病毒学总论-病原生物学课件

病毒学总论

病毒学总论13000BC，埃及孟非思壁画中长老患小儿麻痹症3000BC，埃及孟非思壁画中2

病毒概述病毒的发现1892年发现第一个病毒即烟草花叶病毒1898年发现动物口蹄疫病毒首先被证实对人类有致病性的是——黄热病毒（1901年发现）病毒概3体积微小，电子显微镜观察；可通过滤菌器结构简单：非细胞结构基因组：只有一种核酸（RNA或DNA）严格活细胞内寄生以复制方式繁殖对抗生素不敏感，耐冷不耐热病毒的特点体积微小，电子显微镜观察；可通过滤菌器病毒的特点4体积微小，结构简单，只含有一种类型的核酸，只能在活的、敏感细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物病毒概念体积微小，结构简单，只含有一种类型的核酸，病毒概念5病毒引起疾病的特点涉及面广：75%由病毒引起传染性强、传播迅速：如流感病毒病死率高：如狂犬病病毒后遗症严重：如脊灰病毒持续感染：如乙肝病毒引起肿瘤：如爱滋病毒致畸性：如风疹病毒特效药少，对抗生素不敏感预防是重点病毒引起疾病的特点涉及面广：75%由病毒引起6

病毒的基本性状病毒的基本性状7一、病毒的大小与形态

病毒体（virion）完整的成熟病毒颗粒，具有典型的形态结构，并有感染性病毒的大小测量单位：纳米（nm）<50

nm小型病毒50nm-150nm中等大小病毒（大多数）150nm大型病毒（最大300nm）一、病毒的大小与形态

病毒体（virion）8微生物的大小比较葡萄球菌(1000nm）

牛痘病毒300×250nmABCDEFG立克次体450nm衣原体390nmA、大肠杆菌噬菌体(65×95nm)B、腺病毒(70nm)C、脊髓灰质炎病毒(30nm)D、乙脑病毒(40nm)E、蛋白分子(10nm

)F、流感病毒(100nm)G、烟草花叶病毒微生物的大小比较葡萄球菌牛痘病毒ABCDEFG立克次体衣原9球形病毒天花病毒病毒的形态多数病毒呈球形或近似球形，杆状，丝状，少数可为子弹状、砖块状，噬菌体可呈蝌蚪状球形病毒天花病毒病毒的形态10杆状病毒杆状病毒11噬菌体噬菌体12狂犬病毒狂犬病毒13二、病毒的结构与功能二、病毒的结构与功能14病毒体结构模式包膜子粒包膜核心衣壳壳粒核衣壳病毒体结构模式包膜子粒包膜核心衣壳壳粒核衣壳15病毒的结构核心：核酸、酶类衣壳：由壳粒（多肽）组成包膜：由宿主细胞膜或核膜组成镶嵌有包膜子粒（刺突）病毒的结构核心：核酸、酶类16螺旋对称型（HelicalSymmetry）二十面体立体对称型（IcosahedralSymmetry）复合对称型（ComplexSymmetry）衣壳类型螺旋对称型（HelicalSymmetry）衣壳类型17螺旋对称型（helicalsymmetry)螺旋对称型1820面体立体对称型(icosahedralsymmetry)：大多数球状病毒属之

20面体立体对称型(icosahedralsymmetry19（3）复合对称型(complexsymmetry)螺旋对称型20面体立体对称型（3）复合对称型(complexsymmetry)螺旋对称20病毒的组成成分一、核酸种类：DNA、RNA存在形式：单链与双链；正链与负链，分节作用：ORF可重叠，具有感染性二、蛋白质种类：结构蛋白携带全部遗传信息特点：有内含子、非结构蛋白作用：衣壳、基质、包膜蛋白（结构蛋白）酶、反式作用因子（非结构蛋白）病毒的组成成分一、核酸种类：DNA、RNA21三、病毒的分类

（ClassificationofViruses）

三、病毒的分类

（ClassificationofVi22一、生物学分类二、临床分类一、生物学分类23生物学分类——DNA病毒类型分类特点病毒科名DNA病毒双链DNA、有包膜痘病毒科疱疹病毒科双链DNA、无包膜腺病毒科乳多空病毒科单链DNA、无包膜细小病毒科生物学分类——DNA病毒类型24类型分类特点病毒科名RNA病毒双链RNA、分节、无包膜呼肠病毒科双RNA病毒科负单链RNA、不分节、有包膜副粘病毒科弹状病毒科负单链RNA、分节、有包膜正粘病毒科布尼亚病毒科沙粒病毒科正单链RNA、不分节、无包膜小RNA病毒科杯状病毒科星状病毒科正单链RNA、不分节、有包膜冠状病毒科黄病毒科披膜病毒科生物学分类——RNA病毒类型25类型分类特点病毒科名逆转录病毒双链DNA、不分节、有包膜嗜肝DNA病毒科

