaOH溶液中和至刚呈黄色，再加入1滴0.5mol/LH2SO4溶液，使溶液的黄色刚刚褪去呈淡黄色，然后加入钥锑抗显色剂5.00ml，摇匀，用水定容(V3)。在室温高于15T的条件下放置30min后，用1cm光径比色槽在波长700nm处测定吸光度，以空白溶液为参比调节仪器零点。2、 校准曲线或直线回归方程：准确吸取p(P)=mg/L标准工作溶液0、1、2、4、6、8ml，分别放入50mL容量瓶中，加水至20ml,同上步骤显色并定容，即得0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mg/LP标准系列溶液，与待测液同时测定、读取吸光度，然后绘制校准曲线或直线回归方程。五、结果计算X1000cXVX(V’/VJwp= mx1062X1000式中：Wp——植物磷的质量分数，g/kg;c——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度，mg/L；V1 消煮液定容体积，ml；V2——吸取测定的消煮液体积，ml；V3——显色液体积，ml；m 称样量，g；六、注意事项1、室温低于15T时，可在30〜40笑水浴中，显色30min。2、植物磷含量0.5g/kg为低量，1.0~2.0g/kg为中量，大于2.0g/kg为高量。十〜己）hno3—hcio4消煮法❖HNO3:HCIO4=8:2•:•称取烘干植物样1g于开氏瓶（消煮管中），加浓HNO3：HCIO4混合酸（8:2）15mL放置数小时或过夜，然后放在电炉上慢慢升温加热,使黄棕色烟