临床微生物标本的采集和送检省名师优质课获奖课件市赛课一等奖课件

临床微生物标本

采集与送检第1页主要内容1、标本采集意义和标准2、标本运输与拒收标准3、各种标本采集血液、骨髓标本尿液粪便痰及上呼吸道标本穿刺液标本（脑脊液、胆汁、胸腹水等）脓液及创伤感染分泌物标本生殖道标本第2页

标本采集是指采集患者体内一小部分血液、体液、排泄物、分泌物以及组织细胞等标本进行检验，以反应机体正常生理现象和病理改变。

标本采集第3页

标本采集60%以上试验误差发生在分析前！标本采集正确是否与检验结果准确性有亲密关系!所以，我们应掌握正确标本采集方法。第4页正确微生物标本采集和运输是准确病原学诊疗前提第5页掌握正确标本采集方法

为确保标本质量，取得阳性结果，应掌握正确标本采集方法、采集量和采集时间并应及时送检，特殊标本还需注明采集时间。第6页基本标准1.及时采集微生物标本作病原学检验2.在抗菌药品使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后马上送检5.混有正常菌群标本，不可置肉汤培养6.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。7.送检标本应注明起源和检验目标第7页标本运输标准1、所有标本都必须马上送往试验室，最好在2h内,保留时间不应超出24h.2、最佳临床标本送检首先取决于所获取标本量.量少标本应在采集后15-30min内送检.3、对环境敏感微生物如志贺菌、奈瑟氏菌和流感嗜血杆菌（对低温敏感）应马上处理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、内耳道标本。第8页标本拒收标准无标签、无检验单不检测，并与送检医生和护士联络。送检延误不接收，提醒送检者，要求重新采集。送检容器不妥或渗漏不接收，通知送检者，要求重新采集。标本不符合要求不接收，联络送检者，指出不符合要求之处，要求重新采集符合试验要求标本.第9页临床微生物检验常见标本血液、骨髓标本尿液粪便痰及上呼吸道标本穿刺液标本（脑脊液、胆汁、胸腹水等）脓液及创伤感染分泌物标本生殖道标本第10页一、血培养标本采集第11页血培养送检指征病人出现以下临床表现，或同时具备以下几个临床表现时应采集血培养。1、发烧（≥38℃）或低温（≤36℃）2、寒战3、白细胞增多（＞10×109/L，尤其有“核左移”时）4、粒细胞降低（成熟多形核白细胞＜1×109/L）5、血小板降低6、皮肤、粘膜出血7、昏迷8、多器官衰竭9、血压降低10、呼吸加紧11、特殊情况：可疑新生儿败血症时，除发烧或低温外，极少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养。第12页血培养采集须知应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集！对怀疑菌血症、真菌血症患者，在考虑使用抗菌药品之前，应马上采集血培养标本。必须同时或间隔短时间内采集２套以上血培养标本。第13页血培养采集容器法国梅里埃企业血培养仪配套血培养瓶或安图企业血培养瓶第14页血培养标本采集方法1、皮肤消毒2、培养瓶消毒：(1)用75％酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。(2)酒精作用60s。(3)在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签去除橡皮塞子表面剩下酒精，然后注入血液。3、血液注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。第15页血培养采集次数成年患者：推荐同时采集２－３套（不一样部位）血培养标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本）。婴幼儿患者：推荐同时采集２次（不一样部位）血培养标本。原因：血培养做1套检出率为65%。做2套和3套检出率检出率分别为80%和90%。单瓶血培养检出率不高，而且结果极难临床解释。在采取血培养后2至5天内，无需重复采取血培养。两个例外：细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症。第16页血培养采血量成年患者：推荐采血量每瓶不少于5ml。婴幼儿患者：儿童3-5ml，婴儿为1-2ml，推荐采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量1%）第17页注意事项1、严禁在输液、输血针头处抽取标本，以免影响检验结果。（最好在对侧采集）2、若同时抽取几个项目标血标本，普通注入容器次序为：血培养瓶→抗凝管→干燥试管.动作要快速准确，防止溶血。注入标本后血培养瓶务必马上送至检验科细菌室3、每次领培养瓶不宜过多，以防过期，未使用培养瓶亦应室温保留（15-30℃），切勿放冰箱保留。第18页骨髓标本微生物学检验