单链RNA、不分节、有包膜逆转录病毒科生物学分类——逆转录病毒类型26

病毒的增殖

（ReplicationofViruses）病毒的增殖

（Replicat27一、病毒的增殖过程二、病毒的异常增殖形式一、病毒的增殖过程28吸附adsorption穿入penetration脱壳uncoating生物合成biosynthesis组装与释放assemblyandrelease病毒的增殖周期吸附adsorption病毒的增殖周期29吸附病毒的增殖过程穿入脱壳早期蛋白晚期蛋白装配DNA复制核酸游离成熟释放吸附病毒的增殖过程穿入脱壳早期蛋白晚期蛋白装配DNA复制核酸30吸附

病毒表面蛋白质与细胞接触→结合→特异性吸附（病毒配体位点与细胞膜特异受体结合）——决定病毒的嗜组织性穿入融合---有包膜病毒胞饮---无包膜病毒吸附融合---有包膜病毒31

CD21（EBV受体）CD4（HIV受体）CD46（麻疹病毒受体）CD54（鼻病毒受体）病毒受体CD21（EBV受体）病毒受体32胞饮方式穿入胞饮方式穿入33脱壳uncoating

穿入胞质中的核衣壳脱去蛋白质，使基因组核酸裸露的过程

依赖于脱壳酶脱壳uncoating

穿入胞质中的核衣壳脱去蛋白质34病毒核酸病毒核酸病毒核酸病毒核酸35生物合成Biosynthesis

利用宿主细胞提供的小分子物质合成病毒核酸和蛋白质——病毒mRNA的转录——复制子代病毒核酸——特异性mRNA转录、翻译子代病毒结构蛋白和功能蛋白隐蔽期生物合成Biosynthesis

利用宿主细36早期：基因组在细胞内合成非结构蛋白（病毒复制酶及抑制细胞正常生物合成的抑制酶）晚期：根据基因组的指令在细胞内复制病毒核酸，合成结构蛋白和非结构蛋白早期：晚期：371、DNA病毒（双链）：细胞核内合成DNA，细胞质内合成病毒蛋白早期：病毒DNA依赖DNA的RNA多聚酶早期mRNA转译早期蛋白DNA多聚酶脱氧胸腺嘧啶激酶调控病毒基因组转录的酶抑制宿主细胞生物合成的酶药物作用的靶1、DNA病毒（双链）：早期：病毒DNA依赖DNA的早期mR38晚期：解链正链DNA负链DNADNA多聚酶子代DNA转录晚期mRNA晚期蛋白病毒衣壳蛋白及其他结构蛋白晚期：解链正链DNADNA多聚酶子代DNA转录晚期mRNA晚392、RNA病毒（单链）：多数在细胞质内合成子代RNA及病毒蛋白（1）正单链RNA病毒（有mRNA功能）：正单链RNA复制子代RNA结构蛋白（衣壳蛋白等）非结构蛋白（依赖RNA的RNA多聚酶）双链RNA（复制中间型）药物作用的靶2、RNA病毒（单链）：（1）正单链RNA病毒（有mRNA功40（2）负单链RNA病毒（有依赖RNA的RNA多聚酶）：负单链RNA依赖RNA的RNA多聚酶正单链RNA（有mRNA功能）子代RNA结构蛋白（衣壳蛋白等）双链RNA（复制中间型）药物作用的靶解链（2）负单链RNA病毒（有依赖RNA的RNA多聚酶）：负单链41（3）逆转录病毒（有逆转录酶，即依赖RNA的DNA多聚酶）单链RNA逆转录酶RNADNA（复制中间型）进入细胞核双链DNA整合（前病毒）子代病毒RNA病毒mRNA病毒蛋白质DNA肿瘤发生药物作用的靶（3）逆转录病毒（有逆转录酶，即依赖RNA的DNA多聚酶）单42组装与释放

assemblyandrelease

装配细胞核内细胞质内核膜上胞质膜上释放裂解细胞释放（无包膜病毒）出芽释放（有包膜病毒）组装与释放

assemblyandrelease装配细43装配（assembly）装配（assembly）44释放（release）破胞释放：无包膜病毒——致细胞破裂死亡——一次大量释放芽生释放：有包膜病毒——病毒核衣壳出芽时套上宿主细胞的核膜或细胞膜——细胞不死——逐个释放释放（release）破胞释放：45病毒学总论—病原生物学课件46

病毒的异常增殖

缺损病毒（defectivevirus）基因组不完整的病毒体，无感染性缺损干扰颗粒缺损病毒不能复制，但却能干扰同种成熟病毒体进入细胞

辅助病毒：辅助缺损病毒复制具有感染力的完整病毒天然缺损病毒——腺病毒伴随病毒

顿挫感染（流产感染）：细胞条件不合适，病毒进入细胞但不能复制非容纳细胞——顿挫感染容纳细胞病毒的异常增殖

缺损病毒（defectivevirus47四、病毒的干扰现象干扰现象interference当两种病毒同时或先后感染同一细胞时，可发生一种病毒的增殖抑制另一种病毒增殖的现象产生原因——干扰素interferon，IFN——竞争干扰（细胞表面受体、底物、酶）——改变细胞代谢途径（抑制第二种病毒mRNA的转译）四、病毒的干扰现象干扰现象interference48干扰现象的意义1、非特异性免疫的构成部分——抗病毒作用2、指导正确使用疫苗干扰现象的意义49病毒的遗传与变异一、病毒的遗传特点二、病毒变异的类型三、病毒基因组研究的意义病毒的遗传与变异一、病毒的遗传特点50病毒遗传的特点1、遗传方式简单2、受宿主细胞影响3、易产生突变病毒遗传的特点1、遗传方式简单51病毒变异的类型1、突变2、重组（recombination）3、重配（reassortment）4、表型混合病毒变异的类型1、突变52突变株mutant温度敏感突变株（temperaturesensitive，ts）

28～35℃可以复制，37～40℃不能复制脊髓灰质炎减毒活疫苗突变株能稳定地存在，可在相应的宿主或细胞中传代与存活突变株mutant53病毒的抵抗力一、耐冷怕热二、紫外线敏感三、氧化剂敏感四、包膜病毒对脂溶剂敏感五、耐甘油病毒的抵抗力一、耐冷怕热54病毒感染抗病毒免疫

病毒感染与免疫病毒感染病毒感染与免疫55病毒的感染：病毒侵入机体并在易感细胞内复制增殖，与机体发生相互作用的过程

病毒的感染：56病毒的感染方式

一、水平传播病毒在人群不同个体间的传播

病毒的感染方式一、水平传播病毒在人群不同个体间的传播57一、水平传播1、通过黏膜表面传播2、通过皮肤传播昆虫叮咬——乙脑病毒动物咬伤——狂犬病毒3、医源性传播注射、输血、拔牙——乙肝、丙肝呼吸道——流感病毒消化道——甲肝病毒泌尿生殖道——爱滋病毒一、水平传播1、通过黏膜表面传播呼吸道——流感病毒消化道——58