采集部位：骨髓穿刺法从髂骨采集标本。

采集时间：在用药前、发烧早期或高热期

当骨髓炎时或长久使用抗菌药品患者，抽取骨髓培养阳性率远高于血液培养

第19页

二、尿液标本采集

第20页尿液标本送检指征1有经典尿路感染症状；2肉眼脓尿或血尿；3尿常规检验表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性；4不明原因发烧，无其它局部症状；5留置导尿管病人出现发烧；6膀胱排空功效受损；7泌尿系统疾病手术前。第21页尿液标本采集容器无菌试管或无菌尿液标本留取容器第22页尿液标本采集方法1、清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围，开始排尿，将前段尿排去，插入性接取中段尿约10ml于无菌容器中，马上送检，于一小时内接种。该方法简单、易行，是最惯用尿培养标本搜集方法，但很轻易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。第23页尿液标本采集方法2、耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸收尿液，是评定膀胱内细菌感染“金标准”方法，但有一定痛苦，病人难以接收。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难婴儿尿标本采集

第24页尿液标本采集方法3、直接导尿：按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。可降低尿液标本污染，准确地反应膀胱感染情况。但有可能将下尿道细菌引入膀胱，造成继发感染，普通不提倡使用。

第25页尿液标本采集方法4、小儿搜集包：对于无控制能力小儿可应用搜集包搜集尿液，这种装置因为极难防止会阴部菌群污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时才有意义。假如检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复查。

第26页尿液标本采集方法5、留置导尿管搜集尿液：利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸收尿液，操作时应预防混入消毒剂，不能从搜集袋中采集尿液。长久留置导尿患者，应在更换新尿管时留取尿标本。

第27页注意事项

严格进行无菌操作，因为尿液标本采集和培养中最大问题是污染杂菌

通常应取晨起第一次尿液送检

多数药品均经过尿液排泄，所以采集尿液应在用药前进行

第28页三、粪便标本采集

第29页粪便标本送检指征1急性腹泻：大便次数显著增多，腹痛，里急后重，往往伴有发烧，大便性状为粘液便或脓血便。2慢性腹泻：大便次数多，多为稀便，伴有全身乏力等症状。3无痛性大量水样便或米泔样稀便。4先吐后泻：恶心、呕吐、腹痛、腹泻。有集体发病史，多为细菌性食物中毒所致。5抗生素治疗后腹泻：常发生于长久抗生素治疗后，糊状便，排便次数增加。6高热惊厥：通常为中毒性痢疾，多见于婴幼儿和小儿。第30页粪便标本采集容器一次性无菌便盒

第31页粪便标本采集时间1．采样标准

腹泻病人应在急性期采集（3天以内），以提升检出率，亦最好在用药之前。2．沙门菌感染

肠热症在2周以后；胃肠炎病人在急性期，早期采集新鲜粪便

第32页粪便标本采集方法

自然排便采集法

自然排便后，挑取其脓血、粘液部分2-3g，液状粪便取絮状物2-3ml，盛于灭菌容器内或保留液中送检

直肠拭子方法

如不易取得粪便时，或排泄困难患者及婴儿，可用直肠拭子采取，即以无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内4-5cm（幼儿2-3cm）轻轻转动取出，插入无菌试管内送检。第33页注意事项

虽粪便含有各种杂菌，但应尽可能采取无菌容器（一次性无菌平皿）。

为提升检出率，要采集新鲜粪便作培养，且应挑取其脓血、粘液部分。

第34页四、痰及上呼吸道标本采集

第35页痰标本送检指征1咳嗽、咳痰：痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰。

2咯血：肺结核病人常痰中带血。

3呼吸困难4发烧5胸痛：当炎症病变累及壁层胸膜时，会发生胸痛。*肺部感染患者有25～50％可能发生菌血症，应同时作血培养。第36页上呼吸道标本送检指征1病毒性普通感冒伴有显著咽痛时，怀疑为咽部链球菌感染，应做细菌培养。2细菌性咽－扁桃体炎：显著咽痛、畏寒、发烧，体温可达39℃以上。3上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管－支气管炎，需送对应部位分泌物或痰液进行细菌培养。第37页痰标本和上呼吸道标本采集容器一次性无菌留痰盒咽拭子或鼻咽拭子第38页痰及上呼吸道标本采集时间痰：普通以晨痰为好；支气管扩张症患者，清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰标本。咽拭标本：时间上虽无严格限制，但应于抗菌药品治疗前为好。咽部又是呼吸和食物通路，所以亦以晨起后采集为宜