二、垂直传播通过胎盘或产道，病毒由母亲传给胎儿的方式胎盘：风疹病毒、CMV、HIV、HBV产道:HIV、HSV-II

二、垂直传播通过胎盘或产道，病毒由母亲传给胎儿的方式胎盘：59病毒

母体

新生儿胎盘

显隐胎受先流性性儿染天产感感正胎畸死染染常儿形胎病60病毒的致病机理一、病毒对宿主细胞的直接作用——细胞水平上致病机理

二、病毒感染的免疫病理损害——机体水平上致病机理病毒的致病机理一、病毒对宿主细胞的直接作用——细胞水平上611、溶细胞效应2、改变细胞膜结构3、包涵体形成4、细胞增生与转化5、细胞凋亡一、病毒对宿主细胞的直接作用1、溶细胞效应一、病毒对宿主细胞的直接作用62病毒在细胞内增殖引起细胞裂解死亡多见于无包膜病毒：脊灰病毒、鼻病毒、腺病毒1、影响细胞的生命活力（1）溶细胞效应（杀细胞性感染）：病毒在细胞内增殖引起细胞裂解死亡1、影响细胞的生命活力（1）63CPE溶细胞感染CPE溶细胞感染64（2）改变细胞膜结构：（稳定状态感染）多见于有包膜病毒：正粘病毒、副粘病毒（2）改变细胞膜结构：（稳定状态感染）65稳定状态感染为特异性抗体或CTL细胞识别新抗原多核巨细胞稳定状态感染为特异性抗体或新抗原多核巨细胞663、包涵体形成概念——有些病毒感染细胞，在普通显微镜下可见胞浆或胞核内出现嗜酸性或嗜碱性、圆形或不规则的斑快结构意义——病毒感染的鉴别3、包涵体形成67狂犬病毒包涵体（Negribody）狂犬病毒包涵体（Negribody）68细胞核原因：病毒基因的整合细胞核细胞核1、逆转录病毒复制时以DNA整合入细胞染色体中；2、失常式整合，DNA病毒多见，病毒的DNA偶而以片段整合入细胞的染色体DNA中。4、细胞增生与转化细胞核原因：病毒基因的整合细胞核细胞核1、逆转录病毒69结果：细胞增生或恶性转化（1）细胞增生：病毒细胞细胞内DNA合成加快细胞增生可能与肿瘤的发生有关结果：细胞增生或恶性转化（1）细胞增生：病毒细胞细胞内DNA70（2）细胞转化病毒培养细胞细胞转化细胞形态变化繁殖加快成堆生长（2）细胞转化病毒培养细胞细胞转化细胞形态变化71细胞癌基因：调节细胞生长、分化病毒癌基因：以前病毒的方式从细胞中获取细胞癌基因——致癌因素——活化癌基因——细胞转化（转化细胞不一定发生癌变）细胞癌基因：调节细胞生长、分化72与人类肿瘤相关的病毒病毒科与人类相关的肿瘤病毒嗜肝DNA病毒肝细胞癌HBV疱疹病毒鼻咽癌EBVBurkitt淋巴瘤EBVKaposi肉瘤HHV-8乳多空病毒乳头状瘤HPV亚型宫颈癌HPV-16、18逆转录病毒成人T细胞白血病HTLV-1与人类肿瘤相关的病毒病毒科与人类相关的肿瘤病毒嗜肝DNA病毒735、细胞凋亡：诱导因子（如病毒等）细胞凋亡基因激活细胞膜鼓泡细胞核浓缩染色体DNA降解电泳时有阶梯式条带形成凋亡小体——增加基因突变的机会5、细胞凋亡：诱导因子（如病毒等）细胞凋亡基因激活细胞膜鼓泡74二、病毒感染的免疫病理损害——机体水平上致病机理1、体液免疫的病理作用2、细胞免疫的病理作用3、免疫系统的功能被抑制4、自身免疫损伤二、病毒感染的免疫病理损害——机体水平上致病机理1、体液75病毒感染的类型病毒感染隐性感染显性感染持续性感染慢性感染潜伏感染慢发病毒感染（迟发感染）急性感染持续性感染病毒感染的类型病毒感染隐性感染显性感染持续性感染慢性感染潜伏76病毒感染的类型病毒数量少，毒力弱，机体免疫力强——隐性感染病毒数量多，毒力强，机体免疫力弱——显性感染病毒感染的类型病毒数量少，毒力弱，机体免疫力强77病毒感染的类型不发病，但机体可获得特异性免疫

向外播散病毒，成为重要传染源

急性感染

持续性感染隐性感染显性感染病毒感染的类型不发病，但机体可获得特异性免疫急性感染隐78慢性感染：

病程长，病毒可检出如HBV潜伏感染：可反复激活，急性发作病毒只有在急性发作时才被检出如HSV、VZV慢发病毒感染：潜伏期长，发病后为亚急性进行性直至死亡寻常病毒非寻常病毒

prion

麻疹病毒持续性感染

慢性感染：病程长，病毒可检出如HBV潜伏感染：可反复79急性和持续性病毒感染类型比较类型病毒感染举例病灶中病毒复制病毒感染引起细胞病变死亡临床特点急临床型水痘和带状疱疹鼻病毒所致感染灰质炎病毒致小儿麻痹++典型表现性亚临床型无症状的灰质炎病毒感染灰质炎减毒活疫苗接种麻疹减毒活疫苗接种++无临床表现持潜伏性单纯疱疹的潜伏性水痘-带状疱疹潜伏性——无临床表现续慢性慢性乙型肝炎婴儿先天性风疹综合征++/

+/—性慢病毒性库鲁病SSPE++中枢神经感染潜伏期数年进行性致死性急性和持续性病毒感染类型比较类型病毒感染举例病灶中病毒复80抗病毒免疫一、非特异性免疫二、特异性免疫抗病毒免疫一、非特异性免疫二、特异性免疫81非特异性抗病毒免疫1、干扰素2、NK细胞3、补体非特异性抗病毒免疫1、干扰素82干扰素定义：由病毒或其他干扰素诱生剂刺激机体细胞所产生的一种具有抗病毒等作用的糖蛋白

种类：种类 产生细胞 抗病毒抗肿瘤免疫调节

人白细胞 强 弱 弱

人成纤维细胞强弱弱

T细胞 弱 弱强 I型II型干扰素定义：由病毒或其他干扰素诱生剂 种类：种类 产生细83干扰素性质糖蛋白、抗原性弱、对蛋白酶、胰酶敏感具有相对稳定性，56°C30分钟不被灭活抗病毒谱广、无特异性、无毒性干扰素的产生早于特异性抗体在体内作用时间短干扰素性质糖蛋白、抗原性弱、对蛋白酶、84抗病毒意义：抗病毒特点种的特异性、间接性、广谱性抗病毒机理：细胞受干扰素作用后，合成抗病毒蛋白（蛋白激酶、2，-5，合成酶、磷酸二酯酶）早期中断病毒复制，阻止病毒扩散抗病毒意义：抗病毒特点种的85干扰素产生机理操纵基因结构基因A:DNA转录转录mRNAmRNA翻译翻译A阻遏物干扰素病毒A阻遏物与病毒结合失去活性干扰素产生机理操纵基因结构基因A:DNA转录转录mRNAmR86干扰素作用机理B:DNA操纵基因结构基因转录转录mRNAmRNA翻译翻译B阻遏物翻译抑制蛋白TIP抑制病毒蛋白质合成B阻遏物与干扰素结合失去活性干扰素干扰素作用机理B:DNA操纵基因结构基因转录转录mRNAmR87特异性抗病毒免疫1、体液免疫：中和作用细胞毒作用促进作用2、细胞免疫：细胞毒作用DTH炎症反应特异性抗病毒免疫1、体液免疫：中和作用88体液免疫的保护作用中和抗体——可中和病毒的感染具有保护作用的抗体，主要是IgG、IgM、IgA

（1）改变病毒表面结构或与病毒表位结合以阻止病毒的吸附；（2）与病毒形成免疫复合物有利于巨噬细胞的吞噬和清除；（3）有包膜病毒与抗体结合后，激活补体而使病毒裂解。体液免疫的保护作用中和抗体——可中和病毒的感染89抗体的中和作用抗体的中和作用90激活补体病毒裂解有包膜病毒激活补体病毒裂解有包膜病毒91细胞免疫的保护作用病毒性感染主要靠细胞免疫致敏T细胞——CTL、TDTHCTL：直接杀伤或破坏表面带有特异性抗原的靶细胞TDTH：再次接触病毒感染的细胞时，释放多种细胞因子细胞免疫的保护作用病毒性感染主要靠细胞免疫92TDTH病毒抗原肽靶组织细胞因子（IL-2、TNF、IFN-）CD4+T细胞的效应作用机制活化巨噬细胞TDTH病毒抗原肽靶组织细胞因子（IL-2、TNF、IFN-93未活化ICE活化ICE

ICE底物P34cdc2（凋亡）FasL基因FasLFasTCRCD8+T细胞的细胞毒作用机制穿孔素粒酶CTL靶细胞未活化ICE活化ICEICE底物P34cdc2FasL基因94病毒感染的检查方法和防治原则病毒感染的检查95一、病毒感染的检查方法1、标本采集与送检2、病毒的分离培养与鉴定3、病毒感染的快速诊断一、病毒感染的检查方法961、标本采集与送检标本采集：早期；不同病变取不同标本标本处理：无菌操作；杂菌标本+抗生素冷藏速送：快速送检；冷藏（-700C）血清学标本：取双份血清，效价升高4倍有诊断价值1、标本采集与送检972、病毒的分离培养与鉴定病毒的分离培养动物接种（Animals）