第39页痰标本采集方法：

自然咳痰法：患者清晨起床后，先用漱口水漱口，再以开水或生理盐水漱口，以降低口腔常居菌群污染，然后用力自气管深部咳出第一口痰于无菌痰怀内送检

小儿取痰法：用压舌板向后压舌，用棉拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上，送检

第40页上呼吸道标本（咽拭子）采集方法：

采集上呼吸道标本通常采取无菌棉拭子。采集前患者应用开水或生理盐水重复漱口，由检验者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，将棉拭子经过舌根到咽后壁或腭垂后侧，涂抹数次，但拭子要防止接触口腔和舌粘膜

第41页注意事项1．

采集标本以清晨为佳，以降低口腔正常菌群污染，采集前先用漱口液充分漱口。2．

做结核分枝杆菌和真菌培养标本若不能及时送检，应放4℃冰箱保留，以免杂菌生长。3．

作结核分枝杆菌检验，痰量要多或留取24小时痰液，以提升阳性检出率。第42页五、穿刺液标本第43页穿刺液标本

采集时间：当怀疑感染存在，应尽早采集标本，普通在患者使用抗菌药品之前或停顿用药后1-2日采集

采集容器：无菌容器采集方法：采取无菌方法用注射器抽取体内可疑感染部位液体，注入无菌试管马上送检

第44页注意事项：

如果用于检测细菌，搜集脑脊液后，最好能在常温下15-30分钟内接种培养皿。脑脊液标本不可置冰箱保留，不然会使病原菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟菌（能产生自溶素快速自溶）、肺炎链球菌和嗜血杆菌。第45页注意事项：如果只采集了一管脑脊液，应先送细菌室做细菌培养，再做脑脊液生化、常规等检验穿刺时应严格无菌操作

作脑脊液培养时，提议同时作血培养

第46页注意事项：为了预防穿刺液凝固，最好在无菌试管中预先加入灭菌肝素，再注入穿刺液尽可能采集更多液体，最少1ml第47页六、脓液及创伤感染分泌物标本

第48页脓液及创伤感染分泌物标本采集开放性脓肿和脓性分泌物

先以无菌盐水冲洗溃疡表面，用2支无菌棉拭子拭取溃疡深处分泌物后插入无菌试管送检。一支为涂片检验用，另一支作培养用

大面积烧伤创面分泌物

用无菌棉拭子取多部位创面脓液或分泌物，置无菌试管内送检

封闭性脓肿

消毒局部皮肤或粘膜表面后，用注射器抽取，将脓液注入无菌试管内送检

第49页注意事项：

不能马上送检标本，应放4℃保留；培养淋球菌、脑膜炎奈瑟菌标本除外

用药前采集标本，严格无菌采样

第50页七、生殖道标本第51页生殖道标本检验生殖道标本细菌培养、真菌培养、结核菌培养；解脲支原体、沙眼衣原体、淋菌培养；淋菌涂片；细菌性阴道病相关检测、真菌涂片

第52页生殖道标本送检指征1皮肤黏膜损害：原发损害可有斑疹、丘疹、结节、水疱、囊肿、糜烂、溃疡等。继发损害由原发损害演变而来，有萎缩或斑痕等，患者可出现疼痛或瘙痒症状。2全身症状：多数无全身症状。偶有发烧、乏力、食欲不振等。3男性生殖系统表现4女性生殖系统表现5疑为以下疾病时需送检标本：前庭大腺脓肿、外阴阴道念珠菌病、细菌性阴道病、急性子宫颈炎、急性盆腔炎、急性尿道炎、急性膀胱炎、羊膜腔感染、产褥期感染。第53页生殖道标本采集容器无菌试管、男性拭子、女性拭子

第54页生殖道标本采集方法1尿道分泌物①男性：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，采取从尿道口溢出脓性分泌物或用无菌男性拭子插入尿道内2～4厘米取出分泌物。如无脓液溢出，可从阴茎腹面向龟头方向按摩，促使分泌物溢出。②女性：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，然后从阴道内诊压迫尿道，或从尿道后面向前按摩，使分泌物溢出。无肉眼可见脓液，可用灭菌拭子轻轻深入前尿道内，旋转拭子，采集标本。第55页生殖道标本采集方法2巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后压迫腺体，使分泌物溢出。3阴道分泌物：用窥器扩张阴道，用灭菌女性拭子采取阴道口内4厘米内侧壁或后穹隆处罚泌物培养或涂片镜检。4宫颈分泌物：用窥器扩张阴道，先用无菌棉球擦取宫颈口分泌物；用女性拭子插入宫颈管2厘米采取分泌物，转动并停留10～20秒钟，让拭子充分吸附分泌物，或