鸡胚培养（Embryonatedeggs）

组织细胞培养（Organandtissueculture）2、病毒的分离培养与鉴定组织细胞培养（Organandt98病毒的鸡胚接种示意图病毒的鸡胚接种示意图99尿囊腔接种羊膜腔接种流感病毒流感病毒尿液羊水血凝及血凝抑制试验鉴定病毒流感病毒+红细胞血凝流感病毒+特异抗体血凝被抑制初次再次尿囊腔接种羊膜腔接种流感病毒流感病毒尿液羊水血凝及血凝抑制试100鸡胚接种鸡胚接种101常用的细胞培养常用的细胞培养102病毒增殖指标细胞病变效应(Cytopathiceffect,CPE)包涵体（InclusionBodies）多核巨细胞病毒的鉴定病毒增殖指标病毒的鉴定103正常细胞正常细胞104CPECPE105狂犬病毒包涵体（Negribody）狂犬病毒包涵体（Negribody）106巨细胞病毒包涵体巨细胞病毒包涵体107三、病毒感染的快速诊断1、形态学检查2、检查病毒性抗原3、检查病毒抗体4、病毒核酸的检测光镜—大病毒、包涵体电镜—直接电镜、免疫电镜免疫标记技术—荧光素、放射性核素、酶ELISA——IgM核酸杂交技术Southern、NouthernPCR三、病毒感染的快速诊断1、形态学检查光镜—大病毒、包涵体108光镜检查法

用光学显微镜直接检查某些细胞包涵体巨细胞病毒包涵体麻疹病毒感染形成多核巨细胞

狂犬病脑组织神经细胞胞质中包涵体（Ｎegri氏小体）等形态学检查光镜检查法形态学检查109电镜检查法

用电子显微镜观察病毒颗粒的形态，适于检查含高浓度病毒的标本用于甲型肝炎病毒、轮状病毒等的检测近年来利用特异性免疫血清与标本混合孵育后，用免疫电镜法检测，提高阳性率用于轮状病毒、鼻病毒、甲型和戊型肝炎病毒、疱疹病毒等的检测

形态学检查电镜检查法形态学检查110免疫荧光法（IFT）可快速、早期检测难以培养的病毒，如流行性出血热的汉坦病毒上呼吸道上皮细胞内的流感病毒、腺病毒和呼吸道融合病毒（ＲＳＶ），疱疹水疱液中单纯疱疹病毒抗原婴幼儿腹泻中的轮状病毒抗原等检查病毒性抗原免疫荧光法（IFT）检查病毒性抗原111免疫荧光法示意图免疫荧光法示意图112酶联免疫吸附检测法（ELISA）

可用分光光度比色计或肉眼观察结果，无需特殊设备用于HBV、流行性出血热、单纯疱疹、轮状病毒和EB病毒等抗原检测检查病毒性抗原酶联免疫吸附检测法（ELISA）检查病毒性抗原113SPRIA

示意图ELISA

示意图SPRIA

示意图ELISA

示意图114血凝抑制试验

用于流感、副流感和流行性乙型脑炎因这些病毒可凝集动物红细胞，加入相应抗体后可抑制血细胞凝集现象补体结合试验用于流感、流行性乙型脑炎用含已知病毒抗原，检查病人血清中未知抗体中和试验

用于人群免疫水平的调查酶联免疫吸附试验已知抗原来测定抗体

检查病毒抗体血凝抑制试验检查病毒抗体115原位杂交检测DNA病毒感染细胞病毒核酸的检测原位杂交检测DNA病毒感染细胞病毒核酸116聚合酶链反应（ＰＣＲ）1985年美国Saiki等首先提出PolymerseChainReactionPCR是试管内特异性DNA片段扩增法，将DNA片段扩增10万倍，提高了试验的特异性和敏感性逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）也可特异性的扩增RNA片段近年来成为临床病原诊断的重要工具

聚合酶链反应（ＰＣＲ）1985年美国Saiki等首先提出Po117蛋白质转染技术Southernblot

用于酶解后DNA片段的分子杂交检测Northernblot

用于酶解后RNA片段的分子杂交检测Westernblot蛋白免疫印迹试验，用于蛋白质转染技术蛋白质转染技术Southern118常用的血清学试验肠道病毒等抗体检测定量测定抗体及鉴定病毒中和试验流感病毒抗体的检测及病毒的鉴定定量测定抗体及鉴定病毒血凝抑制试验乙脑等病毒抗体定量测定抗体补体结合试验同ELISA同ELISA放免测定确证HIV感染检测抗原的特异性抗体Western印迹法轮状病毒等抗原，抗HIV等抗体抗原和抗体定量测定ELISA